荷斯坦牛性控胚胎移植黄牛产业化繁殖技术

新疆维吾尔自治区科技成果转化专项资金项目可行性研究报告项目名称：喀什地区荷斯坦奶牛性别控制科技成果转化项目申报单位：喀什地区畜牧技术推广中心站（公章）科技主管部门：喀什地区科技局申报日期：新疆维吾尔自治区科学技术厅制一、项目背景（一）申请项目概述根据党的“十七大”会议精神和国发[2007]32号文关于推进新疆现代化优质畜产品基地建设，发展奶牛、优质肉牛肉羊和细毛羊产业带，加快畜禽良种繁育体系建设和种质资源保护，推动畜牧业向集约化转变的精神。

以及自治区科技成果转化专项资金项目的申报要求，本项目的实施属于2008年自治区科技成果转化专项资金征集范畴。

本项目以增加我区优质高产奶牛雌性后代为目的，运用性控精液（性控精液是使用精液流式细胞分离技术使X和Y精子有效分离，只要X不要Y，控制奶牛出生性别，是目前最成熟最先进的性别控制技术，已进入产业化生产阶段）、性控胚胎使出生子代90%以上为期望的性别，实现奶牛优良品种人为控制后代性别进行繁育。

该项目从我区畜牧业发展对优质奶牛需求迫切的区情出发，以奶牛的繁殖为市场切入点，运用性控精液进行人工授精的高新生物技术，实现奶牛人为控制后代性别进行繁育。

从而可加快奶牛繁殖的速度，降低繁殖成本，大大提高优质奶牛的推广速度，将极大地推动我区现有奶牛品种的更新换代。

增强我区畜牧业的疆内和国内市场竞争力，提高我区畜牧业的经济、社会效益。

（二）项目的社会经济意义及必要性长久以来“母牛生母牛，三年五头牛”，一直是奶牛养殖户和各大奶牛场的企望，多生一头良种母牛犊，将为他们带来几千元甚至更多的收入。

不仅如此，连续生母犊，对迅速扩繁良种奶牛群体、实现规模经济，缩短世代间隔、加速改良步伐都有着现实而重要的意义。

本项目实施，将显著提高我区高产奶牛的数量和质量，为我区发展优质高效型畜牧业提供奶牛良种和生产配套技术，从而提高我区奶牛业总体水平和经济效益。

本项目的实施使我区奶牛品种生产走向良性循环。

一、实验背景随着生物技术领域的不断发展，胚胎移植技术已经广泛应用于畜牧业生产中。

近年来，关于胚胎移植后胚胎发育与受体母体相互作用的研究逐渐增多。

本研究旨在探讨胚胎移植过程中，胚胎与受体母牛脑部的相互作用及其对胚胎发育的影响。

二、实验材料与方法1. 实验动物：选取健康、发育正常的荷斯坦奶牛作为供体，选取年龄、体重、健康状况相似的荷斯坦奶牛作为受体。

2. 实验分组：将供体和受体奶牛随机分为三组，每组5头。

3. 胚胎采集：采用超排卵技术采集供体奶牛的卵母细胞，体外受精后培养至桑椹胚期，进行胚胎移植。

4. 脑部组织采集：在胚胎移植后第5天、第10天、第15天分别对受体奶牛进行麻醉，采集脑部组织样本。

5. 实验方法：a. 采用免疫组化技术检测受体奶牛脑部组织中与胚胎发育相关的基因表达。

b. 利用实时荧光定量PCR技术检测受体奶牛脑部组织中相关基因的mRNA表达水平。

c. 采用蛋白质印迹技术检测受体奶牛脑部组织中相关蛋白的表达水平。

三、实验结果1. 胚胎移植后，受体奶牛脑部组织中与胚胎发育相关的基因表达水平显著升高。

2. 实时荧光定量PCR结果显示，受体奶牛脑部组织中相关基因的mRNA表达水平在胚胎移植后第5天、第10天、第15天均显著升高。

3. 蛋白质印迹结果显示，受体奶牛脑部组织中相关蛋白的表达水平在胚胎移植后第5天、第10天、第15天均显著升高。

四、讨论与分析1. 胚胎移植过程中，受体奶牛脑部组织中与胚胎发育相关的基因表达水平显著升高，表明胚胎移植对受体奶牛脑部组织产生了显著影响。

2. 实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示，受体奶牛脑部组织中相关基因和蛋白的表达水平在胚胎移植后第5天、第10天、第15天均显著升高，提示胚胎移植后受体奶牛脑部组织可能发生了适应性改变，以适应胚胎的发育需求。

3. 本研究结果表明，胚胎移植过程中，受体奶牛脑部组织与胚胎之间可能存在相互作用，这种相互作用可能对胚胎发育产生重要影响。

奶牛性控精液繁殖技术
侯宁玉;杨丽琳;张娟;方艳芬;王高峰
【期刊名称】《中国畜禽种业》
【年(卷),期】2015(11)11
【摘要】奶牛养殖技术日新月异,性控精液是继性控胚胎后的一项最新技术,同时也是奶牛繁育史上的一次革命,大大加快了良种奶牛的培育步伐。

在短时间内较快的
提高了奶牛的繁殖率,而且性控精液配种情期受胎率较高,生产成本低,授配技术易掌握,便于推广应用于奶牛生产,是提高奶牛情期受胎率的有效方式。

1性控精液各项
技术指标国内外生产的性控精液均为0.25/im细管精液,母犊率指标均在90%以上。

具体指标如下：
【总页数】2页(P75-76)
【作者】侯宁玉;杨丽琳;张娟;方艳芬;王高峰
【作者单位】宁夏吴忠利通区农牧局 751100;宁夏吴忠利通区农牧局 751100;宁
夏吴忠利通区农牧局 751100;宁夏吴忠利通区农牧局 751100;宁夏夏进乳液公司751100
【正文语种】中文
【相关文献】
1.用荷斯坦奶牛性控精液生产体内性控胚胎 [J], 巴特尔;孙伟;苏和;郭继彤;李喜和
2.应用奶牛性控精液生产体内性控胚胎及其移植试验初报 [J], 李剑波;王廷斌;高帅;徐飞良;朱立军
3.奶牛性控精液与常规精液抗氧化物酶活性比较分析 [J], 赵宪林;昝林森;田万强;
胡建宏;王韦华
4.“荷斯坦牛性控胚胎移植黄牛产业化繁殖技术”项目通过鉴定 [J],
5.荷斯坦牛性控胚胎移植黄牛产业化繁殖技术 [J], 赵丽
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奶牛胚胎移植技术上海交通大学农业与生物学院朱淑文一、概述牛胚胎移植的商业化应用开始于七十年代初期。

当时，必须通过手术方法才能采集胚胎，由于奶牛的乳房影响手术的顺利进行，手术后往往还会影响奶牛以后的繁殖性能，因此，胚胎移植主要在肉牛中应用。

1976年，一些研究小组报道了应用导管高效采集胚胎的非手术方法。

随后，胚胎移植在奶牛中的应用得到了飞速发展。

1974年，第一头胚胎移植登记荷斯坦奶牛在美国出生。

七十年代后期，胚胎移植（ET）登记荷斯坦奶牛的数量每年以100%以上的速度增长，1980年达到8298头年。

进入80年代后，随着非手术采胚法和移植技术的改进以及胚胎冷冻保存技术的发展，每年（ET）登记奶牛的数量在稳步增长，至1990年达到18727头年。

截止1991年，美国登记的胚胎移植荷斯坦奶牛总数量已达到142598头。

目前，44%的荷斯坦优秀种公牛是由胚胎移植培育的。

九十年代以来，胚胎移植在发达国家中的增长速度有所减缓，但是技术含量越来越高，例如体外受精胚胎生产技术、转基因技术以及克隆技术的应用和研究得到加强。

近几年来，胚胎移植在亚洲和南美一些国家中增长速度很快。

从整个世界范围来看，牛胚胎移植的增长速度仍然很快。

二、胚胎移植技术（一）体内受精胚的移植1 超数排卵在常规胚胎移植技术中，获得大量可用胚胎的主要途径是超数排卵（简称超排），因此，高效率的超排技术是胚胎移植技术能否在生产中推广应用的关键。

应用于奶牛的超排激素主要有PMSG（孕马血清促性腺激素）和FSH（促卵胞素）。

PMSG尽管只需一次性注射，省时省力，但是半衰期过长，可以导致卵巢的过度刺激以及对排卵、受精和随后的胚胎发育产生不利的影响，因此现在一般已不采用PMSG对奶牛进行超排处理。

目前广泛应用于母牛的超排激素是FSH。

用于奶牛超排的商品FSH均是从屠宰家畜的脑垂体中提取的，脑垂体不但能够分泌FSH，而且还能分泌LH，因此商品FSH制剂中都含较高水平的LH，不同厂家或同一厂家不同批次FSH制剂中的LH含量差异很大，所以商品FSH制剂的超排效果很不稳定。

中国荷斯坦牛育种原理
中国荷斯坦牛是一种优良的奶牛品种，其育种原理是通过选择、配种和遗传改良等手段，不断提高牛的产奶量、肉质和抗病能力，以满足人们对奶制品和肉制品的需求。

荷斯坦牛的育种原理涉及到遗传学、生理学和营养学等多方面知识，下面将从这些方面来探讨中国荷斯坦牛的育种原理。

首先，荷斯坦牛的育种原理与遗传学密切相关。

在育种过程中，通过对牛的遗传背景进行分析，选择具有良好遗传性状的优秀个体作为繁殖对象，以期望获得更优良的后代。

同时，利用现代生物技术手段，如人工授精、胚胎移植等，可以更精确地选择和繁殖优质的荷斯坦牛，加速育种进程。

其次，荷斯坦牛的育种原理还涉及到生理学方面的知识。

通过对牛的生殖生理特点和生殖激素的调控机制进行研究，可以更好地掌握牛的繁殖规律，提高繁殖效率。

同时，科学合理地控制牛的饲养管理，保证牛的健康生长，也是提高育种效果的重要手段。

此外，荷斯坦牛的育种原理还需要结合营养学知识。

合理的饲料配方和饲养管理可以有效地提高牛的产奶量和肉质，为育种工作提供良好的物质基础。

同时，科学的饲养管理还可以增强牛的免疫力，提高其抗病能力，减少疾病对育种工作的影响。

总的来说，中国荷斯坦牛的育种原理是一个综合性的工程，需要涉及多个学科的知识，包括遗传学、生理学和营养学等。

只有充分利用现代科学技术，结合实际情况，科学合理地制定育种方案，才能更好地提高荷斯坦牛的产奶量、肉质和抗病能力，为我国畜牧业的发展做出贡献。

奶牛性控胚胎移植技术规程1范围本文件规定了奶牛性控胚胎生产和移植技术的术语和定义、技术操作要求和方法。

本文件适用于奶牛性控胚胎生产、移植技术推广应用的规范化操作。

2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T3157-2008中国荷斯坦牛GB/T31582-2015牛性控冷冻精液NY/T34-2004奶牛饲养标准NY/T815—2004肉牛饲养标准NY/T1445-2007奶牛胚胎移植技术规程DB64/T528-2008奶牛性控冷冻精液人工授精技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。

3.1性控胚胎sexed embryos选择生产性能优良、遗传性能稳定的供体牛进行超数排卵处理，发情后用性别控制精液进行人工授精，供体牛在配种后6d～7d回收的早期胚胎。

3.2胚胎移植embryo transplantation选择与供体牛生理状况相近的受体牛，用非手术方法将胚胎移植到受体牛子宫角内，以便胚胎继续发育。

4性控胚胎生产4.1供体牛的选择与饲养管理4.1.1供体牛符合GB/T3157-2008中荷斯坦奶牛标准，系谱档案完整，体型线性评分良好。

成年母牛选择参加奶牛生产性能测定（DHI）,生产性能优良的牛只，或经遗传评估（EBV），具有较好育种价值的牛只；青年母牛选择全基因组检测（GEBV）,具有较好育种价值，或其父母生产性能优良的牛只。

4.1.2供体牛要求体格健壮，无遗传缺陷。

饲养环境的舒适、稳定，避免出现疫苗注射等应激反应。

保证科学、合理、平衡的日粮营养。

超数排卵前一个月，适量补充复合维生素、微量元素，适量增加精料，保证超排期间体重处于增重状态。

饲养标准按照NY/T34-2004执行。

具体要求按照NY/T1445-2007中5.1.1和5.1.2的规定执行。