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毒害细胞（5）浸泡器材的蒸溜水容器要专用，并做好标记。
（6）器材清洗干燥后，在以后各步操作时，手指不可接触器材的使用端。
18.对器皿进行有效清洗需注意事项是什么？[10分]参考答案：对器皿进行有效清洗需注意事项是：（1）用后应立即浸泡（2）挑选合适的去污剂（3）流水冲洗干净后，再用去离子水和重蒸馏水漂洗；（4）洗后应及时凉干或烘干；（5）包装后，放置干净处，待消毒19.简述使用甲醛消毒时应注意事项及甲醛气体产生的方法。
[10分]参考答案：甲醛气体产生的方法：（1）多聚甲醛加热法：将多聚甲醛研成粉末，铺在金属板上，加热至150℃以上即产生甲醛气体。
（2）甲醛水溶液蒸发法：将40%甲醛水溶液（福尔马林）倒入蒸发皿中，加热蒸发。
（3）氧化法：先将高锰酸钾放入一较大容器中，再倒入福尔马林。
使用甲醛消毒时应注意事项及注意：（1）熏蒸前应充分暴露物体表面;（2）熏蒸时室内温度应在18℃以上，相对湿度为70%。
20.双蒸器使用应注意哪些事项？[10分]参考答案：双蒸器使用应注意事项是：（1）使用时先开启冷却水水源。
（2）要调节去离子水或蒸馏水流速，使之进入一次横式烧瓶的速度基本上与二次蒸馏水流出速度相等（3）停用时应先关闭去离子水，再关闭电源，最后关闭冷却水21.电热干燥箱使用时应注意哪些事项？[10分]参考答案：电热干燥箱使用时应注意事项是：（1）鼓风与升温应同时开始（2）温度降至100℃以下时，再打开箱门。
（3）最底层不能放置物品22.培养基的基本要求是什么？[10分]参考答案：培养基的基本要求是：（1）营养成分：氨基酸，单糖，维生素，无机离子与微量元素。
（2）促生长因子及激素（3）渗透压（4）pH（5）无毒无污染23.在细胞培养液中加入血清的作用是什么？[10分]参考答案：在细胞培养液中加入血清的作用是：（1）提供基本的营养物质（2）提供贴壁和扩展因子（3）提供激素及各种生长因子（4）提供结合蛋白（5）对培养细胞提供某些保护作用24.使用血清的缺点是什么？[10分]参考答案：使用血清的缺点是：n（1）可能改变细胞在体内的正常状态（2）有些物质对细胞产生毒性作用（3）每批血清之间都有差别（4）取材过程有可能带入支原体、病毒。
临床研究用人间充质干细胞质量评价规范（讨论稿）前言人间充质干细胞(human MSCs, hMSCs)是一类具有一定的自我复制更新和多向分化潜能的成体干细胞，广泛存在于胎儿和成人各组织中，如骨髓、脂肪、皮肤、牙髓、肌腱，以及新生儿附属组织，如脐带、胎盘、羊膜等等组织。
除一定程度的分化潜能外，hMSCs还具有独特的免疫调控和组织再生功能，参与调控异常免疫反应、维护免疫平衡，帮助机体形成有利于病损组织细胞修复或再生的微环境，以促进损伤组织细胞的修复或再生。
hMSCs独特的生物学功能决定了其应具有广泛的临床适应症，并使其成为近十年来细胞治疗领域中发展最为广泛、最为迅速的干细胞类型。
过去10年来所积累的大量临床前及临床研究数据显示，不同组织来源的hMSCs均具有不同程度，针对不同临床适应症的治疗效果。
目前在登记的各种自体或异体组织来源的hMSCs临床适应症类型或疾病亚型已有上百种，其中常见的临床适应症类型包括骨关节疾病、心血管疾病、器官功能衰竭、神经退行性疾病、移植物抗宿主病、多发性硬化、脊髓损伤、炎性结肠炎、脊髓侧索硬化、系统性红斑狼疮，等等。
然而，无论是临床前或临床研究阶段，现有的研究结果仍都存在不同程度的问题，而所有问题又都不同程度地汇聚到hMSCs的质量问题上。
其中临床前研究所表现的问题是，不同研发者所使用的hMSCs来源、培养体系、制备工艺、质量标准、评价技术等存在很大差异，也存在质量评价内容和技术的合理性等问题，因此导致不同研究者间的研究结果很难具有可比性，或结果难以重复，因此也很难形成相对统一的质量标准。
而临床研究中所存在的问题是，绝大多数临床研究还处在早期阶段，所观察的病例数还很有限，临床研究中细胞质量的标准化和细胞使用的规范性仍存在巨大差异，所有这些尚不足以完全支持hMSCs的安全性和/或疗效。
除此以外，因hMSCs临床前研究还远不够完善，对其临床研究的指导作用还不强，或者临床前研究与临床研究存在严重脱节现象，临床研究阶段细胞质量的稳定性研究欠缺，细胞质量评价和受试者评估体系尚未建立，等等。
Hi5-SF悬浮细胞系的建立及鉴定马伟;王家敏;马桂兰;马祺;马花;乔自林;马忠仁;冯玉萍【摘要】从中国典型培养物保藏中心(CCTCC)引进High Five细胞并对其进行驯化,获得无血清悬浮驯化株(Hi5-SF).依据《中华人民共和国药典(2010年版三部)》对其进行细胞生物学特性研究、微生物污染、病毒外源因子及细胞致瘤性检测.结果发现,Hi5-SF细胞复苏活力76.3％,生长曲线呈“S”型,最大增殖密度可达3.50×106 mL-1,群体倍增时间为26.2 h;细菌、真菌及支原体检查均为阴性;血细胞吸附试验、致细胞病变试验和特异性病毒荧光抗体结合物检查结果均为阴性;致瘤性检查结果也为阴性.说明该细胞株符合兽用疫苗生产用细胞质量要求,可以在疫苗研究与生产中应用.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2017(026)002【总页数】6页(P173-178)【关键词】High five细胞;悬浮培养;质量评价【作者】马伟;王家敏;马桂兰;马祺;马花;乔自林;马忠仁;冯玉萍【作者单位】西北民族大学甘肃省动物细胞工程技术研究中心,兰州 730030;西北民族大学甘肃省动物细胞工程技术研究中心,兰州 730030;兰州百灵生物技术有限公司,兰州 730010;兰州百灵生物技术有限公司,兰州 730010;西北民族大学甘肃省动物细胞工程技术研究中心,兰州 730030;西北民族大学甘肃省动物细胞工程技术研究中心,兰州 730030;西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,兰州730030;西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,兰州 730030【正文语种】中文【中图分类】S85粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)卵巢细胞株BTI-TN-5B1-4是20世纪90年代Robert R和李国勋等从粉纹夜蛾卵巢细胞系BTI-TN-5B1克隆得到的新型宿主细胞，Invitrogen公司注册商标为High Five细胞[1-2]。
植物体细胞杂交技术的几点疑问解析展开全文植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。
其过程主要包括原生质体的制备、细胞融合的诱导、杂种细胞的筛选和培养以及杂种植株的再生和鉴定等环节。
1植物体细胞杂交的原理植物体细胞杂交首先要使原生质体融合形成杂种细胞;其次要把杂种细胞经过植物组织培养技术培育成杂种植株。
细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。
因此，植物体细胞杂交的原理是：利用细胞膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性进行育种。
2如何制备原生质体植物细胞外面坚硬的细胞壁是细胞融合的障碍，因此在体细胞杂交前必须除去细胞壁，获得具有活力的原生质体。
除去细胞壁早期的方法是机械法，即通过将材料置于高渗糖溶液中，使其发生质壁分离，当原生质体收缩成球状时，切开细胞壁释放出原生质体。
但由于这种方法费时、繁琐且不易获得完整的原生质体，目前已基本上被酶解法取代。
酶解法是用不同种类和浓度的酶处理植物细胞，将细胞壁解离，以获得原生质体的方法。
由于植物细胞壁的主要成分为纤维素、半纤维素、果胶等，所以酶解法去壁常用的酶主要有纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶等。
正常状态下，细胞壁对原生质体具有保护和支持作用。
但在制备原生质体时将细胞壁去除后，裸露的原生质体很可能由于其内外渗透压的不同而发生吸水胀破或失水皱缩。
因此，在酶液中必须加渗透稳定剂以保护原生质体的活力和质膜的稳定性。
此外，酶液的浓度为使细胞发生轻度的质壁分离为宜1。
3如何诱导原生质体融合诱导原生质体融合的方法有化学诱导和物理诱导两种。
化学法又可分为离子诱导融合法、高钙-高pH法、PEG（聚乙二醇）法等。
离子诱导融合法常用的盐类离子有硝酸钠、硝酸钾、硝酸钙、氯化钙等。
由于PEG法对原生质体毒性小、易操作、成本低、不需特殊设备，融合子产生的异核率较高，且融合过程不受物种限制。
因此，该方法在植物体细胞杂交中被广泛使用。
临床医学检验技术(师)：诊断酶必看题库知识点1、单选酶活性测定方法中的平衡法又称为（）A.中止反应法B.终点法C.动力学法D.速率法E.连续检测法正确答案：B参考解析：平衡法指通过测定酶反应开始至反应（江南博哥）到达平衡时产物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法，又叫终点法。
2、单选不属于水解酶的是（）A.淀粉酶B.脂肪酶C.门冬氨酸氨基转移酶D.酸性磷酸酶E.碱性磷酸酶正确答案：C3、单选SI制中酶活性单位是（）A.U/LB.KatalC.g/hD.ml/LE.pmol正确答案：B4、单选?患者，男，72岁，进行性排尿困难2年。
直肠指诊触及前列腺侧叶增大、中间沟平，左侧叶有2cm大小硬结，怀疑为前列腺癌。
临床以往常用来诊断前列腺疾病的酶学指标是（）A.ALTB.ACPC.ALPD.ASTE.AMY正确答案：B5、单选临床上主要用什么方法来分析同工酶（）A.蛋白酶水解法B.沉淀法C.电泳法D.层析法E.热失活法正确答案：C参考解析：同工酶氨基酸组成不同，等电点不同，电泳迁移率也就不同，可用电泳法分离鉴定。
电泳法简便、快速、分离效果好，并且一般不会破坏酶的天然状态，是研究同工酶最为广泛的方法。
6、单选LD催化乳酸生成丙酮酸的反应较适当的pH是（）A.10.5B.9.0C.7.6D.7.0E.4.6正确答案：B7、单选?患者，男，72岁，进行性排尿困难2年。
直肠指诊触及前列腺侧叶增大、中间沟平，左侧叶有2cm大小硬结，怀疑为前列腺癌。
一般应在前列腺检查多久之后进行实验室测定为宜（）A.6hB.12hC.24hD.48hE.72h正确答案：C8、单选下列哪种酶与心脏功能是否正常关系不大（）.A.ALPB.ASTC.CKD.LDE.α-HBDH正确答案：A参考解析：ALP主要用于骨骼和肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，与心脏功能是否正常关系不大。
9、单选进行酶活性浓度测定时，常推荐加入磷酸吡哆醛的酶是（）A.ALPB.ALTC.CKD.LDE.AMY正确答案：B10、单选根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况，不属于血浆特异酶的是（）A.纤溶酶B.胆碱酯酶C.铜氧化酶D.脂蛋白酯酶E.转氨酶正确答案：E参考解析：转氨酶即氨基转移酶，是一组催化氨基在氨基酸与α酮酸间转移的酶，不属于血浆特异酶。
