实验三 GOD-POD法测定葡萄糖的回收和干扰试验1
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葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)试剂盒与己糖激酶法(HK)试剂盒测定血糖比较摘要:通过对本实验室常规使用的己糖激酶法试剂盒的比较,分析葡萄糖氧化酶法试剂盒检测血糖的可靠性和应用性。
对本实验室使用的血糖测定参考方法HK法试剂盒与GOD-POD法试剂盒从重复性、试剂稳定性、特异性等方面进行比较。
结果显示GOD-POD法在重复性、试剂稳定性等方面均能满足一般实验室要求,且与HK法相关性良好。
关键词:GOD-POD、HK、血糖测定、方法比较1 引言。
血糖测定是诊断糖尿病的重要依据,血糖的准确测定对诊断和处理高血糖和低血糖症十分重要测定方法主要有化学法和酶法,而酶法有分为葡萄糖氧化酶与过氧化物酶偶联的的GOD-POD法及己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶偶联的HK 法。
酶法中的GOD-POD法,因具有操作简单,无毒、无害,试剂已商品化、易于质控、价格低等优点,现已广泛用于临床。
为此,将GOD-POD法与血糖参考方法HK法从重复性、试剂稳定性、特异性及两种方法的相关性方面作比较,现报告如下:2 材料与方法2.1仪器与试剂己糖激酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号:20110310葡萄糖氧化酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号:20110310胆红素校准品(430 umol/l)四川迈克生物科技有限公司批号:20101120血糖中值质控品(4.80 mmol/l)四川迈克生物科技有限公司批号:20101008血糖高值质控品(11.20mmol/l)四川迈克生物科技有限公司批号:20101008日立-7180全自动生化分析仪2.2方法按试剂盒使用说明设置参数和操作。
2.2.1重复性试验取两个血糖浓度的定值质控血清用两种方法分别平行测20次,计算批内误差。
另取两个血糖浓度同一批号定值质控血清用两种方法每天各做两次,累计20个结果,计算天间误差。
2.2.2回收试验取若干健康体检人群血清混合,分装,按9:1的比例分别加入浓度为4.80 mmol/L和11.20 mmol/l的糖标准溶液,用两种方法分别测定,每种方法的每一浓度平行测定三次,分别计算回收率。
godpod法测血糖实验报告一、实验目的本次实验旨在探究 godpod 法在血糖检测中的准确性、可靠性以及操作的便捷性,为临床血糖监测和糖尿病的诊断与管理提供参考依据。
二、实验原理Godpod 法是一种基于葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化物酶(POD)的酶促反应来测定血糖浓度的方法。
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下与显色剂发生反应,产生可测量的颜色变化,通过比色法测定吸光度,进而计算出血糖浓度。
三、实验材料与设备1、实验试剂葡萄糖标准液(浓度分别为 28mmol/L、61mmol/L、111mmol/L)葡萄糖氧化酶试剂过氧化物酶试剂显色剂2、实验仪器分光光度计移液器恒温箱离心机试管、刻度吸管等四、实验步骤1、样本采集采集空腹静脉血 3ml,注入含有抗凝剂的试管中,轻轻混匀。
以 3000r/min 离心 10 分钟,分离血浆备用。
2、标准曲线绘制分别取不同浓度的葡萄糖标准液 01ml,加入到试管中,然后加入30ml 葡萄糖氧化酶试剂和 03ml 过氧化物酶试剂,充分混匀。
将试管置于 37℃恒温箱中孵育 15 分钟。
取出试管,在分光光度计上于 505nm 波长处,以空白管调零,测定各标准管的吸光度。
以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
3、样本测定取01ml 待测血浆样本,按照与标准曲线绘制相同的步骤进行操作,测定吸光度。
4、计算结果根据样本的吸光度,在标准曲线上查出对应的葡萄糖浓度。
五、实验结果1、标准曲线绘制的标准曲线呈现良好的线性关系,相关系数 r 为 0998。
2、样本测定结果对 10 份血浆样本进行测定,结果如下(单位:mmol/L):|样本编号|测定值|||||1|52||2|68||3|49||4|75||5|58||6|82||7|46||8|63||9|71||10|55|六、结果分析1、准确性将测定结果与已知的血糖参考值进行比较,发现大部分样本的测定值与参考值偏差在允许范围内,表明 godpod 法具有较高的准确性。
临床生物化学检验题库(2)一、单选题1、下列哪些物质可用于二级参考测量程序的校准(D)。
A、常规样品B、厂家产品校准物C、厂家工作校准物D、一级校准物2、下列关于同工酶概念的叙述,正确的是(B)。
A、结构相同,而存在部位不同的一组酶B、催化相同化学反应,而酶的分子结构不同、理化性质各异C、性质相似,催化的反应相似,而分布不同的一组酶D、催化相同反应,存在部位相同的一组酶3、在血浆中形成,转运内源性甘油三酯和胆固醇酯的血浆脂蛋白是(C)。
A、乳糜微粒B、极低密度脂蛋白C、中间密度脂蛋白D、低密度脂蛋白4、多次重复测定的均值与被测量真值的接近程度,称为(B)。
A、准确度B、正确度C、精密度D、偏倚5、理想的临床化学质控品的有效期,应在到达实验室后(D)。
A、2个月以上B、3个月以上C、6个月以上D、12个月以上6、某一实验室在血糖测定进行室内质控时,采用两个浓度水平质控物,正常浓度水平质控物测定结果的均值为 5.5mmol/L,标准差为0.5mmol/L,病理浓度水平测定结果的均值为8.25mmol/L,标准差为0.25mmol/L。
该实验室两个浓度水平的变异系数分别为(A)。
A、9.09%和3.03%B、0.50%和0.25%C、5.0%和8.0%D、2.75%和2.06%7、当生化分析仪出现所有的项目均失控时,其可能有以下原因,但除外(D)。
A、样本采样针阻塞B、分析仪灯泡老化C、样本采样针漏水D、某些项目的试剂变质8、骨、吸收标志物由破骨细胞在骨吸收期间产生,骨形成标志物由成骨细胞在骨形成期间产生,可在尿中检查的骨吸收标志物是(C)。
A、骨钙素B、骨碱性磷酸酶C、脱氧吡啶酚D、前胶原肽9、随肾小球病变的加重,尿中蛋白质的检出顺序是(A)。
A、转铁蛋白→白蛋白→IgG、IgA→IgMB、白蛋白→转铁蛋白→IgG、IgA→IgMC、白蛋白→IgG、IgA→转铁蛋白→IgMD、白蛋白→IgG、IgA→IgM→转铁蛋白10、仪器用水具体参照仪器使用说明书并定期检测,电导率一般应不大于()μS/cm(25℃),微生物总数<()CFU/mL。