分子标记在番茄抗性育种研究进展

河南农业2023年第22期
茄抗病性。

3. 抗除草剂。

实践表明，番茄转基因法、杂交法和诱变育种等方法都能够培育出对除草剂具有良好抗性的品种。

4. 抗青枯病。

早在20世纪中旬，我国就已经开始着手培育对青枯病具有良好抗性的番茄，经过数十年的发展，现已成功培育出包括抗青1号和丰顺在内的多种番茄。

5. 抗TYLCVD。

TYLCVD 具有波及范围广、传播速度快等特点，科研人员利用传统育种、分子标记等方法，对可抵抗该病的品种进行培育。

在已培育出的品种中，最具代表性的是西大樱粉1号，研究人员以抗病樱桃番茄作父本、具有良好口感及形状的番茄作母本，成功培育出了兼具良好口感及抗病性的新品种。

育鲜食及加工品种进行选择，充分利用我国在育种方面所具有的优势，对拥有良好性状的番茄进行培育，增强番茄所具有的竞争力。

在此过程中，应当注意以下几点：一是单一抗性所能发挥的作用十分有限，应重点培育拥有复合抗性的番茄，其中，种植在保护地的番茄，应拥有3~4种抗性；露地种植的番茄，则应拥有2~3种抗性。

二是做到因地制宜，优先培育耐热及耐低温的品种。

（四）创新育种方法
种子作为农业生产不可或缺的材料，种子质量决定了农作物生长的质量及产量。

要以番茄的特点为依据，将生物技术与常规技术充分结合。

在保证育种质量的前提下，精简育种步骤，加快育种速度，实现稳产、高产，为番茄行业稳定、持续发展奠定良好基础。

（责任编辑 程丽红）
LIANGZHONG LIANGFA
良种良法
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番茄黄化曲叶病（Tomato yellow leaf curl virus disease ，TYLCVD ）的发生给全球番茄生产造成了巨大的经济损失[1]。

2011年番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus ，TYLCV ）被列入十大重要植物病毒之一[2]。

1939-1940年，番茄黄化曲叶病在以色列被首次发现[3]，1995年该病传入我国[4]，近年来在我国多个番茄主产区大范围发生，2011年该病在我国新疆喀什地区番茄主产区大面积爆发，发病率最高达100%[5]。

2014年有报道称该病在我国的年发生面积超过20万亩，年经济损失超过十亿元[6]。

近几年该病害的发生具有爆发突然、发病迅猛、扩散迅速、危害严重、治疗困难、损失巨大等特点[7]，因此，番茄黄化曲叶病的综合防控研究已经刻不容缓。

目前针对该病的防治，可通过化学防治、生物防治和物理防治的方法在一定程度上减轻该病的危害，但都存在防治不彻底、易复发等问题，无法从根本上解决这一问题，而选育番茄抗黄化曲叶病品种是较为经济、有效、绿色、持久的防治方法[2，8]。

1番茄黄化曲叶病毒（TYLCV ）1.1.TYLCV 基因组组成及结构番茄黄化曲叶病毒（TYLCV ）属于双生病毒科（）菜豆金色花叶病毒属（），双生病毒是一类具有孪生颗粒形态的单链环状DNA （Singlestranded DNA ，ssDNA ）。

与其它大多数菜豆金色花叶病毒不同，TYLCV 是植物病毒中唯一一类具有孪生颗粒形态的单链环状DNA 病毒[9，10]。

TYLCV 的寄主非常广泛，包括茄科、葫芦科、豆科、菊科、十字花科、白花菜科等12个科，主要侵染茄科。

2009年，Michael 等研究表明，很多野草也是TYLCV 的寄主，但一般情况下是无症状感病。

TYLCV 的DNA-A 编码6个开放性阅读框（Opening readingframes ，ORFs)，这些ORF 被大约200bp 的基因间隔区（Intergenic region ，IR ）分为病毒链和互补链，病毒链编码V1和V2，互补链编码C1，C2，C3和C4。

番茄抗病基因分子标记研究进展吴媛媛;李海涛;张子君;邹庆道【摘要】番茄抗病育种是番茄病害防治及提高产量的最直接有效的途径,现代分子标记技术的迅速发展为番茄抗病育种工作者提供了有利的辅助工具,它可以从DNA 水平上鉴定抗病位点,准确、快速,显著提高育种效率.为了对番茄抗病育种提供参考,对分子标记技术在番茄质量抗病性状的基因定位(主要包括番茄叶霉病、番茄根结线虫病、番茄烟草花叶病毒病、番茄枯萎病)和数量抗病性状的基因定位(主要包括番茄灰霉病.番茄晚疫病和番茄青枯病)的研究进展进行了综述.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2010(038)002【总页数】5页(P27-31)【关键词】番茄;抗病基因;分子标记【作者】吴媛媛;李海涛;张子君;邹庆道【作者单位】沈阳农业大学,园艺学院,辽宁,沈阳,110161;辽宁省农业科学院,蔬菜研究所,辽宁,沈阳,110161;辽宁省农业科学院,经济作物研究所,辽宁,辽阳,111000;辽宁省农业科学院,蔬菜研究所,辽宁,沈阳,110161;辽宁省农业科学院,蔬菜研究所,辽宁,沈阳,110161;辽宁省农业科学院,蔬菜研究所,辽宁,沈阳,110161【正文语种】中文【中图分类】S436.412.1+9番茄(Solanum lycopersium.)广泛栽培于世界各地，但随着番茄保护地连续种植，轮作困难，各种病害也随之蔓延，周年频发。

目前已发现的番茄主要病害包括ToMV、TSWV、根结线虫病、白粉病、细菌性斑点病、斑萎病、叶霉病、青枯病、晚疫病等10余种。

每年因各种病害造成的减产给番茄的生产和市场供应都带来严重的影响。

选用番茄抗病品种省钱省力，是解决减产的最直接有效的途径，因此番茄抗病研究在番茄育种中变得越来越重要。

现代分子标记技术的迅速发展为番茄抗病育种工作者提供了有利的辅助工具，它可以从DNA水平上鉴定抗病位点，准确、快速，显著提高育种效率。

作者综述了分子标记技术在番茄抗病基因定位研究中的研究进展，以期为番茄的抗病育种提供参考。

与番茄抗叶霉病基因Cf—16连锁的分子标记筛选及种质资源鉴定摘要：以携带抗叶霉病基因Cf-16的番茄（Lycopersicon esculentum）材料Ontario 7816为母本，感病材料07880为父本配置杂交，以亲本及其F2代分离群体为研究材料，采用SSR和AFLP技术筛选与抗叶霉病基因Cf-16连锁的分子标记。

结果表明，鉴定到与Cf-16基因连锁的SSR标记1个、AFLP标记5个，并将AFLP 标记E-ACA/M-TCG219转化为AFLP-SCAR标记并应用于种质资源筛选，筛选出3份携带Cf-16基因的番茄材料，为抗叶霉病育种提供了基础。

关键词：番茄（Lycopersicon esculentum）；叶霉病；Cf-16基因；SSR标记；AFLP-SCAR标记叶霉病是由褐孢霉属（Fulvia）褐孢霉[Fulvia fulva （Cooke）Cif.]引起的番茄（Lycopersicon esculentum）主要病害之一，既影响番茄产量又影响果实品质，从而造成经济损失[1]。

选育和推广抗病品种是解决番茄叶霉病最为经济、有效和环保的途径之一。

但是防治番茄叶霉病是十分困难的，主要是由于番茄叶霉病病原菌的生理小种分化十分迅速，育成含有新的Cf抗病基因的栽培品种不久后，就会分化出侵染该基因的新致病生理小种。

目前，国内番茄抗叶霉病育种中普遍应用的Cf-4抗病基因已被侵染，侵染Cf-9抗病基因的生理小种在华北地区也被检测出来[2]。

已报道至少有24个抗叶霉病基因被发现，它们能够克服不同的叶霉病生理小种[3]，因而利用新的、具有较高抗性的Cf抗病基因将是我国叶霉病抗病育种的重要目标之一。

番茄与叶霉病病原菌的互作遵循“gene-for-gene”学说[4]，开展番茄抗叶霉病育种工作要根据当地叶霉病病原菌生理小种的分化情况，利用抗病基因对不同生理小种的抗病性进行鉴定。

传统的人工接种抗病性鉴定不仅需要较长的时间和花费较多的人力物力，直接影响多抗性新材料及新品种的选育进程，而且还易受环境条件、接种技术等影响，从而导致鉴定结果不稳定。

分子标记在番茄抗性育种中研究进展摘要：本文综述了近年来RFLP RAPD SSA AFLP CAPS和SNP分子标记技术在番茄抗性育种上的应用，分析了目前的研究进展，对今后研究的重点进行了讨论。

关键词：分子标记；番茄；抗性；进展。

Molecular marker in tomato resistance breeding research progress inAbstract: This paper reviewed recent RFLP RAPD SSA AFLP CAPS and SNP in the application of tomato resistance breeding, analysis of the current research progress, the focus of the future research are discussed.Key words: Molecular markers; tomato; resistance; progress.番茄既是蔬菜也是水果, 其中含有丰富的维生素C对心血管有良好的保护作用；番茄红素具有良好的抗氧化作用,能清除体内废物,增加免疫力。

它也是营养师大力提倡的减肥食品。

它早已成为人们日常生活中的不可缺少的食物。

随着遗传学的发展,遗传标记的种类和数量也在不断增加。

形态标记、细胞学标记、生化标记都是以基因表达的结果(表现型)为基础,是对基因的间接反映;而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映。

与表型标记相比,DNA分子标记具有能对各发育时期的个体、组织、器官甚至细胞作检测,既不受环境的影响,也不受基因表达与否的限制;数量丰富;遗传稳定;对生物体的影响表现“中性”以及操作简便等特点。

分子标记的所有这些特性,奠定了它具有广泛应用性的基础。

本文在介绍一些常用的DNA分子标记技术基础上,综述分子标记应用于番茄遗传育种研究的新进展,并就我国今后番茄分子育种主要研究方向进行讨论。

番茄分子标记番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）是一种在全世界栽培极为广泛的蔬菜，也是我国的主要栽培蔬菜之一。

番茄原产于南美洲地区，起源于南美的秘鲁、厄瓜多尔、玻利维亚，在南美西部安第斯山脉的狭长地带均有番茄野生种存在。

番茄有着鲜艳的色泽和美观的外形，含有丰富的营养成分，其栽种品种繁多。

据报道至 1990 年，全世界已经收集并保存了 4 万多份番茄材料。

我国引进番茄的历史较短，1949 年以前曾从美国引进大量番茄栽培品种，自 20 世纪 80 年代以来，也先后组织了两次大规模的种质资源收集工作，共收集到各种番茄材料 1912 份生物技术不断的创新发展和广泛应用为传统的遗传育种研究带来了巨大的改变，目前分子标记技术的应用尤为显著。

20 世纪 80 年代，标记技术逐渐发展到植物遗传育种领域，使广大学者大大加深了对某些性状遗传规律的认知。

目前应用在植物遗传多样性和亲缘关系关系方面的分子标记技术主要有RAPD（随机扩增多态DNA）、RFLP（限制性片段长度多态性）、SSR(简单序列长度多态性)与AFLP（扩增片段长度多态性）。

其中，AFLP标记技术（amplified fragmet length polymorphism，扩增片段长度多态性）是1993年由荷兰KEYGENE公司的科学家Zabeau和Vos发明并申请欧洲专利，之后于1995年以论文形式发表的检测DNA多态性的方法。

AFLP技术具有结果稳定可靠、重复性强和多态性丰富等优点，利用此技术分析番茄的遗传多样性和亲缘关系可以保证实验的可靠性和实验鉴别效率。

1 番茄的起源及价值1.1. 番茄的起源及分布番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）在植物分类上属于茄科（Solanaceae）番茄属。

俗称“西红柿”，或“洋柿子”，番茄原产于南美洲的秘鲁、厄瓜多尔与智利。

一年生草本。

植株分有限生长和无限生长两种类型，浆果呈扁圆、长圆、圆或樱挑形等，有红、黄、粉红等不同颜色。

番茄疮痂病病原菌分类、抗性遗传和分子标记辅助选择进展杨文才1，陈佳1，张晓敏1，Francis David M2（1中国农业大学农学与生物技术学院蔬菜系，北京100094；2美国俄亥俄州立大学园艺与作物科学系，OH 44691，USA）摘要：番茄疮痂病是世界上所有番茄种植地区主要的细菌性病害之一，该病能引起严重的产量损失和品质下降，几十年来一直受到育种界的关注。

由于该病病原菌存在多个种和小种以及对该病的抗性呈数量性状遗传，因此通过育种途径来改良抗性进展缓慢。

分子标记辅助选择为育种家筛选、聚合或累加对多个小种的抗性提供了一种工具。

以前的综述对1997年以前在病害的发生、症状、危害、综合防治、遗传分析和育种等方面的研究进行了较为详尽的总结。

近年来，在病原菌种与小种的鉴定、抗源的发掘、抗性遗传的分子定位和分子标记辅助选择方面的研究取得了很大进展，传统育种与分子生物学方法有机结合的策略也初见成效。

本文将对这些进展进行总结，并对分子标记在番茄疮痂病抗性育种中的应用前景进行讨论。

关键词：番茄疮痂病；小种变异；抗性遗传；分子标记辅助选择Recent Advances in Classification of T omato Bacterial Spot Pathogen, Genetics of Resistance, and Marker-Assisted SelectionYANG Wen-cai1, CHEN Jia1, ZHANG Xiao-min1, FRANCIS David M2 (1Department of Vegetable Science, College of Agronomy and Biotechnology，China Agricultural University, Beijing 100094;2Department of Horticulture and Crop Science, The Ohio State University, OH 44691, USA)Abstract: Bacterial spot is one of the most important bacterial diseases in tomato growing areas in the world. It causes severe yield and fruit quality losses, and thus has been receiving breeding attention for decades. Due to the existence of multiple species and races, and the quantitative inheritance of resistance, breeding for resistance to the pathogen has been slow. Marker-assisted selection provides breeders a tool to screen resistance to multiple races and to combine or pyramid multiple resistances into one variety or hybrid. Previous reviews provide detailed information about the disease including occurrence, symptoms, damages caused by the disease, integrated managements, the genetics of resistance, and breeding progress up to 1997. Since then, progress has been made to detect new species and races of the pathogen, discover new resistance sources, and identify molecular markers linked to genes conferring resistance to bacterial spot. The strategy of combining molecular tools with traditional breeding approach is also beginning to demonstrate progress. In this review, we will summarize these progresses and discuss the promise of marker-assisted selection in breeding for resistance to bacterial spot.Key words: Bacterial spot of tomato; Race variation; Genetics of resistance; Marker-assisted selection番茄疮痂病（bacterial spot）是番茄（Solanum lycopersicum L.）生产上最严重的细菌性病害之一[1]。

番茄黄化曲叶病毒病的研究进展分析番茄黄化曲叶病毒病（Tomato Yellow Leaf Curl Virus Disease，缩写TYLCV）是一种由番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）引起的严重病害。

该病毒主要感染茄科植物，如番茄、辣椒等，会导致植株黄化、卷曲、发育不良等严重症状，严重影响茄科作物的产量和品质。

本文将对目前关于TYLCV病毒的研究进展进行分析。

一、病毒鉴定与检测方法研究人员通过分子生物学手段对TYLCV病毒进行鉴定和检测。

其中最常用的方法是PCR扩增和序列分析。

研究人员通过设计引物和探针来扩增病毒的特定片段，并通过序列分析比对已知的TYLCV基因组序列，确定病毒的种属和亚种。

还有一些新的检测方法正在研究中，如聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验（PCR-ELISA）和卷曲病毒病症集检测（ToCV SBT）。

二、病毒传播途径和宿主范围TYLCV病毒主要通过白薯蝽传播。

白薯蝽是TYLCV的主要媒介昆虫，其通过在植株间传播病毒。

种子传播和接种传播也是TYLCV的传播途径。

TYLCV病毒具有广泛的宿主范围，除了茄科植物外，还可以感染一些豆科和鸭跖草科植物。

三、病毒与寄主植物互作研究研究人员通过病毒、宿主和宿主免疫系统之间的互作研究，深入了解TYLCV的致病机制。

研究发现，TYLCV病毒可以通过抑制植物的防御响应和调节宿主基因表达来促进自身的繁殖。

研究还发现一些植物基因在病毒感染中起到重要的调控作用，如植物雄性不育基因B2（SlNOB1）和Rp1-DeltaK遗传变异体等。

四、抗性品种筛选和遗传改良通过筛选和培育抗TYLCV的品种，是防控TYLCV病毒病的重要手段。

研究人员通过种质资源的评估和遗传背景的分析，筛选出一些具有抗TYLCV性状的品种，并将其引入育种工作中。

研究人员还通过分子遗传学和基因组学的方法进行分子标记辅助选择和基因功能研究，为育种提供了更多的科学依据。

当前关于TYLCV病毒的研究主要集中在病毒鉴定与检测、病毒传播途径和宿主范围、病毒与寄主植物互作、抗性品种筛选和遗传改良以及病毒的生物学特性和传递机制等方面。

分子育种技术在番茄高产中的应用近年来，随着生物学、生物技术的发展，分子育种技术已经逐渐成为了农业生产的重要技术手段，特别是在作物育种领域，分子育种技术的应用越来越广泛。

番茄作为一种非常重要的蔬菜，其生产量和质量对消费者、生产者以及整个社会都有着非常重要的影响。

因此，利用分子育种技术在番茄高产生产中的应用已经成为了一种非常前沿的研究领域。

本文将介绍番茄的相关情况，以及分子育种技术在番茄高产中的应用。

一、番茄基本特征番茄作为一种非常重要的蔬菜，其特点主要包括以下几个方面：首先，番茄富含营养，含有丰富的维生素C、维生素E、钾、纤维素等；其次，番茄种类繁多，其中以红色大型番茄为主；再次，番茄生产容易，生长发育期为60-100天，每年可栽培1-2季；最后，番茄适应性强，其种植面积和产量在世界上均位居前列。

二、分子育种技术的应用1、DNA标记技术的应用DNA标记技术是一种分子育种的基础技术，它能够通过特定的PCR技术来检测出不同的基因型，因此可以很好地进行品种筛选和优选。

对于番茄作物来说，目前已经开发了很多不同的DNA标记，包括RAPD、SSR、AFLP等等。

这些标记技术可以用来鉴定不同品种之间的遗传差异，同时也可以用来筛选出优质的、高产的番茄品种。

2、基因编辑技术的应用基因编辑技术是一种新兴的分子育种技术，它可以直接编辑、修饰RNA或DNA，从而改变或增强植物的性状。

基因编辑技术的应用可以使得番茄作物具有更好的病虫害抗性、更好的耐旱性和抗逆性、更好的品质等等。

同时，基因编辑技术也可以大幅提高番茄的产量，从而实现番茄高产的目标。

3、基因测序技术的应用基因测序技术是一种复杂的分子育种技术，它可以对番茄的基因进行全面、系统的测序，从而深入探究其遗传特征和育种潜力。

基因测序技术可以大大提高番茄育种的效率和成功率，可以找出高产、高产等目标基因的差异，并以此为基础进行育种。

三、总结通过以上分析可以得出结论：分子育种技术在番茄高产生产中具有非常重要的应用价值，能够为农业生产提供新的可能性，并为人类社会的繁荣创造更大的价值。

遗 传HER ED I TAS (Be iji n g )28(2):195~199,2006研究报告收稿日期:20050127;修回日期:20050517基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)项目(编号:202AA207013 2)资助[Support ed by Chinese National Progra m s f or H igh Technology Research and Development(863Progra m )(No .202AA207013 2)]作者简介:寿森炎(1948 ),男,浙江诸暨人,教授,研究方向:蔬菜生长发育与调控。

Te:l 0571 ********;E m ai:l sy shou @z ju .edu .cn 通讯作者:苗立祥(1981 ),男,山东蒙阴人,博士研究生,研究方向:蔬菜生长发育与调控。

Te:l 0571 ********;E m ai:l shousy@z ju .edu .cn番茄抗青枯病基因的AFLP 分子标记寿森炎1,冯壮志1,苗立祥1,廖芳滨2(1.浙江大学园艺系,杭州310029;2.浙江永隆山生物科技工程有限公司,诸暨311800)摘 要:用番茄高抗青枯病品种 T51A 与高感青枯病品种 T 9230 配制杂交组合,接种鉴定其正反交F 1代及F 2代分离群体的青枯病发生情况。

结果表明,T 51A 对青枯病的抗性属于细胞质遗传,受1对杂合基因加性控制。

用64个Eco R Ⅰ/M se Ⅰ引物组合对 T51A 、 T9230 两个亲本及其F 2代抗病和感病基因池进行AFLP 分析,共扩增出约4200条可分辨的带,其中2条为稳定的差异。

用 T51A 和 T9230 杂交产生的F 2代分离群体对2个特异条带与目的基因的遗传连锁性进行分析,发现特异条带AAG /CAT 与暂定名为RRS 342的抗青枯病基因紧密连锁,二者之间的遗传距离为6.7c M 。

中国瓜菜2019，32（1）：18-21收稿日期：2018-10-09；修回日期：2018-11-07基金项目：青年科技研究基金（201601D202077）；山西农谷研发专项（YCX2017D2221）；“十二五”农村领域国家科技计划课题（2014BAD05B02-3）作者简介：侯富恩，男，助理研究员，研究方向为蔬菜栽培技术研究。

E-mail ：houfuen123@番茄黄化曲叶病（Tomato yellow leaf curl dis-ease ，TYLCD ）是目前我国番茄生产上的重要病害之一，植株感病后会表现出叶片卷曲、黄化、生长停滞等现象，严重时会导致大面积绝收[1-6]。

导致该病发生的病原为番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus ，TYLCV ），该病毒属于双生病毒科（Geminiviridae ）菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus ），是一类具有孪生颗粒形态的单链环状DNA 植物病毒，其基因组重组发生率和变异频率较高[7]。

利用分子标记辅助选择技术聚合多个抗TYLCV 基因，是培育具有持久抗性品种最有效的策略[8]。

因此，笔者结合苗期接种鉴定、分子标记辅助选择和田间性状观察，初步研究番茄不同抗TYLCV 基因聚合后抗性表现的差异，建立番茄抗TYLCV 聚合育种的分子标记辅助选择体系，以获得抗性高且不再分离同时性状优良的自交系，为番茄优质、抗病育种创制新的种质资源。

1材料与方法1.1材料3份含有TYLCV 抗性基因材料‘TY52’‘CLN2777A ’‘R1164’（分别含有Ty-1、Ty-2、Ty-3），其中‘TY52’‘CLN2777A ’由亚洲蔬菜研究发展中心提供，‘R1164’由杂交品种的分离后代选育而成。

2份受番茄抗TYLCV 分子标记辅助聚合育种侯富恩1，郝科星1，张涛1，苏东涛1，王铭2（1.山西省农业科学院农业资源与经济研究所太原030006；2.山西省农业科学院生物技术研究中心太原030001）摘要：为了培育对TYLCV （Tomato yellow leaf curl virus ）抗性稳定持久、园艺性状优良的番茄品种，以分别含有Ty-1、Ty-2、Ty-3的3个抗源材料‘TY52’‘CLN2777A ’‘R1164’为供体亲本，2个园艺性状优良的不含抗病基因的育种材料‘TMX255-1’‘TMX255-5’为受体亲本，通过杂交和多代回交自交，同时利用分子标记辅助选择技术、苗期接种技术和农艺性状观察对后代进行筛选，将Ty-1与Ty-2导入并聚合到‘TMX255-1’，Ty-1与Ty-3导入并聚合到‘TMX255-5’，最终获得2份聚合了不同抗病基因的株系，分别命名为‘TY1-2’‘TY1-3’，并对其进行了抗性评价，结果显示，2份株系对TYLCV 整个生育期在田间都表现抗病，且园艺性状优良稳定，可以作为自交系应用于抗病育种中。

番茄抗青枯病AFLP分子标记设计一、实验研究方案的设计要求根据所学生物技术及相关学科的知识，设计一个植物基因克隆、分子标记或转基因技术在植物遗传改良应用方面的实验方案，题目自定。

二、实验研究方案的结构和写作方法（一）、实验名称名称要准确，要把实验研究的问题是什么，研究的对象是什么交待清楚，要和研究的内容相一致，要准确地把你研究的对象、问题概括出来；名称要规范，所用的词语、句型要规范、科学，似是而非的词不能用，口号式、结论式的句型不要用。

（二）、项目的研究背景和目的、意义（800～1000字）介绍国内外研究现状、水平和发展趋势，即该课题有没有人研究，研究达到什么水平、存在什么不足以及正在向什么方向发展等。

阐明为什么要研究、研究它有什么价值。

要求：具体，有针对性，不能漫无边际地空喊口号。

一般方法是：先从现实需要方面去论述，指出现实当中存在这个问题，需要去研究和解决，本实验的研究有什么实际作用；然后，再写实验的理论基础和学术价值。

（三）、实验研究的目标实验研究目标是，实验最后要达到的具体目的，要解决哪些具体问题。

要求：目标要具体，必须清楚地写出来，使研究者能够明确知道工作的具体方向、研究的重点和研究思路。

（四）、实验研究的基本内容根据目标来设计实验拟研究的内容。

一个目标可能要通过几方面的研究内容来实现。

研究内容要更具体、明确，切忌笼统、模糊，不能把研究的目的、意义当作研究内容。

（五）、实验研究的技术路线和步骤实验研究的步骤是实验研究在时间和顺序上的安排。

研究步骤要充分考虑研究内容的相互关系和难易程度，一般情况下，都是从基础问题开始，分阶段进行。

三、实验研究方案评阅得分一二三四五总计分值10 30 20 20 20得分教师签名：番茄抗青枯病AFLP分子标记设计一、番茄抗青枯病的简介、项目的研究背景和目的、意义番茄青枯病又称细菌性枯萎病( bacterial wilt) 是由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum )引起的一种毁灭性土传病害。

番茄抗病种质资源分子标记筛选作者：杨再俊郑家瑞潘鹏程潘寅涛高彬李云洲来源：《山地农业生物学报》2021年第06期摘要：番茄是现代蔬菜的支柱产业，也是脱贫攻坚的优势产业，为了满足番茄生产种对抗病抗逆性的需求，挖掘利用抗病资源育种越来越被关注，本研究利用已明确的番茄根结线虫抗性基因Mi，抗PVY病毒病基因Pvr4，抗番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）基因Ty-1/Ty-3，对贵州本土16个番茄种质资源进行分子标记筛选。

结果表明：通过三对根结线虫抗性分子标记REXF1/REXR2、PM3Fb/PM3Rb和Mi23F/Mi23R对16个番茄种质资源进行检测，结果显示所有材料均含Mi基因，但是通过PMiF3/PMiR3对其检测，结果显示只有GZ09、GZ14、GZ10、GZ13等4个番茄材料含有Mi基因，而其他品种均不含Mi基因;另外，本研究通过Pvr4/Pvr7-F和Pvr4/Pvr7-R引物对16个番茄种质资源的马铃薯Y病毒（PVY）抗性分子标记进行检测，结果只有GZ04、GZ07和GZ06三个番茄材料含有Pvr4基因;用TYLCV抗性分子标记引物qR180/qF180扩增 16 个番茄材料，结果显示，GZ02、GZ19、GZ04、GZ07、GZ01、GZ08、GZ09、GZ03、GZ16、GZ05、GZ13、GZ18、GZ11等13个番茄品种含有抗性基因Ty1/Ty3。

综合分析三种抗病分子标记，确定GZ04、GZ07和GZ06为三个优异抗病材料，可用于将来的番茄抗病育种，本研究初步明确了贵州大学16个番茄种质资源的抗性分子標记，为番茄抗病育种提供材料选择，为贵州省‘红酸汤’产业奠定材料基础。

关键词：番茄;抗性基因;分子标记;种质资源中图分类号：S641.2文献标识码：A文章编号：1008-0457（2021）06-0030-07国际DOI编码：10.15958/ki.sdnyswxb.2021.06.004Abstract：Tomato is a pillar industry of modern vegetables and an advantageous industry for poverty alleviation.In order to meet the demand for disease and stress resistance in tomato production，more and more attention has been paid to the exploitation and utilization of resistance resources for breeding.This study used theresistance gene Mi of tomato root-knot nematode resistance gene Mi，the resistance gene Pvr4 of PVY virus disease，and resistance gene Ty-1/Ty-3 of tomato yellow leaf curl virus（TYLCV）to identify the resistance molecular marker about 16 tomato germplasm resources from Guizhou.Sixteen tomato germplasm resources were tested by three pairs of root-knot nematode resistance molecular markers REXF1/REXR2，PM3Fb/PM3Rb andMi23F/Mi23R.The results showed that all materials contained Mi genes.When these materials were tested by PMiF3/PMiR3，the test results showed that only 4 tomato materials，such as GZ09，GZ14，GZ10，GZ13，contained Mi genes.In addition，this study used Pvr4/Pvr7-F and Pvr4/Pvr7-R primers to detect the potato virus Y（PVY）resistance molecular markers of 16 tomato germplasm resources.Only three tomato materials（GZ04，GZ07 and GZ06）contained Pvr4 gene.Sixteen tomato materials were amplified with TYLCV resistance molecular marker primerqR180/qF180.Thirteen tomato varieties contained the resistance gene Ty1/Ty3，such as GZ02，GZ19，GZ04，GZ07，GZ01，GZ08，GZ09，GZ03，GZ16，GZ05，GZ13，GZ18，GZ11，etc.GZ04，GZ07 and GZ06 were determined to be the excellent materials by comparing the three resistance molecular markers，which can be used for resistant breeding in tomato.This study has preliminarily clarified the resistance molecular markers of 16 tomato germplasm resources from Guizhou University，which provides material selection for tomato resistance breeding，and lays a material foundation for the "red and sour soup" industry in Guizhou Province.Keywords：tomato;resistance gene;molecular marker;germplasm resources番茄（Solanum lycopersicum L.），属于茄科（Solanaceae）蔬菜作物，因其经济价值高，已成为现代蔬菜的主导产业，更是脱贫攻坚的优势产业。