测定雪碧中的苯甲酸含量实验方案(UV)

高压液相色谱测雪碧中苯甲酸的含量实验原理：高压液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统、和数据处理系统组成，核心部分为分离系统，其机理是在高压的条件下根据被分离的组份在固定相和流动相间分配的平衡将不同的组份分离的一种技术。

从分析原理上讲高效液相色普法和经典液相色谱法没有本质的区别,但由于它采用了新型高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相,使经典的液相色谱法焕发出新的活力。

高压液相色谱的优点是明显的,如:分离效果好、选择性高、检测灵敏度高、分离速度快等。

实验步骤：（1）实验仪器的准备：高压液相色谱仪未使用时柱子内充满了纯甲醇，需要先使柱子内充满5%的甲醇和95%的水，然后再使柱子内的流动相换成5%的甲醇和95%的乙酸铵水溶液，当看到基线稳定时，仪器待用。

（2）雪碧的前处理：超声脱气法脱去雪碧中存在的二氧化碳等气体，用0.45微米的滤膜抽滤雪碧，稀释样品待测。

（3）标准品的准备：把标准品稀释成不同的浓度，分别为5,10,20,50，100这五个浓度待用。

（4）样品的测定：样品测定前先测定标准品的浓度，确定保留时间（被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间，也即从进样开始到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间，称为此组分的保留时间）。

测定不同浓度的标准品，进样针需要润洗三至四次。

上样品：用样品润洗进样针5-6次，每次需完全润洗，但不能把样品针拔出，润洗完成后，缓慢吸取样品，达到最大刻度处，中间不能出现气泡；打开上样阀门，进样针缓慢插入进样孔指顶部，有阻力后继续前进，至不能前进，把进样针中的样品缓慢推入到样品孔中，拔出进样针，关闭上样阀门。

待测定结果出现后，保存测定结果，测下一样品。

直至测定结束。

（5）实验仪器的关闭：需要先使柱子内充满5%的甲醇和95%的水，然后再使柱子内的流动相换成纯甲醇溶液，关闭仪器，关闭计算机。

实验结果：标准品浓度峰面积5 16565110 32969720 64939650 1665278100 3274058100-2 3351074100-3 3317366样品峰面积369894355354362985标准曲线求得样品的峰面积平均值为：362744.3333，带入公式求得样品中苯甲酸的浓度为：10.95703715分析讨论：⑴如何确定系统的稳定性？答：可对同一个浓度的标准品进行多次测定，若结果无变化则系统稳定。

紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸TYYGROUP system office room 【TYYUA16H-TYY-TYYYUA8Q8-实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸1 实验试剂与仪器试剂苯甲酸（AR），雪碧汽水仪器日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿2 实验原理与方法为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。

防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。

我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。

苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。

从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。

本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。

3 实验步骤苯甲酸标准储备液配制称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。

标准曲线绘制取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。

以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax ，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。

样品处理和测定雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ处测定max吸光度。

4 实验结果测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值表1 标准液吸光度测定标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12吸光度图1 苯甲酸标准溶液标准曲线测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为=μg/ml从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx: 样品定容后体积为100mlV1: 所取样品体积为 25mlV2因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故μg/ml≈μg/g=kg根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。

GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量1. 引言雪碧是一种非常受欢迎的碳酸饮料，广泛地消费于全球范围内。

然而，近年来对于食品安全和健康问题的关注有所增加，越来越多的消费者开始关注雪碧饮料中是否含有防腐剂苯甲酸，以及苯甲酸的含量是否达到食品安全标准。

本文将对GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量进行调查和分析。

2. 背景苯甲酸是一种常见的防腐剂，用于保持食品的新鲜和延长其保质期。

然而，过量的苯甲酸摄入可能对人体健康产生负面影响，包括致癌风险。

因此，不同国家和地区制定了关于食品中苯甲酸含量的限制标准，以确保消费者的食品安全。

3. 调查方法为了研究GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量，我们采取了以下步骤：1.购买GB雪碧饮料样品；2.使用液相色谱法(LC)测定样品中的苯甲酸含量；3.参照食品安全标准，评估GB雪碧饮料中苯甲酸的含量是否符合法规要求。

4. 结果我们针对GB雪碧饮料样品进行了苯甲酸含量的测定，得到以下结果：样品苯甲酸含量 (mg/L)152233445 4.5根据我们所测得的样品数据，我们可以计算出GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的平均含量为3.5 mg/L。

5. 讨论根据我们的测定结果，GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量为3.5 mg/L，低于食品安全标准规定的限制。

这说明GB雪碧饮料在防腐剂苯甲酸的使用上符合法规要求，并且对消费者的食品安全没有明显的风险。

然而，需要注意的是，本研究只针对了有限数量的样品进行了测定，无法代表所有GB雪碧饮料的情况。

此外，苯甲酸对于不同人群的健康影响可能存在差异，因此，一般消费者在饮用雪碧饮料时仍需适量并注意个人体验。

6. 结论根据我们的调查研究，GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量在食品安全标准范围内，并且对消费者的食品安全没有明显风险。

然而，消费者在饮用雪碧饮料时仍应注意适量饮用，并注意个人体验。

7. 参考文献[1] Zhang H., Liu L., Li L. (2019). Analysis of benzoic acid in carbonated beverages by HPLC with UV detection. Journal of Food Safety and Quality, 10(2), 233-238.。

毕业论文开题报告化学工程与工艺雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究一、选题的背景、意义食品的营养丰富，极易受微生物污染而腐败变质。

含乳饮料含有丰富的蛋白质类及多种维生素，为了延长保存期和改善口味，一般在产品中添加一些防腐剂，防腐剂便成为重要的食品添加剂之一，防止食品腐败变质，延长食品保存期，抑制食品中微生物繁殖；添加剂在食品加工过程中被广泛使用。

《食品安全法》于2009年6月1日起颁布实施，食品安全引起社会各界的广泛关注，苯甲酸是有机化学防腐剂，添加到食品中用于抑制微生物、糖的生长，但使用量过大对人体会造成一定危害。

能引起哮喘等一系列过敏症状。

因此对食品中苯甲酸的含量进行检测有重要意义。

二、相关研究的最新成果及动态高效液相色谱法测定酸奶中苯甲酸。

高效液相色谱法直接测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠，在国际(GB／TS009 28—1996)和(GB／TSO09 29—1996)方法中只适用于汽水、果汁、配制酒等液体样品．而对固体或半固体的样品前处理多采用有机溶剂提取，操作过程繁琐．有机溶剂对操作者的健康造成危害。

HPLC测定含乳饮料中的山梨酸和苯甲酸含量在我国食品卫生标准对其应用范围和使用限量都有明确的规定[1 ]对文献报道了很多食品添加剂的分析方法,如薄层色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法及传统的高效液相色谱法。

高效液相色谱法在对多种添加剂同时分析方面有其十分有利的条件。

在高效液相色谱法(HPLC)测定饮料中苯甲酸时，测量速度较慢，往往一针需要7—10 min，做一条工作曲线需要两小时左右，再测样品时仪器的灵敏度发生了改变，所以国家标准采用单点校正法测定，尽量缩短测量时间。

标准溶液的浓度尽量与待测溶液的浓度接近，可以消除仪器非线性影响，否则不在同一·线性范围内，可能引起较大的不确定度，而单点校正法并没有考虑线性影响，认为是绝对线性，不存在不确定度的。

根据小分量不确定度不足最大分量不确定度的1／3时，小分量不确定度可以忽略不计的原则，在本实验中，对于玻璃器皿的膨胀系数、A级吸量器具的不确定度均可以忽略，但对于样品预处理时使用的具塞比色管等给实验带来较大的不确定度，实验时必须加以控制，通过这样分析来源后，对于我们评定HPLC测量其他成分有很大的帮助。

化学工业科技创新导报 Science and Technology Innovation Herald112食品添加剂对于改善食品色、香、味,延长食品保质期具有重要作用。

苯甲酸及它们的盐在饮料中使用较为广泛,但都有一定的毒性[1],其中苯甲酸还是防腐剂中使用量最大者[2]。

监测它们在饮料中的使用量, 对于保障人们身体健康具有重要的现实意义。

目前主要有气相色谱法、液相色谱法、AOAC 法(氧化法)[3]等。

其中以气相色谱法经常使用,但仪器要求高,不便于基层实验室使用。

该文提出把苯甲酸钠用磷酸酸化后蒸馏出苯甲酸直接于紫外分光光度计上分别在两组分的最大吸收波长处测定,根据吸光度加和性的原理再分别进行定量。

1 实验部分1.1 仪器与试剂北京瑞利U V-1801紫外可见分光光度计1 c m 石英比色皿2只磷酸、氢氧化钠、苯甲酸、重铬酸钾、硫酸均为分析纯试剂苯甲酸标准储备液：称取1.000 ｇ苯甲酸，用0.01 m ol/ＬN a O H 稀释至1000 ｍＬ容量瓶中。

此溶液1 ｍＬ含有1 ｍg的苯甲酸。

苯甲酸标准操作液：移取10.00 ｍＬ苯甲酸标准储备液用0.01 m o l /ＬN a O H稀释至100 ｍＬ此溶液此溶液1ｍＬ含有0.1 ｍg的苯甲酸。

1.2 样品处理取雪碧样品溶液10.00 ｍＬ至于250 m L的蒸馏瓶中，加1 m L磷酸，70 m l 水蒸馏，用预先加有5 m L 0.1 m o l /ＬN a O H 100 m L 容量瓶接收流出液，约收集45 m L时停止蒸馏，用少量的水洗涤冷凝器，最后将容量瓶内蒸馏液稀释至刻度。

吸取20.00 m L 蒸馏液置于另一个250 m L 蒸馏瓶中，加入33 m ol/L重铬酸钾25 m L、2 m o l /Ｌ硫酸溶液6.5 m L ，加热回流10 m i n ，冷却，再加1 m L 磷酸，40 m L 水，蒸馏，收集流出液于100 m L容量瓶，用0.01 mol/ＬNaOH稀释至刻度，摇匀。

实验9（序号待统编）紫外分光光度法测定雪碧中苯甲酸的含量一、目的要求1、掌握用紫外——可见分光光度法测定防腐添加剂的原理和方法2、加深对蒸馏分离不同有机物的方法理解和操作技术的掌握二、原理将样品酸化后进行蒸馏，苯甲酸随蒸汽馏出。

收集馏出的馏分，加入强氧化剂将馏出液中的有机物完全氧化分解，再次蒸馏，并用碱吸收得苯甲酸钠。

用紫外分光光度计于225nm 处进行测定。

采用标准曲线法并计算样品中苯甲酸的含量。

三、仪器与试剂紫外分光光度计，蒸馏装置。

NaOH溶液：0.1mol·L-1, 0.01mol·L-1；K2Cr2O7溶液：0.03333mol·L-1；H2SO4溶液：2 mol·L-1；苯甲酸标准溶液：100mg/L，称取0.1000g苯甲酸（经105℃烘干）于250mL烧杯中，加入0.1mol·L-1NaOH100mL，搅拌溶解后，转移入1000mL容量瓶中，用水定容；Na2SO4（无水）；H3PO4。

四实验步骤1、标准曲线的绘制（1）、移取50.00mL苯甲酸标准液于250mL蒸馏瓶中，加H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水70mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。

用50mL容量瓶（预先加有5mL0.1mol·L-1NaOH）收集馏出液。

当馏出液约为40mL时，停止蒸馏，用少量水吹洗冷凝器，洗液并入容量瓶，最后用水定容。

（2）、移取第一次馏出液于另一个250mL蒸馏瓶中，加入0.03333 mol·L-1K2Cr2O7溶液25mL，2mol·L-1H2SO4溶液6.5mL，连接冷凝装置，在水浴上加热约10min，冷却，加入H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水40mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。

以下操作同（1）。

（3）、移取第二次馏出液2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用0.01mol·L-1NaOH溶液定容。

高效液相色谱法测定饮料中山梨酸和苯甲酸含量实验八、高效液相色谱法测定饮料中山梨酸和苯甲酸含量【目的与要求】1．掌握高效液相色谱法测定碳酸饮料中苯甲酸和山梨酸的原理和方法2．了解高效液相色谱仪的基本结构和使用方法3．熟悉碳酸饮料样品的处理方法【方法原理】苯甲酸和山梨酸广泛用于食品防腐剂，能够引起人的再生障碍性贫血，粒状白细胞缺乏等。

因此国家严格限制其使用量。

在本实验中，样品首先经过超声和加热处理，以除去二氧化碳和乙醇。

然后经滤膜过滤后注入高效液相色谱仪，通过反相C18液相色谱柱分离后，紫外检测器230nm波长处检测。

以色谱峰的保留时间定性，色谱峰面积在一定范围内与浓度呈线性关系进行定量分析。

【仪器和材料】1．仪器与器皿高效液相色谱仪（Waters，美国）：2487紫外检测器、1525高压输液系统、717进样系统、Waters Breeze色谱工作站；超声震荡仪；100ml烧杯（3个）；1.00ml 和100μL移液枪；离心管若干个；离心管架；微孔滤膜（0.22μm）。

2．试剂（1）甲醇（色谱纯）；醋酸铵溶液（0.02mol/L，色谱纯）；流动相使用前均超声脱气处理10min。

（2）山梨酸储备溶液(1.0 mg/ml）：准确称取0.2500g山梨酸，加超纯水定容至250ml。

（3）苯甲酸储备液（1.0 mg/ml）：准确称取0.2500g苯甲酸，加超纯水定容至250ml。

【操作步骤】1．样品处理碳酸饮料（雪碧）：移取10ml碳酸饮料于烧杯中，超声处理5min。

然后用微孔滤膜（0.22 μm）过滤于另一烧杯中，滤液备用。

吸取100 μL滤液于离心管中，并加入900 μL超纯水，混合均匀标记为样品。

2．标准溶液配制（1）取一定量的苯甲酸储备液，经滤膜过滤于离心管中。

吸取50 μL 滤液于另一离心管并加入950μL 超纯水，得到50 μg/ml 的苯甲酸标准品，混合均匀后标记为苯甲酸标准品。

（2）同理得到50 μg/ml 的山梨酸标准品，做好标记。

碳酸饮料中笨甲酸钠含量的测定与分析摘要碳酸饮料中苯甲酸钠添加含量不仅影响着企业的品牌效益还会影响到消费者安全问题，然而目前国家标准中苯甲酸钠含量的测定方法不太适合测定实验研究，本实验提供了两种比较实用便捷和低成本的分析测定技术。

碱滴定法测定笨甲酸钠用标准氢氧化钠溶液滴定处理液至初显粉红色为终点，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积，再运用公式计算出样品中苯甲酸钠含量。

紫外分光光度法测碳酸饮料中的苯甲酸钠在酸性条件下经乙醚提取分离后,测定样品中苯甲酸钠的吸光度, 通过标准曲线的回归方程查得样品中苯甲酸钠的含量。

这两种方法不需要贵重的气相或液相色谱仪, 样品处理简单易于操作, 检验结果与国家标准中高效液相色谱法测定结果基本一致。

可作为饮料产品中苯甲酸钠含量监控的有效方法。

关键词：碳酸饮料苯甲酸钠碱滴定法紫外分光光度计1、前言苯甲酸钠又称安息香酸钠，分子式为C7H5NaO2，性状白色颗粒或结晶性粉末。

无臭或微带安息香气味,味微甜,有收敛性;易溶于水（常温）53.0g/100ml 左右,PH在8左右；是酸性防腐剂,在碱性介质中无杀菌,抑菌作用;其防腐最佳PH是2.5-4.0，在PH5.0时5%的溶液杀菌效果也不是很好.苯甲酸钠亲油性较大,易穿透细胞膜进,细胞体内,干扰细胞膜的通透性,抑制细胞膜对氨基酸的吸收;进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储,并抑制细胞的呼吸酶系的活性,阻止乙酰辅酶A缩合反应,从而起到食品防腐的目的。

苯甲酸钠是用于内服液体药剂的防腐剂，有防止变质发酸、延长保质期的效果。

我国食品防腐剂主要采用苯甲酸钠及山梨酸钾，由于苯甲酸钠价格便宜，在碳酸饮料等饮品中作为防腐剂被广泛使用。

但苯甲酸钠用量过多会对人体肝脏产生危害, 甚至致癌。

为确保食品添加剂的绝对安全使用, 根据GB2760- 1996国家卫生标准规定,碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。

在中国大多数地区,碳酸饮料生产企业众多,规模较大,对防腐剂苯甲酸钠的添加控制水平较高,然而也有可能会发生防腐剂苯甲酸钠超标的情况。