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ABI 7500 FAST荧光定量PCR仪简明操作规程1.双击桌面图标，或从 Start >All Programs > Applied Biosystems >7500 Software > 7500 V2.0 开启软件。
进入主界面后选择Advanced Setup 。
2.默认进入 Setup 下的Experiment Properties 界面2.1输入实验名称（Experiment Name）2.2确认仪器型号2.3在实验类型中，选择 Quantitation-Comparative CT (△△CT)2.4选择试剂种类2.5确认运行模式3.进入 Setup 下的Plate Setup 界面，编辑基因（Target）及样本（Sample）；3.1在“define targets and samples”界面中设置基因3.2在“assign targets and samples”中进行样品板的排布。
4.在“Select relative quantitation setting”中设置内参基因及对照样本。
5.进入 Run Method 界面，设定反应条件及反应体积。
6.点击“save”按钮，文件储存成 Experiment Document Single Files（*.eds）格式，然后在 Run 界面按下按钮，反应即开始进行。
7.实验结束后，点击界面右上角的 Analyze 按钮，软件将会显示实验结果：7.1在扩增图中（见上图），可通过更改Plot Settings 来改变扩增图的显示方式。
如果想查看阈值线或基线，请将Threshold 及Baseline 打勾。
7.2查看相对表达量结果时，利用Plot Settings 选项，可以以不同方式显示相对表达量的结果。
7.3对于 SYBR Green 法实验，可以在Melt Curve 界面中查看熔解曲线。
7.4检测 QC Summary 结果，可以快速查看实验中是否有反应孔存在异常情况。
PCR实验室7500SOP【】ABI 7500型核酸扩增荧光检测仪使⽤、维护、校准程序-LAB-SOP-FZSW-0111.⽬的：确保ABI7500仪器的正确使⽤及正常运⾏2.适⽤范围：美国应⽤⽣物系统公司⽣产的ABI7500实时荧光定量PCR仪3.运⾏环境：电源：推荐配备合适的UPS或稳压器。
通风：仪器的通风应该没有阻挡。
温度：推荐实验室配备空调，温度应该控制在10～30℃之间。
湿度：20-80%；对于潮湿的省份，推荐实验室配备除湿机。
空间：易于操作，安全。
4.操作程序：4.1开关机程序：开机顺序：先开电脑，待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机，等主机⾯板上的绿灯亮后即可打开ABI7500系统软件，进⾏实验。
关机顺序：确认实验已经结束后，⾸先关闭ABI7500系统软件，然后关掉定量PCR仪主机的电源，最后关闭电脑。
4.2 创建绝对定量反应板⽂件：4.2.1依次选择 Start > Programs > Applied Biosystems 7500 >Applied Biosystems 7500 SDS Software ( )，以启动 SDS 软件;或在桌⾯双击Applied Biosystems 7500 SDS Software ( )图标。
4.2.2选择 File （⽂件） > New （新建）。
4.2.3在 New Document Wizard （新建⽂件向导）窗⼝中，从 Assay （实验）下拉列表中选择Absolute Quantification (Standard Curve)（绝对定量，标准曲线）。
接受 Container （反应板类型）和 Template （模板）字段中的默认设置（即分别为 96-Well Clear（空⽩96 孔板）和 Blank Document（空⽩反应板））。
4.2.4在 Default Plate Name （默认反应板名）字段中输⼊反应板⽂件名，或接受默认⽂件名。
1、目的规范该型号ABI7500Fast荧光定量PCR仪操作程序，正确使用和维护仪器，保证检测工作顺利进行，操作人员人身安全和设备安全。
2、适用范围适用于ABI7500Fast荧光定量PCR仪的使用操作与维护。
3、职责3。
1 操作人员按照本规程使用仪器，对仪器进行日常维护。
3。
2 保管人员负责对仪器进行定期维护、保养。
3。
3 科室负责人监督检查本操作程序的执行。
4、操作程序4.1启动笔记本电脑，进入Windows XP系统。
4.2待电脑桌面图标出现后，打开ABI7500Fast荧光定量PCR仪主机电源.4。
3待主机电源指示灯亮后，双击电脑桌面7500 SDS图标，打开软件。
4.4新建文件：在Quick Startup document窗口点击Create New Document 按钮，出现New Document Wizard窗口，在Assay菜单中选择Standard Curve （Absolute Quantification），点击Finish按钮后打开一个空白96孔板文件。
4．5探针设置：双击任意一个孔打开Well Inspector窗口.4．6点击Add Detector按钮，打开Detector Manager窗口，选择Detector List中的探针，例如用的是TaqMan—FAM标记探针，在列表中选择Reporter：FAM,Quencher：TAMRA;如果用的是SYBR Green I，则在列表中选择Reporter：SYBR，Quencher：（none).选择所需探针，按住Ctrl键可选择多个探针,再点击Add To Plate Document 按钮,最后点击Done按钮关闭Detector Manager窗口。
此时Well Inspector窗口仍然是打开的。
填样品表：在96孔表中选择有样品的一个或者多个孔，然后在Well Inspector窗口的Sample Name输入样品的名称，在探针列表中的Use项下的方框中打钩选择要用的探针，在Task栏中选择指定样品类型：未知样品选择Unknown，阴性对照选择NTC，标准品选择Standard。
ABI7500实时跟踪荧光PCR仪使用操作规程1. 目的：使ABI 7500 型核酸扩增荧光检测仪能够正确和正常的使用，保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2. 范围：适用于ABI 7500型核酸扩增荧光检测仪使用操作。
3. 职责：操作人按照规程进行仪器的操作使用。
4. 程序：4.1 开机。
连接好所有连线，打开接线板开关，然后依次打开主机开关（在主机侧面），电脑显示器开关（按屏幕下方开关按钮），电脑开关（主机前面按钮）。
使用鼠标双击桌面上一体化仪3.2图标，连机后打开应用程序。
4.2 编辑样品板。
在区域选择界面中进行样品板编辑，同时输入待检样品的相关信息。
4.3 编辑实验程序。
在温度控制界面中进行程序编辑。
4.4 进行实验。
设定完成样品板和实验程序后，将实验样品按样品板设定的位置放入样品槽内，然后将样品槽放入主机内，在程序主界面下点击开始读图标开始运行实验。
实验过程中屏幕的下半部分同步显示实验的运行状态。
4.5 实验中仪器将实时显示每次的样品检测结果：在实验进行中间或实验结束后，均可组合界面中查看实时的检测结果：4.6 定量分析：实验结束后，可以点击定量图标进入定量分析功能。
4.7 打印报告单：定量完毕后，用鼠标单击文件（F）菜单中的刷新病历数据信息，用鼠标单击文件（F）菜单中的打印，系统将自动生成检测报告单，并进行打印。
4.8 关机。
实验全部结束后，可先点击Files菜单Save Data File保存实验结果，然后关闭Opticon Monitor。
依次关闭计算机主机，显示器，ABI 7500主机。
5. 相关文件：无6.相关记录：仪器设备使用、维护保养和清洁记录。
1. 目的为规范使用人正确和正常的使用ABI 7500型核酸扩增荧光定量检测仪，保证扩增及结果分析的标准化、规范化，特制定本规程。
2. 适用范围适用于本公司ABI7500荧光定量PCR仪的操作。
3. 职责3.1使用人员负责本规程的实施。
3.2 设备使用人负责设备维护保养工作；设备责任人负责设备的定期维护保养工作。
3.3 质量监督员负责监督本规程的实施。
4.内容4.1 程序设置4.1.1 打开电脑及仪器电源，待仪器电源项显示power绿色状态。
4.1.2 双击电脑桌面上的7500 software V2.3 图标打开程序，打开程序单击OK，待软件连接仪器并测试校准状态后（若有出现连接失败可尝试重启电脑，检查USB线接口），出现如下界面，单击Design Wizard选项，红色箭头指示位置有个下拉菜单，如下图所示。
下拉菜单中有一个Advanced Setup（高级设置）选项，如箭头所示：点击这个选项，可以进入下面这个界面，①②③如上图所示，红色箭头从上到下指示的分别是①实验名称、②仪器型号和③反应程序类型。
（带*号的必需填）此图是上面图的延续（自己电脑显示不完全），红色箭头从上到下指示的分别是①Plate Setup 选项、②探针类型和③程序应用速度类型，一般使用的探针就是TaqMan 探针，速度类型选择默认就可以了（如果是7500fast 的话则有快速模式可以选择）。
下一步我们可以看到左上角的红色箭头指示的一个Plate Setup 选项，点击这个选项，就可以进入下一个设置界面。
红色箭头①和②指的是设定反应探针和反应样品名称，箭头③处可以填写反应探针名称（如P1,HBV ,HCV ）。
箭头⑤是选择报告荧光，一般使用的发光基团是FAM ，箭头⑥是选择粹灭荧光，达安现在使用的是TAMRA 荧光，科华现在使用的是BHQ ，在这个仪器中无此选择项，那么就选择none 。
箭头⑧处可以填写样品名称。
点击箭头④和箭头⑨处可以添加反应探针体系名称和样品名称。
7500荧光定量PCR 仪使用说明注意事项：●实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。
● PCR 反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用，凸盖PCR 管禁止使用。
● 使用8联管两侧需用空管支撑，使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均。
● 实验数据用光盘刻录，禁止U 盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室D 盘中有指定文件夹，中心外部人员数据存于FUWU 文件夹下的子文件夹中。
操作步骤➢开机➢ 放入反应板注：关闭仪器托盘时，应按一个角度推压托盘的右侧。
（以下过程按字母顺序a →q 进行操作）➢ 创建反应板文件双击电脑桌面上SDS 软件图标打开SDS 软件；a. 从 Assay 下拉列表中选择反应板类型c. 单击Next 反应板文件类型有以下几种：1. Relative Quantification (ddCt) Plate （相对定量）2. Absolute Quantification (Standard Curve)（绝对定量，标准曲线）3. Allelic Discrimination （等位基因鉴别）4. Plus/Minus （阳性/ 阴性实验）d. 选择要添加到反应板文件的探针（引物），单击Add 添加选中探针e. 如果在列表中未列出所需探针，请单击New Detector 创建新探针f. 单击Nextb. 为反应板文件命名➢为反应孔设置样品名g.选取探针相同的反应孔h.点击反应孔对应的探针。
i.单击Task栏的下边指定探针任务。
j.选择Use （使用）。
k.单击Finish （完成）。
ghijkl.选取反应孔，直接输入相应样品名（也可右键，调出反Well Inspector对话框，在Sample Name中进行修改）设定PCR循环参数、运行程序1.实验结束后关闭软件。
（确认反应板文件数据已保存）2.打开拖盘，将反应板取出，关闭拖盘。
3.按下7500仪器电源开关关闭机器。
●目的建立ABI7500型荧光定量PCR仪的标准操作及维护保养规程，为本设备的操作提供标准依据。
●适用范围ABI7500型荧荧光定量PCR仪的操作、维护保养、清洁过程。
●责任与要求质量部人员必须遵照本规程。
●培训对象质量部●内容1.设备信息2.操作流程示意图3.3.1 开机自检3.1.1 按下配套电脑的开机键打开电脑。
3.1.2 按下ABI7500开关，打开仪器，仪器自动进行自检。
待仅有“power”指示灯（绿色）亮时，自检结束。
3.2 样品上机3.2.1 按下托盘按钮，弹出96孔管架托盘，确定所需的96孔管架。
3.2.2 将加好样品的八连管或96孔板放入相应的孔位。
3.2.3 将托盘推入原来位置。
3.3 编辑运行参数3.3.1 双击桌面上7500 Software v2.3软件图标，打开7500 Software v2.3软件。
3.3.2 在弹出的窗口点击“New Experiment”新建实验程序，并对实验参数进行设置：3.3.2.1 在Experiment Name（实验名称）字段中，可以自定义实验名称。
3.3.2.2 在Barcode（条形码）字段中，输入反应板条码。
3.3.2.3 在User Name（使用者姓名）字段中，输入您的姓名。
3.3.2.4 在Comments（备注）字段中，输入您想保存到文件中的任何附加信息。
3.3.2.5 默认选择instrument（仪器）-----7500(96 wells)。
3.3.2.6 默认选择Experiment type（实验类型）----- Quantitation-Standard Curve。
3.3.2.7 默认选择Reagents （试剂）----- TaqMan® Reagents（TaqMan® 试剂）。
3.3.2.8 默认选择Ramp speed（升降温速度）-----Standard（～2 hours to complete a run）。
1. 目的为规范使用人正确和正常的使用ABI 7500型核酸扩增荧光定量检测仪，保证扩增及结果分析的标准化、规范化，特制定本规程。
2. 适用范围适用于本公司ABI7500荧光定量PCR仪的操作。
3. 职责3.1使用人员负责本规程的实施。
3.2 设备使用人负责设备维护保养工作；设备责任人负责设备的定期维护保养工作。
3.3 质量监督员负责监督本规程的实施。
4.内容4.1 程序设置4.1.1 打开电脑及仪器电源，待仪器电源项显示power绿色状态。
4.1.2 双击电脑桌面上的7500 software V2.3 图标打开程序，打开程序单击OK，待软件连接仪器并测试校准状态后（若有出现连接失败可尝试重启电脑，检查USB线接口），出现如下界面，单击Design Wizard选项，红色箭头指示位置有个下拉菜单，如下图所示。
下拉菜单中有一个Advanced Setup（高级设置）选项，如箭头所示：点击这个选项，可以进入下面这个界面，①②③如上图所示，红色箭头从上到下指示的分别是①实验名称、②仪器型号和③反应程序类型。
（带*号的必需填）此图是上面图的延续（自己电脑显示不完全），红色箭头从上到下指示的分别是①Plate Setup 选项、②探针类型和③程序应用速度类型，一般使用的探针就是TaqMan 探针，速度类型选择默认就可以了（如果是7500fast 的话则有快速模式可以选择）。
下一步我们可以看到左上角的红色箭头指示的一个Plate Setup 选项，点击这个选项，就可以进入下一个设置界面。
红色箭头①和②指的是设定反应探针和反应样品名称，箭头③处可以填写反应探针名称（如P1,HBV ,HCV ）。
箭头⑤是选择报告荧光，一般使用的发光基团是FAM ，箭头⑥是选择粹灭荧光，达安现在使用的是TAMRA 荧光，科华现在使用的是BHQ ，在这个仪器中无此选择项，那么就选择none 。
箭头⑧处可以填写样品名称。
点击箭头④和箭头⑨处可以添加反应探针体系名称和样品名称。
ABI7500校正步骤ABI7500是一款常用的实时荧光定量PCR仪，用于对DNA、RNA等生物分子进行定量检测。
为了确保测量结果的准确性和可靠性，使用该仪器前需要进行校正。
下面是ABI7500校正的一般步骤，包括仪器准备、光源校正、温控系统校正、定量准确性校正等。
1.仪器准备：首先需要检查ABI7500仪器的外观是否完好。
检查电源、通风系统和连接线是否正常，确保仪器工作环境安全可靠。
同时，检查仪器的工作液位是否在标准范围内，如需添加液体，应按照仪器使用说明进行操作。
2.光源校正：打开ABI7500仪器，进入软件界面。
选择“光源校正”功能，按照软件提示进行操作。
通常包括背景校正和通道校正两个步骤。
在背景校正过程中，仪器会自动测量背景信号，并根据结果进行修正。
在通道校正过程中，需要使用标准样品进行比对，以确保不同通道的荧光信号一致。
校正完成后，保存校正结果。
3.温控系统校正：选择“温控系统校正”功能，按照仪器提供的温度校正盒进行操作。
校正过程中，仪器会自动调整温度控制系统，以确保设定温度与实际温度一致。
校正完成后，保存校正结果。
4.定量准确性校正：首先选择适当的标准样品，以确保其浓度在仪器检测范围内。
将标准样品分别按照一定比例稀释，再进行定量PCR反应。
测量得到的荧光信号随标准品浓度变化的趋势应与理论值一致。
根据测量结果，对不同浓度的样品进行定量分析，绘制标曲。
通过标曲可以将实际样品的荧光信号转化为待测物质的浓度。
5.数据分析和校正结果的保存：将校正结果以及样品测量结果进行记录，并将其保存。
可以通过软件对测量数据进行进一步处理和分析，比如计算标准曲线、确定待测样品中物质的浓度等。
保存校正结果和测量数据可以方便后续的数据比对和结果验证。
值得注意的是，校正过程中要严格按照仪器说明书的要求进行操作，确保校正的准确性和可靠性。
在操作过程中，应注意操作规范，避免引入误差。
另外，校正的频率应根据实际需要进行合理调整，以保证测量结果的准确性。
文件名称AB7500荧光定量PCR仪使用、维护、校准标准操作规程颁发部门制订人：复核人：批准人：质保部制订日期：复核日期：批准日期：执行日期版本 1.0编号SOP04006制作份数_____份发送部门修订人修订原因修订内容版本修订日期修订记录1. 目的：确保荧光定量PCR仪能够正确和正常的使用，保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2. 范围：适用于AB7500荧光定量PCR仪的使用及维护。
3. 定义：无4. 职责：荧光定量PCR仪使用人员负责本规程的实施。
质保部对本规定的有效执行承担监督检查责任。
5. 内容：5.1 室内温度控制在15～30℃，相对湿度45～75%。
5.2 仪器操作5.2.1 依次打开电脑显示器和电脑主机的电源开关，进入Windows界面。
5.2.2 接着打开AB7500仪器电源开关，预热10分钟。
5.2.3 点击7500 Software v2.3图标，打开软件。
5.2.4 按压仪器托盘上的按压位，待托盘弹出后，将所需检测的8联PCR反应管或者96孔PCR反应板放入检测孔位，记下放置位置。
检测8联PCR反应管用**反应孔模块，检测96孔PCR反应板用**反应孔模块。
（检测8联PCR反应管需放入盖紧管盖的空8联PCR反应管配平，检测96孔PCR反应板无需配平）5.2.5 再次按压托盘使其滑入仪器。
5.2.6 新建扩增参数模板：例如新建一个UG-63-62的模板，扩增参数是95°，10′；（95°，10″；63°，45″）×5 cycles；（95°，10″；62°，35″）×40 cycles，在62°时收集荧光信号（HEX、FAM信号），20μｌ反应体系。
5.2.6.1 在Setup-Plate Setup-Define Targets and Samples中，将Target Name下的Target1改成FAM；点击Add New Target，将新增的Target1改成HEX，点击Reportee下拉菜单，选择VIC。
1. 目的：确保荧光定量PCR仪能够正确和正常的使用，保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2. 范围：适用于AB7500荧光定量PCR仪的使用及维护。
3. 定义：无4. 职责：荧光定量PCR仪使用人员负责本规程的实施。
质保部对本规定的有效执行承担监督检查责任。
5. 内容：5.1 室内温度控制在15～30℃，相对湿度45～75%。
5.2 仪器操作5.2.1 依次打开电脑显示器和电脑主机的电源开关，进入Windows界面。
5.2.2 接着打开AB7500仪器电源开关，预热10分钟。
5.2.3 点击7500 Software v2.3图标，打开软件。
5.2.4 按压仪器托盘上的按压位，待托盘弹出后，将所需检测的8联PCR反应管或者96孔PCR反应板放入检测孔位，记下放置位置。
检测8联PCR反应管用**反应孔模块，检测96孔PCR反应板用**反应孔模块。
（检测8联PCR反应管需放入盖紧管盖的空8联PCR反应管配平，检测96孔PCR反应板无需配平）5.2.5 再次按压托盘使其滑入仪器。
5.2.6 新建扩增参数模板：例如新建一个UG-63-62的模板，扩增参数是95°，10′；（95°，10″；63°，45″）×5 cycles；（95°，10″；62°，35″）×40 cycles，在62°时收集荧光信号（HEX、FAM信号），20μl反应体系。
5.2.6.1 在Setup-Plate Setup-Define Targets and Samples中，将T arget Name下的T arget1改成FAM；点击Add New Target，将新增的Target1改成HEX，点击Reportee下拉菜单，选择VIC。
5.2.6.2在Setup-Run Method-Graphical View中的Reaction Volume Per Well后面输入20（20μl反应体系）。
选中第一个Holding Stage，点击Delete Selected删除；在Cycling Stage中的Numberof Cycles后输入5，在Step1中输入时间10秒，在Step2中输入温度63度，输入时间45秒，将63度下面收集荧光图标点掉；点击Add Stage下拉菜单选择Cycling，在Cycling Stage中的Number of Cycles后输入40，在Step1中输入时间10秒，在Step2中输入温度62度，输入时间35秒，在62度下面点击图标收集荧光。
5.2.6.3 点击Save下拉菜单下的Save As T amplate，文件名输入UG-63-62，保存在默认ab7500-config-tamplates文件夹内，关闭设置界面。
5.2.7 已有扩增参数模板：在软件Home界面中点击Template，选择需要的模板，点击打开。
例如：UG-63-62，其扩增参数就是95°，10′；（95°，10″；63°，45″）×5 cycles；（95°，10″；62°，35″）×40 cycles，在62°时收集荧光信号（HEX、FAM信号），Reaction Volume Per Well:20μl（20μl 反应体系）。
5.2.8 在Setup-Plate Setup-Assign Targets and Samples中选择8联管摆放的位置，全部勾选Sample 1；UGT1A1*6勾选HEX，UGT1A1*28勾选FAM。
5.2.9 在Run-Amplification Plot中点击START RUN，命名为20140101-1（当日日期+当日上机次数，例:2014年1月1日第1次上机编号为20140101-1），保存在默认文件夹中，开始运行。
5.2.10 结果分析5.2.10.1 PCR反应结束后自动保存结果，对扩增曲线进行分析。
5.2.10.2 也可根据分析后图像调节Baseline的Start值、End值以（用户可根据实际情况自行调整，Start值可以在3～15、End值可设在5～20），Threshold值（Rn）推荐设定为5000～15000，点击Analyze进行分析，然后到Plate窗口下记录每个反应的Ct值。
5.2.11实验结束后取出反应管（切勿打开管盖），顺序关闭AB7500软件、定量PCR仪电源，关闭电脑。
5.3 仪器维护5.3.1 每周维护5.3.1.1 检查计算机磁盘空间。
如需要，将实验文件归档或备份。
•至少每周检查一次计算机磁盘空间。
•如果硬盘的可用空间不足其总容量的20%，应将较陈旧的数据传输到备份存储设备上保存。
5.3.1.2 关闭控制7500 Instrument的计算机，30秒后再次开启计算机。
5.3.1.3 用无绒布块（不脱毛）蘸取75%酒精清洁7500 Instrument的表面。
（注：切勿使用有机溶剂清洁7500 Instrument。
）5.3.1.4 使用75%酒精浸泡反应管托架（晾干后放回仪器内）。
5.3.2 每月维护5.3.2.1 执行背景校准。
（可执行一次背景校准以检查是否存在污染物）5.3.2.2 运行磁盘清理和磁盘碎片整理。
•至少每月一次。
•当Windows®操作系统显示消息提示执行碎片整理时。
•切勿同时运行磁盘管理实用工具和7500 Real-Time PCR Software。
5.3.3 每半年（6个月）维护5.3.3.1 检查灯具状态。
①在7500 Software中，选择Instrument→Lamp Status/Replacement以确定卤素灯的状态。
显示Lamp Status/Replacement对话框：•Condition –表示以下其中一种状况：–Good –灯具工作良好，不需要更换。
单击Close。
–Failed –必须更换灯具。
单击Close，然后按照5.3.4.3步骤更换卤素灯。
–Change Soon –灯具使用超过2000小时；生产商建议将其更换。
单击Close，然后决定是否更换灯具。
如果决定更换，请按照5.3.4.3步骤更换卤素灯。
•Usage (Hours) –灯具已照明的总小时数。
•Lamp Current –灯具的输出电流，以安培为单位(A)。
低电流意味着灯具可能将要失效。
•Date Last Replaced –上次更换灯具的日期。
②在执行一次运行之前或期间，7500 Software 可能显示以下警告：5.3.3.2 执行目标区（ROI ）校正。
5.3.3.3 执行背景校准。
5.3.3.4 执行光学校准。
5.3.3.5 执行染料校准。
5.3.3.6 执行RNase P 仪器验证试验。
5.3.4 其它维护任务（需要时执行） 5.3.4.1 样本块污染清除。
执行以下程序，去除7500 Instrument样本块的荧光污染。
荧光污染是导致背景运行失败的常见原因，在此情况下，一个或多个反应孔会持续表现出异常的高信号。
注意！切勿移去设备上的盖板。
7500 Instrument中没有用户可安全维修的组件。
如果怀疑存在问题，请联系生产商服务代表。
①全程戴上一次性无粉手套操作。
②找到样本块中受污染的反应孔（参阅5.4.2.13 “如何确定污染”）。
③从7500 Real-Time PCR Instrument中取出反应板和托盘支架。
a.按压托盘门，将其打开。
b.取出反应板和托盘支架。
c.关闭托盘门。
以一定角度向托盘右侧施加压力。
④手动降低样本块：a.在7500 Software中，选择Instrument→Instrument Maintenance Manager。
b.在Instrument Maintenance Manager的ROI选项卡中，单击Start Manual Calibration。
c .在ROI Inspector对话框中，单击Move Block。
d.当ROI Inspector对话框显示“Block Down”时，单击Done。
⑤关闭7500 Real-Time PCR Instrument，然后拔下其电源电缆。
允许仪器冷却15分钟。
⑥打开7500 Real-Time PCR Instrument的检查门。
a.将薄型螺丝刀插入检查门边缘处的键销孔内，然后推动以解开门栓。
b.打开仪器前门。
⑦抬起门栓，然后将受热的护盖门推到仪器的背面。
⑧使用少量的双蒸水，清洁样本块中被污染的反应孔：a.用移液管吸取少量双蒸水并滴入每个受污染的反应孔中。
b.抽吸并滴入反应孔中的双蒸水数次，以冲洗反应孔。
c.将用过的双蒸水水吸入废液瓶中。
d.使用棉花拭子，擦试每个被污染的反应孔的内壁。
e.使用无绒布料，吸出残余的双蒸水。
⑨7500 Real-Time PCR Instrument将受热的护盖门拉到仪器的正面。
抬起门栓，然后将受热的护盖门紧固到交叉杆。
⑩打开7500 Real-Time PCR Instrument的检查门。
⑪插上电源插头并开启7500 Instrument。
⑫通过执行背景校准运行确认已消除污染（参阅5.4.2 “背景校准”）。
⑬如果污染仍然存在，重复步骤②至⑦，然后使用95%乙醇溶液清洁样本块中受污染的反应孔：a.用移液管吸取少量95%乙醇溶液并滴入每个受污染的反应孔中。
b.抽吸并滴入反应孔中的溶液数次，以冲洗反应孔。
c.将用过的乙醇溶液吸入废液瓶中。
重要！使用漂白剂溶液或乙醇溶液清洁反应孔之后，应始终使用双蒸水冲洗反应孔。
⑭重复步骤⑧至⑫，以冲洗样本块的反应孔，并验证已清除掉污染物。
⑮如果污染仍然存在，重复步骤②至⑦，然后使用10%漂白剂溶液清洁样本块中受污染的反应孔：a.用移液管吸取少量10%漂白剂溶液并滴入每个受污染的反应孔中。
b.抽吸并滴入反应孔中的溶液数次，以冲洗反应孔。
c.将用过的漂白剂溶液吸入废液瓶中。
重要！使用漂白剂溶液或乙醇溶液清洁反应孔之后，应始终使用去离子水冲洗反应孔。
⑯重复步骤⑧至⑫，以冲洗样本块的反应孔，并验证已清除掉污染物。
如果仍有污染，请与生产商技术支持联系。
⑰确保受热盖门完全关闭并上闩。
如果没有，则7500 Software显示错误消息。
5.3.4.2 移动PCR仪。
（更换或移动光学器件的任何部件后，必须执行ROI校准、背景校准、光学校准、染料校准以及RNase P仪器验证。
）5.3.4.3 更换卤素灯。
①全程戴上一次性无粉手套操作。
②关闭7500 Instrument，然后拔下其电源电缆。
允许仪器冷却15分钟。
a.注意！灼热。
7500 Instrument和灯具灼热！灯具在使用中会变得非常灼热。
