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在植物组织培养者加入墨汁或者活性炭的作用？目前，活性炭已被广泛应用于植物组织培养中，在许多试验中效果良好，这已有不少报道，但有关活性炭作用机理的研究很少，对于某种植物的培养，加不加活性炭，以及加多少，仍处于摸索和积累经验的阶段。
一般认为活性炭通过吸附而发生作用，它可以吸附培养基中的有害物质，包括琼脂中所含的杂质，外植体在培养过程中分泌的酚、醌类等对外植体自身有害的物质以及蔗糖在高压灭菌时产生的5－羟甲基糠醛。
在组织培养中活性炭主要用于以下几个方面：一、促进芽的增殖、茎和苗的生长在茎尖培养和茎段培养时，为防止褐变和有害物质的积累, 常在培养基中加入适量活性炭。
汤浩等研究表明，在植物组织培养时培养基中加入0.05% 的活性炭对防止培养基褐变有良好的效果，有利芽的诱导和增殖。
在防止褐变方面，王敬驹等研究表明，活性炭的防褐效果优于Vc和半胱氨酸。
二、用于生根培养基活性炭最广泛的应用是用于培养物的生根。
一般认为活性炭创造的黑暗环境有利于根的诱导和根系的生长。
三、用于胚培养，促进成苗在许多植物的胚培养时，也用到了活性炭。
如果植物中含酚类物质较多，组培时褐变严重，从而增加了胚培养的难度，需添加抗氧化剂，艾鹏飞（2002 ）等研究发现，活性炭抗褐化效果比柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮效果都好。
四、用于花药培养花药培养的主要目的是诱导花粉发育成单倍体，可以快速地获得纯系，缩短育种周期。
但实践表明，小孢子的启动发育对药壁组织有相当大的依赖关系。
目前对小孢子启动和进一步发育的机理和条件了解不多，花粉培养难度较大。
活性炭用于花药培养是Nakamura 等首先提出的。
目前，已经在油菜、马铃薯、烟草、玉米、黑麦、小黑麦、龙眼、辣椒、甜椒和水稻的花药培养中得到应用。
参考文献：中国果蔬2009第2期42 . 《活性炭在植物组织培养中的应用》。
植物组织培养综合测试题（一）一、填空题（每空0.5分，共10分）1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型。
2. 在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂。
3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念；1943年White提出植物细胞“_________”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。
4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_________℃。
5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。
6. 1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基，其特点是__________浓度较高，且为较稳定的__________。
7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进__________的生长，这时__________占主导地位；比值高促进__________的生长，这时__________占主导地位。
二、不定项选择题（每题2分，共10分）1. 培养室里的度一般保持在_________A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是_________。
A Kt；B IAA；C NAA；3. 影响培养基凝固程度因素有_________。
A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. .活性炭在组织培养中的作用有_________。
脱分化外植体继代培养植物细胞全能型种质褐变人工种子器官培养.胚胎培养植物组织培养．灭菌：驯化愈伤组织培养：玻璃化现象无病毒苗．胚状体．愈伤组织．消毒植物生长调节物质接种细胞悬浮培养脱毒苗褐化．再分化．1 植物组培对象分为，，,细胞培养，原生质体培养几种类型。
2 培养基中有机态氮素营养主要是和MS3 种质保存的方式有，，。
4在组织培养中，不耐热对的用法灭菌，耐热的培养基用法灭菌5幼胚培养的三种常见方式是，，。
6 去除植物病毒的主要方法是，，。
7 愈伤组织的形成大志经历，，三个时期8植物组培过程中，最常用的培养基是，大多数植物组培的适宜范围是1．植物组织培养过程中，最常用的培养基是MS ，培养基的pH因外植体的来源不同而异，大多数植物的pH要求调节在 5.8-6.0 范围内。
．2．植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。
3．培养基的灭菌要求压力为一、温度为、维持时间为10～20min．4．在离体叶培养中，6-BA和KT利于的形成：2，4-D利于的形成。
5．茎尖分生组织培养的目的主要是，其茎尖一般取毫米。
6．污染的原因从病源菌上分析主要有两大类和。
7．一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为8 White培养基浓度低，适合生根培养，．9．植物组织培养的理论基础是。
糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织赖以生长的碳源,而且还能维持。
11．花药培养前的预处理是最常用的方法。
12．在进行花药和花粉培养时，最适宜的花粉发育时期是。
13，组织培养植株再生的两条途径是和。
2．在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂。
．3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物的理论概念；1943年white提出植物细胞¨¨学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科．．4 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在100-130 ℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在160-180 ℃的温度下1一3小时：烘干植物材料的温度是80 ℃。
第二章试题一、选择题（每题2分，共50分）1、下列属于细胞分裂素的植物激素是（）A IAAB NAAC 6-BAD 2,4-D2、植物组培中，进行微茎尖剥离的设备是（）A、放大镜B、显微镜 C 、解剖镜D、无需设备3、下列（）不是活性炭在组培中的作用。
A、吸附有毒物质B、减少褐变，防止玻璃化C、创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长D、增加培养基中的养分4、在组培中常用的维生素浓度约在（）A、1-5mg/lB、0.1-1 mg/l C 、10-20 mg/l D、5-10mg/l5、试管瓶内的无病毒苗应保存在温度为（）的低温环境中。
A、0度以下 B 、10-15度C、1-9度D、15-18度6、病毒在植物体内的分布规律为（）A 、嫩叶比老叶含量多B、未成熟的组织和器官含量少C、茎尖含量最多，生长点几乎没有D、病毒在植株体的分布是均匀的7、组培苗的室内培养过程不包括（）培养。
A、初代 B 、继代C、生根D、炼苗8、目前，生产无病毒苗最安全、最重要的一条途径是（）A、热处理脱毒 B 、茎尖培养脱毒C、愈伤组织培养脱毒D、化学脱毒9、接种用具可用（）法灭菌。
A、灼烧 B 、化学 C 、过滤 D 、照射10、生长中的蝴蝶兰幼嫩花茎最具分化（）能力。
A、顶芽B、不定芽C、胚状体D、原球茎11、大多数微生物属于（）A、光能自养型B、光能异养型 C 、化能自养型D、化能异养型12、下列（）不是细菌的特殊结构。
A、鞭毛B、荚膜C、芽孢D、伴孢晶体13、丝状真菌分离不宜采用（）A、稀释法B、组织分离法C、孢子分离法 D 、饵诱法14、土壤中细菌分离时，采样季节以（）为好。
A、春初B、夏末 C 、秋初D、冬末15、土壤细菌分离是土样浸提液水浴温度不可高于（）A、50度B、65度 C 、75度D、100度16、菌种保藏最基本的方法是（）A、斜面室温保藏B、斜面冰箱（4度）保藏 C 、沙土管保藏 D 、冷冻干燥保藏17、斜面冰箱保藏菌种的期限一般为（）A、3-6个月B、1-2年 C 、1-5年D、10-20年18、大规模工厂化液体培养微生物时常采用（0A、试管 B 、三角瓶C、摇瓶D、发酵罐19、（）的菌体能互相连接并延长成菌丝体称假菌丝。
实验室及设备单元复习题1．组培能够进行，其理论依据是＿＿＿＿和＿＿＿＿-。
2．接种室要求室内＿＿＿＿，墙面＿＿＿＿，门为＿＿＿＿，并设置＿＿＿＿，防止出入时带进杂菌。
3．紫外灯灭菌利用＿＿＿＿＿波长左右的紫外光，它的灭菌强度较弱，须离被灭菌物＿＿＿＿。
4．配制培养时，一般先配制母液，其目的在于＿＿＿＿-和＿＿＿＿-。
5．培养架一般长为＿＿＿＿米，宽为-＿＿＿＿米。
6．pH值一般调节为＿＿＿＿，常用＿＿＿＿和＿＿＿＿方法来进行。
7．压力单位中1kg/cm2＿＿＿＿Mpa,,在0.1 mPa时锅内温度为＿＿＿＿。
8．培养基中缺铁会使幼苗＿＿＿＿，培养基中以＿＿＿＿形式加入。
9．蔗糖使用浓度为＿＿＿＿%，它主要起＿＿＿＿作用。
二、名词解释20分1.外植体2.愈伤组织3.灭菌4.细胞全能性5.脱分化三选择题10分1.接种工具灭菌常采用（）①灼烧②高压③过滤④熏蒸2.具有促进愈伤组织生成的物质是（）①VPP②VB1③VB6④甘氨酸3.微量元素母液的配制浓度（）①10倍②100倍③1mg/ml④10mg/ml四、问答题40分1 配制培养基时，使用生长调节物质的原则是什么?2. 无菌接种室怎样做好接种前的灭菌工作3. 高压灭菌器的使用程序怎样4MS培养基的名称来源及特点5 为什么要配制母液，配制时要注意什么6 表面灭菌如何操作?培养基章复习题一、填空（20分）1．配制培养时，一般先配制母液，其目的在于＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。
2．培养架一般长为＿＿＿＿＿米，宽为＿＿＿＿米。
3．培养基PH值一般调节为＿＿＿＿＿，常用＿＿＿＿和＿＿＿＿＿方法来进行。
4．培养基中缺铁会使幼苗＿＿＿＿，培养基中以＿＿＿＿＿形式加入铁。
5．磷是构成＿＿＿＿的主要成分，这种物质又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。
磷也是＿＿＿＿的成分、这是一种常见的直接能量物质。
6．琼脂加入浓度大约是___________，蔗糖加入浓度大约是______________ 。
植物组织培养技术考试复习题一、填空题1、组织培养的理论依据是：植物细胞的全能性。
2、根据培养的外植体材料不同，可将植物组织培养分为以下几种类型：愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养、原生质体培养、遗传转化。
3、植物组织培养实验室一般划分为洗涤室、培养基配置室、缓冲室、无菌接种室、培养室、观察室、驯化室等分室，其中植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区域是无菌接种室。
4、培养基成分主要包水分、无机盐类、有机营养成、植物生长调节物质、天然物质、pH 、凝固剂。
5、目前应用最广泛的组培基本培养基是MS培养基。
6、培养基最常用的碳源是糖类物质，使用浓度在1%-5%常用3 %。
7、培养基中加入活性炭的目的：减少外植体的褐变8、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高则有利于根的形成:其比值低则有利于芽的形成。
9、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为"J兑分化_"10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行（高压蒸汽）灭菌,而要进行过滤方法灭菌。
11、确定花粉发育时期最简捷有效的方法是压片镜检法。
12、液体培养基和固体培养基最主要的区别是：固体培养基中添加了琼脂粉，而液体培养基一般不添加。
13、细胞悬浮培养的方法有分批培养和连续培养。
14、外植体灭菌常用的消毒剂是酒精，使用浓度一般为70—75%。
15、具有防止褐变作用的维生素是抗坏血酸（维生素c）。
16、常用防止褐变的试剂有有机酸、硫代硫酸钠。
17、组培中按照污染的对象分，常见的污染类型有细菌性污染_、真菌性污染。
18、在使用超净工作台进行无菌操作前，应先将借种器械放进超净工作台，并打开紫外线灯和风机组工作进行消毒20分钟左右。
19、配制培养基调节pH值时常用氢氧化钠溶液和稀盐酸溶液。
20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液，在使用时，若需要配制1/2 L的培养基，则需要吸取母液的量是5ml。
第1章复习测试卷二、填空题1．根据外植体的不同，一般可以将植物组织培养分为：植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养。
2．在植物组织培养中，外植体脱分化后，再分化形成完整植株的途径有两条：一是器官发生途径，二是胚状体途径。
3．通过器官发生再生植株的方式有三种：第一种最普遍的方式是先分化芽，再分化根；第二种是先分化根，再分化芽，这种方式中芽的分化难度比较大；第三种是在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽，再通过维管组织的联系形成完整植株。
4．体细胞胚发生的途径可分为间接途径和直接途径。
5．植物组织培养的整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初。
一个多世纪来，植物组织培养的发展大致可以分为探索、奠基和迅速发展三个阶段。
6．在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说推动下，1902年德国植物生理学家G．Haberlandt提出了细胞全能性的设想，并成为用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的第一人。
7．White、Gautheret和Nobecourt在1939年确立的植物组织培养的基本方法，成为以后各种植物组织培养的技术基础，他们三人被誉为植物组织培养的奠基人。
8．1958年英国人Steward等将胡萝卜髓细胞培养成为一个完整植株，首次通过实验证明了植物细胞的全能性，成为植物组织培养研究历史中的一个里程碑。
9．1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功，开创了植物原生质体培养和体细胞杂交工作。
同年Morel培养兰花的茎尖，获得了快速繁殖的脱毒兰花。
其后，国际上相继把组织培养技术应用到兰花的快速繁殖上，建立了“兰花工业”。
10．花药培养在20世纪70年代得到了迅速发展，获得成功的物种数目不断增加，其中包括很多种重要的栽培物种。
烟草、水稻和小麦等的花培育种在我国取得了一系列举世瞩目的成就。
三、是非题（×）1．从理论上说，所有的植物细胞与组织材料都能培养成功，其培养的难易程度基本相同。
