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缓冲液配制方法

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1 一．常用缓冲溶液的配制方法

1．甘氨酸—盐酸缓冲液（0.05mol/L）

x ml 0.2mol/L甘氨酸＋y ml 0.2mol/L HCl，再加水稀释至200ml

pH x/ml y/ml pH x/ml y/ml

2.2 50 44.0 3.0 50 11.4

2.4 50 32.4 3.2 50 8.2

2.6 50 24.2 3.4 50 6.4

2.8 50 16.8 3.6 50 5.0

甘氨酸Mr = 75.07，0.2mol/L甘氨酸溶液含15.01g/L

2．甘氨酸—氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L）

x ml 0.2mol/L甘氨酸＋y ml 0.2mol/L NaOH，加水稀释至200ml

pH x/ml y/ml pH x/ml y/ml

8.6 50 4.0 9.6 50

8.8 50 6.0 9.8 50 27.2

9.0 50 8.8 10.0 50 32.0

9.2 50 12.0 10.4 50 38.6

9.4 50 16.8 10.6 50 45.5

甘氨酸Mr = 75.07，0.2mol/L甘氨酸溶液为15.01g/L

3．邻苯二甲酸—盐酸缓冲液（0.05mol/L，20℃）

x ml 0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾＋y ml 0.2mol/L HCl，再加水稀释到20ml

pH x/ml y/ml pH x/ml y/ml

2.2 5 4.670 3.2 5 1.470

2.4 5 3.960 3.4 5 0.990

2.6 5 3.295 3.6 5 0.597

2.8 5 2.642 3.8 5 0.263

3.0 5 2.032

邻苯二甲酸氢钾Mr = 204.23，0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L

4．柠檬酸—氢氧化钠—盐酸缓冲液 2 pH Na＋浓度

/mol/L 柠檬酸/g

C6H8O7·H2O 氢氧化钠/g

NaOH(97%) 盐酸/ml

HCl(浓) 最终体积/L*

2.2 0.20 210 84 160 10

3.1 0.20 210 83 116 10

3.3 0.20 210 83 106 10

4.3 0.20 210 83 45 10

5.3 0.35 245 144 68 10

5.8 0.45 285 186 105 10

6.5 0.38 266 156 126 10

使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，置冰箱保存。

5．磷酸氢二钠—柠檬酸缓冲液

pH 0.2ol/L

Na2HPO4/ml 0.1mol/L

柠檬酸/ml pH 0.2mol/L

Na2HPO4/ml 0.1mol/L

柠檬酸/ml

2.2 0.40 19.60 5.2 10.72 9.28

2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85

2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.40

2.8 3.17 16.83 5.8 12.09 7.91

3.0 4.11 15.89 6.0 12.63 7.37

3.2 4.94 15.06 6.2 13.22 6.78

3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.15

3.6 6.44 13.56 6.6 14.55 5.45

3.8 7.10 12.90 6.8 15.45 4.55

4.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53

4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61

4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83

4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.27

4.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85

5.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 3 Na2HPO4 Mr = 141.98，0.2mol/L溶液为28.40g/L，

Na2HPO4·2H2O Mr = 178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L

C6H8O7·H2O Mr = 210.14，0.1mol/L溶液为21.01g/L

6．柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）

pH 0.1mol/L

柠檬酸/ml 0.1mol/L

柠檬酸钠/ml pH 0.1mol/L

柠檬酸/ml 0.1mol/L

柠檬酸钠/ml

3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8

3.2 17.2 2.8 5.2 7.3 12.7

3.4 16.0 4.0 5.4 6.4 13.6

3.6 14.9 5.1 5.6 5.5 14.5

3.8 14.0 6.0 5.8 4.7 15.3

4.0 13.1 6.9 6.0 3.8 16.2

4.2 12.3 7.7 6.2 2.8 17.2

4.4 11.4 8.6 6.4 2.0 18.0

4.6 10.3 9.7 6.6 1.4 18.6

4.8 9.2 10.8

柠檬酸C6H8O7·H2O，Mr = 210.14，0.1mol/L溶液为21.01g/L

柠檬酸钠Na3C6H5O7·2H2O，Mr = 294.12，0.1mol/L溶液为29.41g/L

7．乙酸—乙酸钠缓冲液（0.2mol/L，18℃）

pH 0.2mol/L

NaAc/ml 0.2mol/L

HAc/ml pH 0.2mol/L

NaAc/ml 0.2mol/L

HAc/ml

3.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10

3.8 1.20 8.80 5.0 7.00 3.00

4.0 1.80 8.20 5.2 7.90 2.10

4.2 2.65 7.35 5.4 8.60 1.40

4.4 3.70 6.30 5.6 9.10 0.90

4.6 4.90 5.10 5.8 9.40 0.60

NaAc·3H2O，Mr = 136.09，0.2mol/L溶液为27.22g/L 4 8．邻苯二甲酸氢钾—氢氧化钠缓冲液

50ml 0.1mol/L邻苯二甲酸氢钾＋x ml 0.1mol/L氢氧化钠，加水稀释到100ml

pH x/ml pH x/ml pH x/ml

4.1 1.3 4.8 16.5 5.5 36.6

4.2 3.0 4.9 19.4 5.6 38.8

4.3 4.7 5.0 22.6 5.7 40.6

4.4 6.6 5.1 25.5 5.8 42.3

4.5 8.7 5.2 28.8 5.9 43.7

4.6 11.1 5.3 31.6

4.7 13.6 5.4 34.1

邻苯二甲酸氢钾Mr = 204.23，0.1mol/L溶液为20.42g/L

9．磷酸盐缓冲液

(1)磷酸氢二钠—磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）

pH 0.2mol/L

Na2HPO4/ml 0.2mol/L

NaH2PO4/ml pH 0.2mol/L

Na2HPO4/ml 0.2mol/L

NaH2PO4/ml

5.8 8.0 92.0 7.0 61.0 39.0

5.9 10.0 90.0 7.1 67.0 33.0

6.0 12.3 87.7 7.2 72.0 28.0

6.1 15.0 85.0 7.3 77.0 23.0

6.2 18.5 81.5 7.4 81.0 19.0

6.3 22.5 77.5 7.5 84.0 16.0

6.4 26.5 73.5 7.6 87.0 13.0

6.5 31.5 68.5 7.7 89.5 10.5

6.6 37.5 62.5 7.8 91.5 8.5

6.7 43.5 56.5 7.9 93.0 7.0

6.8 49.0 51.0 8.0 94.7 5.3

6.9 55.0 45.0

Na2HPO4·2H2O，Mr = 178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L 5 Na2HPO4·12H2O，Mr = 358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L

NaH2PO4·H2O，Mr = 138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L

NaH2PO4·2H2O，Mr = 156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L

(2)磷酸氢二钠—磷酸二氢钾缓冲液（1/15mol/L）

pH 1/15mol/L

Na2HPO4/ml 1/15mol/L

KH2PO4/ml pH 1/15mol/L

Na2HPO4/ml 1/15mol/L

KH2PO4/ml

4.92 0.10 9.90 7.17 7.00 3.00

5.29 0.50 9.50 7.38 8.00 2.00

5.91 1.00 9.00 7.73 9.00 1.00

6.24 2.00 8.00 8.04 9.50 0.50

6.47 3.00 7.00 8.34 9.75 0.25

6.64 4.00 6.00 8.67 9.90 0.10

6.81 5.00 5.00 8.18 10.00 0

6.98 6.00 4.00

Na2HPO4·2H2O，Mr = 178.05，1/15mol/L溶液为11.876g/L

KH2PO4，Mr = 136.09，1/15mol/L溶液为9.078g/L

10．磷酸氢二钠—氢氧化钠缓冲液

50ml 0.05mol/L磷酸氢二钠＋x ml 0.1mol/L NaOH，加水稀释至100ml

pH x/ml pH x/ml pH x/ml

10.9 3.3 11.3 7.6 11.7 16.2

11.0 4.1 11.4 9.1 11.8 19.4

11.1 5.1 11.5 11.1 11.9 23.0

11.2 6.3 11.6 13.5 12.0 26.9

Na2HPO4·2H2O，Mr = 178.05，0.05mol/L溶液为8.90g/L

Na2HPO4·12H2O，Mr = 358.22，0.05mol/L溶液为17.91g/L

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常见缓冲液配制方法

常见缓冲液配制方法

常见缓冲液配制方法

一、介绍

缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。缓冲液有许多种，其配制方法也多种多样。下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。

二、常用缓冲液的配制方法

1、磷酸缓冲液的配制

磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸来配制。比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。同样，如果需要制备一种低碱度的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。

2、碳酸缓冲液配制

碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸氢钠来配制。比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。同样，如果需要制备一种低碱度的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。

3、氨水缓冲液配制

氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。

缓冲液配制

缓冲液配制

1 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) ：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) ：取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) ：取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)： 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。

乌洛托品缓冲液： 取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。

巴比妥缓冲液(pH8.6)： 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。

2 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)： 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。

甲酸钠缓冲液(pH3.3) ：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)： 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。

常见缓冲液配制

常见缓冲液配制

经常使用缓冲溶液的配制之蔡仲巾千创作

（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。

pH X Y pH X Y

50 50

50 50

50 50

50 50

甘氨酸分子量＝。

0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。

（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。

pH(20℃) X Y pH (20℃) X Y

5 5

5 5

5 5

5 5 5

邻苯二甲酸氢钾分子量＝。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。

（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液

pH 0.2 mol/L

Na2HPO4 (mL) 0.1 mol/L

柠檬酸 (mL) pH 0.2 mol/L

Na2HPO4 (mL) mol/L

柠檬酸 (mL)

Na2HPO4分子量＝；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。

Na2HPO4·2H2O分子量＝；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。

C6H8O7·H2O分子量＝；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。

（四）柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液

pH 钠离子浓度

(mol/L) 柠檬酸 (g)

C6H8O7·H2O 氢氧化钠 (g)

NaOH 97％ 盐酸 (mL)

HCl (浓) 最终体积

(L)①

210 84 160 10

210 83 116 10

210 83 106 10

210 83 45 10

245 144 68 10

285 186 105 10

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法

Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液

PH 0.2mol/LNa2HPO4

(ml) 0.1mol/L柠檬酸钠 (ml) PH 0.2mol/LNa2HPO4

(ml) 0.1mol/L柠檬酸钠

(ml)

2.2 0.4 19.6 5.2 10.72 9.28

2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85

2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.40

2.8 3.17 16.83 5.8 12.09 7.91

3.0 4.11 15.89 6.0 12.63 7.37

3.2 4.94 15.06 6.2 13.22 6.78

3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.15

3.6 6.44 13.56 6.6 14.55 5.45

3.8 7.10 12.90 6.8 15.45 4.55

4.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53

4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61

4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83

4.6 9.35 10.65 7.6 18.73

1.27

4.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85

5.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55

Na2HPO4。2H2O，分子量=178.05 0.2mol/L溶液含35.61g/L

柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L

柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（0.1mol/L）

PH 0.1mol/L柠檬酸

（ml） 0.1mol/L柠檬酸

钠（ml） PH 0.1mol/L柠檬酸

（ml） 0.1mol/L柠檬酸钠

(ml)

3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8

3.2 17.2 2.8 5.2 7.3 12.7

3.4 16.0 4.0 5.4 6.4 13.6