水处理微生物学标准实验报告2
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实验四培养基的配制及灭菌一、培养基的常规配制程序(一)目的要求了解培养基配制过程各环节的要求和注意事项。
了解培养基的配制原理。
(二)基本原理正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础。
由于微生物种类及代谢类型的多样性,因而用于培养微生物培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法虽各有差异。
但一般培养基的配制程序却大致相同,例如器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相同。
(三)实验材料1. 药品待配各种培养基的组成成分、琼脂、1mol/L NaOH溶液、1mol/L HCl溶液等。
2. 仪器天平或台秤、高压蒸汽灭菌锅。
3. 玻璃器皿移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
4. 其它物品药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸等。
(四)实验步骤1. 玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中,用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
详见附录一。
2. 灭菌前玻璃器皿的包装(1) 培养皿的包装:培养皿由一盖一底组成一套。
可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
(2) 移液管的包装:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作用是避免外界及口中杂菌吹入管内,并防止菌液等吸入口中。
塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左右,棉花自身长度约1~1.5cm 。
塞棉花时,可用一外圈拉直的回形针,将少许棉花塞入管口内。
棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。
先将报纸裁成宽约5cm 左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45º角,折迭纸条包住尖端,用左手握住移液管身,右手将移液管压紧,在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。
南昌大学实验报告学生姓名:学号:专业班级:实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:实验十细菌菌落总数(CFU)的测定一、实验目的:1.学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。
2.了解培养基平板菌落计数原则二、实验基本原理:细菌菌落总数(CFU)是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃培养24h后所生长的腐生性细菌菌落总数。
它是有机污染程度的指标,也是卫生指标。
在饮用水中所测得的细菌菌落总数除说明水有机污染的程度外,还指示该饮用水能否饮用。
但还应当指出的是,水源水中的细菌菌落总数不能说明污染的来源。
因此,结合大肠菌群数以判断水的污染的安全程度就更全面。
我国现行生活饮用水的卫生标准(GB5749-2006)规定:细菌菌落总数在1ml自来水中不得超过80个。
细菌种类很多,有各自的生理特性,必须用适合它们的培养基才能将它们培养出来。
然而在实验工作中不易做到,通常用一种适合大多数细菌生长的培养基培养腐生性细菌,以它的菌落总数表明有机污染程度。
三、主要仪器设备及耗材:电热干燥箱,高压蒸汽灭菌锅,电热培养箱,恒温水浴,冰箱,菌落计数器,放大镜,肉膏蛋白胨脂培养基,灭菌水,灭菌三角烧瓶,灭菌的带玻璃塞瓶,灭菌培养皿,灭菌吸管,灭菌试管等。
四、实验步骤:1.水样的采取供细菌学检验用的水样,必须按无菌操作的基本要求进行采样,并保证在运送,贮存过程中不受污染。
为了要正确反映水质在采样时的真实情况,水样在采取后应立即送检,一般从取样到检验不应超过4小时。
条件不允许立即检验时,应存于冰箱,但也不应超过24小时,并应在检验报告单上注明。
(1)生活饮用水(自来水)先将自来水龙头用火焰烧灼3分钟灭菌,再开放水龙头使水流5分钟后,用灭菌三角烧瓶接取水样,以待分析。
(2)池水、河水或湖水应取距水面10—15㎝的深层水样,先将灭菌的带玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流入瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,立即返回实验室检查,否则需放入冰箱中保存。
有机废水生物处理实验报告一、实验目的本实验旨在探究有机废水生物处理的原理和方法,通过实验验证生物处理技术的可行性和有效性,为实际工业生产提供参考。
二、实验原理有机废水生物处理是利用微生物对有机废水进行降解和转化的一种处理方法。
微生物通过吸附、吞噬、分解等方式将有机废水中的有机物质转化为无机物质,从而达到净化水质的目的。
生物处理技术主要包括生物接触氧化法、生物滤池法、活性污泥法等。
其中,生物接触氧化法是将有机废水与微生物接触,利用微生物的代谢作用将有机物质转化为无机物质的一种处理方法;生物滤池法是将有机废水通过滤池,利用滤料表面的微生物对有机物质进行降解和转化的一种处理方法;活性污泥法是将有机废水与活性污泥混合,利用污泥中的微生物对有机物质进行降解和转化的一种处理方法。
三、实验步骤1.准备实验设备和试剂:生物接触氧化池、有机废水、微生物培养液等。
2.将有机废水倒入生物接触氧化池中,加入适量的微生物培养液。
3.开启生物接触氧化池的通风设备,保持池内氧气充足。
4.观察有机废水的处理情况,记录处理前后的COD、BOD、NH3-N等指标。
5.根据实验结果,分析有机废水生物处理的效果和优缺点。
四、实验结果经过生物接触氧化处理后,有机废水的COD、BOD、NH3-N等指标均有明显下降。
处理前后的指标变化如下表所示:指标|处理前|处理后-|-|-COD|200mg/L|50mg/LBOD|100mg/L|30mg/LNH3-N|50mg/L|10mg/L从实验结果可以看出,生物接触氧化法对有机废水的处理效果显著,能够有效地降低水质污染指标。
五、实验分析有机废水生物处理技术具有处理效果好、成本低、操作简便等优点,是一种可行的废水处理方法。
但是,生物处理技术也存在一些缺点,如对水质的适应性较差、处理效果受环境因素影响较大等。
因此,在实际工业生产中,应根据废水的特性和处理要求选择合适的处理技术,综合考虑各种因素,以达到最佳的处理效果。
水处理微生物实验报告实验目的:通过研究水处理微生物的作用,了解微生物在水处理中的应用和重要性。
实验材料和方法:材料:自来水、废水、细菌培养基、平板、试管、显微镜等。
方法:1. 取自来水和废水样品,分别装入试管中。
2. 对试管中的样品进行稀释,得到不同浓度的样品。
3. 用吸管吸取一定量的稀释后的样品,均匀涂抹在细菌培养基平板上。
4. 将涂抹后的平板放入培养箱中,25培养24小时。
5. 取出培养好的平板,观察菌落的形态和数量。
6. 用显微镜观察菌落中的微生物,记录种类和数量。
实验结果:经过观察,可以发现自来水样品在平板上的菌落数量相对较少,且菌落颜色较浅。
而废水样品在平板上的菌落数量较多,菌落颜色较深。
通过显微镜观察,可以看到菌落中存在大量不同形态的微生物。
实验讨论:1. 自来水中的微生物数量较少,这是因为自来水经过消毒处理,微生物已经被杀灭或大量减少。
2. 废水中的微生物数量较多,这是因为废水中存在大量有机物质,为微生物提供了生存和繁殖的条件。
3. 废水中的微生物种类较多,包括细菌、真菌、藻类等。
这些微生物具有不同的代谢特点,对水中有机物质进行分解和降解,从而净化水体。
4. 废水处理中常使用微生物处理技术,利用微生物的降解能力进行废水处理。
通过培养和筛选适宜的微生物,可以提高废水处理效果,达到净化水体的目的。
实验结论:水处理微生物在废水处理中发挥着重要的作用。
通过研究微生物的生长和降解特性,可以优化水处理工艺,提高废水的处理效果。
同时,对自来水中的微生物进行研究也有助于了解水质的健康和安全情况。
因此,对水处理微生物的研究具有重要的意义。
南昌大学实验报告学生姓名:学号:专业班级:实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:实验七培养基的配制和灭菌一、实验目的:1 、学习玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作;2、了解配制微生物培养基的基本原理,本实验通过学习常用细菌培养基的配制来了解并掌握常规培养基配制和无菌水的制备方法;3、学习各类物品的包装及灭菌技术;二、实验基本原理:培养基是应科研、生产需要,根据微生物对营养的需求按一定比例人工配置的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合营养物,任何培养基都应具备微生物生长所需要的六大类营养要素。
培养基配制好后应立即灭菌后备用。
由于微生物的种类及代谢的多样性,因而培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法也各有差异,除一些特殊培养基外,一般培养基的配制过程大致相同。
一款成熟的培养基配方都会在其配方后面附上配制方法及pH值、灭菌温度等其他配制要求。
三、主要仪器设备及耗材:1、药品及试剂:可溶性淀粉、营养琼脂(或牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉、10%NaOH,10%HCl)2 、仪器及其它高压蒸汽灭菌锅、干燥箱、试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、药匙、pH试纸(1-14)、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、培养皿、吸管、玻璃珠等四、实验步骤:(一)培养基的制备与分装1 称量:按培养基配方比例依次准确地称取药品。
(可溶性淀粉先用少量冷水溶化后再加入)2 熔化:在沸水浴锅中加热熔化。
3 调pH:10%NaOH,10%HCl调pH至7.4-7.6。
4 过滤:趁热用多层纱布过滤(本实验勿需过滤)5 分装:将溶化的固体培养基趁热加至漏斗上,装试管时,装量不超过试管的1/4,注意管口不要沾上培养基。
6 加塞:试管应先捆成一捆,然后再于棉塞外包扎牛皮纸,贴上标签,注明培养基名称、日期、组别。
(二)无菌水的制备用量筒量取150ml自来水于带玻璃珠三角瓶中,塞上棉塞,包扎牛皮纸。
(三)器皿的准备1、培养皿的包装每6~10个一包,用旧报纸包扎(或放在特制铁皮圆筒里加盖扣严)。
南昌大学实验报告学生姓名:学号:专业班级:实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:实验一光学显微镜的使用及微生物形态的观察一、实验目的:1了解光学显微镜的结构、各部分的功能;2掌握光学显微镜的使用、了解油镜的工作原理,并学习其使用、保养方法;3 观察微生物的形态,学会生物图的绘制,养成正确的观察习惯;二、实验基本原理:微生物都很小,须用显微镜放大后才能看到。
观察微生物的一般形态,以普通光学显微镜(常简称为显微镜)最为常用。
普通光学显微镜最大能够将物体放大2000倍左右,通常观察霉菌和酵母菌时,采用100~400倍的放大率,而观察原核微生物,如细菌、放线菌等往往需要放大到900~1500倍左右。
普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分,机械部分包括:镜座(Base)、镜臂(Arm)、镜筒(Tube长度一般为160mm)、镜头转换器(Nosepiece)、载物台(Stage)、粗调焦钮(Coarse adjustment knob)和细调焦钮(Fine adjustment knob)等;光学系统包括采光系统、聚光镜(Condenser)、虹彩光圈(Iris diapHragm附在聚光器上)、接物镜(Objective lens)、接目镜(Eyepiece lens)等。
接物镜常称为镜头,简称物镜,是显微镜中最重要的部分,一般显微镜有3~4和物镜,根据使用方法的差异可分为干燥系和油浸系两组。
干燥系物镜包括低倍物镜(4~10x )和高倍物镜(40~45x ),使用时物镜与标本之间的介质是空气;油浸系物镜(90~100x )在使用时,物镜与标本之间加有一种折射率与玻璃折射率几乎相等的油类物质(香柏油)作为介质。
衡量显微镜性能好坏的指标主要是显微镜的分辨率,显微镜的分辨率(Resolving power )是指显微镜将样品上相互接近的两点清晰分辨出来的能力,即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力。
南昌大学实验报告学生姓名:学号:专业班级:实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:实验十细菌菌落总数(CFU)的测定一、实验目的:1.学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。
2.了解培养基平板菌落计数原则二、实验基本原理:细菌菌落总数(CFU)是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃培养24h后所生长的腐生性细菌菌落总数。
它是有机污染程度的指标,也是卫生指标。
在饮用水中所测得的细菌菌落总数除说明水有机污染的程度外,还指示该饮用水能否饮用。
但还应当指出的是,水源水中的细菌菌落总数不能说明污染的来源。
因此,结合大肠菌群数以判断水的污染的安全程度就更全面。
我国现行生活饮用水的卫生标准(GB5749-2006)规定:细菌菌落总数在1ml自来水中不得超过80个。
细菌种类很多,有各自的生理特性,必须用适合它们的培养基才能将它们培养出来。
然而在实验工作中不易做到,通常用一种适合大多数细菌生长的培养基培养腐生性细菌,以它的菌落总数表明有机污染程度。
三、主要仪器设备及耗材:电热干燥箱,高压蒸汽灭菌锅,电热培养箱,恒温水浴,冰箱,菌落计数器,放大镜,肉膏蛋白胨脂培养基,灭菌水,灭菌三角烧瓶,灭菌的带玻璃塞瓶,灭菌培养皿,灭菌吸管,灭菌试管等。
四、实验步骤:1.水样的采取供细菌学检验用的水样,必须按无菌操作的基本要求进行采样,并保证在运送,贮存过程中不受污染。
为了要正确反映水质在采样时的真实情况,水样在采取后应立即送检,一般从取样到检验不应超过4小时。
条件不允许立即检验时,应存于冰箱,但也不应超过24小时,并应在检验报告单上注明。
(1)生活饮用水(自来水)先将自来水龙头用火焰烧灼3分钟灭菌,再开放水龙头使水流5分钟后,用灭菌三角烧瓶接取水样,以待分析。
(2)池水、河水或湖水应取距水面10—15㎝的深层水样,先将灭菌的带玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流入瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,立即返回实验室检查,否则需放入冰箱中保存。
微生物法处理污水实习报告一、实习背景随着我国经济的快速发展,工业、农业和生活污水的排放量逐年增加,水质污染问题日益严重。
微生物法作为一种经济、有效、环保的污水处理技术,已经在我国得到了广泛的应用。
本次实习旨在了解微生物法处理污水的原理、工艺及实际运行情况,提高自身环保意识和技术水平。
二、实习内容1. 污水处理厂概况本次实习所在的污水处理厂是一家采用微生物法处理生活污水的企业。
厂区占地面积约20亩,设计处理能力为每天1000吨生活污水。
污水处理厂的主要任务是去除污水中的有机物、悬浮物和病原体,减轻对受纳水体的污染。
2. 污水处理工艺流程污水处理厂采用的微生物法处理工艺包括预处理、生物处理和后处理三个部分。
(1)预处理:主要包括粗格栅、细格栅、沉砂池等环节,用于去除污水中的较大悬浮物、泥沙等。
(2)生物处理:采用好氧活性污泥法,利用微生物的代谢作用降解污水中的有机物。
生物处理环节包括初沉池、曝气池、二沉池等。
(3)后处理:主要包括过滤、消毒等环节,用于进一步去除污水中的悬浮物和病原体,确保出水水质达到排放标准。
3. 实习操作与观察在实习过程中,我们参与了污水处理厂的运行操作,并观察了各个处理环节的现象。
(1)预处理环节:粗格栅和细格栅之间设有捞渣机,用于定期清理格栅上的漂浮物。
沉砂池中,污水中的泥沙在重力作用下沉淀,上清液溢流至下一处理环节。
(2)生物处理环节:初沉池中,活性污泥呈棕黄色,有较强的粘性。
曝气池中,污水与空气充分混合,微生物在有氧条件下繁殖活跃。
二沉池中,处理后的污水中的悬浮物明显减少。
(3)后处理环节:过滤池中,污水通过砂层过滤,进一步去除悬浮物。
消毒池中,污水经过氯气消毒,杀灭病原体。
4. 污水处理效果经过微生物法处理,污水中的有机物、悬浮物和病原体得到了有效去除。
根据厂区监测数据,污水处理厂的出水水质达到了《城镇污水处理厂污染物排放标准》(GB18918-2002)一级A标准,可以安全排放。
南昌大学实验报告学生姓名:学号:专业班级:实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:实验三微生物细胞大小的测定一、实验目的:1 学习掌握用测微尺测量微生物细胞大小的方法;2 进一步掌握光学显微镜的使用方法;二、实验基本原理:在一定条件下,各种微生物细胞的大小,是微生物形态特征之一,也是分类鉴定的依据之一。
由于微生物细胞很小,只能在显微镜下测量,一般采用显微测微尺来测量。
显微测微尺用由镜台测微尺和目镜测微尺组成。
镜台测微尺是特制的载玻片,其中央有一全长1mm的刻度标尺,等分成100小格,每格长度为10um,可用它来校正目镜测微尺每小格的长度。
目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形薄片,其中央刻有50或100等分的小格,每小格的所代表的实际长度随目镜物镜放大倍数的大小而变动,在测量微生物菌体的大小之前,应预先用镜台测微尺来校正并计算出在某一放大倍数物镜下目镜测微尺每小格所代表的实际长度,再以它作为测量微生物细胞的尺度。
标定:目镜测微尺每格所代表的实际长度(μm)=(两条重合线间镜台测微尺的格数/两条重合线间目镜测微尺的格数)×10μm。
测定:微生物的大小(μm)=目镜测微尺的格数×目镜测微尺每格所代表的实际长度(μm)。
实验时应注意几个原则:1、整数格原则:即标定时应取目测微尺和镜台测微尺的重合线,不能估读。
2、边对齐原则:随着物镜放大倍数的增大,物镜测微尺刻度线变粗,标定时取重合线时应以目测微尺和镜台测微尺刻度线的左边或右边对齐为标准。
3、最远重合线原则:在一个视野下,可能有几对重合线,标定时应取最远重合线。
4、用目测微尺实际测定微生物大小时,应估读一位即小数点后保留一位有效数字。
三、主要仪器设备及耗材:显微镜;细菌三形涂片、放线菌、曲霉、青霉等教学示范片;目镜测微尺、镜台测微尺;香柏油、二甲苯、擦镜纸等;四、实验步骤:1 目镜测微尺的校正(1)目镜测微尺装入目镜的隔板上,刻度朝下,将镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
南昌大学实验报告
学生姓名:学号:专业班级:
实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:
实验三微生物细胞大小的测定
一、实验目的:
1 学习掌握用测微尺测量微生物细胞大小的方法;
2 进一步掌握光学显微镜的使用方法;
二、实验基本原理:
在一定条件下,各种微生物细胞的大小,是微生物形态特征之一,也是分类鉴定的依据之一。
由于微生物细胞很小,只能在显微镜下测量,一般采用显微测微尺来测量。
显微测微尺用由镜台测微尺和目镜测微尺组成。
镜台测微尺是特制的载玻片,其中央有一全长1mm的刻度标尺,等分成100小格,每格长度为10um,可用它来校正目镜测微尺每小格的长度。
目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形薄片,其中央刻有50或100等分的小格,每小格的所代表的实际长度随目镜物镜放大倍数的大小而变动,在测量微生物菌体的大小之前,应预先用镜台测微尺来校正并计算出在某一放大倍数物镜下目镜测微尺每小格所代表的实际长度,再以它作为测量微生物细胞的尺度。
标定:目镜测微尺每格所代表的实际长度(μm)=(两条重合线间镜台测微尺的格数/两条重合线间目镜测微尺的格数)×10μm。
测定:微生物的大小(μm)=目镜测微尺的格数×目镜测微尺每格所代表的实际长度(μm)。
实验时应注意几个原则:
1、整数格原则:即标定时应取目测微尺和镜台测微尺的重合线,不能估读。
2、边对齐原则:随着物镜放大倍数的增大,物镜测微尺刻度线变粗,标定时取重合线时应以目测微尺和镜台测微尺刻度线的左边或右边对齐为标准。
3、最远重合线原则:在一个视野下,可能有几对重合线,标定时应取最远重合线。
4、用目测微尺实际测定微生物大小时,应估读一位即小数点后保留一位有效数字。
三、主要仪器设备及耗材:
显微镜;细菌三形涂片、放线菌、曲霉、青霉等教学示范片;目镜测微尺、镜台测微尺;香柏油、二甲苯、擦镜纸等;
四、实验步骤:
1 目镜测微尺的校正
(1)目镜测微尺装入目镜的隔板上,刻度朝下,将镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
(或将带有目镜测微尺的目镜头换上)
(2)从目镜中观察“目尺”的结构后,用低倍镜寻找镜台测微尺(先找黑圈,再稍加移动)。
(3)移动台尺和转动目镜,使两尺平行,并把两测微尺一端的第一条线完全重叠,然后寻找另一端的一条完全重叠的线。
(4)记下两重叠线之间的格数,求出校正值。
(5)用同样的方法,求出高倍镜及油镜下目镜微尺的校正值。
2 测量微生物的大小
(6)取下台尺,换上待测示范片。
(7)按要求测量每种微生物细胞的大小。
五、实验数据及处理结果
目镜测微目尺校正结果
杆菌大小测定记录(格)
六、思考讨论题
P337思考题第三题
七、实验体会及对实验改进的建议。