甲硝唑片微生物限度检查方法确认方案

检验前的准备
一、实训资料
〔一〕检验药品
〔1〕检验药品的名称：甲硝唑片。

〔2〕检验药品的3〕检验药品的规格、批号、包装及数量：根据药品包装确定，并记录有关情况。

〔二〕质量标准
检验依据：?药典?〔2021版〕二部213页“甲硝唑片〞：?药典?〔2021版〕四部通那么0931“溶出度与释放度测定法〞；?药典?〔2021版〕四部通那么0401“紫外-可见分光光度法〞。

本品溶出度采用第一法〔篮法〕为测定方法，按照紫外-可见分光光度法，在277nm的波长处测定吸光度，按C6H9N3O3的吸收系数〔%1
E〕
1cm 为377计算每片的溶出量。

限度为标示量的80%，应符合规定。

二、实训原理
溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。

凡检查溶出度的制剂，不再进行崩解时限检查。

药物只有固体制剂中的活性成分溶解之后，才能为机体吸收。

溶出度试验能有效地区分同一药物制剂生物利用度的差异，是片剂质量控制的一个重要指标。

甲硝唑的溶解度大小、辅料的亲水性程度和制片工艺都会影响制剂的溶出度，甲硝唑溶出度测定采用转篮法。

三、仪器、试药的准备及试液的配制
1仪器的准备
溶出仪、量筒〔10mL 、1000mL〕、紫外-可见分光光度计、溶出杯〔1000mL〕、微孔滤膜〔不大于μm〕、滤器、取样器、分析天平〔感量〕、温度计〔分度值℃〕、超声波清洗仪等。

2试药的准备
甲硝唑片、盐酸。

3试液的制备
〔1〕盐酸溶液的配制此盐酸溶液为溶出介质。

取盐酸〔9→1000〕9mL，加水稀释至1000mL，即得。

解放军总医院第一附属医院
甲硝唑乳膏
微生物限度检查方法验证方案
1 目的
根据《中国药典》2015版草案中的相关规定，建立甲硝唑乳膏的微生物限度检查方法，并对其进行验证，保证其检验方法的科学性，使检验结果准确可靠。

2 范围
本验证方案适用于甲硝唑乳膏的微生物限度检查方法的验证。

3 人员与职责
质量控制人员负责验证方案与报告的起草，并按照批准的方案实施，完成检验相关数据的采集；质量保证人员负责验证方案和报告的审核；质量管理负责人负责验证方案和报告的批准。

4 培训
本方案实施前应对参加验证人员进行培训，并做好培训记录确保进行验证的人员均能熟悉、掌握验证过程。

5 验证方案
5.1 制剂信息
甲硝唑乳膏为甲硝唑加入至以甘油、三乙醇胺、水组成的水相和以硬脂酸、羊毛脂、凡士林组成的油相乳化混匀后的基质中配制而成，有一定的抗菌作用，临床作为抗阿米巴、抗滴虫、抗厌氧菌药使用。

其质量标准中规定应进行微生物限度检查，每1g样品中细菌数不得超过100cfu，霉菌和酵母菌数不得超过100cfu，并不得检出金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。

根据以上特点，本方案中按《中国药典》2015版草案《非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法》（1105）和《非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法》（1106）中相关要求，决定采用稀释剂稀释法消除抑菌性成分对结果的影响，制备供试品溶液；采用平皿法中的倾注法对供试品中的需氧菌总数及霉菌和酵母菌总数进行计数，根据草案对其质量标准中规定的金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌进行检查，并对所选用的计数和检查方法进行验证。

实验四甲硝唑片的含量测定一、目的要求1．掌握紫外分光光度法测定甲硝唑片的原理及操作，并能进行有关计算。

2．熟练使用紫外分光光度计。

3．了解排除片剂中常用辅料干扰的操作。

二、实验原理根据甲硝唑能产生紫外吸收的性质，将本品用盐酸溶液配成稀溶液，在甲硝唑的最大吸收波长处测定吸收度，根据朗伯－比尔定律，用吸收系数法计算含量。

三、实验步骤1. 操作取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于甲硝唑50mg），置100mL量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约80mL，，微温使甲硝唑溶解，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5mL，置200mL量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀。

取该溶液置1cm厚石英吸收池中，以相同盐酸溶液为空白，在277nm波长处测定吸收度，按C6H9N3O3的吸收系数为377计算，即得。

《中国药典》（2005）规定本品含甲硝唑（C6H9N3O3）应为标示量的93.0%~107.0%。

2. 计算根据朗伯－比尔定律：A=ECL则：C=AA= E⨯L377⨯LA1⨯⨯V⨯D⨯平均片重故：每片甲硝唑的量（g）=w式中，V：供试品溶液原始体积；D：稀释倍数；W：称取供试品的量（g）甲硝唑片占标识量的百分含量可按下式求得：A1⨯⨯V⨯D⨯平均片重标示量%=⨯100%w标示量四、注意事项1. 本次实验是用紫外分光法进行含量测定，故应选择可见—紫外分光光度计中的氢灯为光源，采用石英吸收池进行测定。

2. 测定步骤一般须经仪器预热、并调节各种开关至工作处；调拨测定所需波长；经校正仪器后，用与供试液相同的溶剂作空白测试，调其透光率为100%（吸收度为零）；再测定供试液的吸收度；关闭电路；计算（仪器的具体操作可详见各型号的说明书）。

3. 在仪器使用中，暂停测试时，应尽可能关闭光路闸门，以保护光电管，勿使受光过久而遭损坏。

4. 吸收池在测定前，应用被测试液冲洗2~3次，以保证溶液的浓度不变。

甲硝唑片微生物限度检查方法确认方案产品名称：甲硝唑片产品编号：验证项目：微生物限度文件编码：验证时间：年月日～年月日确认方案起草你的签名表明你已清楚了解本方案及附件内容，充分理解并认可本方案。

确认方案审核确认方案批准目录1.简介 (1)1.1.验证目的 (1)1.2.适用范围 (1)1.3.依据的法律法规 (1)2.概述 (1)3.验证小组组成及职责 (1)3.1.验证小组成员及方案会审 (1)3.2.验证小组职责 (1)3.3.人员确认 (2)3.4.验证培训 (2)4.验证内容 (2)4.1.验证准备 (2)4.2.菌液制备 (4)4.3.供试液制备 (4)4.4.计数方法适用性试验 (5)4.5控制菌检查方法的验证：大肠埃希菌 (6)5偏差及结果评估 (7)6验证结论 (7)1.简介1.1.验证目的验证所采用的需氧菌、霉菌及酵母菌计数方法和控制菌检查方法适合该药品的微生物限度检查。

1.2.适用范围适用于本厂生产的甲硝唑片（规格：0.2g）的微生物限度检验方法的验证。

1.3.依据的法律法规《中国药典》2015年版四部2.概述根据《中国药典》2015年版四部要求在建立药品的微生物限度检查法时，应进行需氧菌、霉菌及酵母菌计数方法和控制菌检查方法的验证，以验证所采用的方法适合于该药品的需氧菌、霉菌及酵母菌数的测定和控制菌检查；不同检品、不同的仪器或材料等均可能对检验结果产生影响，当检品有抑菌性时，会掩盖已受检品污染的事实或造成低于实际污染水平的检测结果；选用不适当的培养基，其促生长能力不符合要求，也会造成类似的后果；若药品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时，检验方法应重新验证；因此为了使微生物限度检验方法的结果准确可靠，需要对检品的具体检验方法进行验证，以证明其对检品的适用性。

3.验证小组组成及职责3.1.验证小组成员及方案会审您的签名表明您已审阅并同意本验证方案，并保证按文件要求实施验证，观察并做好验证原始记录，对实施验证的结果负责。

非无菌产品微生物限度检查方法适用性试验文件文件名称人工牛黄甲硝唑胶囊微生物限度检查方法适用性试验（2015版）文件编号TS-VD-550-01重庆天致药业股份有限公司2018年人工牛黄甲硝唑胶囊微生物限度检查方法适用性试验方案试验报告的起草：日期：试验报告的审核：日期：试验报告的审核：日期：试验报告的批准：日期：1.概述通过试验以确认所采用的方法适合于该药品的需氧菌、霉菌和酵母菌的测定，确认所采用的方法适合于该药品的控制菌的检查，根据样品的特性制定检验方法和检验条件，按制定的方法进行试验，根据试验结果判断是否符合试验标准。

若符合，按试验的方法和条件进行药品的微生物限度检查；若不符合，重新建立制订检验方法和检验条件，再进行试验，直至试验结果符合设立的试验标准。

2.目的:确认所采用的方法适合该药品的需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌的测定。

照此检查法和检验条件进行供试品需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌检查能保证检验结果的准确、可靠。

3.职责3.1.QC：负责起草试验方案和报告，并负责本方案的实施。

3.2QC主管、质量部长：负责试验方案、试验报告的审核。

3.3.质量授权人：负责方案、偏差和报告的最后批准。

4.适用范围:适用于本公司生产的人工牛黄甲硝唑胶囊微生物限度检查：微生物计数法和控制菌检查法。

5.培训:在本方案实施前，已对方案实施过程中涉及人员进行培训，以保证方案顺利实施，并做好培训记录，培训记录见附表1。

6.试验条件6.1.供试品规格：批号：6.2.培养基及试剂培养基名称培养基批号生产厂家6.3.试验用菌株菌种名称菌种编号菌种来源6.4.检验仪器及相关设备仪器名称仪器型号仪器厂家7.计数方法适用性试验7.1.需氧菌总数及霉菌和酵母菌计数方法适用性试验7.1.1菌液制备7.1.1.1接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌的新鲜培养物至100ml胰酪大豆胨液体培养基中，置30～35℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，制成适宜浓度的菌悬液，备用。

甲硝唑检验内容操作方法甲硝唑是一种常用的药物，可用于治疗细菌和原虫感染。

甲硝唑检验主要用于药物的质量控制和药效评估。

下面是甲硝唑检验内容和操作方法的详细介绍：一、甲硝唑的化学性质与性质检验：1. 甲硝唑是一种白色到浅黄色结晶性粉末，易溶于水和乙醇，微溶于丙酮和氯仿，几乎不溶于醚。

通过观察甲硝唑的颜色、结晶形态和溶解性，可以初步判断其质量。

2. 甲硝唑具有较强的氧化性，可与还原剂发生反应。

药物样品中的杂质可能与甲硝唑发生氧化反应，降低其药效。

通过测定甲硝唑的含氧量，可以评估其氧化性和纯度。

二、甲硝唑的含量检验：1. 含量检验是甲硝唑检验中非常重要的一项内容。

可以使用高效液相色谱(HPLC)等检测方法，来测定甲硝唑的含量。

首先，准备一定浓度的甲硝唑标准溶液作为对照，然后将样品溶解在适量的溶剂中，并通过色谱柱进行分离与检测。

根据对照品与样品的峰面积比较，可以确定样品中甲硝唑的含量。

2. 另一种常用的含量检验方法是紫外分光光度法。

该方法通过测定甲硝唑在一定波长下的吸光度，来计算其含量。

首先，将甲硝唑样品溶解在适量的溶剂中，然后使用紫外分光光度计测量样品在特定波长下的吸光度。

通过建立标准曲线，可以计算出样品中甲硝唑的含量。

三、甲硝唑的溶解度检验：溶解度检验是评估甲硝唑质量的一个重要指标。

可以通过测定甲硝唑在不同溶剂中的溶解度，来评估其溶解性。

首先，将一定量的甲硝唑样品加入不同的溶剂中，并用摇床加热摇匀，待其全部溶解后，采用适当的方法（例如静态法或动态法）测定甲硝唑的溶解度。

通常，溶解度越高表示甲硝唑的纯度越高。

四、甲硝唑的稳定性检验：甲硝唑的稳定性检验主要通过进行加速试验来评估。

将甲硝唑样品分别暴露在不同条件下，如高温、高湿度、氧化剂等环境下，然后定期进行质量评估。

通过观察甲硝唑的外观、含量和溶解度的变化，可以判断其稳定性和质量持久性。

五、甲硝唑的微生物限度检验：微生物限度检验是用来评估甲硝唑样品是否存在细菌、真菌和酵母等微生物污染。

甲硝唑的质量检测方案一、引言甲硝唑是一种重要的抗感染药物，用于治疗多种细菌和寄生虫感染疾病。

为了确保甲硝唑的质量符合标准要求，制定和实施一个可靠的质量检测方案是至关重要的。

本文将介绍甲硝唑的质量检测方案，以确保其合格性和安全性。

二、原料检验甲硝唑的原料检验是确保其制备过程中的原料符合质量标准的关键步骤。

以下是甲硝唑原料检验的主要内容：1. 外观检查：对甲硝唑的外观进行全面检查，包括颜色、形状、气味等指标，确保没有明显异常。

2. 质量分析：采用适当的分析方法，如高效液相色谱法（HPLC），对甲硝唑进行定性和定量分析，确保药物的纯度和含量达到标准要求。

3. 杂质检测：使用适当的杂质检测方法，如气相色谱法（GC），检测甲硝唑中的有机溶剂、重金属、水分等杂质，保证药物的纯净度和安全性。

三、制剂检验甲硝唑的制剂检验是确保其制备过程中的各个环节和质量标准符合要求的重要环节。

以下是甲硝唑制剂检验的主要内容：1. 溶解度测定：用适当的溶剂测定甲硝唑的溶解度，确认药物在规定条件下的溶解度是否符合标准要求。

2. 含量测定：采用适当的方法，如紫外分光光度法，测定甲硝唑制剂中的有效成分含量，确保药物的质量符合标准。

3. 储存稳定性检验：将甲硝唑制剂置于不同贮存条件下，如高温、高湿等，一定时间后测定药物的含量变化，确认其稳定性和储存条件要求。

四、质量控制点检验为了进一步确保甲硝唑的质量，设立一系列质量控制点进行检验是必要的。

以下是甲硝唑质量控制点检验的主要内容：1. 外观检查：在药物生产过程的关键环节，如原料投料、反应过程中，对甲硝唑的外观进行检查，确保无异常情况发生。

2. 温度控制：监测甲硝唑制剂生产过程中的温度变化，确保生产温度符合要求，避免因温度过高或过低导致药物质量问题。

3. 反应时间控制：控制甲硝唑制剂的反应时间，以确保药物在反应过程中的充分反应，达到预期效果。

4. 成品检验：对甲硝唑成品进行全面检查，包括外观、含量、溶解度等指标，确保最终产品符合质量标准。