RNA编辑
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基因组学中的RNA编辑近几年,随着科技的不断进步,基因组学已经成为研究热点之一。
在众多基因组学研究的领域中,RNA编辑技术无疑是备受关注的。
RNA编辑是一种重要的后转录修饰,它可以在转录后改变RNA序列中的碱基,形成新的RNA分子,从而产生新的蛋白质。
本文将详细探讨RNA编辑的定义、机制、方法、应用以及未来发展方向。
一、RNA编辑的定义在生物学中,RNA编辑是指一种基因表达的后转录修饰,通过改变RNA序列中的碱基类型来形成新的RNA分子。
RNA编辑的结果是RNA分子与基因组DNA不完全匹配,并且在转录后产生一系列新的蛋白质变体。
与DNA修饰不同的是,RNA编辑是在成熟的RNA分子上进行的,包括mRNA、tRNA和rRNA。
RNA编辑机制很复杂,涉及到多种蛋白质和辅酶的参与。
二、RNA编辑的机制RNA编辑的机制可以简单分为两类:腺嘌呤到肌苷(A-to-I)编辑和胸腺嘧啶到尿嘧啶(T-to-U)编辑。
其中,A-to-I编辑是最为常见的RNA编辑类型。
在A-to-I编辑过程中,腺嘌呤(A)被酰胺转移酶(ADAR)催化成为肌苷(I)。
ADAR家族是RNA编辑过程中最为重要的催化因子之一,它可以通过催化反应将A合成成I。
在生物体内,ADAR基因的表达量与腺嘌呤到肌苷编辑的发生密切相关。
在胸腺嘧啶到尿嘧啶编辑中,胸腺嘧啶(T)被脱甲基酶TDG催化成为尿嘧啶(U)。
由于T-to-U编辑是一种较为少见的编辑类型,其研究较为困难。
三、RNA编辑的方法RNA编辑技术是一种基因工程技术,需要一系列高难度的实验操作。
下面简单介绍一下RNA编辑的实验方法。
1.基于ADAR蛋白的克隆与其它蛋白质一样,ADAR蛋白的全长编码序列可以通过基因克隆的方式进行获得。
科学家可以将ADAR编码序列插入到外源性表达载体中,并使用转染的方式将表达载体导入到人类细胞系中,实现肌苷(I)的合成。
2.CRISPR/Cas9基因编辑技术CRISPR/Cas9基因编辑技术是当前最为常用的基因编辑技术之一。
rna的编辑名词解释RNA(Ribonucleic Acid,核糖核酸)是一种存在于所有生物体内的分子,它承担着转录和翻译等重要生物过程中转运遗传信息的功能。
与DNA (Deoxyribonucleic Acid,脱氧核糖核酸)相比,RNA具有一些独特的特征和功能。
在细胞内,RNA在遗传和调控过程中扮演着重要的角色。
但是,细胞内的RNA分子并非一成不变的,它们可以被编辑和修饰,从而产生潜在的功能多样性。
1. RNA编辑的定义和机制RNA编辑是指在转录过程中,RNA的序列可以被修饰或改变的过程。
这种编辑主要通过一种称为腺苷脱氨酶(ADAR)的酶来催化。
ADAR酶会识别特定的RNA序列,将其中的腺苷(A)碱基转变为肌苷(I)碱基。
这个过程被称为A到I编辑,是RNA编辑中最常见的形式。
2. A到I编辑的意义及过程A到I编辑对RNA分子的结构和功能产生了巨大的影响。
编辑后的RNA分子可能会发生结构上的变化,对其参与的生物过程产生重要的调控作用。
此外,编辑还可以改变RNA的翻译效率、RNA的稳定性以及RNA与其他分子的相互作用。
编辑也被认为是一种进化上的适应机制,能够提供遗传多样性,增强生物体适应环境的能力。
实际上,A到I编辑是一个复杂的过程,涉及到多个步骤。
首先,ADAR酶会将腺苷转变为脱氨腺苷(Inosine,I),其后,脱氨腺苷被RNA合成酶错误地识别为鸟苷(G),最终生成编辑后的RNA分子。
这个过程非常精细和精确,需要一系列的酶和辅因子的协同作用。
3. RNA编辑的生物学意义RNA编辑的生物学意义在逐渐被科学界认识和解析。
编辑后的RNA序列可能使得蛋白质的编码发生改变,从而增加了蛋白质的多样性和特异性。
此外,编辑还可以调节基因表达水平,通过改变RNA分子的稳定性或影响翻译效率来调控相关基因的表达。
这种调节机制对于生物体的发育、适应环境、发育和免疫等方面具有重要的功能。
不仅如此,最新的研究还表明,RNA编辑可能参与调节神经递质受体的功能。
分子生物学中的RNA编辑技术RNA编辑技术在分子生物学领域中被广泛应用,以研究基因调控机制,发现RNA编辑与疾病的关联及新药开发等方面发挥着重要作用。
在本文中,我们将探讨RNA编辑技术的定义、发现历程与分类、功能以及应用,以期更好地理解RNA编辑技术在分子生物学中的作用。
一、RNA编辑技术的定义RNA编辑是指在RNA分子中,通过转换碱基或插入/删除核苷酸,改变其序列和表达的一种分子修饰方式。
与DNA序列的不可逆性不同,RNA序列的可逆变异性使得RNA编辑成为研究RNA表达和功能最为重要、最为灵活的一种方式之一。
二、RNA编辑技术的发现历程与分类RNA编辑的发现始于20世纪50年代,当时研究人员首次发现一些RNA分子的长度和结构会发生变化。
但直到20世纪80年代,随着技术的提高,人们才开始意识到DNA和RNA之间存在差异,而RNA编辑作为其中的一种重要机制,受到了广泛的关注和研究。
根据RNA编辑的发生位置,可将其分为线粒体RNA编辑和细胞核RNA编辑两类。
线粒体RNA编辑是指通过改变线粒体RNA的碱基组成,调节线粒体功能和代谢过程的一种机制。
细胞核RNA编辑通常发生在多种细胞类型中的mRNA级别,通过转换碱基或插入/删除核苷酸,改变RNA基因的信息表达,影响蛋白质翻译和生物功能。
三、RNA编辑技术的功能RNA编辑技术在分子生物学中具有多种功能。
首先,RNA编辑可以调节基因表达和维持基因组的稳态。
RNA编辑通过改变RNA序列,可以影响RNA结构和功能,从而影响RNA的稳定性、降解、翻译效率等,并参与到基因的调控过程中。
其次,RNA编辑与疾病的关联越来越引起人们的关注,因为RNA编辑异常会导致多种疾病发生。
例如,ADAR1基因突变可引发脊髓运动神经元疾病、淋巴细胞性白血病等多种疾病。
此外,RNA编辑还可以作为一种新型疗法来治疗某些遗传性疾病。
例如,通过将RNA干扰引导到RNA上进行编辑,可以帮助病人恢复其正常基因功能,进一步治疗遗传疾病。
RNA编辑的调控机制及应用RNA编辑是指利用ADAR(Adenosine Deaminases Acting on RNA)家族成员将靶RNA分子中的腺嘌呤进行化学修饰(在转录后阶段之后),其具体机制依赖于RNA编辑因子的特异性识别和作用。
在这一过程中,ADAR蛋白会辅助腺嘌呤转变为肌苷,从而修改RNA中的某个异核苷酸,从而改变RNA的功能和表达调控模式。
RNA编辑可发生于多类型RNA,如编码和非编码RNA,甚至包括类似SINE和LINE等转座子的重复元件,因此具有广泛的调控功效和潜在应用场景。
RNA编辑凭借其系统性、复杂性和高效性在生物学、神经学、肿瘤学等多个领域内有着广泛的应用。
例如在基因表达调控研究上,RNA编辑能向人们展示在RNA水平上调控基因表达的机制,以及在疾病机制和治疗方法上都具有重要意义。
此外,RNA编辑也是神经学和肿瘤学中重要的研究领域,通过RNA编辑的调控,可以变更信号通路、修饰异构体如合成极性、结构域组合、氧合作用等等,从而影响细胞行为、生物酶和蛋白质结构/功能。
换而言之,RNA编辑成为了探索生命基本规律和治疗疾病的重要手段,受到越来越多人的重视和研究。
在RNA编辑研究中,ADAR家族成员是RNA编辑的主要调控者,其成员包括ADAR1、ADAR2和ADAR3等等,均有着不同的结构和功能特征。
不同ADAR家族成员对RNA编辑的调控也各不相同。
其中,ADAR1是基因表达调控中最为重要的编辑酶,具有多种剪接转录因子及更广泛的活性,其发挥作用非常重要,可以通过3’UTR剪接促进RNA降解和RNA稳定性,同时也能通过ADR6介导特定的A-RNA二级结构并发挥调控作用。
而ADAR2主要在某些生理和疾病过程中起着调节作用,如脑、胎儿和心肌,可使RNA在特定轨迹下更大地包容了基于腺嘌呤(A)的编辑活性。
根据不同的亚型和剪接变异,ADAR3也在特定细胞或组织内表达。
RNA编辑作为一项新型技术,在生命科学领域的多样性应用和发展也如火如荼。
RNA编辑的特点及意义随着科学技术的不断发展,RNA编辑这一概念也在逐渐被人们所了解。
RNA编辑是指RNA分子上的某些核苷酸被替换成其他的核苷酸或删除,从而改变RNA分子的化学结构和功能。
与DNA不同,RNA分子一旦合成,其序列可以被编辑或修改。
在本文中,我们将着重探讨RNA编辑的特点及其意义。
第一、RNA编辑的特点1、具有高度的可塑性和可逆性RNA编辑的一个显著特点是具有高度的可塑性和可逆性。
RNA编辑产生的新RNA序列可以被再次编辑或复原成原始的序列,这种可逆性使得RNA具有更广泛的调节功能。
2、普遍存在于生命体系中RNA编辑不仅存在于人类和动物中,还普遍存在于植物、真菌和微生物中。
例如,植物中的RNA编辑在种子发育、光合作用和抗逆应答等方面发挥了重要作用。
3、丰富多样的编辑方式RNA编辑有多种不同的方式。
最常见的方式是转换腺嘌呤(A)成肌苷(I)、肌苷(I)成转换腺嘌呤(A)、胞苷(C)成尿嘧啶(U)和尿嘧啶(U)成胞苷(C)。
此外,还有其他的编辑方式,如C到A、G到A、U到C等转化。
第二、RNA编辑的意义1、影响基因表达和蛋白质功能RNA编辑在调节基因表达和蛋白质功能中发挥着重要作用。
RNA编辑可以改变RNA分子的3D结构和功能,进而影响到蛋白质合成。
例如,在神经系统中,RNA编辑可以改变电压门控离子通道的电导性、沟通信号的能力以及突触后膜的稳定性。
2、调节基因表达的多样性和复杂性RNA编辑调节基因表达的多样性和复杂性也是非常重要的。
通过改变RNA的剪接、稳定性、转运及翻译,RNA编辑可以调节基因表达的多种方式,实现基因功能的精细调控。
例如,在脊椎动物中,RNA编辑通过调节启动子和DNA甲基化,可以影响胚胎发育、成人细胞分化等生物学过程。
3、为疾病治疗提供新思路RNA编辑对疾病治疗提供了新思路。
RNA编辑技术可以修正病毒自身RNA或RNA病毒基因组中的突变,从而降低或消除其致病性。
此外,通过直接编辑RNA,可以更精确地调节基因表达和蛋白质功能,以期达到治疗疾病的目的。
RNA编辑的作用及其在疾病中的意义RNA编辑是一种基因表达调控机制,类似于DNA基因编码的过程,但是RNA编辑在RNA转录过程中发挥作用。
RNA编辑是指在RNA序列中加入、删除或替换核苷酸的现象,通过RNA编辑可以改变蛋白质翻译的结果,进而影响生命体内的生物学过程。
RNA编辑可以发生在所有真核生物中,包括人类。
RNA编辑在人类疾病中发挥了重要的作用。
在神经系统疾病中,RNA编辑被认为是一种重要的调节机制。
通过改变RNA序列,RNA编辑可以影响神经细胞的活动,并进一步影响神经系统的发育和功能。
例如,大量的RNA编辑事件已被发现与神经退行性疾病的发生有关。
神经退行性疾病是由于神经元损伤、退化或死亡而导致的一类疾病,如阿尔茨海默症、帕金森病等。
另外,RNA编辑在癌症中也扮演着一个重要的角色。
研究表明,一些癌症患者可以表现出RNA编辑的异常模式。
RNA编辑事件的异常可能导致癌细胞增殖和转移的进程加速,导致癌症的恶化。
RNA编辑也可以用作治疗某些疾病。
例如,通过外源性RNA编辑的方法,可以有针对性地改变RNA序列,修复某些基因缺陷。
更广泛地说,RNA编辑也可以用于设计新的疗法,以治疗某些与RNA相关的疾病。
这为人类疾病的治疗提供了一个新的思路和方向。
为了更深入地了解RNA编辑在生物体内的作用,以及在疾病中的意义,需要将RNA编辑与其他生物学过程结合起来研究,例如转录、翻译、蛋白质折叠等过程。
此外,还需要发展更有效的工具和技术,以研究RNA序列和RNA编辑的动态变化。
同时,也需要更多的生物信息学和计算生物学手段,以协助RNA编辑信息的存储、分析和可视化。
总体来说,RNA编辑是人类疾病中的一个重要调节因素,在深入研究其作用机制的同时,也为未来疾病治疗提供了新的思路,具有重要的研究价值和临床应用前景。
RNA编辑及其在生物体发生发展中的作用随着生命科学的快速发展,越来越多的神经科学家、遗传学家和生理学家对RNA编辑的作用感到着迷。
RNA编辑是一种包括修改、插入和删除RNA分子中的碱基的过程。
这个过程已经成为解释基因表达和突变的新机制。
那么这种机制到底是什么,它在生物体发生发展中的作用又是什么呢?本文将向您详细解释。
什么是RNA编辑?RNA编辑是一种在过程中修改RNA序列的遗传机制,修改RNA序列中的一个碱基,这可以导致在编码的蛋白质序列中出现不同的氨基酸。
需要注意的是,这与DNA序列突变的区别在于,RNA编辑是在转录过程中发生的——这意味着这种修饰可以在特定细胞环境中进行。
因此,RNA编辑机制对于基因表达和神经元发育(尤其是在大脑中)至关重要。
RNA编辑的过程是如何进行的?RNA编辑涉及一些非常基本的转录和翻译过程。
首先,DNA中的基因编码RNA。
然后,这些RNA分子需要经过剪接才能编码蛋白质。
在剪接过程中,翻译前RNA分子(即前体mRNA)通过剪接形成,包括剪接内含子,剩余的exon依次排列并连接在一起。
最后通过一系列步骤将这份RNA转化成可翻译的蛋白质。
举例来说,我们可以研究人类基因“APOB”,这个基因产生两种非常不同的蛋白质,即APOB100和APOB48。
在APOB100的case中,所有exon都会剪接到一起形成非常长的前体mRNA。
例如,APOB的第二个exon都有一个修饰的碱基。
如果这个exo在RNA编辑过程中被剪掉,这将导致在产生的蛋白质中缺失数千个氨基酸。
这就可以说明,RNA编辑在翻译中所起的关键性作用。
RNA编辑的在生物体发生发展中的作用在生物体的发生发展过程中,尤其是在大脑中,RNA编辑有着至关重要的作用。
在大脑中,突触的性质会随着时间和刺激的变化而发生改变。
这被称为“可塑性”。
RNA编辑可以帮助细胞响应这种可塑性,从而大脑可以适应身体发生的各种改变。
最近一项研究指出,在小鼠中,通过RNA编辑可以将芯片板(皮层特有的神经元极长突触)独立地“装配”成各种形状的神经元极突,并且每一个芯片板都拥有自己独特的RNA编辑响应。
RNA编辑技术的原理与应用随着基因编辑技术的不断发展,RNA编辑技术作为一种新兴的基因编辑技术也逐渐受到人们的关注。
那么,RNA编辑技术到底是什么?它的原理和应用又是什么呢?一、 RNA编辑技术的基本原理RNA编辑技术是指通过特定的酶类将RNA分子中的某个碱基替换成另一种碱基,从而改变RNA分子的序列。
具体来说,RNA 编辑技术主要采用腺嘌呤去氨基酶(ADAR)家族的酶来实现RNA的编辑。
它们可以识别RNA中的双链结构,并将一个腺嘌呤(A)碱基转换成一个肾上腺嘧啶(I)碱基,或将肾上腺嘧啶(I)转换为腺嘌呤(A)。
二、 RNA编辑技术的应用1. 研究基因功能RNA编辑技术在科学研究中的应用非常广泛。
它可以用于研究基因功能,尤其是那些含有致命突变或难以获得生物材料的基因。
以往,基因的功能研究主要依赖于基因敲除或突变动物的建立。
但是这种方法对一些重要的基因来说是不实用的,因为这些基因的敲除或突变会直接导致胚胎发育异常或致死。
而RNA编辑技术则可以很好地解决这个问题,它可以精准地编辑目标基因的指定区域,从而揭示出基因的功能。
2. 治疗疾病RNA编辑技术还可以用于治疗一些遗传性疾病。
比如,目前有一些与基因变异有关的遗传性疾病,如遗传性失语症、家族性白化病等,都是由于某个基因的编码序列出现了突变而引起的。
而RNA编辑技术可以通过特定的酶类来敲除或修复目标区域的DNA 序列,从而达到治疗疾病的目的。
3. 创造生物多样性除了在基因功能研究和治疗疾病方面的应用外,RNA编辑技术还可以用于创造生物多样性。
比如,在农业生产中,一些特定基因的编辑可以使作物更适应制定的环境,从而提高产量并减少农药使用。
此外,RNA编辑技术还可以用于改变动物的某些特征,比如颜色、体形等。
三、 RNA编辑技术的优点和局限性RNA编辑技术相对于其他基因编辑技术具有许多优点。
首先,它可以本地化地修改RNA序列,而无需对基因进行敲除或突变。
其次,它不涉及到DNA序列的修改,因此不会影响整个生物体系的遗传信息。
RNA的编辑与修饰RNA是一个关键的分子。
它帮助我们合成不同的蛋白质,这些蛋白质是生命的基础。
在RNA的生命周期中,它会被编辑和修饰。
这些编辑和修饰对细胞的生存和发展具有重要意义。
本文将探讨RNA的编辑和修饰的概念、影响以及方法。
一、RNA编辑的概念RNA编辑指的是RNA分子序列的改变。
这种改变有两种形式:腺苷脱氨酶介导的腺苷到肉毒素的转换,以及核碱基插入或删除。
腺苷到肉毒毒素的转换主要发生在线粒体和细胞质的tRNA、rRNA和mRNA中。
在这种改变中,特定的酶将腺苷(A)转化为肉毒素(I)。
这种修改可能会导致蛋白质序列的改变或蛋白质的功能变化。
核碱基插入和删除是指从RNA分子中添加或删除碱基。
这些改变可能会导致蛋白质的位置、数量或功能发生变化。
二、RNA编辑的影响RNA编辑的影响取决于修改的类型和位置。
腺苷到肉毒毒素的转换可能改变蛋白质序列和结构,从而影响其功能。
核碱基插入或删除的影响也可能是它改变了一个特定的基因的密码子,使它编码不同的氨基酸。
这种改变可能会导致蛋白质的性质和功能的变化。
RNA编辑还可能影响基因的表达、RNA稳定性以及RNA的翻译。
编辑RNA分子可能会导致其在细胞中的分解速度变得更快或更慢。
这可能会影响该RNA分子的表现模式和细胞答复基因表达的能力。
三、RNA编辑的修饰RNA修饰是指改变RNA分子结构或生命周期的过程,如:添加或删除特定的化学基团、切割RNA分子或将RNA分子与蛋白质结合。
添加化学基团是外源性修饰RNA分子的常见方法。
磷酸化、门冬酰氨酸化和甲基化等化学修饰可以影响RNA的性质和功能。
这种修饰可能会调节RNA分子的表观基因表达、转运和稳定性。
RNA多肽修饰可以改变RNA的结构和生命周期。
与RNA配体的结合可能会影响RNA的生长和降解速度。
四、RNA编辑和修饰的方法RNA编辑和修饰有多种方法,包括外源和内源的修饰方法。
在外源修饰方法中,化学试剂和核酸酶被用来随意添加或删除化学基团或核酸结构。
《RNA编辑:RNA蛋白质编码顺序的变动》
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《RNA编辑:RNA蛋白质编码顺序的变动》《RNA编辑:RNA蛋白质编码顺序的变动》(RNAediting:thealterationofproteincodinqsequencesofRNA)由RobBenne编著,19cd年EllisHorwood出版,196页。
1984年,Benne博士实验室发现了锥虫RNA编辑。
自那以后,术语“RNA编辑”一般用以描述RNA水平上基因编码信息改变的不同加工。
大多数情况,RNA编辑代表了基因表达中具有至关重要和潜在的调节步骤,该书对所有不同的加工提供了一幅线条清楚的综合图景。
它由这个领域的国际知名专家撰写,描述了重要顺式和反式因子鉴别时不同系统的工艺,探寻了新颖通路不同形式的异同之处。
该书有下列章节:RNA编辑综述;非洲锥虫线粒体RNA编辑;利什曼线粒体RNA编辑,PhysarumPolycephalum线粒体RNA编辑,副粘病毒P基因mANA编辑,哺乳动物脱脂蛋白BmRNA利用定位RNA脱氨作用进行编辑;植物细胞器RNA编辑;双键RNA腺苷脱氨酶:是否是RNA编辑的可能因子。
索书号:58.174261
RNA编辑培训内容
2008-11-09 00:48
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RNA编辑(RNAediting)
RNA编辑是指在mRNA水平上改变遗传信息的过程。
RNA编辑是通过比较成熟的mRNA与相应基因的编码信息时发现的,成熟的mRNA序列中有几种意想不到的变化,包括U→C,C→U;U的插入或缺失、多个G或C的插入等。
最典型的例子是锥虫(trypanosome)动质体(kinetoplastid)的线粒体基因mRNA的编辑,涉及上百个U的缺失和添加。
由于RNA编辑是基因转录后在mRNA中插入、缺失或核苷酸的替换而改变DNA 模板来源的遗传信息,翻译出多种氨基酸序列不同的蛋白质,RNA编辑的结果不仅扩大了遗传信息,而且使生物更好地适应生存环境。
有些基因的主要转录产物必须经过编辑才能有效地起始翻译,或产生正确的可读框(ORF)。
基因转录产生的mRNA分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成,不同于基因序列中的编码信息,这种现象称为RNA编辑。
RNA编辑同基因的选择剪接或可变剪接(alternativesplicing)一样,使得一个基因序列有可能产生几种不同的蛋白质,这可能是生物在长期进化过程中形成的、更经济有效地扩展原有遗传信息的机制。
RNA编辑最早是在锥虫(Trypanosome)线粒体基因中发现的。
一个基因转录
产生的mRNA分子与“引导”RNA(gRNA,guideRNA)互补。
gRNA分子是线粒体基因转录的长约55~70核苷酸的RNA,能通过正常的碱基配对途径,或通过G—U 配对方式与mRNA上的互补序列配对。
从图中可以看到,编辑前的mRNA分子中删除了一个腺嘌呤核苷酸(A),由gRNA和mRNA形成了一个杂合分子,增加了A·U 和U·G碱基对。
被删除的A又重新插入杂合分子中的mRNA部分。
通过这样编辑后的mRNA分子,比原来的mRNA分子增加了二个U。
在翻译成蛋白质时就相当于发生了移码突因。
RNA编辑是指DNA转录成前RNA(preRNA)后RNA序列内一些特异位点的核苷酸发生删除、添加或修饰等变化. 这些变化改变了遗传信息使得一个基因产生几种结构和功能不同的蛋白质. 对RNA发生编辑作用的酶称为RNA编辑酶,有三组家族成员,研究最广泛者是ADAR1[3-5](RNA依赖性腺嘌呤脱氨酶,ad enosine deaminase acting on RNA). ADAR1使preRNA中特定位点的腺嘌呤脱氨转换成次黄嘌呤,改变了遗传密码,造成其所编码的蛋白质结构和功能发生改变. 有关RNA编辑在免疫应答中的作用研究目前刚刚起步. 罗晓星等[6]发现,重症感染的小鼠肝、脾、胰、淋巴结和胸腺中ADAR1表达显著升高,提示AD AR1在炎症和免疫系统中发挥着重要作用. Yang等[7]报道内毒素、白介素和TNFα均可诱导T淋巴细胞巨噬细胞等表达ADAR1. Zhao等[8]发现,小鼠原代淋巴细胞增殖过程中,ADAR1表达活性也是显著升高的. 我们的研究发现:①大鼠肝移植出现排斥反应时,脾和肝细胞内ADAR1表达升高3~5倍;应用FK 506预防后,ADAR1表达升高的幅度明显降低. ②将绵羊红细胞注入C57/BL6小鼠腹腔,发现胸腺、脾脏和淋巴结内ADAR1的活性显著升高. 而同品系小鼠之间输入全血成分,ADAR1的变化也不明显. ③在淋巴细胞杀伤试验中,用siRNA 质粒抑制ADAR1表达后,淋巴细胞对靶细胞的杀伤功能明显减低[9-10]. ④淋巴细胞内ADAR1活性与IL2密切相关.原代培养的淋巴细胞只有在加入了IL2后活性才升高[11]. 用IL2依赖性T淋巴细胞CTLL2做试验,发现ADAR1
低活性的细胞株凋亡比例明显高于正常的CTLL2细胞. 且IL2的依赖程度、AD AR1活性以及细胞增殖速度,三者成正相关[12]. 上述结果提示,在器官移植
排斥反应过程中ADAR1可能发挥着重要的作用.
我们借助RNAi技术在经典的双向淋巴细胞混合培养试验中观察了ADAR1表达降低后对小鼠淋巴细胞功能的影响,发现抑制了ADAR1表达后,①小鼠淋巴细胞ADAR1 mRNA水平下调,与转染及正常未转染组比较条带亮度降低,说明转染ADAR1siRNA后可以对ADAR1 mRNA水平产生影响,而传染Lipofect amine 后,对小鼠淋巴细中的ADAR1 mRNA水平未产生影响;②存活淋巴细胞数目显著下降(P<0.01),而死亡细胞数目显著增多(P<0.01),且MTT结果与之相符(P<0.01),结果提示ADAR1 mRNA的表达水平受到明显抑制,淋巴细胞受到抗原刺激后其活化、增殖的速度减慢,能力减弱;正常未转染ADAR1 siRNA组ADAR1的表达没有明显变化,淋巴细胞受到抗原刺激后其活化、增殖的速度没有明显变化. 说明ADAR1与淋巴细胞接受抗原刺激后活化及增殖的能力密切相关,且靶向ADAR1的siRNA产生了序列特异性效果,能够抑制小鼠淋巴细胞的增殖.。