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抗生素的配制

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抗生素的配制

1. 氨苄青霉素Amp（100mg/mL）

取1g氨苄青霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。用时每100mL加75μL，终浓度为50μg/mL。

2. 硫酸链霉素（400mg/mL）

氨基糖苷类抗生素，氨苄青霉素主要用于抑制革兰氏阴性细菌的生长。

取4g硫酸链霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。

用时每100mL加75μL，终浓度为200μg/mL。 3. 乳酸（50%）

大多数细菌不耐酸，而真菌偏好酸性。

将50mL的乳酸溶液与50mL的ddH2O混匀，分装于2mL离心管中，-20度保存。用

时每100mL加75μL，终浓度为0.35%。

4. 卡纳霉素Kanamycin 是一种氨基糖酐类，从卡那霉素链霉菌(Streptomyceskanamyceticus)中分离得到。能

结合细菌核糖体的30S亚基上的16S rRNA，干扰formyl-methionyl-tRNA 与

30SrRNA的连接，阻断细菌蛋白质的合成。

取1g卡纳霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。用

时每100mL加75μL，终浓度为50μg/mL。

1. 青霉素：β-内酰胺类抗生素,主要是抑制细菌的细胞壁生成,使之产生缺陷,细菌

破裂死亡. 2. 红霉素: 大环内酯类抗生素,阻碍细菌蛋白质的合成,起到抑制细菌繁殖的作

用,但是不能杀菌.

3. 四环素: 四环素类抗生素,抑制细菌DNA复制,阻碍蛋白质合成.起到抑制细菌

生长作用,但大剂量也可杀菌.

4. 链霉素: 氨基甙类抗生素,阻碍细菌蛋白质合成.杀菌作用.

毒素和抗毒素是相对概念,某些物质进入体内会抑制我们正常的生理运转环境和

途径,比如有机磷农药可以使神经肌肉接头的信号传递出现障碍.从而产生一系列

的症状.而抗毒素用通俗的话来说就是解毒药.能逆转或者阻止毒素对正常生理的

破坏. 外毒素（exotoxin）: 细菌在生长过程中由细胞内分泌到细胞外的毒性物质。能

产生外毒素的细菌大多数是革兰氏阳性菌，少数是革兰氏阴性菌。将产生外毒素

的细菌的液体培养物用滤菌器过滤除菌，即能获得外毒素。其特点是：

（1）化学成分是蛋白质，分子量为27000～900000道尔顿；

（2）不稳定，易被热、酸及酶所灭活； （3）可经甲醛（0.3～0.4％）处理，脱毒成为类毒素；

（4）抗原性强，可刺激机体产生高效价的抗毒素；

（5）具亲组织性，但作用于组织有选择性。一般不引起宿主发热，但常可抑制

宿主蛋白质的合成，对宿主有细胞毒及神经毒性。如破伤风痉挛毒素能影响宿主

脊髓前角运动神经细胞的控制机能，引起骨骼肌强直痉挛；肉毒杆菌产生的肉毒毒素，能阻断胆碱能神经末梢传递介质（乙酰胆碱）的释放，麻痹运动神经末梢，

出现眼、咽肌等麻痹；

（6）毒性极强，极微量就可使实验动物死亡。

重要的外毒素主要有两大类：

1. 体外产生并引起食物中毒的外毒素。它们所致的疾病不是传染过程，而是由于食入含有这类毒素的食物引起的中毒过程。主要有肉毒杆菌产生的肉毒毒

素和金黄色葡萄球菌产生的肠毒素。

2. 体内产生并引起重要致病作用的毒素。这类毒素有的作用于全身，如白喉杆

菌产生的白喉毒素、破伤风杆菌产生的破伤风痉挛毒素、乙型溶血型链球菌

产生的红疹毒素；有的作用于局部，如霍乱弧菌肠毒素等。

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抗生素溶液配制

抗生素溶液配制

抗生素溶液配制

红霉素是由无水乙醇配制的！可按下列原则配制：

1 贮存液一般配制100mg/ml或50mg/ml；

2 -20度，避光保存；

3 配完后，小量分装保存，取出用后即丢弃；

4 可用0.44um滤膜过滤，除菌、除杂。

氯霉素溶液的配置和注意事项。

工作液、母液配制：

一般常用的工作浓度为25μg/ml。

配制母液时，先用乙醇配成10 mg/ml，再用水稀释至1 mg/ml。该母液应冻存，并在30天内用完。

注意事项：

（氯霉素溶液应避光）

（氯霉素溶液见光分解后会变黄，出现橘黄色沉淀）

氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）

溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）

溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）

溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）

溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）

溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

链霉素（streptomycin）（50mg/ml）

溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

抗生素配置及工作浓度

抗生素配置及工作浓度

抗生素

储存液 配制方 法 贮存浓度/

(mg/ml) 工作浓度

(mg/L) 保存条件 严紧型质

粒(ug/ml) 松驰型质粒

(ug/ml)

氨苄青霉

素(Amp) 溶于水 100 100细菌培

养 -20 C 20 60

羧苄青霉

素(Carb) 溶于水 50 250-500

植物脱菌 -20 C 20 60

头抱霉素

(Cef) 溶于水 250 250-500

植物脱菌 -20 C

卡那霉素

(kan) 溶于水 50 100 -20 C 10 50

链霉素

(str) 溶于水 50 10-50 -20 C 10 50

利福平

(Rif) NaOH溶解

后用水定

容 20 50-100 -20 C保存3

个月

硫酸新霉

素(Nm) 溶于水 50 10-100植物

选择培养 -20 C

巴龙霉素 溶于水 50 150 4 C 作用就是抑

制菌的生物

特美汀 溶于水 200 200 -20 C

常用抗生素：

①以水为溶剂的抗生素贮存液应使用 0.22 ^m滤器过滤除菌；②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌;

③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。

氨苄青霉素(ampicillin)( 100mg/ml)

溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水(最好是高压后的灭菌水)中，最后定容至10ml。分 装成小份于-20 °C贮存。常以25ug/ml〜50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素(carbenicillin) (50mg/ml)

溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中， 最后定容至10ml。分装成小份于-20C贮存。

常以25ug/ml〜50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

卡那霉素(kanamycin) (10mg/ml)

溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至 10ml。分装成小份于-20C贮存。常以 10ug/ml〜50ug/ml的终浓度添加于生长培养基

抗生素溶液配制 2

抗生素溶液配制 2

抗生素溶液配制

使用时，均按照1：1000稀释：

A、硫酸卡那霉素配制（50mg/ml）

(1) 在10mL蒸馏水中溶解1g 硫酸卡那霉素后，用蒸馏水定容至20mL；

(2) 在超净工作台中，用0.22μm滤器过滤至新的无菌管；

(3) 分装成2mL小份贮存于-20℃。

B、氨苄青霉素配制（100mg/ml）

(1) 在10mL蒸馏水中溶解2g氨苄青霉素后，用蒸馏水定容至20mL；

(2) 在超净工作台中，用0.22μm滤器过滤至新的无菌管；

(3) 分装成2mL小份贮存于-20℃。

C、氯霉素配制（25mg/ml）

（1）在8mL无水乙醇中溶解0.25g氯霉素后，定容至10mL；

（2）在超净工作台中，用0.22μm滤器过滤至新的无菌管；

（3）分装成2mL小份贮存于-20℃。

注：氯霉素见光分解会变黄，出现橘色沉淀。

D、四环素配制（10mg/ml）

（1）在8mL无水乙醇中溶解0.1g无碱的四环素后（或溶解四环素盐酸盐于水中），定容至10mL；

（2）在超净工作台中，用0.22μm滤器过滤至新的无菌管；

（3）分装成2mL小份贮存于-20℃。

注：四环素见光易分解，应避光保存。

抗生素配制

抗生素配制

溶液配制

2,4-D溶液（1mg/ml）: 0.1g粉末溶于少量1M NaOH中，加热溶解，ddH2O定容至100mL，保存在棕色瓶中。

IAA溶液，KT溶液，6-BA溶液（1mg/ml）: 0.05g粉末溶于少量1M

NaOH中，ddH2O定容至50mL，保存在棕色瓶中。

Carb羧苄（50mg/ml）: 1 g羧苄青霉素二钠盐溶于ddH2O，定容至20 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。

Amp氨苄 (100mg/ml）： 1 g氨苄青霉素钠盐溶于ddH2O，定容至10ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。

Kan卡那 (100mg/mL)：5 g Kan溶于ddH2O，定容至50 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。

Rif（35mg/mL)：1 g Rif先溶于少量NaOH溶液，再用ddH2O定容至28.5 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。

Cefo头孢(100mg/mL)：5 g Cefo溶于ddH2O定容至50 ml，过滤灭菌，分装成小份于-20℃贮存。

Timetin替卡西林二钠/克拉维酸钾（200mg/mL）: 5g粉末溶于25 mL

ddH2O，过滤灭菌，-20℃保存。

Basta草铵膦（10mg/mL）：100 mg粉末溶于10 mL ddH2O，过滤灭菌，-20℃保存。

As乙酰他丁香酮（100 mM）：196.2 mg粉末溶于5 mL DMSO，用ddH2O定容至10 mL，过滤灭菌，-20℃保存。