药理学实验的基本知识与技术
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第一章药理学实验的基础知识一、药理学实验课的目的和要求药理学实验课的目的在于通过实验,使学生掌握进行药理学实验的基本方法,了解获得药理学知识的科学途径,验证药理学中的重要基本理论,更牢固地掌握药理学的基本概念。
在实验课中还应培养学生科学工作的严肃的态度、严格的要求、严密的工作方法和实事求是的作风,并初步具备客观地对事物进行观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力。
为了达到上述目的,要求做到下列事项:实验前(1)仔细阅读实验指导,了解实验目的、要求、方法和操作步骤,领会其设计原理;(2)结合实验内容,复习有关药理学和生理学、生化学等方面理论知识达到充分理解;(3)估计实验中可能出现的情况和发生的问题。
实验中(1)将实验器材妥善安排,正确装置;(2)严格按照实验指导书上的步骤进行操作,准确计算给药量,防止出现差错意外;(3)认真、细致地观察实验过程中出现的现象,随时记录药物反应的出时间、表现以及最后转归,联系课堂讲授内容进行思考;(4)注意节约实验材料。
实验后(1)整理实验结果,经过分析思考,写出实验报告,按时交给指导教师;(2)整理实验器材,洗净擦干,妥为安放。
将存活和死亡动物分别送至指定处所。
做好实验室的清洁卫生工作。
二、实验动物的捉持和给药法实验1.1 蛙和蟾蜍的捉持和给药法[目的] 学习蛙和蟾蜍的捉持和淋巴囊给药法。
[材料] 蛙或蟾蜍;注射器、针头、生理盐水。
[方法] 1.捉持法通常以左手握持,用食指和中指夹住左前肢,用拇指压住右前肢,将下肢拉直,用无名指及小指夹住。
2.淋巴囊内注射法蛙及蟾蜍皮下有多个淋巴囊,注入药物后易于吸收。
通常将药物注射于胸、腹或股淋巴囊。
蛙及蟾蜍的皮肤很薄,缺乏弹性,注射后药物易自针眼漏出,故作胸部淋巴囊注射时应将针头插入口腔,由口腔底部穿过下颌肌层而达胸部皮下;作股淋巴囊注射时,应由小腿皮肤剌入,通过膝关节而达大腿部皮下。
这样才可避免药液外漏。
注入药液量一般为0.25ml∽0.50ml试以生理盐水作胸淋巴囊和股淋巴囊注射练习。
药理学实验的基础知识药理学是研究药物对生物体产生作用的科学,而药理学实验是用来研究、验证药物的药效、毒性和代谢等特性的重要手段。
在进行药理学实验之前,研究人员需要掌握一些基础知识,以确保实验的可靠性和科学性。
药理学实验的分类药理学实验通常可以分为体外实验和体内实验两大类。
体外实验体外实验是在体外环境(如离体器官、细胞培养皿等)中进行的实验,用于研究药物对细胞、基因等的作用机制和生物效应。
体内实验体内实验是在动物模型或人体中进行的实验,用于评价药物的生物活性、毒性和药代动力学特性等。
药理学实验的设计原则进行药理学实验时,必须遵守一些设计原则,以确保实验结果的准确性和可靠性。
1.随机分组:实验对象在实验前应随机分配到不同的实验组,以减少实验结果的偶然性。
2.双盲对照:在动物实验中,研究人员应当实现实验组和对照组的盲法实验,以减少实验结果的主观影响。
3.样本量控制:实验设计时需要合理确定实验组和对照组的样本量,以保证实验结果的统计学意义。
4.质量控制:在进行实验的过程中,需要确保实验操作的标准化和一致性,以减少操作误差。
药理学实验的常用技术在药理学实验中,有许多常用技术可以帮助研究人员获取所需数据和信息,例如:•ELISA检测技术:用于测定细胞因子、蛋白质等分子在样本中的浓度。
•Western blot:检测蛋白质表达水平和结构特征的技术。
•细胞色素释放试验:用于评价药物对细胞毒性的影响。
•动物行为学实验:评估药物对动物运动、认知等行为的影响。
药理学实验的伦理和安全注意事项在进行药理学实验时,研究人员需要遵守相关的伦理规范和安全措施,以保障实验对象的权益和研究人员的安全。
1.动物实验伦理:研究人员应当遵守动物实验的伦理规范,尽量减少动物的痛苦和不必要的死亡。
2.实验室安全:在实验室操作时应当穿戴个人防护装备,确保实验操作的安全。
3.数据保密:研究人员需要确保实验数据的保密性,防止实验数据泄露。
结语药理学实验作为药物研发的重要环节,需要研究人员具备扎实的基础知识和实验技术,以确保实验结果的科学性和可靠性。
针对药理学有关知识容与实验课的要求,拟开设以下几个方面的实验:实验一:药理学实验的基本知识及基本技能训练(4学时)实验目的与要求:通过实验使学生掌握药理实验有关的动物选择、应用、捉拿、给药、采血等基本知识及基本技能的训练。
要点:一、常用动物捉持方法⑴小鼠捉持⑵家兔捉持二、常用动物给药方法⑴小鼠灌胃——;皮下注射——;腹腔注射——;肌肉注射——;尾静脉注射——;⑵家兔灌胃——;耳缘静脉给药——;三、常用动物取血方法⑴小鼠后眼眶静脉丛取血——用拇指和食,中指捏住鼠颈部,利用捏紧的压力,使静脉丛淤血.将一特制硬玻璃吸管(约长15cm,前端拉成管壁略厚的毛细管),从眼角插入眼睑和眼球之间,轻轻香眼底方向移动,并略加捻转,血即自然顺便玻璃管流出。
⑵眼眶动脉、静脉取血——左手抓住小鼠,拇指和食指尽量将头部皮肤捏紧,使眼球突出,用无钩弯镊将眼球摘除,将鼠倒置,血即流出1. 小鼠捉持法以右手捉小鼠尾,将小鼠放于粗糙面上,向后轻拉小鼠尾部,使小鼠固定于粗糙面上。
用左手的拇指、食指和中指捏住小鼠两耳及头部皮肤,无名指、小指和掌心夹住背部皮肤和尾部,使头部朝上,颈部拉直但不宜过紧,以免窒息(见图1—1)。
另一种捉持方法是只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴,后用手掌及小指和无名指夹住其尾部,再以拇指及食指抓住两耳和头部皮肤(见图1—2)。
前者易学,后者便与快速捉拿给药。
图1—1 小鼠的捉拿方法1 图1—2 小鼠的捉拿方法22. 小鼠灌胃以左手捉持小鼠,头部朝上,使其头颈充分拉直。
右手拿起装有灌胃针头的注射器,自口角插入口腔,再从舌面紧沿上腭进入食道(见图1—3)如插入正确,灌胃针头容易进入,如遇阻力,可能插入气管,应退出再插。
灌胃液最多不超过0.1ml。
图1—3小鼠的灌胃法图1—4小鼠的皮下注射法3. 小鼠皮下注射将小鼠至于铁丝网上,左手抓住小鼠,以拇指扣食指捏起背部皮肤,右手持注射器刺入背部皮下注射药液。
(见图1—4)。
药理学基础实验实验一药理学实验的基本知识和技术 6课时一、动物实验的基本知识和技术(一)实验动物的要求和选择药理学实验要求根据不同的实验目的选用相应合格的医学实验动物。
实验动物按微生物控制分为四级:一级为普通动物,要求不带有人兽共患病的病原体以及体外寄生虫;二级为清洁动物,在一级要求基础上还必须不带有动物传染病的病原体;三级为无特定病原体的动物;四级为无菌动物。
药理教学实验可选用一级普通动物,科研实验必须用二级以上的实验动物。
1.青蛙和蟾蜍其心脏能在离体情况下保持较持久地节律性搏动,可用来观察药物对心脏的作用;其坐骨神经腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、横纹肌或神经肌肉接头的作用,用于局麻药和肌松药实验。
2.小鼠最为常用,易大量繁殖,适用于需要大量动物的实验,如半数致死量测定和药物的初筛实验。
3.大鼠用途与小鼠基本相同。
主要用于一些用小鼠不便进行的实验,如血压实验等。
大鼠对炎症反应较为灵敏,其踝关节炎模型常用于观察药物的抗炎作用。
4.豚鼠对组胺特别敏感,是筛选平喘药和抗组胺药最理想的动物。
5.家兔性情温顺,易饲养,亦是药理实验中最常用的动物之一,用于观察药物对心脏、血压、呼吸的影响。
6.狗易于通过驯养与人合作,因而很适合于慢性实验,如用手术造成胃瘘、肠瘘以观察药物对胃肠蠕动及分泌功能的影响;高血压的实验治疗;新药临床前毒性试验等。
(二)实验动物的捉持方法2.小鼠右手提起鼠尾,放在鼠笼(或其他粗糙面)上,向后轻拉其尾,迅速用左手拇指和食指捏住小鼠头颈部皮肤,并以左手小指、无名指压其尾部于手掌尺侧。
另一方法是只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌尺侧和小指夹住尾根部,然后用左手拇指和食指捏住头颈部皮肤。
(三)实验动物的给药方法1.灌胃小鼠:左手捉持小鼠,使头部朝上,颈部拉直,腹部朝向操作者,右手持灌胃管,自口角插入口腔,使灌胃管与食管成一直线,再从舌面紧沿上腭缓慢进入食管2cm~3cm,将药液缓慢注入。
药理学实验的基本知识和基本技术一、实验动物的种类选择药理学实验常用的动物有小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫、犬、蛙、蟾蜍等。
常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。
由于不同的动物具有不同的特点,故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用,并符合节约的原则。
小白鼠:系实验室最常用的一种动物。
易于大量繁殖,且价廉,适用需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。
大白鼠:与小白鼠相似。
一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠,如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。
此外也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管,或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。
大白鼠的血压和人相近,且稳定,现常用于抗高血压药物实验。
豚鼠:是实验室常用动物之一。
对组织胺很敏感,容易致敏,常用于平喘药和抗组胺药的实验。
对结核菌亦敏感,故也用于抗结核药的研究。
此外还用于离体心脏及平滑肌实验,其乳头肌和心房常用于电生理特性及心肌细胞动作电位实验,研究抗心律失常药物的机理。
家兔:温顺、易饲养,常用于观察药物对心脏、呼吸的影响及农药中毒和解救的实验。
亦用于研究药物对中枢神经系统的作用、体温实验、热原检查及避孕药实验。
猫:与家兔比较,猫对外科手术的耐受性强,血压较稳定,故常用于血压实验。
但价格较贵。
此外,猫也常用于心血管药物及中枢神经系统药物的研究。
犬:药理实验需大动物时常用犬。
常用于观察药物对心脏泵功能和血流动力学的影响,心肌细胞电生理研究,降压药及抗休克药的研究等。
犬还可以通过训练,用于慢性实验研究,如条件反射、高血压的实验治疗、胃肠蠕动和分泌实验、慢性毒性实验。
蛙和蟾蜍离体心脏能较持久地有节律地搏动,常用于观察药物对心脏的作用;坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用;蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。
须注意:由于动物对外界刺激的反应存在个体差异,在选择实验动物时,还应注意动物的年龄、体重、性别、生理状态、健康状况及其品系、等级等因素对实验的影响。
实验一药理学实验基本知识和技术实验目的:1、掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力;2、更好地掌握药理学基本理论知识;3、培养科学思维。
实验内容:一、药理实验的基本目的与要求二、实验动物:1、动物的选择;2、动物的标记与捉拿、固定方法;3、动物的取血方法(尾尖、眼眶静脉丛、摘眼球、断头);4、动物的给药方法(灌胃、腹腔、皮下、尾静脉);5、动物的麻醉方法;6、动物的处死方法。
三、实验设计基本原则。
实验步骤:一、药理学实验的基本目的与要求药理学实验课在药理学教学中占有非常重要的地位。
药理学实验课的目的在于通过实验验证药理学的基本理论,加深理解与掌握药理学的基本知识和规律;也是了解获得药理学知识的科学途径。
同时,培养学生独立思考,独立工作,科学思维的能力;培养学生动手操作、分析问题和解决问题的能力;还应培养学生对科学工作的严肃的态度、严格的要求、严密的工作方法及实事求是的工作作风。
为了达到上述目的,要求做到下列事项:1. 实验前:预习实验内容并复习相关理论知识;2. 实验时:(1)实验分小组进行,实验前分工明确,实验时密切配合;(2)确定实验仪器、药品、动物与实验指导相符时,将实验器材妥善安排,正确装置、保管;(3)实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录;(4)注意爱护动物、节约实验药品;(5)实验过程中保持实验室肃静、清洁。
3. 实验后:⑴各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室;⑵值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所;⑶整理实验结果,经分析思考作出结论,按要求写出实验报告,按时交给指导老师。
实验报告的书写1.题目2.目的3.原理4.材料:实验动物,器材,药品5.方法:用自己的语言简单扼要描述出来;6.结果:要求真实、清楚;7.讨论:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因;8.结论:将实验结果进行归纳总结,应带有提示性质。
药理学实验教程 〔中、英文版〕主编 叶春玲 钟玲暨暨南南大大学学药药学学院院药药理理教教研研室室22000077年年55月月药理学实验教程目目 录录第一篇 药理学实验基本知识第一章 药理学实验须知一、药理学实验课的目的和要求二、实验结果的整理和实验报告的撰写第二章 药理学实验设计的基本知识一、实验设计的基本原那么二、药理实验设计中的剂量效果三、药理实验设计中的预试效果第三章 药理学实验的统计处置原那么一、计量资料的统计剖析二、计数资料的统计剖析三、药效和剂量依赖关系〔相关性〕的统计剖析四、两药药效的等效性剖析第四章 常用实验植物的基本操作一、实验植物的选择及捉拿固定二、实验植物的编号三、实验植物的给药方法四、实验植物的麻醉和取血第五章 药理学实验常用仪器操作技术BL-410生物机能实验系统第六章 药物剂型与处方学一、药物剂型二、处方学第二篇 药理学总论实验第一章 药动学实验实验一 磺胺类药物静脉给药后的药时曲线实验二 磺胺类药物非血管内给药后的药时曲线实验三 3P87 计算药物动力学参数实验四磺胺类药物在体内的散布实验五磺胺嘧啶的血浆蛋白结合率测定实验六磺胺类药物在麻醉大鼠体内经胆汁和尿排泄的实验第二章药效学总论实验实验一不同给药途径对药物作用的影响实验二肝功用形状对药物作用的影响实验三量效关系曲线和有关药效学参数测定第三章平安性实验实验一药物急性半数致死量〔LD50〕的测定实验二最大耐受量〔MTD〕测定第三篇药理学各论实验第一章传入迷经系统药物实验实验一药物对麻醉植物血压的影响实验二药物对麻醉植物血活动力学的影响实验三药物对离体兔自动脉环的作用第二章中枢神经系统药物实验实验一药物对小鼠自发活动的影响实验二药物对益智作用的影响实验三抗癫痫药和抗惊厥实验实验四镇痛药实验第三章心血管系统药物实验实验一利多卡因对哇巴因诱发心律正常的拮抗作用实验二强心苷对家兔在体衰竭心脏的作用实验三药物对垂体后叶素所致的急性心肌缺血心电图变化的影响第四章内脏系统药物实验实验一呋塞米对小鼠尿量及电解质的影响实验二药物对组胺诱发豚鼠哮喘的作用实验三药物对大鼠的利胆作用第五章激素类及抗炎药物实验实验一糖皮质激素对毛细血管通透性的影响实验二糖皮质激素对单核巨噬细胞吞噬功用的影响实验三抗炎药物对大鼠足跖肿胀的影响第四篇实践运用才干训练第一章设计性实验第二章病历讨论附录一、常用植物离体实验的生理溶液二、植物实验常用麻醉药的用法与用量三、不同植物采血部位与采血量的关系四、常用实验植物的最大平安采血量与最小致死采血量五、不同种属植物单位体重〔kg〕剂量折算系数六、植物常用正常数据七、成年植物的年龄、体重和寿命比拟第一篇药理学实验基本知识第一章药理学实验须知一、药理学实验课的目的和要求1目的药理学实验课的目的在于经过实验,使先生掌握药理学实验的基本方法,了解取得药理学知识的迷信途径,验证药理学中的重要实际,更结实地掌握药理学的基本概念和基本知识。
药理学实验指导江苏建康职业学院2010年1月目录1、实验一药理学实验的基本知识与技术 (1)2、实验二药物剂量对药物作用的影响 (5)3、实验三药物剂型对药物作用的影响 (6)4、实验四肾功能损害对药物作用影响 (7)5、实验五给药途径对药物作用的影响 (8)6、实验六溶媒对乳糖酸红霉素溶解度的影响 (8)7、实验七药物血浆半衰期的测定 (9)8、实验八传出神经系统药物对血压的影响 (11)9、实验九传出神经药物对肠肌的作用 (12)10、实验十去甲肾上腺素的缩血管作用 (14)11、实验十一有机磷酸酯类中毒及解救 (14)12、实验十二普鲁卡因的传导麻醉作用 (15)13、实验十三苯巴比妥的抗惊厥作用 (16)14、实验十四氯丙嗪的镇静和降温作用 (17)15、实验十五药物的镇痛作用 (18)16、实验十六尼可刹米对抗吗啡中毒的呼吸抑制 (19)17、实验十七药物的抗心律失常作用 (20)18、实验十八普萘洛尔的抗缺氧作用 (20)19、实验十九理化因素及药物对离体蛙心的影响 (21)20、实验二十枸椽酸钠的抗凝血作用 (23)21、实验二十一糖皮质激素对细胞膜的保护作用22、实验二十二链霉素毒性反应及钙剂的对抗作用 (23)23、实验二十三磺胺类药物的溶解性 (24)24、常用仪器简介 (25)25、附录一:几种常用注射麻醉剂的参考剂量 (31)26、附录二:常用生理溶液的成分和配制 (32)27、附录三:常用实验动物的一些生理常数 (33)28附录四:动物与人体的每千克体重剂量折算系数表 (33)实验一药理学实验的基本知识与技术一、实验的目的药理学实验是培养学生了解药理学实验方法,掌握药理学实验操作,提高专业素质的重要手段,是药理学教学的重要组成部分。
通过实验,训练学生动手操作的能力,比较和分析客观事物的能力,独立思考和解决问题的能力。
同时,通过实验培养学生对科学工作的严谨态度、严密的方法和实事求是的工作作风,为今后的工作实践打下坚实的基础。
二、实验要求1、实验前认真仔细地阅读《药理学实验指导》,了解实验的目的,理解实验原理,熟悉实验方法和操作步骤;结合实验内容,复习与本次实验有关的理论知识;对于使用的仪器要了解其基本结构和功能、操作方法和使用注意事项。
2、实验时做好小组内部分工,各尽其责,做好原始记录,注意培养自己的动手能力与独立解决问题的能力,正确调试仪器,严格按操作程序进行实验。
3、实验后认真整理实验原始记录,对实验结果进行分析讨论,书写实验报告。
三、实验结果的整理和实验报告的书写1、实验结果的处理实验结束后应及时地对原始记录进行整理和分析,整理时需要科学认真的态度,无论实验是预期的结果或意外,都要实事求是地整理表达。
药理实验结果有测量资料(如血压值、心率值、体温值等)和记数资料(如死亡率、阳性反应率等)两大类。
我们在记录和整理这些资料时均应以正确的单位和数值定量表示。
一般来说,应尽量将获得的资料组成图或表,使结果有重点地表达出来,以便分析、比较。
做表格时,一般将观察项目列在表内左侧,由上而下逐项填写,实验中的变化过程则由左向右按顺序填写。
绘图时,应在纵轴和横轴上列出数值刻度,标明单位,并在图下方注明实验条件。
如果不是连续性变化,也可用直方图表示。
总之,图表的制作原则应体现直观性。
有关图表的详细制作要求可参考有关文献。
2、实验报告的书写书写实验报告是对实验的总结,是培养学生文字表达能力和综合分析能力的重要训练方式。
完整的实验报告应包括以下内容:(1)实验题目一般将实验题目放在实验报告纸的第一行正中并在右边注明实验时间、条件等。
(2)实验目的实验目的相当于论文的引言,主要说明本实验要解决的问题及其意义。
尽可能简洁、清楚。
(3)实验材料包括实验仪器、试剂与药品、实验动物等内容。
(4)实验方法是对实验动物的分组、实验条件、给药方法、操作步骤及观察指标等简要地表述。
(5)实验结果实验结果的记录应是经过整理的数据或图表,与实验结果有关的重要情况也应加以说明。
(6)讨论讨论是根据已知的理论知识针对实验中观察到的现象与结果进行解释和分析,逐步推出结论。
讨论应避免离开实验结果去空谈理论。
如果属于非预期的实验结果,则应分析可能的原因。
(7)结论结论是对实验结果进行分析后所得到的概括性判断。
结论应与实验目的相呼应,文字要精炼。
本次实验中未能得到充分证据的理论分析,不应写入结论。
四、实验动物1、实验动物的选择在药理学实验中,药物的作用大多数是通过动物用药后的反应而表现出来的。
一般根据实验的需要选用动物,最常用的有小白鼠、大白鼠、家兔、豚鼠、青蛙、狗、猫等。
选用动物的原则是:(1)该种动物的某一系统或器官能反映实验药物的选择作用,达到实验目的。
例如青蛙和蟾蜍的心脏,在离体情况下仍能有节奏的搏动,所以常用来研究药物对心脏的作用;豚鼠因对组织胺敏感,易于致敏,所以在对平喘药和抗组织胺药的研究中常用。
(2)动物来源充分,符合精简节约的原则。
例如小白鼠是实验最常用的一种动物,因其便于大量繁殖,所以适合于需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定等的研究。
(3)操作方便,有利于实验进行。
例如家兔在实验中应用也很多,易得到且易驯服,便于静脉注射和灌胃,常用于观察药物对中枢神经系统、心血管系统的作用,由于家兔体温变化灵敏,也常用于体温实验、热原检查等。
(4)选用的实验动物需身体健康,除特殊实验规定外,均应发育成熟。
2、实验动物的性别鉴定兔将兔呈仰卧位,自尾部向前观察,肛门位于尾基部之前。
肛门前有泄殖孔,成年雄兔的泄殖孔附近可见阴囊。
雌兔肛门前有两个相距很近的孔,分别为尿道和阴道孔。
此外,雌兔腹部有5对乳头。
小鼠和大鼠雄性阴囊明显可见,性器官与肛门距离较远,二者间有毛。
雌性者性器官与肛门距离近,界限不清,腹部有乳头。
蟾蜍用拇指及食指挟皮肤提起时,雄性通常会发出叫声,而雌性不会叫。
另外,前趾蹼上棕黑色小突起(常分布在拇指和食指蹼上)有助于辨认,如有则为雄。
另提起动物时,前肢作环抱状则为雄性,前肢呈伸直状则为雌性。
3、实验动物的编号犬、兔等较大动物可用特制号码牌固定于耳上。
小白鼠、大白鼠及白色家兔等可用黄色苦味酸涂于毛上标号,如给小鼠标记1-10号,可将小鼠背部的肩、腰、臀部按左、中、右分化为九个区,从右到左标记1-9号,第10号不作标记。
4、实验动物的捉拿方法蛙和蟾蜍通常以左手握持动物,以中指和食指夹住左前肢,以拇指压住右前肢,将两下肢拉直固定于无名指和小指之间。
毁脑和脊髓时,左手食指和中指夹持动物的头部。
右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔摆动探针毁脑组织。
毁脑后,退回探针向后刺入椎骨破坏脊髓。
小白鼠捉拿方法有两种:一种是用右手提起尾部,放在鼠笼盖或其它粗糙面上,向后上方轻拉,此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并以小指和手掌尺侧夹住其尾根部固定于手中。
另一种抓法是只用左手,先用食指和拇指抓住尾部,再用手掌尺侧及小指夹住尾根,然后用拇指及食指捏住其颈部皮肤。
前一方法简单易学,后一方法稍难,但便于快速捉拿给药。
大鼠捉拿及固定方法基本同小鼠。
捉拿时,右手抓住鼠尾,将大鼠放在粗糙面上,左手戴上保护手套或用厚布盖上大鼠,握住整个身体并固定其头部以防咬伤。
豚鼠捉拿时以拇指和中指从豚鼠背部绕到腋下,另一只手托住其臀部。
体重小者可用一只手捉拿,体重大者捉拿时宜用双手。
兔用左手抓住颈背部皮肤,轻轻将兔捉起,以右手托住其臀部,使兔呈坐姿势。
5、实验动物的给药途径与方法蛙和蟾蜍蛙及蟾蜍皮下有数个淋巴囊,注入药物易吸收。
一般以腹,胸或股淋巴囊作为给药途径。
注射方法:一手抓住蛙,固定四肢,将其腹部朝上,另一手持注射器,将注射针头先从蛙大腿止端刺入,经大腿肌层再入腹壁皮下刺入腹淋巴囊内,然后注入药液,此种注射方法可防止拔出针头时药液外溢。
注射量0.25~1.0ml/只。
小白鼠(1)灌胃法左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤,无名指或小指将尾部紧压在手掌上,使口部朝上,颈部拉直,右手持装有灌胃管的注射器,操作时小心自口角插入口腔,用灌胃管向后上方压迫小白鼠头部,使口腔与食道成一直线,再将灌胃管沿上腭壁轻轻推进食道,当推进2-3cm时,胃管的前端到达膈肌水平,此时可稍感有抵抗。
一般在此位置推进药液即可。
如此时动物呼吸无异常,可将药液注入,如遇阻力应抽出灌胃管重新插入,推注药液后轻轻拉出灌胃管。
一次灌注量为0.1~0.3ml∕10g.操作切忌粗暴,以防损伤食管及膈肌。
(2)皮下注射法最好两人合作,一人左手抓住小白鼠头部,右手拉住尾巴,另一人持注射器选用5号或6号针头,轻轻拉起背部皮肤,将注射针刺入皮下,稍稍摆动针头,若容易摆动则表明针尖的位置确在皮下,即可注入药液,注射量0.05~0.2ml∕10g。
(3)肌肉注射法小白鼠固定如上述。
将注射的针头刺入小白鼠臀部外侧肌肉,注入药液。
注射量一般为0.2ml∕次∕只。
(4)腹腔注射法左手固定动物,使小白鼠呈头低位,腹部朝上。
右手持注射器,在左侧或右侧下腹部向头部方向刺入皮下,沿皮下向前推进3-5mm,然后使针头与皮肤呈45°角穿过腹肌刺入腹腔,针尖进入腹腔时可有抵抗消失感。
此时可轻轻推进药液。
一次注射量0.1-0.2ml∕10g。
兔(1)灌胃法如用兔固定箱,可一人操作,右手将开口器固定于兔口中,左手插入导尿管。
如无固定箱,需两人合作进行,一人坐好,将兔的躯干夹于两腿之间,左手抓双耳,固定其头部,右手握住其两前肢。
术者将开口器从口角插入横放于兔口中,将兔舌压在开口器下面。
此时助手用双手固定开口器。
术者将导尿管经开口器中央小孔慢慢沿上腭壁插入食管约15-18cm。
为避免误入气管,可将导尿管的外口端放入水中,如有气泡从导尿管中逸出,说明已插入气管,应拔出重新插入。
若无气泡逸出,则用注射器将药液灌入,并以少量清水冲洗导尿管。
灌胃完毕后,先拔出导尿管,再拿出开口器。
(2)静脉注射法兔静脉注射一般采用耳缘静脉。
注射时一人固定兔身,也可用固定器将兔固定。
注射者用手拔去注射部位的兔毛,用酒精棉球涂擦耳缘静脉部皮肤,以左手食指放在耳下将兔耳垫起,并以拇指按压耳缘部分,右手持带有6-7号针头的注射器,尽量从血管远端刺入血管(不一定有回血)。
并用左手拇指固定针头,右手徐徐注入药液。
若推药有阻力或发现局部发白隆起,表示针头在血管外,这时应将针头稍退后,再重新穿刺血管,注射完毕后,用棉球压住针眼,拔去针头。
6、实验动物的处死方法实验结束后,常需将动物处死,常用的方法如下:(1)颈椎脱臼法此法适用于小白鼠。
用镊子或左手拇指及食指压住小白鼠的后头部,右手捏住尾巴,用力向上牵拉,使之颈椎脱臼死亡。
(2)空气栓塞法用注射器将空气急速注入静脉,可使动物死亡。