第十四章 维生素类药物的分析
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十四维生素类药物的分析VBPPT课件
1.原理
维生素B1在碱性溶液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，硫色素溶 于正丁醇（或异丁醇）中显蓝色荧光。
6
2019/8/21
CH3 N N
NH2 S CH2CH2OH
HCl
N
CH2 Cl-
CH3
NaOH
CH3
N
NH2 O
H SNa CH2CH2OH
C
N
N
CH2
CH3
-H2O
CH3 N N SNa CH2CH2OH
17
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20
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三、含量测定
（三）硫色素荧光法（USP所采用的方法）
1.原理 维生素B1在碱性溶液中被铁氰化钾氧化成硫色素，用异 丁醇提取后，在紫外光(λex365m)照射下呈现蓝色荧光 (λem435m)。通过与对照品比较荧光强度，即可求得 供试品含量。
ChP2015收载有维生素B1及其片剂和注射液。
2
2019/8/21
一、结构与性质
（一）结构
H3C
N
2 34
N1 6 5
NH2 S 21 5 N34
CH2
CH3
OH Cl , HCl
氨基嘧啶环
亚甲基
噻唑环
季铵
3
2019/8/21
一、结构与性质
（二）性质
1.溶解性 维生素B1为白色结晶或结晶性粉末，干燥品在 空气中迅速吸收4%的水分。本品在水中易溶，在乙醇中 微溶，在乙醚中不溶，水溶液呈酸性。
4.与生物碱沉淀试剂反应
分子中具有两个杂环（嘧啶环和噻唑环），故可与某些生物碱沉淀试剂 （如碘化汞钾、三硝基酚、碘溶液、硅钨酸）反应生成组成恒定的沉淀， 可用于鉴别和含量测定。
维生素B1在碱性溶液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，硫色素溶 于正丁醇（或异丁醇）中显蓝色荧光。
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CH3 N N
NH2 S CH2CH2OH
HCl
N
CH2 Cl-
CH3
NaOH
CH3
N
NH2 O
H SNa CH2CH2OH
C
N
N
CH2
CH3
-H2O
CH3 N N SNa CH2CH2OH
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2019/8/21
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三、含量测定
（三）硫色素荧光法（USP所采用的方法）
1.原理 维生素B1在碱性溶液中被铁氰化钾氧化成硫色素，用异 丁醇提取后，在紫外光(λex365m)照射下呈现蓝色荧光 (λem435m)。通过与对照品比较荧光强度，即可求得 供试品含量。
ChP2015收载有维生素B1及其片剂和注射液。
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2019/8/21
一、结构与性质
（一）结构
H3C
N
2 34
N1 6 5
NH2 S 21 5 N34
CH2
CH3
OH Cl , HCl
氨基嘧啶环
亚甲基
噻唑环
季铵
3
2019/8/21
一、结构与性质
（二）性质
1.溶解性 维生素B1为白色结晶或结晶性粉末，干燥品在 空气中迅速吸收4%的水分。本品在水中易溶，在乙醇中 微溶，在乙醚中不溶，水溶液呈酸性。
4.与生物碱沉淀试剂反应
分子中具有两个杂环（嘧啶环和噻唑环），故可与某些生物碱沉淀试剂 （如碘化汞钾、三硝基酚、碘溶液、硅钨酸）反应生成组成恒定的沉淀， 可用于鉴别和含量测定。
药物分析维生素类药物的分析
在方法验证的基础上，可构建维生素类药物分析的评价指 标体系，包括定量限、检测限、回收率、重复性、稳定性 等指标，以全面评价分析方法的性能。
持续改进方向和目标设定
持续改进方向
针对维生素类药物分析过程中存在的问题和 不足，可进一步改进样品前处理方法、优化 分析条件、提高检测灵敏度等，以不断提高 分析结果的准确性和可靠性。
数据处理和结果表达技巧分享
数据处理
对HPLC和UV-Vis法得到的数据进行整理、归纳和统计 分析，包括峰面积、保留时间、浓度等参数的计算和 处理。
结果表达
将分析结果以图表形式呈现，如色谱图、标准曲线图、 含量分布图等，使结果更加直观、易于理解。同时，对 分析结果进行解释和说明，提出改进意见和建议。
在选择维生素类药物的标准品时，应确保其 纯度高、稳定性好，且具有代表性。同时， 应关注标准品的来源和溯源性。
使用注意事项
在使用标准品时，需按照规定的条件进行保 存和使用，避免污染和降解。此外，应定期 对标准品进行复验和更新。
检测方法验证及评价指标体系构建
要点一
检测方法验证
要点二
评价指标体系构建
为确保维生素类药物分析方法的准确性和可靠性，需进行 方法学验证，包括专属性、线性、范围、准确度、精密度 等指标的考察。
质量控制体系建立及实施情况介绍
质量控制体系
为确保维生素类药物分析结果的准确性和可靠性，需建立全面的质量控制体系，包括样 品采集、前处理、分析测试、数据处理等各个环节。
实施情况
目前，质量控制体系已在多个实验室得到广泛应用，有效提高了维生素类药物分析的准 确性和一致性。
标准品选择与使用注意事项
标准品选择
通过对该维生素类药物的定性、定量分析，评估其质量 稳定性和一致性，为药物研发、生产和监管提供科学依 据。
维生素类药物分析医学课件
维生素类药物分析医学课件维生素是人体必需的一类有机化合物，对于人体各种生理功能和健康保健都有不可或缺的作用。
维生素类药物是以维生素为主要成分的药物。
本文就维生素类药物进行分析，介绍其药理作用、适应症、副作用等相关知识。
一、维生素A类药物维生素A类药物主要成分是维生素A，具有多种生物学作用，如维持视网膜视力、保护上皮组织、维持正常成长及免疫功能等。
常用维生素A类药物包括维生素A软胶囊、维生素A注射液等。
维生素A类药物适应症包括夜盲症、角膜软化症等。
但长期大量摄入维生素A可引起中毒，表现为头痛、皮肤瘙痒、运动不便等症状。
因此，应注意维生素A类药物的正确用法。
维生素B类药物包括维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12等多种成分。
维生素B类药物在人体内起到辅酶的作用，参与糖、脂肪、蛋白质等物质代谢。
常用维生素B类药物包括维生素B1片、硫胺素注射液、维生素B6注射液、维生素B12注射液等。
维生素B类药物适应症包括神经炎、急慢性肝炎、贫血等。
与其他药物混合使用时，可能会发生过敏、头晕、恶心呕吐等不良反应。
维生素D类药物主要成分是维生素D3，具有增加钙吸收、促进骨骼成长等生物作用。
常用维生素D类药物包括维生素D3溶液、维生素D3软胶囊等。
维生素D类药物适应症包括佝偻病、骨质疏松等。
剂量过大时，可能引起高钙血症、软组织钙化等不良反应。
维生素类药物是一类广泛应用的药物，对于人体健康保健有着不可或缺的作用。
然而，使用维生素类药物时应注意药物的正确用法，避免过度、长期使用，避免不良反应的发生。
同时，不应将维生素类药物作为万能药，采取正确的饮食和生活方式才是维持健康的最佳方式。
第十四章维生素类药物的分析AnalysisofVitamines
蓝色
CH2OH
N 50℃
-3H2OCH (CHOH)2 C H
O CHO
OH
O
N
N
H
糠醛
戊糖
鉴别 利用其还原性
硝酸银（银镜） 2.6-二氯靛酚(褪色） 高锰酸钾（褪色） 亚甲蓝（蓝色褪去） 磷钼酸（钼蓝） 斐林氏溶液（红色氧化亚铜）
（1）与硝酸银反应 本品→加水溶解→加硝酸银试液 →银黑色沉淀（ChP、BP采用）
第二法： a、λmax不在326～329nm b、校正与未校正吸收度比较<-15%、>+3%
样品：
醇制KOH/ Et2O/提取 挥散 残渣 溶于异丙醇中
9～15IU/ml
(一)紫外法（三点校正法）
①λmax323－327nm之间 300、310、 325及334nm A300/A325≤0.73，计算A325（校正） a、校正在未校正吸收度≤土3% 以未校正吸收度计算 b、>土3%，以校正吸收度计算
第一节
维生素A的分析
（二） 鉴别 1. Carr-price反应（三氯化锑） 三氯化锑的氯仿液与VA作用产生蓝色 渐变成紫红色
①无水：三氯化锑水解、VA不溶 ②无醇：乙醇能和反应中正碳离子作用
第一节
维生素A的分析
2.紫外法 本品加无水乙醇－盐酸溶解，立即紫外扫描 326nm单一吸收峰(VA) 水浴加热30s，迅速冷却，再扫描 348、367和389nm三个尖锐吸收峰(去水VA)
Vit B1
Thiamine Hydrochloride
CH3 N NH2 S CH2CH2OH
HCl
N
N
CH2 Cl-
CH3
NaOH
CH3
CH2OH
N 50℃
-3H2OCH (CHOH)2 C H
O CHO
OH
O
N
N
H
糠醛
戊糖
鉴别 利用其还原性
硝酸银（银镜） 2.6-二氯靛酚(褪色） 高锰酸钾（褪色） 亚甲蓝（蓝色褪去） 磷钼酸（钼蓝） 斐林氏溶液（红色氧化亚铜）
（1）与硝酸银反应 本品→加水溶解→加硝酸银试液 →银黑色沉淀（ChP、BP采用）
第二法： a、λmax不在326～329nm b、校正与未校正吸收度比较<-15%、>+3%
样品：
醇制KOH/ Et2O/提取 挥散 残渣 溶于异丙醇中
9～15IU/ml
(一)紫外法（三点校正法）
①λmax323－327nm之间 300、310、 325及334nm A300/A325≤0.73，计算A325（校正） a、校正在未校正吸收度≤土3% 以未校正吸收度计算 b、>土3%，以校正吸收度计算
第一节
维生素A的分析
（二） 鉴别 1. Carr-price反应（三氯化锑） 三氯化锑的氯仿液与VA作用产生蓝色 渐变成紫红色
①无水：三氯化锑水解、VA不溶 ②无醇：乙醇能和反应中正碳离子作用
第一节
维生素A的分析
2.紫外法 本品加无水乙醇－盐酸溶解，立即紫外扫描 326nm单一吸收峰(VA) 水浴加热30s，迅速冷却，再扫描 348、367和389nm三个尖锐吸收峰(去水VA)
Vit B1
Thiamine Hydrochloride
CH3 N NH2 S CH2CH2OH
HCl
N
N
CH2 Cl-
CH3
NaOH
CH3
药物分析-14维生素类药物的分析
§14 维生素类药物的分析·脂溶性维生素：VitA、D2、D3、E、K1等·水溶性维生素：VitB族（B1、B2、B6、B12）、VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺一、维生素A中国药典收载的维生素A是指人工合成的维生素A醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液。
（一）结构与性质1.具有一个共轭多烯侧链的环己烯·具有UV吸收·存在多种立体异构化合物2.不稳定性（1）易发生脱氢、脱水、聚合反应·脱氢维生素A（A2），脱水维生素A（A3）效价低于维生素A ·鲸醇（维生素A醇的二聚体）无生物活性（2）共轭多烯侧链易被氧化维生素A应凉暗处保存，充氮气或加抗氧剂★3.与三氯化锑发生呈色反应4.溶解性不溶于水，乙醇中微溶；易溶于有机溶剂和植物油等（二）鉴别试验1.三氯化锑反应条件: 无水（SbCl3水解），无醇（和碳正离子作用使其电荷消失）。
2.UV法（BP2003）VitA有一个吸收峰，盐酸催化下加热30s生成脱水VitA，有三个吸收峰，且红移（向长波长位移）。
3.TLC法·BP 对照品法（供试品与不同VitA酯类），显色剂：三氯化锑·USP 规定斑点颜色和Rf值，显色剂：磷钼酸（氧化剂）12（三）含量测定 ★1.三点校正法 （1）原理①杂质的吸收在310~340nm 波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；②物质对光的吸收具有加和性。
（2）波长的选择λ1为VitA 的λmax ；λ2、λ3为分别在λ1的两侧各选一点 ①等波长差法——VitA 醋酸酯nm 12340316328=∆λλλλ，、、)2(52.3340316328328A A A A --=（校正）②等吸收比法——VitA 醇33431032576A A A == 334310325325260.4555.2815.6A A A A --=（校正）（3）测定方法①直接测定法（等波长差法）——高纯度维生素A 醋酸酯 Ⅰ核对λmax/329~326max 328改用造化法与规定值比较求否是−→−−→−∈A A nm i λ Ⅱ计算吸收度比及比值差规定吸光度比值-328/A A iⅢ判断差值是否超过±0.02，确定用A 或A 校正%15%3)3%%,15(]%3,%3[32802.032832832802.0计算用改用皂化法＜或＞计算用计算用、计算无超过（校正）（校正）有超过A f f A f A f f A −−−−→−→-+→--∈→+-∈→−−−−→−±±)2(52.3340316328328A A A A --=（校正）%100328328328⨯-=A A A f （校正）Ⅳ求（样品）%11cm E lc AE cm ⨯=)%(%11（样品）·注意：（纯品）（样品）%11%11cm cm E E ≠，c 为混合样品的浓度。
药物分析维生素类药物的分析
国际单位IU=0.344微克维生素Ａ醋酸酯； IU＝0.300微克维生素Ａ醇
换算：1g维生素Ａ醋酸酯相当于：
1106 g 2907000IU 0.344 g / IU
1g维生素Ａ醇相当于：
1106 g 3330000IU 0.300 g / IU
VA1:
2
9'
1
3
8'
4
6
5
7'
5'
6'
4'
三、含量测定 高效液相色谱法，药典收录。
§9.5 维生素E（称为生育酚） 一、结构：苯并二氢吡喃醇衍生物，
CH3
H3C
8
O CH3
1
CH3
CH3
CH3
CH3
H3C C O
5
4
O CH3
名称：消旋α-生育酚醋酸酯（ α-异构体生理活性 最强）
母核：苯骈二氢吡喃衍生物，苯环上有一乙酰化的
酚羟基
侧链：脂肪烷烃 性质：不溶于水，油状，微黄色液体。
VB1分子中含有已成盐的伯胺和季铵基团，在非 水溶液中，在醋酸汞存在下，均可被高氯酸滴定。
溶剂：冰醋酸 / 醋酸汞 指示剂：喹哪定红- 亚甲蓝混合指示液 滴定剂：高氯酸（0.1mol/L) 终点：天蓝色 摩尔比：VB1：高氯酸=1：2 VB1摩尔质量=337.27 滴定度T=0.1×(1/2) ×337.27=16.86mg/ml
E11c%m
0.652 0.010232
1
63.72
IU / g E11c%m 1900 63.72 1900 121068(IU / g) 维生素A的标示含量
标示量%
IU / 丸 标示量
维生素类药物的分析课件
• 测定对象：VA醇
4、测定方法 首先判断用哪个吸收度(A328 or A328(校正)）进行 含量计算。 第一法：供试液浓度为9～15IU/ml，溶剂为环 己烷，在300、316、328、340、360nm五个波 长处测定吸收度。 1）最大吸收波长在326～329nm之间，计算吸 收度比值Ai /A328，并与规定值相减，差值不超过 ±0.02，则用A328计算含量。
S
KOH /乙醇
皂化
液植Vit物A 醋油酸酯甘油 和Vit脂A 醇肪 酸
盐
乙醚提取除去植物油的干扰挥干乙醚 异丙醇
溶解 稀释至9～15IU / ml 于300、310、325、
334nm 处 测Ai
A325校正 6.815A325 2.555A310 4.260A334
f A325(校正) A325 100% A325
氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵 碱)
1. 溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性 2. UV:246nm(盐酸液) 3. 硫色素反应
OHO 硫色素正丁醇 蓝色荧光
4. 碱性：嘧啶环 —— 伯氨，噻唑环 —— 季铵 ❖ 可与酸成盐 ❖ 与生物碱↓→↓ ❖ 含量测定 —— 非水碱量法
二、鉴别试验
1. 硫色素反应（维生素B1专属反应）
5、讨论 1）维生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程
式法推导而来：维生素A醇的吸收度校正公式是用相似 三角形法推导而来。
2）在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸收波 长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的两侧进行测定 。如果仪器波长精度不准确时，会产生较大误差。因此 ，在测定前务必要校正波长，并可用全反式维生素A进 行测定，比较测定结果和比值是否与对照品相符合，以 进一步核对仪器波长是否准确。测定的样品应不得少于 两份。
维生素类药物的分析.ppt
感谢你的欣赏
3
第一节 维生素A的分析
全反式
R : -H -COCH3
维生素A醇 维生素A醋酸酯
-COC15H31 维生素A棕榈酸酯
2019-10-14
感谢你的欣赏
4
一、结构与性质
（一）结构：具有共轭多烯侧链的环己烯
m ax 相对生物效价 顺反异构
维生素A
325.5
100%
全反式
新维生素Aa 328
(
纯
/
)
g）
3330000 1820
2019-10-14
感谢你的欣赏
23
A值的选择：
1、维生素A醋酸酯-第一法（等波长差法）
S 环己烷 9～15IU / ml 溶 液 分 别 于300、316、328、340、360nm 处 测Ai
• 判断 m ax 是否在326～329nm之间
环氧化物
VitA醛
感谢你的欣赏
VitA酸
7
（二）性质
1.溶解性：易溶于有机溶剂和植物油等，不溶于水 2.不稳定性 3.紫外吸收特性 4.与三氯化锑呈色 V itA SbCl 3 蓝 色 紫 红
CHCl3
2019-10-14
感谢你的欣赏
8
二、鉴别试验
（一）三氯化锑反应
V itA SbCl 3 蓝 色 紫 红
脂溶性
S
KO H /乙醇
皂
化
液植 Vit物A 醋 油酸 酯甘油
VitA 醇 和脂肪
酸
盐
水溶性
乙醚提取 除去植物油的干扰挥干乙醚 异丙醇
溶解 稀释至9～15IU / ml 于300、310、325、
维生素类药物的分析-药物分析课件
❖ 具有UV吸收
❖ 存在多种立体异构化合物
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 异维生素Aa
异维生素Ab
m ax
325.5 328 320.5 323
324
相对生物效价
100% 75% 24% 21%
24%
VitA2 VitA3
鲸醇
二、 性质 （一） 共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 紫外线、O2、氧化剂
BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、 含量测定
（一） UV法
立体异构体 氧化产物及光照产物 合成中间体 去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
三点校正法 1. 条件： （1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波 长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
必需的 一种活性物质。 人体不能合成维生素。
脂溶性 VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM
VitPP
一、
维生素A 结构
R : -H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
（一） 为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
f A325(校正) A325 100% A325
A3 2 5校 正
A325
－3%
0
A3 2 5校 正
3%
第一法与第二法的区别
第一法
第二法
测定对象 维生素A醋酸酯 维生素A醇
方法 直接取样，测定 皂化提取，测定
溶剂 环己烷
❖ 存在多种立体异构化合物
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 异维生素Aa
异维生素Ab
m ax
325.5 328 320.5 323
324
相对生物效价
100% 75% 24% 21%
24%
VitA2 VitA3
鲸醇
二、 性质 （一） 共轭多烯侧链 易被氧化
VitA 紫外线、O2、氧化剂
BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、 含量测定
（一） UV法
立体异构体 氧化产物及光照产物 合成中间体 去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
三点校正法 1. 条件： （1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波 长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
必需的 一种活性物质。 人体不能合成维生素。
脂溶性 VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM
VitPP
一、
维生素A 结构
R : -H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
（一） 为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
f A325(校正) A325 100% A325
A3 2 5校 正
A325
－3%
0
A3 2 5校 正
3%
第一法与第二法的区别
第一法
第二法
测定对象 维生素A醋酸酯 维生素A醇
方法 直接取样，测定 皂化提取，测定
溶剂 环己烷
药物分析第十四章维生素类药物的分析
04
0
3%
3%
f
第一节 维生素A的分析
01
02
高效液相色谱法
流动相：正己烷－异丙醇（997︰3） 检测波长：325nm 系统适用性实验考察分离度 ——是否能将维生素A醋酸酯顺式和反式分开
第一节 维生素A的分析
01
02
λmax 618nm～620nm
标准曲线法
三氯化锑比色法
第一节 维生素A的分析
异维生素Aa
323
21%
6－顺
异维生素Ab
324
24%
2，6－顺
天然维生素A主要是反式
可用于鉴别和含量测定
01
与三氯化锑呈色:三氯甲烷+三氯化锑=不稳定的蓝色
02
CHCl3
第一节 维生素A的分析
鉴别实验
Vit A
SbCl3
CHCl3(无水无醇)
蓝色
紫红色
（一）Carr-Price反应
第一节 维生素A的分析
05
三氯化锑比色法
06
小结
Vitamins
Contents
01.
C
单击此处添加文本具体内容
02.
D
单击此处添加文本具体内容
03.
E
单击此处添加文本具体内容
第一节 维生素B1的分析
维生素B1广泛分布于米糠、麦麸和酵母中，具有维持糖代谢及神经传导与消化的正常功能。主要用于治疗维生素B1缺乏症、多发性神经炎及胃肠疾病。
第十四章 维生素类药物的分析
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概 述
维生素维持正常生理功能所必需的、微量营养物质，人体不能合成维生素。必须从外界食物中摄取。
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1
CH3
去水维生素A （A3 anhydroretinol)
第一节 VitA
CH3
CH39
CH3
75
CH3
3
1
CH2OR
8642
CH3
R= H
O
Retinol (Vit A alcohol)
R= C CH3 O
VA acetate
2-Cis Neovitamin Aa R= 4-Cis Neovitamin Ab 2,4-dicis Neovitamin Ac 6-Cis Isovitamin Aa
A 328
A328不校正 A=A328校正
第二法
测定方法
三、第二法——VitA alcohol 皂化法 6/7法
① 样品前处理
酯
水解 OH-
乙醚提取VA醇，洗涤，过滤 蒸去醚
异丙醇溶解残渣
在 300，310，325，334nm处分别测Ai
② λmax应为325nm。
若λmax不在323～327nm之间，则供试品中杂质含量过 高，改为色谱法将未皂化部分纯化后进行测定。
测量吸光度
若λmax不在326～329nm之间，则不能用本法测定，改 为第二法
③ 计算 A ，选择A A328nm
测定方法
λ(nm)
300
316
328
340
360
Aλ/A328nm 0.555 0.907
1
0.811 0.299
A. 若【(Aλ/A328nm)-规定值】≤ (±0.02) —— A328不校正 B. 若【(Aλ/A328nm)-规定值】 有超过 (±0.02)者
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药物分析
第十四章 维生素类药物的分析
维生素类药物的分析
维生素
通俗来讲，即维持生命的物质，是维持人 体生命活动必须的一类有机物质，也是保 持人体健康的重要活性物质。维生素在体 内的含量很少，但不可或缺。
维持人类机体正常代谢功能所必须的一类 活性物质,主要用于机体的能量转移和代谢
③ 计算
A300 A325
，选择A
测定方法
A. 若(A300/A325)≤ 0.73
A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334
◊ A 325 (校 正) - A 325 1 0 0% 3%,3%
A 325
◊ A 325 (校 正) - A 325 1 0 0% 3%,3%
λ(nm) A
300 0.374
316 0.592
328 0.663
340 0.553
360 0.228
测定方法
λ(nm)
300
316
328
340
360
Ai
0.374 0.592 0.663 0.553 0.228
Ai/A328 0.564 0.893 1.000 0.834 0.344
A规定
0.555 0.907
VitA醇
310 325 334
测定方法 具体步骤
一、基本步骤
第一步：选择A （A328 或A328(校正后)） 测定A
选择依据——所选A值中杂质的干扰已基本消除
第二步：求
Ε
% 1c m
A %
1cm(样)
规 定
C (%) L 第三步：求效价（每克供试品所含维生素A的国际单位数）
效 价 （IU / g）(样) E%1cm(样) 换 算 因 数
A
A1
A2A3Biblioteka Aλ1Aλ2Aλ3
设：
A λ1 A λ2
K1
A λ1 A λ3
K2
已知
Aλ1=A1-X1=A1-(mλ1+C)
Aλ2=A2-X2=A2-(mλ2+C)
X2
X1 X3
λ2 λ1 λ3
nm
316 328 340
Aλ3=A3-X3=A3-(mλ3+C) Y=mX+C
第一节 VitA 波长为ChP2015药典规定
物特性来进行分析
Contents
主要讲解
Vitamins
A
B1 C
D E
维生素A的分析
维生素A
是一种不饱和脂肪醇，在自然 界中主要来源于鲛类海鱼肝脏 中提取的脂肪油（鱼肝油）。
具有多种异构体，有不 同的名称，其中活性最 好的是维生素A1，也是
通常所指的维生素A
维生素A的分析
维生素A
具有一个共轭多烯醇侧链的 环已烯，具有多个异构体
A=A328校正
测定方法
标示量%
A
328校正
1
9
0
0
平均丸重
100
C(g /100ml) 标示量
0.6 3 7 1 9 0 0 0.1287 2 1 100
nm
第一节 VitA 波长为ChP2015药典规定
第二法——等吸收比法
A A2
A1 A3
Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1
EM FM λ3 λ1 K DL FL λ3 λ2
Aλ2
Aλ1 Aλ3
A325(校正)
D E
=6.815A325-2.555A310-4.260A334
L
F M
λ2 λ1 λ3 nm
H3C
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
1CH2OR
2
CH3
维生素A的分析
维生素A
具有一个共轭多烯醇侧链的 环已烯，具有多个异构体
H3C
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
1CH2OH
2
CH3
维生素A醇 （Retinol)
维生素A的分析
维生素A
具有一个共轭多烯醇侧链的 环已烯，具有多个异构体
H3C
作用而使反应不能进行
O
CH2 O C R SbCl5
Notice
CH2
[SbCl5 RCOO] CH2
第一节 VitA
2.UV
维生素A在无水乙 醇盐酸溶液中溶解, 立即进行UV扫描, 在360nm处有一 最大吸收峰.如1. 水浴加热30s,迅速 冷却,此过程发生 脱水反应,扫描时
出现三个吸收峰
Vit A3 Vit A
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
1CH2OOCCH3
2
CH3
维生素A醋酸酯 （Vitamin A Acetate)
维生素A的分析
维生素A
具有一个共轭多烯醇侧链的 环已烯，具有多个异构体
H3C
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
1CH2OOCC15H31
2
CH3
维生素A棕榈酸酯 （Vitamin A Palmitate)
A D 100
1900 W L标示量
100％
这是因为标示量是以 效价的形式存在的
测定方法
A值的选择
判断
二、第一法——纯度高的VitA acetate 合成 Vit A
天然鱼肝油
① S 环己烷 9～15IU / ml 溶 液
分 别 于300、316、328、340、360nm 处 测Ai
② λmax应为328nm。
测定方法
1IU=0.344μg Vit A 醋酸酯
1gVit A 醋酸酯=106 μg/0.344 (μg/IU) =2.907×106IU
Vit A 醋酸酯换算因子=2.907×106 IU/1530 =1900
溶剂
环己烷 异丙醇
Vit A acetate
λmax(nm)
Ε
% 1c m
换算因子
327.5 1530 1900
咋办呢？
请用三点校正法！
第一节 VitA
维生素A在325-328nm的波 长范围内具有最大吸收，其 最大吸收峰的位置随溶剂的
不同而异。如下：
溶剂
环己烷 异丙醇
Vit A acetate
λmax(nm)
Ε
% 1c m
换算因子
327.5 1530 1900
325 1600 1830
Vit A alcohol
每日所需(mg)
主要作用
1
抗干眼病，VA缺乏症
0.025
佝偻病，骨软化症
间歇性跛行
1
抗出血维生素
1.5
周围神经炎
2
核黄素缺乏症
3
VB6依赖综合症、缺乏症
0.005
恶性贫血、神经系统疾病
0.25
生物素酶缺乏
60
VC缺乏、酸化尿
维生素类药物的分析方法
生物 法
微生 物法
化学 法
物理化 学法
都是依据药物的化学 结构、理化性质与生
1
0.811 0.299
A
0.009 -0.014 0.000 0.023 0.045
A328校正 3.5 2 2A328 A316 A340 3.522 0.663 0.592 0.553 0.637
A328 (校正) A328 1 0 0 3.9 2% (1 5% ~ 3%) A 328
λmax(nm)
Ε
% 1c m
换算因子
326.5 1755 1900
325 1820 1830
应用三点校正法时要注意
第一节 VitA
测定原理
杂质的吸收在310~
CH3
去水维生素A （A3 anhydroretinol)
第一节 VitA
CH3
CH39
CH3
75
CH3
3
1
CH2OR
8642
CH3
R= H
O
Retinol (Vit A alcohol)
R= C CH3 O
VA acetate
2-Cis Neovitamin Aa R= 4-Cis Neovitamin Ab 2,4-dicis Neovitamin Ac 6-Cis Isovitamin Aa
A 328
A328不校正 A=A328校正
第二法
测定方法
三、第二法——VitA alcohol 皂化法 6/7法
① 样品前处理
酯
水解 OH-
乙醚提取VA醇，洗涤，过滤 蒸去醚
异丙醇溶解残渣
在 300，310，325，334nm处分别测Ai
② λmax应为325nm。
若λmax不在323～327nm之间，则供试品中杂质含量过 高，改为色谱法将未皂化部分纯化后进行测定。
测量吸光度
若λmax不在326～329nm之间，则不能用本法测定，改 为第二法
③ 计算 A ，选择A A328nm
测定方法
λ(nm)
300
316
328
340
360
Aλ/A328nm 0.555 0.907
1
0.811 0.299
A. 若【(Aλ/A328nm)-规定值】≤ (±0.02) —— A328不校正 B. 若【(Aλ/A328nm)-规定值】 有超过 (±0.02)者
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药物分析
第十四章 维生素类药物的分析
维生素类药物的分析
维生素
通俗来讲，即维持生命的物质，是维持人 体生命活动必须的一类有机物质，也是保 持人体健康的重要活性物质。维生素在体 内的含量很少，但不可或缺。
维持人类机体正常代谢功能所必须的一类 活性物质,主要用于机体的能量转移和代谢
③ 计算
A300 A325
，选择A
测定方法
A. 若(A300/A325)≤ 0.73
A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334
◊ A 325 (校 正) - A 325 1 0 0% 3%,3%
A 325
◊ A 325 (校 正) - A 325 1 0 0% 3%,3%
λ(nm) A
300 0.374
316 0.592
328 0.663
340 0.553
360 0.228
测定方法
λ(nm)
300
316
328
340
360
Ai
0.374 0.592 0.663 0.553 0.228
Ai/A328 0.564 0.893 1.000 0.834 0.344
A规定
0.555 0.907
VitA醇
310 325 334
测定方法 具体步骤
一、基本步骤
第一步：选择A （A328 或A328(校正后)） 测定A
选择依据——所选A值中杂质的干扰已基本消除
第二步：求
Ε
% 1c m
A %
1cm(样)
规 定
C (%) L 第三步：求效价（每克供试品所含维生素A的国际单位数）
效 价 （IU / g）(样) E%1cm(样) 换 算 因 数
A
A1
A2A3Biblioteka Aλ1Aλ2Aλ3
设：
A λ1 A λ2
K1
A λ1 A λ3
K2
已知
Aλ1=A1-X1=A1-(mλ1+C)
Aλ2=A2-X2=A2-(mλ2+C)
X2
X1 X3
λ2 λ1 λ3
nm
316 328 340
Aλ3=A3-X3=A3-(mλ3+C) Y=mX+C
第一节 VitA 波长为ChP2015药典规定
物特性来进行分析
Contents
主要讲解
Vitamins
A
B1 C
D E
维生素A的分析
维生素A
是一种不饱和脂肪醇，在自然 界中主要来源于鲛类海鱼肝脏 中提取的脂肪油（鱼肝油）。
具有多种异构体，有不 同的名称，其中活性最 好的是维生素A1，也是
通常所指的维生素A
维生素A的分析
维生素A
具有一个共轭多烯醇侧链的 环已烯，具有多个异构体
A=A328校正
测定方法
标示量%
A
328校正
1
9
0
0
平均丸重
100
C(g /100ml) 标示量
0.6 3 7 1 9 0 0 0.1287 2 1 100
nm
第一节 VitA 波长为ChP2015药典规定
第二法——等吸收比法
A A2
A1 A3
Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1
EM FM λ3 λ1 K DL FL λ3 λ2
Aλ2
Aλ1 Aλ3
A325(校正)
D E
=6.815A325-2.555A310-4.260A334
L
F M
λ2 λ1 λ3 nm
H3C
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
1CH2OR
2
CH3
维生素A的分析
维生素A
具有一个共轭多烯醇侧链的 环已烯，具有多个异构体
H3C
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
1CH2OH
2
CH3
维生素A醇 （Retinol)
维生素A的分析
维生素A
具有一个共轭多烯醇侧链的 环已烯，具有多个异构体
H3C
作用而使反应不能进行
O
CH2 O C R SbCl5
Notice
CH2
[SbCl5 RCOO] CH2
第一节 VitA
2.UV
维生素A在无水乙 醇盐酸溶液中溶解, 立即进行UV扫描, 在360nm处有一 最大吸收峰.如1. 水浴加热30s,迅速 冷却,此过程发生 脱水反应,扫描时
出现三个吸收峰
Vit A3 Vit A
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
1CH2OOCCH3
2
CH3
维生素A醋酸酯 （Vitamin A Acetate)
维生素A的分析
维生素A
具有一个共轭多烯醇侧链的 环已烯，具有多个异构体
H3C
CH3
9
CH3
7
8
6
5 4
CH3
3
1CH2OOCC15H31
2
CH3
维生素A棕榈酸酯 （Vitamin A Palmitate)
A D 100
1900 W L标示量
100％
这是因为标示量是以 效价的形式存在的
测定方法
A值的选择
判断
二、第一法——纯度高的VitA acetate 合成 Vit A
天然鱼肝油
① S 环己烷 9～15IU / ml 溶 液
分 别 于300、316、328、340、360nm 处 测Ai
② λmax应为328nm。
测定方法
1IU=0.344μg Vit A 醋酸酯
1gVit A 醋酸酯=106 μg/0.344 (μg/IU) =2.907×106IU
Vit A 醋酸酯换算因子=2.907×106 IU/1530 =1900
溶剂
环己烷 异丙醇
Vit A acetate
λmax(nm)
Ε
% 1c m
换算因子
327.5 1530 1900
咋办呢？
请用三点校正法！
第一节 VitA
维生素A在325-328nm的波 长范围内具有最大吸收，其 最大吸收峰的位置随溶剂的
不同而异。如下：
溶剂
环己烷 异丙醇
Vit A acetate
λmax(nm)
Ε
% 1c m
换算因子
327.5 1530 1900
325 1600 1830
Vit A alcohol
每日所需(mg)
主要作用
1
抗干眼病，VA缺乏症
0.025
佝偻病，骨软化症
间歇性跛行
1
抗出血维生素
1.5
周围神经炎
2
核黄素缺乏症
3
VB6依赖综合症、缺乏症
0.005
恶性贫血、神经系统疾病
0.25
生物素酶缺乏
60
VC缺乏、酸化尿
维生素类药物的分析方法
生物 法
微生 物法
化学 法
物理化 学法
都是依据药物的化学 结构、理化性质与生
1
0.811 0.299
A
0.009 -0.014 0.000 0.023 0.045
A328校正 3.5 2 2A328 A316 A340 3.522 0.663 0.592 0.553 0.637
A328 (校正) A328 1 0 0 3.9 2% (1 5% ~ 3%) A 328
λmax(nm)
Ε
% 1c m
换算因子
326.5 1755 1900
325 1820 1830
应用三点校正法时要注意
第一节 VitA
测定原理
杂质的吸收在310~