生物安全复习资料

《生物安全》复习提纲

一、生物安全总论

1．生物安全的涵义：

广义：指与生物有关的各种因素对社会，经济，人类健康及生态环境所造成的危害和潜在的危险。

狭义：是指现代生物技术的研究、开发、应用及转基因生物可能对生物多样性、生态健康与人类健康产生潜在的危险。特别是各类转基因活生物体释放到环境中，可能对生物多样性造成潜在威胁。

2．生物安全管理的内容：一般包括生物安全的研究、评价、检测、监测和控制措施等技术内容。其中安全性评价是核心和基础。

3．生物安全性评价的目的：

提供科学决策的依据；保障人类健康和环境安全；回答公众疑问；促进国际贸易，维护国家利益；促进生物技术可持续发展

4. 生物安全控制措施的类别：

物理控制措施，化学；生物；环境；规模控制措施

5．国际关注的几个主要的生物安全问题：

转基因生物对非目标生物的影响；增加目标害虫的抗性和进化速度；杂草化；对生物多样性和生态环境的影响；对人类健康的威胁和影响

6．什么是实验室生物安全？实验室生物安全的重要意义。

实验室生物安全：指在从事病原微生物实验活动的实验室中避免病原微生物对工作人员和相关人员的危害，对环境的污染和对公众的伤害，为了保证试验研究的科学性还要保护被试验因子免受污染。

重要意义：是建立病原微生物研究安全平台的需要；是生物国防的需要；是传染病预防和控制的需要；是动物防疫的需要；是入境检验检疫的需要；是医院感染控制的需要

7．病原微生物实验室生物安全相关法律法规和标准

世界卫生组织---《实验室生物安全手册》，美国--CDC/NIH — 《微生物和生物医学实验室的生物安全》

我国病原微生物生物安全相关法律法规：《中华人民共和国传染病防治法》，《病原微生物实验室生物安全管理条例》，《中国人民共和国国境卫生检疫法》，《中国人民共和国进出境动植物检疫法》，《突发公共卫生事件应急条例》，《医疗废物管理条例》

《中华人民共和国传染病防治法》2004年12月1日实施

《病原微生物实验室生物安全管理条例》2004年11月12日公布及实施，是我国第一个具有法律效应的病原微生物生物安全的法规

病原微生物实验室的标准和指南

卫生行业标准《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（WS 233－2002）。

卫生部令： 《人间传染的病原微生物名录》。

卫生部令：《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定 》（第45号）

国家强制性标准：《实验室 生物安全通用要求》

8．微生物危害评估：

即对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害进行评估。是生物安全的核心工作，对于保证生物安全具有非常重要的意义

病原微生物危害程度分类主要依据：

微生物的致病性；微生物的传播方式和宿主范围；当地所具备的有效预防措施；当地所具备的有效治疗措施

国内外病原微生物危害程度分类比较：

9．疾病危险度评估

《中华人民共和国传染病防治法》

甲类（鼠疫和霍乱）、乙类（共25+1种：传染性非典型肺炎，艾滋病，病毒性肝炎，肺结核，甲型H1N1流感）、丙类（11种：手足口病，风疹，麻风病等）三类。

10．微生物菌毒种及样本的运输方法

感染性物质运输包装系统：

内层容器：将样品才有防水防漏的内层容器包装并贴上指示内容物的标签

中层包装：内层容器和中层容器间应放置足量的吸水性材料

外层包装：中层容器固定在硬质外层容器中

我国运输准则：尽量陆路运输；报卫生主管部门批准（跨省报卫生部）；包装、容器和标识符合要求；二人护送，不能通过城市公交；发生泄漏2小时内报告

多次运输的有效期为6个月；期满后需要继续运输的，应当重新提出申请

二、生物恐怖总论

生物恐怖：使用致病微生物或者毒素等通过一定的途径散布，造成传染病爆发、流行，导致人群失能和死亡，引起社会动荡。

1．生物战剂（Biological agent）：在战争（生物恐怖）中用于伤害人、畜或毁坏农作物的致病微生物或其产生的毒素。

2．生物武器（Biological weapon）：是生物战剂、生物弹药和运载系统所组成，是以生物战剂杀伤有生力量和毁坏植物的各种武器、器材的总称。 3．基因武器：是在生物战剂的基础上，提高微生物的致病性和抗药性，增强病原微生物对环境和气溶胶化的稳定性，从而改变原来病原体的免疫性；或者利用基因工程把病原体的遗传成分杂交，重组一种新的病原体，从而引起异常复杂的中毒状。

4．失能性战剂：死亡率低于10%

5．致死性战剂：死亡率达于10%

6．生物战剂气溶胶（Biological agent aerosol）：固体或液体微粒稳定地悬浮于气体介质中形成的分散体系。粒径范围： 0.01～5μm

7．免疫电镜（IEM）：是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是将抗原抗体反应的特异性与电子显微镜的高分辨力相结合、在亚细胞和超微结构水平上研究和观察抗原、抗体结合进行定位分析的一种高度精确、灵敏的方法。

8．免疫荧光技术（FIA）：是以荧光物质标记特异性抗体或抗原作为标准试剂，用于相应抗原或抗体的分析鉴定和定位检测，可在荧光显微镜下直接观察结果，该技术是将抗原抗体反应的特异性和荧光物质检测的敏感性和直观性结合起来的一种免疫分析技术。

9．流式细胞术（FCM）是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，与传统的荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。

10. 酶联免疫吸附测定（ELISA）是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记，反应完成后加入酶反应底物，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。

11. 核酸分子杂交技术：是在DNA变性和复性基础上建立的一种技术。

原理：具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下根据碱基互补的原则可以形成双链。

12. 实时荧光定量PCR技术：在常规PCR引物外，加入一个两端带有荧光标记的寡核苷酸探针。

13. 生物剂的种类及新型生物剂

细菌，病毒，立克次氏体，衣原体，真菌，毒素，遗传工程改造的微生物

14. 生物武器、基因武器、生物战剂的特点

生物战剂的特点：1.高度感染性，具具传染性和自我增殖能力；

2.高效性； 3.对环境稳定，能长期不变性，保持活力；

4.生物专一性； 5.难于防护、便于进行突袭、侦测困难；

6.不易治疗，如对抗生素、化学药品有抵抗作用；

7.易扩散性，可通过气溶胶或媒介生物袭击人、畜；

8.存储方便，便于运输； 9. 生产容易，成本低廉；

基因武器的特点：有精确的敌我分辨能力，只攻击敌方特定人种。

没有有效的预防制剂或特异性治疗方法。

检测或鉴定困难。

感染剂量小或毒力高，杀伤力大。

容易生产、储存、成本低廉。

对敌方有强烈的心理威慑作用。

没有立即杀伤作用。结果难以预测。 15. 何为气溶胶？生物剂的主要施放方法有哪些？

1. 飞机和气球携带的空中自动喷洒装置

2. 利用火炮、导弹及火箭发射装有生物战剂的弹头

3. 用飞机空投带有致病微生物的容器

4. 利用特务在对方的后方和军事要地，将生物战剂直接水源、送风口等

5. 利用海潮和河流将生物武器漂向对方

6. 用邮件传送生物战剂

7. 战略撤退时，污染撤退地区

16. 生物武器的最新发展动向

（1）新的病毒性战剂增多。（2）新的毒素性战剂受到高度重视。

17. 生物恐怖事件的特点、识别及对生物恐怖袭击的人体防护

特点：隐蔽性强，突发性，危害规模大；杀伤力大；社会影响大

识别：1.发现可疑包裹。 2.发现可疑粉末。3.发现可疑人员正在乱弄物品或设施等。 4.短期内突然出现来源不明或当地从未发生过的疾病。5．传染病反季节流行。6．疾病传播方式发生改变。7．职业分布出现异常8．流行形式出现异常9.在某些区域暴露过的人群的感染率高如在有中央空调的建筑物内的工作人员集体发病，或者在密封建筑物内的人群感染率低如果在户外施放，经常外出活动会集体发病10.在不同地理位置同时暴发同一种疾病。11.患病或死亡的动植物数量大、种类多。

人体防护：

18. 特异性免疫防护和非特异性免疫防护各包括哪些内容？

特异性免疫防护：疫苗、动物源性抗血清、人特异性免疫球蛋白、人源化抗体

非特异性免疫防护：正常人丙种球蛋白、胎盘丙种球蛋白、细胞因子、中药等

19. 发生生物恐怖时标本采集的注意事项

1.应在消毒处置之前采集。

2.未用药者或给药前采集血、尿等标本。

3.送检标本须按登记表细致填写，包括标本种类、数量、地点、时间、采集人姓名等。

4.采样后标本放置在密封容器内，做好标志，采样过程要注意人员防护。

5.做好标本采集的现场证据保全。

6.采集人员必须穿戴连体式隔离衣、防护鞋套、眼罩、N95级防护面罩和乳胶手套（2层）；

7.收集完后，消毒-脱掉外层手套-戴着内层手套依次脱掉帽子、眼罩、口罩、衣裤、鞋套-内层手套-消毒巾擦拭面部和双手

三、实验室生物安全 1. 实验室生物安全防护水平、生物安全实验室的设施和设备

生物安全防护相关概念：实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护装置、严格遵从标准化操作程序和规程等综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。

实验室生物安全防护的基本要求 ：

实验室生物安全防护由实验室操作和技术、安全设备和实验室设施组合构成四级生物安全防护水平，一级为最低级防护水平，四级为最高级防护水平。

一级防护：（1）生物安全柜 (BSC)和类似的设备等；（2）个人防护装备。

二级防护: 是指实验室屏障设施，其建设有4 种不同的结构。

由一级防护屏障（安全设备）和二级防护屏障（实验室设施）组合构成四级生物安全水平

四级生物安全防护水平（BSL1-4）：

简称BSL实验室，指通过规范的实验室设计、实验设备的配置、个人防护装备的使用等建造的实验室。

BSL-1和BSL-2：基础实验室

BSL-3：生物安全防护实验室

BSL-4：最高生物防护实验室

各级BSL适用于操作的致病微生物，样本及实验。基本安全设备和设施。

一级：病原：大肠杆菌；格鲁伯耐格里原虫；感染性犬肝炎病毒；枯草杆菌等。用于教学的普通微生物实验室

二级：麻疹病毒；沙门氏菌；弓形体；乙型肝炎病毒；衣原体；志贺氏菌

设施设备在一级生物安全防护水平的基础之上，增加生物安全柜、高压灭菌器、防溅罩或面罩、洗眼器等。

三级：结核分枝杆菌；牛分枝杆菌；鼠疫杆菌 ；炭疽杆菌；Q热病原体；HIV

(血清学检测除外)；澳大利亚立克次氏体

2. 生物安全实验室的设施设备（了解）

3. 实验室安全设备的要求

生物安全柜：是直接操作危险性微生物时所用的箱形安全设备，是生物安全实验室必备的装备，保护使用者和环境，保护样品。

生物安全柜的分级：

一级生物安全柜：保护工作人员和环境。