食用菌菌种制作的关键步骤

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食用菌菌种的制作与培养

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一、母种制作

（一）母种培养基制作

1.母种培养基的种类

母种是菌种生产的关键，要求纯度高，不能混生杂菌，同时母种的菌丝体较为纤细，分解培养料的能力较弱。因此，母种菌丝体需要培养在营养丰富，易被吸收，表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。适合母种菌丝生长的琼脂培养基种类很多，常用的有下列几种：

（1）马铃薯—葡萄糖—琼脂培养基

马铃薯（去皮） 200克 琼脂 20克 葡萄糖（或蔗糖） 20克 水 1000毫升

（2）麦芽汁—葡萄糖—琼脂培养基

干麦芽 250克 琼脂 15～20克 葡萄糖（或蔗糖） 10克 水 1000毫升

（3）胡萝卜—葡萄糖—琼脂培养基

胡萝卜100克 琼脂 20克 葡萄糖（或蔗糖）20克 水1000毫升

（4）蘑菇汁—葡萄糖一琼脂培养基（适用于蘑菇）

鲜蘑菇 250克 琼脂 20克 葡萄糖（或蔗糖） 20克 水 1000毫升

（5） 蛋白胨—葡萄糖—琼脂培养基

蛋白胨 2克 葡萄糖 20克 磷酸氢二钾 2克 维生素B1（硫胺素） 0.5毫克 磷酸二氢钾 0.5克 琼脂 18克 硫酸镁0.5克 水 l000毫升

2.母种培养基的制法

以最常用的马铃薯—葡萄糖—琼脂培养基的制法为例介绍如下：

先将马铃薯去皮，洗涤，切成小块加水1000毫升，煮沸15～20分钟，取双层纱布过滤，取其滤液，加入琼脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加热使其溶化，最后补足水分，使其容量仍为1000 专业整理分享

食用菌液体菌种的生产方法（发酵罐法)

传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点，接种到培养料内有流动性好、萌发点多，发菌迅速等特种点。应用于生产与固体菌种相比有以下优点：

1．菌种生产周期短。固体种一般需25—40天，而液体种仅需3—7天。

2．接种后，萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。接种24小时菌丝布满料面，3—15天长满菌袋，一般品种10天左右可出菇。

3．接种方便、成本低。用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分，每人每小时可接800袋以上，提高效益4—5倍。

4． 适宜工厂化生产。可直接用于栽培料进行出菇，大批量生产菌袋。为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。因此，适宜我国国情的液体菌种设备的出现，必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。

液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。在这里我们对此进行简单介绍

一、液体菌种设备基本原理

任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。

液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。

二、液体菌种生产的关键技术

1、溶氧量

液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。 因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。

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食用菌液体菌种的制作食用菌

在无菌的条件下把菌种投放到培养基里。

安装通气管后用输氧机给培养基输入氧气。

把培养基放置在摇床机上进行振荡培养。

食用菌液体菌种具有生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、发酵快、适宜于工厂化生产等优点。食用菌液体菌种的生产方式一般可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵（吹氧）法、发酵罐法。据省农科院食用菌站工作人员介绍，摇瓶机法不仅接种简单，管理方便，而且生产量根据机器的设定而不同，投资2000~3000元即可。

配制液体培养基 先把马铃薯煮到熟而不烂时提取上清液，然后配制3%葡萄糖、1%玉米粉、0.05%硫酸镁、0.1%磷酸二氢钾，最后将马铃薯上清液和上述溶液及水混合即可。液体培养基适用于多种食用菌菌种的培养。

摇瓶振荡培养 液体培养基配制好后，装入容量为500毫升的三角烧瓶中，每瓶装入100毫升，并加入1～15粒小玻璃珠，瓶口用棉塞、牛皮纸密封，在1.5千克/平方厘米压强下灭菌30分钟。然后投入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养24小时。待菌丝萌发时再放置在往复式摇床上振荡培养，振荡频率为每分钟80～100次，振幅为6～10厘米。摇床室的温度控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是5天左右。将振荡好的培养基倒入大容器里，经过扩容后，在无菌条件下安装通气管，用输氧机通入适量氧气后培养48小时。培养结束的标准：培养液清澈透明，其中悬浮着大量小菌丝球，并伴有******菇类特有的香味。培养好的液体菌种应放入培养箱中保存。

《食用菌生产技术》

课程/实训教案

授课班级： 12园艺技术

授课教师：

授课时间： 2013-2014学年第1学期

河北女子职业技术学院

食用菌原种的制作技术 实训项目

实训学时 8 实训指导老师 实训时间

一、实训目标及任务要求：

1. 掌握食用菌原种制作培养基材料的选择与应用

2. 掌握食用菌原种制作培养基配置原则及步骤

3. 掌握高压灭菌锅的使用方法

4.掌握食用菌原种接种的方法及培养条件

二、实训地点

创新食用菌研究所

四、组织形式

1.分组：2组。

五、知识储备

（一）原种培养基的配制（以棉籽壳麦麸培养基为例）

按配方称量各成分 → 能溶解与水中的成分放在水中溶解 → 拌料 → 测定含水量和pH值 → 装瓶或塑料袋 →（用锥形木棒在瓶中心打一个洞为接种穴） →

擦净瓶或塑料袋外沾的培养基成分 → 扎（封）口 →放入高压锅内 → 灭菌 →备用。

注意事项：1、调节好含水量和pH值。

2、放入高压锅的材料，不要太挤，以防气流不畅而灭菌不彻底。

3、灭菌结束后，指针回复到零位，方可打开锅盖，否则会使锅内压力突然改变则造成培养基外冲。

（二）原种的接种、培养

清洗接种箱内外把需要材料及工具放入接种箱并灭菌 → 手清洗并用75%酒精棉球擦洗后，伸入接种箱的袖套内 → 点燃酒精灯，灼烧接种工具 → 解开扎口绳，松开瓶或塑料袋口（用锥形木棒在袋中心打一个洞为接种穴）→ 用左手托住母种，用右手小拇指和手掌下部夹住棉塞取下 → 用接种刀伸入母种培养基内，切出2～3

㎝长的一段→取出放入接种穴内，扎（封）口（塑料袋可以套无棉盖体） → 写上菌种名称、日期 → 放在25～28C恒温下培养20～30天左右 → 菌丝布满瓶或袋，即可用于生产栽培种。