生化试验课件实验六：胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响

一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。

2. 研究胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。

3. 了解血糖浓度与人体健康的关系。

二、实验原理血糖是人体内重要的能量来源，维持在一定范围内对身体健康至关重要。

胰岛素和肾上腺素是两种重要的激素，它们对血糖浓度具有调节作用。

胰岛素可以降低血糖，而肾上腺素则可以升高血糖。

本实验通过观察胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，进一步了解血糖调节的机制。

三、实验材料与试剂1. 实验动物：家兔两只（体重2-3公斤）。

2. 实验试剂：胰岛素（5单位/ml）、肾上腺素（0.5mg/ml）、碘酒、消毒酒精、棉球、血糖测定仪、标准葡萄糖溶液等。

3. 实验器材：注射器、剪刀、烧杯、试管、试管架、温度计等。

四、实验步骤1. 准备实验动物：选取健康家兔两只，分别称重并记录体重。

2. 实验分组：将两只家兔随机分为甲、乙两组，甲组为实验组，乙组为对照组。

3. 实验操作：a. 将甲组家兔禁食14-16小时，乙组家兔正常饮食。

b. 分别从甲、乙两组家兔的耳缘静脉抽取10ml血液，分别测定血糖浓度。

c. 将甲组家兔注射胰岛素（5单位/kg体重），乙组家兔注射等量生理盐水。

d. 注射后30分钟，再次从甲、乙两组家兔的耳缘静脉抽取10ml血液，分别测定血糖浓度。

e. 比较甲、乙两组家兔注射前后血糖浓度的变化。

五、实验结果1. 甲组家兔注射胰岛素前血糖浓度为X1，注射后血糖浓度为Y1。

2. 乙组家兔注射生理盐水前血糖浓度为X2，注射后血糖浓度为Y2。

实验结果显示，甲组家兔注射胰岛素后血糖浓度明显降低，乙组家兔注射生理盐水后血糖浓度无明显变化。

六、实验分析1. 胰岛素具有降低血糖的作用。

注射胰岛素后，家兔体内胰岛素水平升高，促进葡萄糖进入组织细胞，从而降低血糖浓度。

2. 肾上腺素具有升高血糖的作用。

注射肾上腺素后，家兔体内肾上腺素水平升高，促进糖原分解，使血糖浓度升高。

七、实验结论1. 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度具有明显的调节作用。

胰岛素和肾上腺素对血糖的调节（葡萄糖氧化酶法）实验目的：1.了解血糖浓度测定的原理和方法。

2.了解并验证胰岛素和肾上腺素对血糖的调节。

3.在实验中培养严谨的作风和准确进行实际操作的能力，提高分析问题的能力。

实验原理：胰岛素和肾上腺素是体内对血糖调节的激素，胰岛素是唯一降低血糖的激素。

通过对实验动物分别注射不同的激素，了解激素对血糖的调节影响。

测定血糖的原理：在PH7.0条件下,葡萄糖氧化酶可催化葡萄糖生成葡萄糖酸和H2O2，后者在H2O2酶的作用下与苯酚、4-氨基安替吡啉生成红色醌类物质，在505nm处有最大吸收峰,吸光度与葡萄糖含量成正比。

实验器材：[器材]：10mm×100mm试管、试管架、恒温水浴、沸水浴、冰浴、蜡笔、721-分光光度计、兔台、注射器、手术刀片。

[试剂]1.酶酚混合试剂主要成分：①葡萄糖氧化酶②H2O2酶③苯酚④4-氨基安替吡啉2.葡萄糖标准储存液（100mmol/L）3.葡萄糖标准应用液（5mmol/L）取葡萄糖标准储备液5ml，置于100ml容量瓶中，加苯甲酸溶液至刻度。

4.胰岛素注射液5.肾上腺素注射液实验内容与方法：一、注射药物并取血：1.分别取2只兔子，称量体重，从耳缘静脉采血2ML 。

2.2只兔子按体重分别注射肾上腺素和胰岛素，从注射药物时开始计时，每隔30分钟取血一次，一共取血4次，每次2ML 。

二、血糖的测定1．取16×150mm 试管3支按下表进行操作：试剂（ml ） 测定管 标准管 空白管血清或血浆 0.1 — —葡萄糖标准应用液 — 0.1 —蒸馏水 — — 0.1酶酚混合试剂 3.0 3.0 3.02．将上述各管混匀放入37℃水浴中加热15分钟，用波长505nm 分光光度计进行比色，空白管调零点读取测定管与标准管吸光度。

3．计算血糖（mmol/L ）= ×标准管浓度测定管吸光标准管吸光4．计算注射药物前后血糖变化情况。

实验注意事项：血清加量要准，否则会影响到结果的准确性。

实验⼗⼆胰岛素、肾上腺素对⾎糖浓度的影响实验⼗⼆胰岛素、肾上腺素对⾎糖浓度的影响⾎糖是指⾎液中糖，由于正常⼈⾎液中糖主要是葡萄糖，所以⼀般认为，⾎糖是指⾎液中的葡萄糖。

正常⼈空腹⾎糖浓度为4.4～6.7mmol/L（80～120mg/100ml）。

⾎糖是糖在体内的运输形式。

全⾝各组织都从⾎液中摄取葡萄糖以氧化供能，特别是脑、肾、红细胞、视⽹膜等组织合成糖原能⼒极低，⼏乎没有糖原贮存，必须不断由⾎液供应葡萄糖。

当⾎糖下降到⼀定程度时，就会严重妨碍脑等组织的能量代射，从⽽影响它们的功能。

所以维持⾎糖浓度的相对恒定有着重要的临床意义。

⾎糖浓度的调节⾎糖浓度能维持相对恒定是由于机体内存在⼀整套⾼效率的调节机制，精细地控制着⾎糖的来源与去路，使之达到动态平衡。

神经系统的调节作⽤神经系统对⾎糖浓度的调节作⽤主要通过下丘脑和⾃主神经系统对所控制激素的分泌，后者再通过影响⾎糖来源与去路关键酶的活性来实现。

神经系统的调节最终通过细胞⽔平的调节来达到⽬的。

下丘脑⼀⽅⾯通过内脏神经作⽤于肾上腺髓质，刺激肾上腺素的分泌；另⼀⽅⾯也作⽤于胰岛α-细胞，使其分泌胰⾼⾎糖素；同时还可以直接作⽤于肝。

三⽅⾯共同作⽤的结果是使肝细胞的磷酸化酶活化，使糖原分解加速；糖异⽣关键酶的活性增加，糖异⽣作⽤增加，从⽽使⾎糖浓度升⾼。

下丘脑还可通过兴奋迷⾛神经，使胰腺β-细胞分泌胰岛素，同时还可直接作⽤于肝，使肝细胞内糖原合成酶活化，促进肝糖原的合成；此外还抑制糖异⽣途径，促进糖的氧化和转化，总体上使⾎糖的去路增加，来源减少，最终达到使⾎糖浓度降低的⽬的。

激素使⾎糖浓度降低的激素 :胰岛素使⾎糖浓度升⾼的激素:胰⾼⾎糖素、肾上腺素、肾上腺⽪质激素、⽣长素、甲状腺素它们对⾎糖的调节主要是通过对糖代谢各主要途径的影响来实现的。

在激素发挥调节⾎糖浓度的作⽤中，最重要的是胰岛素和胰⾼⾎糖素。

肾上腺素在应激时发挥作⽤，⽽肾上腺⽪质激素、⽣长激素、甲状腺素等都可影响⾎糖⽔平，但在⽣理性调节中仅居次要地位。

激素对血糖浓度的影响实验四激素对血糖浓度的影响[目的]学习对家兔进行采血和注射方法，了解血糖浓度测定方法，验证激素对血糖浓度的调节作用。

[原理]激素是调节血糖浓度恒定的重要因素，其中胰岛素起降低血糖的作用，肾上腺素起升高血糖的作用。

将实验动物——家兔进行空腹采血后，分别注射胰岛素和肾上腺素，作用一段时间后再分别采血，同时观察注射激素前后的家兔血糖浓度变化，以验证激素的调节作用。

本实验测定血糖的方法采用：葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶（god）将葡萄糖水解为葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶（pod）和色素原性氧受体存有下，将过氧化氢水解为水和氧，同时并使色素原性氧受体5-氨基安替比林和酚回去氢酯化为红色醌类化合物，即trinder反应。

其色泽厚薄在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。

其反应式如下：[试剂]1．胰岛素注射液(41单位／ml)。

2．肾上腺素注射液(1：1001)。

3．251g／l葡萄糖溶液。

4．二甲苯及凡士林。

5．肝素抗凝剂(硝酸锶2500单位／m2)。

6．葡萄糖氧化酶试剂。

7．葡萄糖标准应用液(6.6mmol／l)。

吸管，滴管，沸水浴。

[器材]1ml及10ml注射器，台式磅秤，兔紧固箱，刀片，酒精棉球及干棉球，试管及试管架，0.5ml及6ml[操作]1．动物准备及空腹采血取试管4支，编号(1)、(9)、(3)、(4)，分别加入肝素抗凝剂0.0lml。

取空腹家兔两只，分别编号1和2，过磅称重，记录体重。

可用耳静脉采血法：先剪去耳静脉处毛，再用二甲苯擦拭兔耳部静脉，使其充血，在其周围抹上凡士林以防止溶血，用刀片纵行割破边缘耳静脉，放血入抗凝管（1）和（2），约需2ml，边滴边摇，以防凝固。

或者用兔心脏采血法：将10ml注射器用肝素抗凝剂淋洗后，置家兔于兔固定箱中，固定四肢，在心尖搏动处插入，采血4ml左右，抗凝。

2．口服激素并再献血。

将l号兔皮下注射已酿制不好的胰岛素稀释液(按1.5单位／kg排序吸收至lml。

胰岛素对血糖浓度的影响实验报告实验五胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响实验六胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响实验五葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖课程名称：生物化学与分子生物学实验课年级：2004专业、层次：临床医学本科授课教师：汪宗桂职称：助教学时：3学时基本教材：自编《生物化学与分子生物学实验指导》教学目的与要求：1、观察胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响。

2、掌握血糖浓度的测定方法。

3、掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理和方法。

4、掌握血糖浓度的正常参考值，了解血糖测定的临床意义。

大体内容与时间安排：1、胰岛素和肾上腺素对血糖浓度影响的原理5min2、胰岛素和肾上腺素对血糖浓度影响的注意事项5min3、葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理5min4、葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的操作改动及注意事项5min5、学生做实验100min教学方法：讲授式+启发式教学重点、难点：重点：1、葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理2、葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的注意事项难点：葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的注意事项一、实验原理（一）胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响激素是调节机体血糖浓度的重要因素。

胰岛素能降低血糖，肾上腺素等激素能升高血糖。

本实验给两只家兔分别注射胰岛素或肾上腺素，取注射前、后兔的静脉血，测定血糖含量，观察注射前后血糖浓度变化，从而了解胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。

（二）葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖本实验是葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化物酶(POD) 相偶联发生的偶联反应。

第一步：葡萄糖氧化酶利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。

第二步：过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物(苯醌亚胺非那腙)。

二、操作步骤（一）胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响1、动物准备：取正常家兔两只，实验前预先饥饿16小时，称体重(—般为2-3kg)。

激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定刘峡汛11. 武汉科技大学医学院临床1105班湖北武汉430065[摘要]目的：观察家兔注射肾上腺素或胰岛素前后血糖水平的变化方法：采用邻甲苯胺法测血糖浓度。

结果：注射胰岛素的家兔空腹血糖含量为182mg/dL，药后血糖含量为129mg/dL；注射肾上腺素的家兔空腹血糖含量为81mg/dL，药后血糖含量为119mg/dL。

结论：胰岛素会使血糖浓度降低，肾上腺素会使血糖浓度升高。

[关键词]血糖浓度胰岛素肾上腺素引言：正常情况下，血糖浓度在各种因素调解下，维持相对恒定，但现如今糖尿病可谓是医学界的一大顽症，目前并无良药可医，对于此种病当以预防为主。

因此身为医学生，掌握激素对血糖浓度的影响及如何测量血糖浓度显得有为重要。

原理：1.血糖浓度即指血液中的葡萄糖浓度。

血糖水平相当恒定，维持在80—120mg/dL之间。

空腹血糖水平的相对恒定是在神经激素调节下血糖的来路和去路达到动态平衡的结果，其中激素调节站主导地位。

调节血糖的激素有：胰岛素，肾上腺素，胰高血糖素，肾上腺皮质激素，生长素和甲状腺激素。

胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。

2.葡萄糖在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺缩合，生成蓝绿色的西夫氏碱，其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。

1.材料与方法1.1材料仪器：722型分光光度计试剂：1.正常家兔(实验前预先使其饥饿14—16小时)两只。

称体重，一只为2.55kg，另一只为1.8kg。

2.肾上腺素（1mg/1ml）3.胰岛素（5单位/ml）4.碘酒,消毒酒精5.饱和硼酸溶液：取硼酸6g,溶于100ml蒸馏水中，摇匀，放置过夜后过滤，即可应用。

6.邻甲苯胺试剂：取冰醋酸（AR）940ml,加入硫脲（AR）1.5g，溶解后加入邻甲苯胺60 ml混匀，置棕色瓶中，室温保存。

新配试剂应放置24小时后（待老化）使用。

此试剂腐蚀性极强，应避免与皮肤接触而造成灼伤。