猪伪狂犬病的研究进展
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猪伪狂犬病病毒诊断与检测方法研究进展作者:刘霞,崔燕,王慧等来源:《兽医导刊》 2018年第1期猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的猪、牛等多种家畜和野生动物的一种急性传染病,以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状(猪除外)。
该病主要引起种猪呼吸系统及生殖系统疾病和仔猪神经系统疾病,成年猪呈隐性感染,仔猪病死率100%。
在世界上,已有 40 多个国家发生此病,发达国家已将本病列为重点防治疾病之一;在我国,自1947 年首次报道后,已有20 多个省、市、自治区相继报道过本病,2012 年以来PRV 的持续性感染和潜在的免疫抑制,更是给我国猪病防治和疫病净化工作带来了很大的困难。
国外一些专家认为,全世界由PR造成的损失每年可达几十亿美元,仅低于口蹄疫(FMD)和猪瘟(CSF)。
近年来,PR 发生报道数急剧上升,目前该病尚无有效的药物治疗。
疫苗接种是预防控制PR 的主要措施之一,就目前来看,PR 的传统疫苗已经相对成熟,但现代疫苗的研究尚处于研究阶段。
因此,提高PR 的诊断技术是防控该病的先决条件,只有早发现、早防控才能更加有效地降低PR 的发生,避免养猪业遭受巨大的经济损失。
随着免疫学和分子生物学技术的日渐完善,相关的血清学方法和分子生物学方法也不断完善。
为此,本文对临床诊断、病原学、血清学及分子生物学等主要方法的研究进展和应用情况进行综述,以期为PR 临床诊断与检测技术提供参考和借鉴。
一、临床诊断临床诊断就是根据流行病学特点、典型的临床症状及病例剖检等初步诊断。
感染PR 的病猪临床症状因年龄和毒株毒力不同而有所差异。
其中哺乳仔猪最为敏感,病死率可达100%,主要临床表现为高热、排稀便、呕吐- 共济失调、四肢呈游泳状等神经症状,最后昏迷死亡;成年猪多数不表现临床症状,或仅出现体温轻微升高;怀孕母猪常发生流产,产木乃伊胎或死胎。
二、病原学诊断病原学诊断主要包括三种方法,即病毒分离、病毒接种及动物感染,被称为诊断PRV 的黄金标准,但存在敏感性较差的问题。
此j政丛27猪伪狂犬病(Porcine pseudorahies, PK)是由猪伪狂犬病病毒(Pseu<Wabies virus,P R V)所引起的一种急性传染病c I W V感染不同年龄的猪临床症状不同,仔猪出现高热、腹泻、鸣叫,四肢划水样 姿势等精神症状,死亡率较高;公猪表现 为睾丸炎,精液品质下降;成年猪及育肥 猪初期有高热、呼吸闲难症状耐过后通 常呈隐性感染;怀孕母猪发生流产、产死 胎,木乃伊胎;猪伪狂犬病是(M E通报 疫病,该病自上个世纪八十年代发现至 今,一直是全球范围内猪的重要传播疫 病。
1病原学概述1.1病毒结构V属于疱疹病毒科,a-疱疹病 毒亚科,线性l)N A双股病毒病毐粒子呈圆形或椭圆形,由核心、二十面体核衣 壳、旗膜构成,'德膜表面有呈放射状排列 的纤突长约8~10纳米P R V基因组大 小约为150 kb.编码7C M00种病#蛋1'1,主要包括衣壳蛋白、旗膜糖蛋广丨以及 各种酶。
病毒粒子直径约为1丨〇〜150纳 米,位于胞浆内带囊膜的病毒粒子直径 为丨50〜180纳米,带囊膜的完整病毒粒 子直径为丨80纳米P l i V只有一个血清 型但不同毐株之间毒力有所差异。
2流行病学猪伪狂犬病发病无明显季节性但以 春冬较为寒冷的季节多发,PKV nf感染多种动物如牛、羊、犬、猫、鼠等,但猪是 其病毒的储存宿主,2018年我「_首次报 道了人感染丨病例:猪伪犴犬病传播方式多样,怀孕母猪感染该病毐时,病毐 可通过胎盘屏障感染胎儿;健康猪接触 病猪的鼻液、丨丨腔分泌物之后可被感染,也可因污染的词料或词养用具被感染;健康猪接触牛、羊、猫、鼠等带毒动物也 可被感染I W V在我国难以得到净化的 主要原闪有:传播途径多样、免疫不到 位、野毒株正在发生变异、P K V可潜伏 感染猪群3基因组结构及功能3.1基因组概况P K V基因组为线状双链D N A大小约为150 kb,G+C含量为74%。
综述与专论 | Summarize and reviews152018.5·猪伪狂犬病的病原为猪伪狂犬病毒,任何年龄和品种的猪都可以感染该种疾病。
健康母猪感染该种疾病后常常引起母猪流产,产下死胎僵尸胎。
仔猪感染该种疾病后,会出现明显的神经症状,感染率和死亡率都很高。
成年猪通常情况下不表现出任何临床症状,常呈隐性经过,成为养殖场最危险的传染源,严重影响到猪正常生产、生长。
最近几年,随着猪养殖产业不断向着集约化和规模化方向发展,我国养猪产区猪伪狂犬病的报告病例呈现升高趋势,常常因为防治不及时,给养殖户造成巨大经济损失。
因此做好各种疾病防护工作就显得十分重要了。
1 流行病学伪狂犬病毒可以感染多种家畜和野生动物,各个年龄的猪牛均可感染该种疾病,而猪是该种病毒的最终宿主和主要传染动物,尤其是成年猪感染该种病毒后,通常情况下不会表现出任何临床症状,呈现隐性感染[1]。
在自然条件下,伪狂犬病病毒还可以感染羊、犬、猫、鼠、兔、水貂、狐狸等动物。
猪伪狂犬病毒主要通过消化道和呼吸道传播,也可以通过配种、输精、胚胎直接传播。
妊娠母猪通过胚胎传播所造成的危害是致命的,这也是导致母猪在妊娠中后期出现流产的主要原因。
当健康猪接触到被带毒猪污染的垫料饲料饮用水后,也可以感染该种疾病。
2 临床症状患病猪临床症状和患病猪年龄以及毒株毒性有着较大差异性,仔猪感染该种疾病后,临床症状最为明显,15日龄以内的仔猪常常表现最急性型经过,整个发病过程不会超过72 h,病死率很高,在临床上主要出现体温升高、腹泻、呕吐,共济失调、角弓反张等神经症状,最后昏迷衰竭而死。
仔猪群中感染该种疾病后,会在未来的3~7 d内进入发病高峰期。
发病率和死亡率呈现逐渐升高趋势。
断奶仔猪发病症状相对较为缓和,但也会引起死亡,主要表现为神经症状和腹泻症状。
育肥猪症状较轻通常表现为高热、食欲下降、呼吸急促、偶尔会出现神经症状,通常不会出现死亡。
成年猪感染该种疾病后,不表现出任何临床症状,或者表现为体温稍微升高。
养殖技术-猪伪狂犬病病毒新流行变异毒株的研究进展2011年以来,猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株在中国广泛流行,造成了严重的经济损失。
免疫猪群发病是本次猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)疫情的主要特征,这使中国对该病的防控面临新的挑战。
而对中国PRV新流行毒株的研究有助于对猪伪狂犬病有效的防控,最终达到净化的目的。
本文就2011年以来PR疫情的流行病学,新流行毒株的毒力变化、免疫原性变化、分子生物学特性以及新型疫苗的研发做了综述。
1 2011年以来猪伪狂犬病的流行概况2011年以来,PR在中国部分地区暴发流行。
感染PRV后,哺乳仔猪出生后第3d 发病,表现为精神沉郁、不食、呕吐、腹泻、呜叫、兴奋、昏睡、四肢痉挛、呼吸衰竭而死亡,发病率为100.0%,死亡率高达95.0%左右;断奶仔猪表现为呼吸困难、咳嗽、流涕、腹泻,呕吐,神经症状等,发病率为20.0%~40.0%,死亡率可达30.0%左右;成年猪出现呕吐、腹泻、咳嗽,并伴有死亡;生产母猪表现为不育、返情率高、屡配不孕;妊娠母猪大批流产,产死胎或木乃伊胎。
根据农业部兽医诊断中心、哈尔滨兽医研究所、上海兽医研究所、南京农业大学、河南农业大学等单位的相关报道,本文将近年来的PR流行区域绘制成图,近年来中国PR流行区域主要集中在东北、华中、华北及华东地区,涉及沿海地区或近沿海地区17个省份(直辖市),且多数为养猪密集地区。
由于疫情涉及到很多已常规免疫PRV活疫苗的规模化猪场,因此人们推测流行毒株可能已经发生变异,导致部分疫苗株缺乏对PRV变异毒株的保护力。
流行病学调查显示,2011年以来,中国PRV野毒阳性率呈逐年上升的趋势。
解伟涛等统计了从2006年到2014年猪伪狂犬野毒gE抗体的阳性率,发现从2006年到2011年间,gE阳性率呈逐年下降趋势,从24.8%降至6.8%,2011年后,gE 抗体阳性率急剧上升,其中2014年血清阳性率达39.6%。
疫病防制LIVESTOCKANDPOULTRYINDUSTRYNo.11,2017猪伪狂犬病的研究进展任维广,郭继光(山西省太谷县畜牧兽医中心,山西太谷030800)摘 要:伪狂犬病属于急性病毒性传染病,易感畜种多,其中,以猪最易感,发病最为严重,死亡率高。
猪是伪狂犬病毒的主要宿主,也是其重要传染源。
猪场一旦爆发此病,两周龄内患病仔猪死亡率高达100%,临床多表现为精神沉郁、厌食、持续高热、共济失调、震颤等。
成年猪一般不会发病,但会终身携带并持续向外界排毒,加大了控制和根除猪伪狂犬病(PR)的难度。
就PR的基本情况、诊断方法、防治措施等相关内容和研究进展进行综述。
关键词:猪;伪狂犬病;综述中图分类号:S858.28 文献标识码:B DOI:10.19567/j.cnki.1008-0414.2017.11.021收稿日期:2017-10-24 猪伪狂犬病(PR)最早被发现并报道是在20世纪初,曾席卷整个欧洲地区,造成了巨大经济损失。
1947年,我国首次在猫身上分离到了该病病毒,并开始快速传播,2011年,我国出现了差异巨大的变异毒株,对我国的畜牧业尤其是养猪业造成巨大威胁。
目前,传统的PR已经被大部分欧洲发达国家所根除,但在我国仍频繁发生,尤其是还混杂有变异毒株的存在,根除难度大,如何研制出更加高效的基因疫苗、阻止病毒的肆意传播尤为重要。
! 病原猪伪狂犬病病毒(PRV)属于疱疹病毒,直径大小为110~150nm,其本质是由DNA(大小约为150kb)和核衣壳共同构成。
目前,PRV只存在一种血清型,但毒力存在强弱之分,存在变异株[1]。
衣壳表面覆有蛋白质囊膜,存在8种主要编码病毒的糖蛋白,介导病毒的侵染、扩散、融合等过程,也是重要的抗原识别靶位。
例如gB可以激发机体的补体系统,是PRV最为保守的主要抗原成份之一,一旦缺失,PRV将无法与细胞发生融合,失去在细胞之间相互传递的功能。
抗gD产生的抗体是最重要的抗体,gC在激发非依赖性补体系统的同时还可以激发细胞免疫应答,这二者的缺失会降低PRV的感染力。
猪伪狂犬病的研究进展
作者:常凯朱邵伟隋昶升
来源:《湖北畜牧兽医》2013年第05期
摘要:猪伪狂犬病是一种常见的猪传染病,给养殖业造成了极大的经济损失,就猪伪狂犬病的流行趋势及特点,简要介绍。
关键词:猪伪狂犬病;研究进展
中图分类号:S811.7 文献标识码:B 文章编号:1007-273X(2013)05-0067-02
中国是传统的养猪大国,养猪数量位居世界前列。
但长期以来以散养为主,缺乏统一的管理,规模化、集约化养殖更是起步较晚,与世界先进水平相比还存在较大的差距,特别体现在饲养管理水平和动物疾病防治方面。
从某种意义上而言,中国是世界第一养猪大国,同时也是世界猪病第一大国,每年因传染病造成的经济损失高达几亿元甚至更多[1]。
猪伪狂犬病在猪传染病中占据的重要地位,给养猪业造成了极大的威胁。
本文将结合传染病的发展趋势,对猪伪狂犬病做简要介绍。
1 猪伪狂犬病的流行特征
猪伪狂犬病(Porcine pseudorabies PR)是由猪伪狂犬病病毒引起的一种高度接触性传染病,在猪场发病率极高。
它的主要宿主是猪,健康猪与病猪、带毒猪直接接触可感染本病,死亡率高达100%。
猪伪狂犬病病毒抵抗力极强,可在健康猪体内长期潜伏,在机体受到体内或外界因素的刺激后,病毒可被重新激活从而造成散毒,造成疾病的传播。
感染病毒的怀孕母猪极易出现流产,产死胎、木乃伊胎等现象,出生的仔猪具有明显的神经症状,出现运动失调等现象,如不及时救治,死亡率达100%[2]。
2 猪伪狂犬病病原学特性
猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)属于疱疹病毒科甲型疱疹病毒亚科,为线性双股DNA,其病毒粒子呈球形或卵圆形,直径在170 nm左右,有纤突,纤突呈放射状方式排列,对外界环境具有极强的抵抗力,可存活1~2个月,对火碱、碘制剂等化学制剂较为敏感,可用此类物质进行环境消毒。
目前国际上对该病以进行了深入研究,并对其部分片段进行了复制与克隆,截至目前,至少有11个片段已经成功鉴定,并对其进行了功能分析。
3 猪伪狂犬病的诊断技术
伪狂犬病病毒侵入动物机体后,缺乏特征性眼观病变,主要表现为上呼吸道黏膜及扁桃体出血水肿,胃肠黏膜可见卡他性或出血性炎症。
不同年龄段的猪发病症状亦不相同。
仔猪主要表现为神经性症状,嗜睡、呕吐等,3~5 d内为死亡高峰。
母猪症状不明显,表现为一过性。
仅根据临床症状及流行病学特点很难作出诊断,确诊需要借助实验室诊断技术,目前主要有以下几种方法。
(1)病毒中和试验。
是病毒性疾病诊断的经典方法,同时也是世界上多数国家检测PR 的法定方法之一[3]。
但是由于该法操作繁琐,工作量大,且受技术等外部条件的限制,给实际应用带来一定的困难。
(2)乳胶凝集试验。
该方法具有操作简单,实用,同时敏感性与特异性较强,主要用于猪伪狂犬病的筛选,应用前景比较广阔。
(3)免疫荧光试验。
通过采集病猪的样品,经细胞培养后,应用电镜对采自不同部位的样品进行检测,为我国目前使用广泛的一种检测方法。
(4)琼脂扩散试验。
此法受外界环境因素影响较小,且有操作简便、特异性强等优点,但敏感性不高,适合基层和大型猪场使用,不适用于大规模推广。
(5)PCR技术。
PCR技术是一种新型的检测方法,具有快速、敏感性强的优点,其问世后得到了广泛应用。
从病料中提取DNA,通过该技术成功检测到了该病毒。
4 猪伪狂犬病难以净化的原因
导致猪伪狂犬病难以净化的原因有多方面因素,主要表现在以下几点:一是多种病原菌混合感染,加之临床症状不明显,极易造成误诊,给确诊带来了一定的困难[4]。
二是由于药物滥用,导致动物机体对药品敏感性降低,同时影响动物机体机能造成免疫抑制,降低了对该病毒的抵抗力。
三是养殖观念落后,对动物传染病的预防不够重视,大部分养猪户待猪发病后才开始进行治疗,从而错过了治疗的最佳时机。
5 综合防治
目前对于该病尚无有效治疗药物,主要以免疫预防为主。
该病发生时应及时将发病猪与健康猪隔离,并对周围环境进行消毒,若条件允许可设置隔离区[5]。
对未发病猪可进行弱毒苗接种,对已发病猪可注射高免血清,同时注意给患猪及时补充体液。
6 前景与展望
鉴于该病目前尚无有效治疗药物,接种猪伪狂犬病疫苗是预防和控制该病根本措施。
现已成功研制出多种弱毒疫苗,对该病的预防起到了积极作用,但是也存在一定的隐患。
为更根本的净化该病,研制新型的疫苗,比如说病毒载体重组疫苗和基因工程疫苗,相信在不久的将来随着新型疫苗的应用,将会为净化该病起到更为积极的作用。
同时,随着PCR商业化进程的进一步加大,多重PCR诊断技术应用也越来越广泛。
将来的多重PCR诊断方法,应该着眼于构建多重的检测系统,包括一系列临床和流行病学相关的病原体的检测、鉴定等,从而为传染病的净化提供更为有利的工具[6]。
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