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2种猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后抗体水平的动态变化

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两种猪口蹄疫O型Mya98疫苗免疫效果对比试验

两种猪口蹄疫O型Mya98疫苗免疫效果对比试验

两种猪口蹄疫O型Mya98疫苗免疫效果对比试验何彦春;李旭蓉【期刊名称】《畜牧兽医杂志》【年(卷),期】2015(034)002【总页数】2页(P38,40)【作者】何彦春;李旭蓉【作者单位】张掖市动物疫病预防控制中心,甘肃张掖734000;张掖市动物疫病预防控制中心,甘肃张掖734000【正文语种】中文【中图分类】S852.65+1近年来，猪传染病发生越来越发杂，需要免疫的疫病种类很多，给养猪场疫病防控带来很大困难。

特别是在口蹄疫的防控上，多数养殖场户希望给仔猪注射一次疫苗后便能得到有效保护，有的养殖户对政府采购疫苗质量持怀疑态度。

为了验证两种批号口蹄疫O 型灭活疫苗（O／MYA98／BY／2010株）的免疫效果，选用无母源抗体的40～50 日龄仔猪50头，用两种批号口蹄疫O 型灭活疫苗（O／MYA98／BY／2010株）各进行两次免疫。

免疫后，用正向间接血凝试验检测免疫抗体。

1 材料和方法1.1 试验材料1.1.1 试验用疫苗口蹄疫O 型灭活疫苗（O／MYA98／BY／2010 株），批号：H110734J，PD50＝13.97，50mL／瓶，中农威特生物科技股份有限公司生产（以下简称高端苗）。

口蹄疫O 型灭活疫苗（O／MYA98／BY／2010株），批号：H110424J，PD50＝10.81，100mL／瓶，中农威特生物科技股份有限公司生产（以下简称普通苗）。

1.1.2 试验仔猪在张掖市甘州区某养猪场开展试验，该场距离市区20多km，位置偏僻，周围无任何养殖场和居民点，全场采用自繁自养方式饲养。

选择未进行口蹄疫免疫的母猪所产的40～50日龄的仔猪50头作为试验仔猪。

其中30头用作高端苗免疫试验，20头用作普通苗免疫试验。

1.1.3 检测试剂正向间接血凝抗原，阴、阳性血清，稀释液，均由兰州兽研所生产，抗原批号：20110830，阴、阳性血清批号：20110925。

1.2 试验方法1.2.1 免疫试验过程 2011年10月9日首次接种疫苗，所有试验仔猪接种疫苗前前腔静脉采血，分离血清用作测定母源抗体。

不同厂家猪O型口蹄疫合成肽苗免疫效果分析

不同厂家猪O型口蹄疫合成肽苗免疫效果分析

有供试猪 ２ ８日龄免疫高致病性猪蓝耳病疫苗 ， ３ ５日龄免 疫猪 圆环病毒疫苗。Ｉ 组为空 白对照 ， Ｉ Ｉ — Ｉ Ｖ组按厂家推
荐剂量分别肌 肉注射 ３ 种不同的Ｏ型 口蹄疫合成肽苗 ， 每
组编号为 １ 一ｌ ０ 的供试猪免疫 １ 次（ ４ ５日龄免疫一次 ， 简 称一免 ） ， 编号为 １ １ — ２ ０ 的供试猪免疫 ２ 次（ ４ ５日龄首免 ， ７ ３日 龄再次免疫 ， 简称二免 ） 。
均 随供 试猪 日龄 呈增 长 态 势 ， 并于１ ５ ７日龄达 到 峰值 （ 表
１ ． ２ 方 法
由表 １ 可知 ， Ｂ 厂家合成肽苗对猪只未产生副反应 ， Ａ、 ｃ 厂家合成肽苗虽对猪只产生副反应 （ １ ０ ． ０ ０ ％、 １ ３ ． ３ ３ ％） ， 但 ８ ０ 头仔猪随机分成４ 组， 每组 ２ ０ 头， 与Ｂ厂家合成肽苗无显著差异（ Ｐ ＞ ０ ． ０ ５ ） 。从一免和二免 来看 ， Ｃ 厂家合成肽苗二免较 一免 的副反应率显著升高 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 其他厂家合成肽苗一免和二免的副反应率无
１ ． ２ ． ３ 供 试猪 的抗 体效 价检 测 ４ ５日龄 、 ７ ３日龄 、 １ ０ １日
种免疫副反应小 、 免疫抗体效价高的疫苗 ， 为 Ｏ型 口蹄疫
防控提供科学指导。
龄、 １ ２ ９ Ｅ ｔ 龄、 １ ５ ７日龄分别采血。先用 口蹄疫非结构蛋 白 抗体检测试剂盒对血样进行检测 ， 如 口蹄疫非结构蛋 白 抗体检测呈阳性 ， 则说明该供试猪 已感染 口蹄疫 ， 该血样 予 以排 除 ， 然 后用相 应试剂 盒检测 阴性血样 的抗体效 价。供试猪免疫 Ｏ型 口 蹄疫合成肽苗后 ７ ｄ 内连续观察猪
，
２ ． ２ 不 同厂 家 。型 口蹄疫 合成 肽苗 免疫 抗体检 测情 况 ４ ５日龄抗体检测结果显示 ， 供试猪均存在一定滴 度 的母源抗体 ， 除Ｂ厂家合成肽苗二免实验组的母 源抗体 平均滴度略高于阳性 临界值 ， 其他各组均低于 阳性临界 值。从一免来看 ， Ａ、 Ｂ 、 Ｃ 三厂家合成肽苗抗体平均滴度

两种猪口蹄疫O型疫苗应用效果对比试验

两种猪口蹄疫O型疫苗应用效果对比试验

免疫 后分 别于 ２ １ ｄ 、 ２ ８ ｄ采 血 检测 。
ｒ ｅ ｓ ｐ ｉ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｓ ｙ ｎ ｄ ｒ ｏ ｍ ｅ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｉ ｎ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｍｅ ｎ ｓ ［ Ｊ 】 ． Ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ
Ｇｅ ｎ ｅ ｓ ， ２ ０ ０ ９ ， ３ ８ ： ３ ９ ２ —３ ９ ７ ．
猪， 随机 分成 ２ 个组 ， 每组 １ ０ ０头， 分 别免 疫猪 口 蹄 疫 ０型灭活疫苗和猪 口蹄疫 ０型合成肽疫苗。 结果显示： 接种猪 口 蹄 疫 ０型
合 成肽疫苗的试验猪平均免疫抗体合格率明显 高于接种猪 口蹄疫 ０型 灭活疫苗的试验 猪，且注射合 成肽疫苗的试验猪 临床 上 未 出现不 良免疫应激反应 ， 说 明合成 肽疫 苗具有 良好 的免疫原性和安全性 。
免 疫后 ２ １ ｄ 、 ２ ８ ｄ后 的抗 体效 价水 平 ，对 两 种 疫 苗
疫病 毒 （ Ｆ ＭＤ Ｖ ） 所 致 的偶 蹄 动 物 共 患 的急 性 、 热性、 高度 接 触性 传 染病 。临床 上 以 口腔 黏膜 、蹄 部 及乳 房皮 肤 发生 水疱 和 溃烂 为 主要特 征 。该病 具有 流行 快、 传播广、 发病 急 、 危害 大 等流 行病 学特 点 。 世 界动
综 合 性 防治措 施 相 结合 的方 法 ，收 到 了较 明显 的效 果， 但 由于传 统 的灭 活疫 苗质 量参 差 不齐 ， 干 扰 因素 多， 免疫 效果 不理 想 ， 对野 毒 与疫 苗产 生 的抗 体鉴 别 困难 ， 且 应 激 反应 强烈 ， 甚至造成死亡等情况， 给 广
大 养殖 户 带来 巨大损 失 ， 故使研 究 安全 、 高效 的新 型 口蹄 疫疫 苗成 为研 究 热 点 。猪 口蹄 疫 Ｏ型合 成肽 疫 苗 是采 用 固相 多肽 合成 技 术制 作 而成 ，具 有 良好 的 免 疫原 性和 安 全性 ，是近 年来 主 要推 广 的新 型猪 口

猪口蹄疫o型、a型二价合成肽疫苗免疫抗体的检测评估

猪口蹄疫o型、a型二价合成肽疫苗免疫抗体的检测评估

2 试验结果
2.1 临床观察结果 每次接种疫苗后连续观察 5d，首次免 疫后和加强免疫后，40 头猪精神状态均良好，采食量正常， 未出现免疫副反应。 2.2 抗体检测结果 2.2.1 口蹄疫 O 型抗体检测结果 猪口蹄疫 O 型 VP1 结 构蛋白 ELISA 抗体检测试剂盒（ZZ）的检测结果显示， 首免后 30d 口蹄疫 O 型抗体合格率达到 97.5%，加强免疫 后至 120d 时抗体合格率仍维持在 100%，具体检测结果见 表 1。
表 1 不同时间 O 型抗体检测结果（ZZ）
采血时间 首免 30d
采样数 合格数 合格率 /% OD 平均值
40
39
97.5
1.019
二免 15d
40
40
100
1.534
二免 45d
40
40
100
二免 90d
40
40
100
二免 120d
.652
92

参考文献：
[1] 谢庆阁. 口蹄疫 [M]. 北京: 中国农业出版社, 2004: 25-27.
1 材料与方法
1.1 材料 1.1.1 试验疫苗 猪口蹄疫 O 型、A 型二价合成肽疫苗（多 肽 2700+2800+MM13）：国内某口蹄疫疫苗生产企业，批号：
20190102。 1.1.2 试验动物 选取吉林省 2 个规模化猪场 60 日龄左右 的仔猪 40 头（每个猪场选取 20 头）。 1.1.3 检测试剂盒 猪口蹄疫 O 型 VP1 结构蛋白 ELISA 抗体检测试剂盒，郑州某生物技术有限公司（简称 ZZ），批号： 20191001。口蹄疫病毒 O 型抗体检测试剂盒，北京某科技有 限公司（简称 BJ），批号：107HS803。猪口蹄疫 A 型 VP1 结 构蛋白 ELISA 抗体检测试剂盒，郑州某生物技术有限公司（简 称 ZZ），批号：20190101。口蹄疫病毒 A 型抗体检测试剂盒， 北京某科技有限公司（简称 BJ），批号：107HS820。 1.2 试验方法 1.2.1 免疫接种方法 采用耳根后深层肌肉注射，疫苗首次 免疫后间隔 30d 加强免疫一次，免疫剂量均为 1mL/ 头。 1.2.3 血样采集 第 1 次：免疫前采血，检测母源抗体，确 定首免时间；第 2 次：首次免疫后 30d 采血，同时加强免疫 一次；第 3 次：加强免疫后 15d 采血；第 4 次：加强免疫后 45d 采血；第 5 次：加强免疫后 90d 采血；第 6 次：加强免 疫后 120d 采血。每次采集血样 40 份。 1.2.4 抗体检测 分别采用购自郑州和北京的试剂盒进行 O 型、A 型免疫抗体检测，结果按说明书进行判定。

猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验

猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验

猪口蹄疫Ｏ型合成肽疫苗免疫效果试验作者：邓广金来源：《湖北畜牧兽医》2009年第07期摘要:为了更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与灭活疫苗免疫后抗体水平之间的差异,在梅州市选择2个规模化养猪场,每个猪场分2组,对试验猪分别免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗,对接种疫苗的试验猪进行免疫应激观察,结果显示:注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应,说明用合成肽疫苗临床使用的安全性较高;采用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒和正向间接血凝试验分别对使用上述两种口蹄疫疫苗免疫21d后的猪血清进行检测,结果表明:免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒检测,抗体阳性合格率达到92.50%,免疫猪口蹄疫O型灭活疫苗用正向间接血凝试验检测,免疫合格率为35.83%,说明猪口蹄疫O型合成肽疫苗接种后的免疫效果明显优于传统灭活疫苗。

关键词:合成肽疫苗;口蹄疫;抗体;正向间接血凝试验中图分类号:S852.5+2文献标识码:A文章编号:1007-273X(2009)07-0028-02口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病,主要侵害偶蹄兽,偶见于人和其他动物。

临床上以口腔黏膜、蹄部及乳房皮肤发生水疱和溃疡为主要特征。

该病具有强烈的传染性,一旦发病,传播速度很快,往往造成大流行,不容易控制和消灭,带来严重的经济损失。

因此,世界动物卫生组织(OIE)一直将该病列为发病必须报告的A类动物疫病名单之首[1]。

目前对该病的防制主要是采用强制免疫、禁运、扑杀、消毒、封锁等措施,而免疫接种是最主要的也是最经济的防控措施。

目前,主要是研制和应用灭活疫苗[2],但该类灭活苗干扰因素多,对野毒与疫苗产生的抗体鉴别困难,而且疫苗的自身缺陷使之无法克服过敏反应和带毒的生物安全隐患问题[3],故许多学者把免疫谱广、免疫持续期长、安全性好的新型疫苗作为目前口蹄疫的主要研制方向。

猪口蹄疫O型合成肽疫苗是用固相多肽合成技术在体外人工合成含有口蹄疫病毒主要抗原位点的多肽[4],并连接人工合成的可激活辅助性T细胞的短肽,以此作为免疫原与进口佐剂混合乳化制成,能够很好的预防猪O型口蹄疫的发生。

猪O型口蹄疫疫苗不同猪龄免疫抗体分析试验

猪O型口蹄疫疫苗不同猪龄免疫抗体分析试验

猪O型口蹄疫疫苗不同猪龄免疫抗体分析试验
王峰
【期刊名称】《广东农业科学》
【年(卷),期】2011(38)21
【摘要】针对生猪在一个生长周期内的猪0型口蹄疫的免疫抗体效价进行检测,从而掌握猪在饲养过程中不同时期注射疫苗对抗体水平的影响规律.采用正向间接血凝试验监测口蹄疫抗体.通过对同一批次、相同饲养环境下的两组不同猪龄的仔猪注射相同剂量的猪0型口蹄疫疫苗,对不同生长期口蹄疫抗体效价进行监测.结果表明:第1组33 d时断奶,母源抗体为146,注射口蹄疫疫苗剂量2 mL后抗体迅速降低,到40d采血化验抗体水平为38,1周后又上升为105,而到56 d时抗体滴度下降为41,此后继续缓慢下降,71d为40,86d下降到16,此时抗体滴度已低于32的标准.第2组仔猪35 d断奶后,1周内抗体滴度平均值由102上升到117,之后42 ～56 d母源抗体由63快速下降到14,已不能达到标准抗体滴度.在56 d注射口蹄疫疫苗剂量2mL后,抗体滴度平均值逐渐上升到14后又缓慢下降,到98 d以后又缓慢上升,但其值仍达不到群体保护的目的.
【总页数】2页(P118-119)
【作者】王峰
【作者单位】湖南农业大学动物科技学院,湖南长沙410128;东莞市动物卫生监督所,广东东莞523007
【正文语种】中文
【中图分类】S81.35
【相关文献】
1.猪O型口蹄疫疫苗免疫抗体消长动态研究
2.猪O型口蹄疫不同免疫次数免疫抗体检测分析试验
3.不同厂家猪O型口蹄疫疫苗免疫效果比较
4.不同厂家猪O型口蹄疫疫苗免疫效果对比
5.苗猪阶段用不同浓度和剂量的猪O型口蹄疫疫苗实施2次免疫试验
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猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验

表 ３ 保 持 精 子 活 力 ０ ５级 时 的 保 存 天数 ．
～
３ １ ～３ １ （ ３ 。 ． ０ ． ８ｄ 表 ）
监测。
２ ２ 用 液 相 阻 断 Ｅ ＩＡ试 剂 对 浓 缩 灭 活 疫 苗 免疫 后 的 血 ． ＬＳ 清进行检测 ， 由表 ２可 以看 出 ， 免 ３周 抗 体 水 平仍 不 高 且 首 抗 体合 格 率 较 低 ， 免 ２周 后 抗 体 水 平 升 高 ， 抗 体 合 格 率 二 但 并 不 是 很 理想 。
口蹄 疫病 毒 Ｖ １ 构 蛋 白抗 体 Ｅ ＩＡ试 剂 盒 （ 海 优 耐 特 Ｐ 结 Ｓ Ｌ 上 生 物 医 药有 限 公 司 生 产 ） 。 １ ２ 方 法 ．
１ ２ １ 分组 ： 种 猪 场 试 验 的 每 头 母 猪 所 生 的 仔 猪 归 为 一 ．． 在 组， 一共 ６组 。 Ａ、 Ｃ三 组 为 合 成 肽 疫 苗 免 疫 组 ， Ｅ、 Ｂ、 Ｄ、 Ｆ三 组 为浓 缩 灭 活苗 免 疫组 １２２ 免 疫 时 间 和 剂 量 ： ．． 口蹄 疫 ４ 日龄 首 免 ， ０日龄 二 次 ０ ９
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
１ １ １ 试验 动 物 ： 择 昆 山 市 种 猪 场 梅 山 猪 中 相 同 待 生 产 ．． 选 日 、 期 生产 性 能 相 近 的 ６头 母 猪 ， 其 生 产 的 仔 猪 按 其 免 疫 对 程 序进 行 初 免 、 免 ， 每 头 仔 猪 唯 一 编 号 。 并 在 有 关 乡镇 二 对 选 择 了若 干 具有 不 同 免 疫 背 景 的 猪 场 进 行 了 合 成 肽 免 疫 与
１ ２ ３ 检 测方 法 按 试剂 盒说 明书 进 行 （ 程 略 ） ．． 过 。

猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果观察

猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果观察作者：陈培赛，林元潮，曾瑞强来源：《兽医导刊》 2013年第12期陈培赛1，林元潮2，曾瑞强2（1. 温州市苍南县畜牧兽医局，浙江苍南 325800 ；2. 温州市苍南县灵溪镇农业综合服务中心，浙江灵溪 325800）口蹄疫是一种偶蹄动物烈性、高度传染性疾病，给世界畜牧业造成很大损失。

1974 年国际兽疫局（OIE）将该病列为国际动物卫生法典中18个A 类疾病之首, 在许多国家和地区都有该病的发生与流行。

目前对该病的防制主要是采取禁运、紧急屠宰和强制性免疫接种措施，而疫苗免疫是最主要的也是最经济的手段。

猪口蹄疫O 型合成肽疫苗采用固相多肽合成技术，在体外人工合成口蹄疫病毒主要抗原位点（合成肽）并连接人工T 细胞位点，以此作为免疫原与进口佐剂混合配制而成油乳剂疫苗，能够很好的预防猪O 型口蹄疫的发生。

温州市苍南县国土面积1300 平方公里，生猪总存栏数量约10 ～ 12万头，每户存栏数量100 ～ 500 头为主。

我县于2009 年8 月3 日开始试用申联生物医药（上海）有限公司的猪口蹄疫O 型合成肽疫苗，一直坚持使用至今，全县没有出现重大生猪口蹄疫疫情，取得了较好的防控效果，现将我县推广使用合成肽疫苗情况介绍如下。

一、猪口蹄疫O 型合成肽疫苗免疫效果观察1．初试及近年疫苗使用情况统计。

（1）初试情况。

2009 年8 月3 日，我县首先在新华畜牧有限公司进行猪口蹄疫O 型合成肽疫苗与高效灭活疫苗的对比试验。

通过试验发现合成肽疫苗免疫副反应小、抗体检测合格率高，受到了畜牧兽医部门和广大养殖场的高度认同。

（2）推广使用情况。

初试完成后，先在我县9 个规模猪场全面使用，免疫生猪约7 500 头。

10 月份以后，全县开始使用合成肽疫苗至今。

2009 年以来使用的猪口蹄疫疫苗情况见表12. 免疫后效果分析。

（1）免疫应激反应小。

合成肽疫苗接种后不会产生严重的副反应，曾观察到甚至使用了20 ml 注射的剂量也没有不良反应。

猪口蹄疫O型合成肽疫苗及猪口蹄疫灭活疫苗免疫效果试验


将 １ ０ ０头试 验 猪按 照疫 苗 说 明书 进行 免 疫 ， 每 头猪 耳 根后 肌 肉深 层注 射 ｌ 毫升 ， 第 一次 接种
后 间隔 ４Βιβλιοθήκη 再 加强 免疫 ２毫 升 。 ２ ． ３应 激 反 应 判 定 标 准
用猪 口蹄 疫 ０型 合 成 肽疫 苗 和猪 口蹄 疫 ０ 型灭 活疫 苗 在 同一 个猪 场 进行 免 疫注 射 ， 均 用酶
为 ９ ０ ％ ．１ ２ ０天 为 ６ ０ ％， １ ５ ０天 为 ５ ０ ％。 从 表 ２可
源 抗体 ； 第 一 次注 射疫 苗后 ２ ８天（ 二 免前 ） 开始第
二 次采 血 。然后 ， 每隔 ３ ０天采血 一次 。直 至抗 体
下 降 。采取前 腔 静脉或 耳静 脉采 血 ３ ～ ４毫 升 。按
６ ． １重 在 预 防 ， 从 饲养 管 理 人 手 ， 抓好 营养 、
卫生 、 人 员 意 识 等 方 面 的工 作 ． 尽 可 能 减 少 内源
头 随机 平均 分 为两 组 ， １组 ，注 射 猪 口蹄 疫 ０型
合 成肽 疫 苗 ； ２组 ， 注射 猪 １ ： ３ 蹄 疫 ０型 灭 活疫 苗 。 两组 仔猪 体重 差异 不显著 （ 见表 １ ） 。
猪 口蹄 疫 Ｏ 型合成 肽 疫苗及 猪 口蹄疫 灭活疫 苗免 疫效 果试验
孟 艳 ， 杨 秀女 ， 武秋 双 ， 郑 丽丽 ， 杨旭 光 （ １ ． 河北 省畜牧 兽 医研 究所 ， 河北保 定 ０ ７ １ ０ ０ ０ ； ２ ． 河 北省 动物 疫病 预 防控 制 中心 ， 河北 保定 ０ ７ １ ０ ０ ０ ；
蹄疫感染抗体阴性的 ２ ８ 日龄 左 右 断 奶仔 猪 １ ０ ０
或 服用 纯 中药制 剂 复方 益母 草

不同毒株制备的两种猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果对比试验

（ ０ ／ Ｍ Ｙ Ａ ９ ８ ／ Ｂ Ｙ ／ ２ ０ １ ０ 株）免疫组。表明两种疫苗各有其优缺点，对不同日龄段仔猪的免疫效果存在一定的差异。 关键词：猪 口蹄疫；口蹄疫 Ｏ 型灭活疫 苗；免疫效果
中图 分 类 号 ：￥ ８ ５ ５ ． ３ 文 献标 识 码 ：Ａ 文章 编号 ： １ ０ ０ ５ － ８ ５ ６ ７ （ ２ ０ ｌ ５ ） ０ ３ － ０ ０ ２ ３ — ０ ３
摘 要 ：本试验采用 ２ 种不同毒株的 口蹄疫灭活疫苗分别对 １ ２ ０头 ３ ５日 龄仔猪进行 了免疫效果试验 。结果 显示：首次免疫时，猪 口蹄疫 ０ 型灭活疫苗 （ Ｏ ／ Ｍ Ｙ Ａ ９ ８ ／ Ｂ Ｙ ／ ２ ０ １ Ｏ 株）免疫组的抗体合格率和疫苗稳 定性均优 于 使用猪 口蹄疫 Ｏ 型 灭活疫苗 （ Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３ 株＋ Ｏ Ｒ ／ ８ ０ 株） 免疫组 。７ ５日龄 二免 时，使用猪 口蹄疫 Ｏ型灭活疫 苗 （ Ｏ Ｚ Ｋ ／ ９ ３株 ＋ ０ Ｒ ／ ８ ０株 ） 免 疫 组 的 抗 体 合 格 率 和 疫 苗 稳 定 性 均 优 于 使 用 猪 口蹄 疫 Ｏ型 灭 活 疫 苗
烈性 传染 病 口 ］ 。 由于 口蹄 疫病 毒 的高度 变 异性 和 对 不 同动 物 的适 应 性 ，在 流 行 中 出现 新 的特 点 ； Ｆ Ｍ Ｄ Ｖ在 动 物体 内和 细 胞 中长 期存 在 ， 引发 持续 感 染。 使 本病得 不 到有 效控制 ， 在许 多国家和 地 区重
Ｉ Ｉ 苗： 猪 口蹄 疫 ０型 灭活 疫 苗 （ Ｏ ／ Ｍ Ｙ Ａ ９ ８ ／ Ｂ Ｙ ／ ２ ０ １ ０株） ， 国内某 公司 产 品，规 格 ： ｌ Ｏ Ｏ ｍ Ｌ ／瓶 ， 批
广 东畜牧兽 医科技 ２ ０ １ ５ 年（ 第４ ｏ 卷） 第３ 期
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NN N N NN N N NN N N N 40 N N NN N N NN N N
N 40 N N NNNN NNNN Y 41 N N NNNN NNNN
96 h N N N N
NNNN
NN N N
NNNN
24 h - - - -
48 h - - - 三次免疫
72 h - - - -
-
-
-
-
-
1001 0
10 801 4 ? 151 3b
10010 881 5 ? 141 3ab
10010 1001 2 ? 215a
10010 991 8 ? 310a
10010
注: 同列数据阻断率之间比较, 不同字母者表示差异显著 (P < 01 05), 有相同字母者表示差异不显著 (P > 01 05 )。
%
12 941 1 ? 121 9a
1001 0 821 3 ? 231 6a
841 6 651 7 ? 381 5a
841 6 9613 ? 81 9a
1001 0
3 讨论
合成肽疫苗是近 10多年来发展起来的一种新型 人工疫苗, 它是以合成的一段免疫原性肽抗原配以适 当的载体或 /和佐剂制成的疫苗。相对于传统的弱毒 苗和灭活苗以及其他几种新型的疫苗, 肽类疫苗具有 以下特点: 合成肽疫苗是一种纯粹抗原性疫苗具有安 全、无毒、稳定及副反应小等优点; 由于其分子结构 小而简单, 很少会出现严重的并发症及医源性感染问 题; 第三是可精确定位, 合成 T、 B 细胞抗原表位并 能可进行不同组合, 有望制成针对多种病原的超级疫 苗 [ 1] 。猪口蹄疫 O 型合成肽疫苗正是 基于上述理念 研制成功, 其主要含有口蹄疫 O 型病毒 VP1 B 细胞 表位 ( VP1环 ) 和 T 细胞表位的 7种寡肽, 将这些 寡肽和钥孔鏚血蓝蛋白 ( KLH ) 偶联, 然后 混合于 弗氏完全佐剂中, 制备成合成肽疫苗, 能够产生足够 的抗体, 保护 牛和猪不发病 [ 2] 。本试验中针 对猪口 蹄疫 O 型合成肽疫苗免疫后的副反应进行观 察, 发 现除接种猪除短时间的发热及减料外, 并无常规口蹄 疫疫苗接种后的高热不退、食欲废绝、呼吸困难、流
65头 51日龄健康的大白 @长白 @杜洛克 @皮特 兰四元杂交猪由博罗县温氏畜牧有限公司提供。 112 试验分组
将 65头 51日龄健康四元杂交猪随机分为 5 组, 每组 13头。其中 1组为健康对照组, 其余 4组的疫 苗免疫及分组情况见表 1。各组均于接种后 ( 按首免 后的时间计 ) 2、 4、 6、 8、 10、 12 周采取前 腔静脉 血液分离血清备用。 113 疫苗接种后机体应激反应情况观察
EEE 减料 温度 呕吐 倒地
24 h Y 41 N N Y + 40 N N Y + 40 N N
Y 40 N N
首次免疫 48 h Y
40 N
N
72 h N N N N
96 h N N N N
24 h N 40 N N
48 h N N N N 二次免疫
72 h N N N N
NNNN NNNN NNNN Y 41 N N NNNN NNNN
114 免疫抗体水平的阻断 EL ISA检测 根据试剂盒说明书略作修改进行。具体步骤为:
首先将参考血清 1~ 4及待检血清样品以 EL ISA 缓冲
畜牧与兽医 2009年 第 41卷 第 11期
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液按 1B 10 进行稀释, 每孔加入 100 LL 室温感作 1 h, 倾除孔内液体, 洗板 4次后拍干; 每孔加入 100 LL 酶标结合物溶液, 室温感作 1 h, 倾除孔 内液体 后, 洗板 4 次后拍干; 每 孔加入 100 LL 底物溶 液, 避光室温孵育 15 m in; 每孔加入 100 LL 终止液 后, OD 判 450nm 读, 记录。判定标准参照试剂盒说明进行, 以阻断率不低于 50% 判定为阳性。 115 数据分析
3. 广东省博罗县温氏畜牧有限公司, 广东 博罗 516157 )
摘要: 为明确 2种猪口蹄疫 O 型合成肽疫苗的免疫效果, 将 65 头 51日龄四元杂交猪随机分为 5组 ( 13 头 /组 ), 其中 1组设为健康对 照组, DD
组和 EE 组为二次免疫组, D DD 和 EEE组为三次免疫组, 在首免或二免后 4周加强免疫, 采用阻断 ELISA 方法检测首免后 2、 4、 6、 8、 10及 12
6 941 5 ? 111 4a
1001 0 911 4 ? 151 6a
1001 0 971 1 ? 41 2a
1001 0 941 9 ? 71 1a
1001 0
8 691 9 ? 341 0b
921 3 971 5 ? 21 0a
1001 0 991 4 ? 21 0a
1001 0 901 2 ? 131 5ab
周特异性抗体的阻断率及抗体阳性率。研究结果表明, 合成肽疫苗可诱导机体产生特异性抗体; 在 4W PI ( 接种 后周数 ) 各组特异 性、 DD、 EEE 及 DDD 组抗体阻断率分别 为 571 9% , 571 3% , 521 7% 及 501 3% , 在 4W PI之后, 除 DDD 组外, 其 余 3 组抗体
阳性率均在 62% 以上 ( 8 /13 ); 在 6W PI, 各组抗体阻断率均高于 91% , 且接近或达到峰值, 抗体阳性率均为 100% ( 13 /13 ); 在 12W PI, 除 DDD
组外, EEE、 DD 及 EE 组的抗体阻断率均高于 801 0% , 分别为 9613% , 941 1% 及 821 3% ; 除在 10W P I DDD 和 EEE组抗体阻断率显著高于 DD 组
符合确认标准, 在此基础上计算出各血清样品的阻断 率。健 康 对 照 组 的 抗 体 阻 断 率 在 首 免 后 2 周 ( 2W P I), 阻断率均值均低于 50% , 判定为阴性。试 验各组的抗体阻断率见表 3, 结果 表明 EEE、 DDD、 EE 及 DD组的抗体水平动态变化趋势基本一致, 即 在首免后 2周至 4周之间, 抗体水平并未呈现上升趋 势, 推测与母源抗体水平影响有关 ( 除 DDD 组呈现 上升趋势外 ) ; 在二免后抗体水平不断攀升, 并在首 免后 6周达到峰值并维持至试验结束, 3次免疫组在 抗体水平达到峰值后较二次免疫组在维持峰值过程中 波动相对较小。
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A nim a lHusbandry & V eter inary M ed ic ine 2009 V o l1 41 N o1 11
表 3 免疫后各组血 清样品的抗体阻断率及阳性率
类别
阻断率 DD
阳性率 阻断率 EE 阳性率
阻断率 DDD
阳性率
阻断率 EEE
阳性率
2 6611 ? 271 9a
从免疫效果的次序上看, EEE 组免疫效果最好, 其抗体水平在 4WP I后迅速上升, 在 6W P I达到峰值 一直维持至试验结束, 且抗体阳性率在 6W P I后始终 维持在 10010% ( 13 /13) , 尽管在 2W P I其抗体阻断 率虽显著低于 DD组, 但在 10WP I其抗体阻断率显著
肠温度、减料、记录应激性倒地及呕吐等疫苗接种后 的副反应, 结果见表 2。合成肽疫苗注射后副反应轻 微, 仅表现为减料和轻度发热的情况, 而呕吐、应激 性倒地等情况均未出现。
表 2 疫苗接 种后机体应激反应情况
类别
DD 减料 温度 呕吐 倒地
EE 减料 温度 呕吐 倒地
D DD 减料 温度 呕吐 倒地
在每次疫苗接种后 24, 48, 72及 96 h后, 检测 直肠温度, 观察饲料摄入情况, 记录应激性倒地及呕 吐等疫苗接种后的副反应。
组别
日龄
DD
51
EE
51
DDD
51
EEE
51
注: N表示无。
表 1 试验动 物分组及疫苗免疫情况
首免
二免
疫苗及剂量
D 1 mL /头 E 1 mL /头 D 1 mL /头 E 1 mL /头
-
-
-
-
-
-
-
N 40 N N NN N N NN N N
N 40 N N NNNN NNNN
96 h - - - -
-
-
-
-
NN N N
NNNN
注: N 表示正常 ( 体温以 391 5 e 以下判定为正常 ) ; Y 表示异常; Y + 表示异常, 但略严重; - 表示未检测。
212 免疫抗体水平的检测结果 根据试剂盒提供的判定方法, 参考血清 1~ 4均
疫苗免疫各组抗体阻断率的均值以 X ? SD 表示。 DPS ( da ta processing system ) 6155 版统计 软件 方差
分析法和 Duncan新复极差法进行多重比较分析。
2 结果与分析
211 疫苗接种后机体的应激反应情况 在每次疫苗接种后 24, 48, 72及 96 h后, 对直
途径
肌注 肌注 肌注 肌注
日龄
79 79 79 79
疫苗及剂量
D 2 m L /头 E 2 m L /头 D 2 m L /头 E 2 m L /头
途径
肌注 肌注 肌注 肌注
日龄
107 107 107 107
三免
疫苗及剂量
N N D 2 mL /头 E 2 mL /头
途径
N N 肌注 肌注
收稿日期: 2009-02-24; 修回日期: 2009-09-07 作者简介: 司兴奎 ( 1973- ), 男, 副教授, 博士。
口蹄疫 ( foo t and m outh disease, FMD ) 是由口蹄 疫病毒 ( FMDV) 引起偶蹄动物的一种急性、热性高 度接触性传染病, 被 O IE 列为通报疫病。自 1514年 FMD 首次报道以来, 已蔓延至除北美 洲和大洋洲外 的世界各地, 对家畜养殖业 的健康发展构成 严重威 胁。在中国, 防制猪 O 型 FMD主要采用灭活疫苗免 疫与扑杀等综合性防制措施相结合的方法, 收到了较 明显的效果。但在使用灭活 疫苗控制 FMD 过程 中, 由于疫苗质量参差不齐, 免疫效果不理想, 接种灭活 疫苗副反应严重, 甚至造成死亡 等情况, 使 研究安 全、高效的新型口蹄疫疫苗成为研究热点。本试验对 猪 O 型 FMD合成肽疫苗免疫后机体抗体水平的动态 变化进行了检测。