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HPLC_ELSD法测定玉米须中_谷甾醇

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HPLC-EL S D法测定玉米须中Β-谷甾醇李　钦1,2,田智勇1,贾天柱2,许启泰1Ξ(11河南大学药学院,河南开封　475001;21辽宁中医学院,辽宁沈阳　110032) 玉米须最早药用记载见于《滇南本草》,为禾本科植物玉蜀黍Z ea m ay s L1的干燥花柱和柱头。

为《中国药典》1977年版收载品种[1]。

能够利尿消肿,降血压。

临床用于肾炎水肿,小便不利,湿热黄疸,高血压症。

Β2谷甾醇为玉米须的主要有效成分之一[2～4],实验证明Β2谷甾醇具有明显的降胆固醇、止咳、抗癌、抗炎等药理作用。

目前国内外报道的分析Β2谷甾醇的方法有毛地黄皂苷法、薄层扫描法、气相色谱法、高效液相色谱2紫外检测法、H PL C2EL SD法[5～9]。

本研究采用蒸发光散射检测器(EL SD)测定玉米须中Β2谷甾醇,与以上方法比较具有对样品不必进行处理就可以直接提取进样,能克服紫外检测甾醇时系统不稳定的困难。

在选定的色谱条件下,供试溶液中Β2谷甾醇与相邻组分分离度良好。

经方法学考察,方法的重现性、稳定性、精密度、回收率试验均符合有关规定,可用于该药材的质量控制。

1　仪器、试药与实验样品 仪器:日本岛津L C—2010A液相色谱仪, C lass2V P工作站,SED EX—75型蒸发光散射检测器。

Β2谷甾醇对照品(中国药品生物制品鉴定所,批号:085129601)经H PL C2EL SD归一法测定,质量分数为9813%,甲醇为色谱纯。

玉米须(采自山东、河南等地)。

经河南大学生药学教研室张保国教授鉴定为禾本科植物玉蜀黍Z ea m ay s L1的干燥花柱和柱头。

2　方法和结果211　色谱条件:色谱柱:Sh i m2p ack CL C2OD S(250 mm×416mm)。

流动相为:甲醇;体积流量:016 mL m in;EL SD检测器漂移管温度:40℃;载气流速:315×105Pa。

在此色谱条件下,Β2谷甾醇峰的保留时间约为412m in,与共存的其他成分分离良好,见图1,以Β2谷甾醇峰计算色谱柱的理论板数为2443。

212　对照品溶液制备:精密称取Β2谷甾醇对照品适量,加甲醇溶解,制成01435m g mL的溶液,作为对A2Β2谷甾醇对照品　B2样品液　C2甲醇溶剂A2Β2sito stero l　B2test so luti on　C2m ethano l图1　玉米须HPLC图谱F ig11　HPLC chro ma togram of corn silk照品溶液。

213　供试品溶液制备:取玉米须粉末(过一号筛)约3g(同时另取本品粗粉按照《中国药典》2005年版一部附录 H第一法测定水分),精密称定,置索氏提取器中,加入氯仿150mL,放置过夜,加热回流4 h,提取液浓缩至近干,残渣用甲醇使溶解,转移置50mL量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0145Λm)滤过,即得。

214　线性范围考察:精密称取干燥至恒重的Β2谷甾醇对照品4135m g,置10mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成01435m g mL的溶液。

分别精密吸取2、5、10、15、20、25ΛL溶液,注入液相色谱仪中,测定色谱峰面积,以进样量的自然对数为横坐标,峰面积的自然对数为纵坐标,绘制标准曲线,回归方程为:Y=1130783X+13130917,r= 019992。

表明Β2谷甾醇对照品进样量在01870～101875Λg线性关系良好。

215　精密度试验:取供试品溶液10ΛL,在上述色谱条件下连续进样6次,分别测定Β2谷甾醇峰面积,结果Β2谷甾醇峰面积自然对数R SD=1116%,表明仪器精密度良好。

216　重现性试验:取同一批样品(山东临沐县)粉末约3g,5份,精密称定,分别依法进行测定,得平均值为6197m g g,R SD=1193%。

・3881・中草药　Ch inese T raditi onal and H erbal D rugs　第36卷第12期2005年12月Ξ收稿日期:2005201208基金项目:河南大学科学研究基金项目(XK03YBYX164)作者简介:李　钦(1965—),男,河南中牟人,教授,博士。

T el:(0378)5956970　E2m ail:liqin@henu1edu1cn217　稳定性试验:取同一份供试品溶液分别在配制后0、2、4、6、8h进样测定,测得Β2谷甾醇峰面积自然对数的R SD为1185%,表明供试品溶液在8h内稳定。

218　回收率试验:取同一批样品(山东临沐县)粉末约115g,5份,精密称定,精密加入Β2谷甾醇对照品溶液(01435m g mL)2510mL,按样品测定项下方法操作,测定,结果平均回收率9812%,R SD为1110%。

219　不同产地玉米须中Β2谷甾醇的测定:分别精密吸取上述对照品溶液2110ΛL,供试品溶液5～20ΛL,注入高效液相色谱仪,测定峰面积,以外标二点法对数方程求出Β2谷甾醇的量。

结果表明,不同产地玉米须中Β2谷甾醇的差异较大,见表1。

表1　不同产地玉米须中Β-谷甾醇(n=3) Table1　Β-Sitosterol i n corn silk of Z1m ays fro md ifferen t habita ts(n=3)产　地Β2谷甾醇 (m g・g-1)山东省临沐县6197河南省西平县1157河南省新密市0176河南省中牟县7119河南省巩义市51063　讨论311　色谱条件的选择:选择色谱柱是保证分离测定的首要条件,本实验对比了大连依利特H yp er OD S C18柱(250mm×416mm),日本岛津Sh i m2p ack V P2OD S柱(250mm×416mm),发现Sh i m2p ack V P2OD S柱在本实验条件下Β2谷甾醇与其他组分的分离情况良好,结果见图1。

通过比较,选用甲醇作为流动相既简单又能保证Β2谷甾醇与其他组分的有效分离。

312　供试品溶液制备方法的选择31211　提取溶剂选择:根据Β2谷甾醇的化学性质,本试验分别用氯仿和石油醚为提取溶媒回流提取4 h,以Β2谷甾醇提取量为指标加以考察。

结果表明,氯仿提取效率较高,故选用氯仿为提取溶剂。

31212　回流提取时间考察:用氯仿为提取溶剂,对不同回流时间进行了考察,结果提示,回流提取3 h,Β2谷甾醇的提取率较低,回流提取4、5h,Β2谷甾醇的提取率相近,为节约提取时间,故确立回流提取时间为4h。

313　本实验采用H PL C2EL SD法,测定玉米须中Β2谷甾醇的量,操作在常温下进行,样品不需要衍生化处理,本方法灵敏度高,操作简便、快速,可广泛应用于Β2谷甾醇的测定,为玉米须中Β2谷甾醇的测定提供了可靠的方法。

结果可按外标两点法对数方程计算。

并对方法进行验证,标准曲线在01870～101875m g mL进样量的自然对数与峰面积的自然对数线性关系良好。

314　近年来研究表明,植物甾醇是一类具有生理活性的物质,广泛地运用于医药、食品、化妆品等行业,尤其是Β2谷甾醇,经实验证明其具有明显的降胆固醇、消炎、抗癌、退热等疗效。

因此甾醇的分离精制及分析测定也受到研究者的普遍重视[11]。

动物实验表明,玉米须的乙醇提取物具有抗肿瘤作用,对骨癌细胞SGC的体外抑制率为90170%[10],Β2谷甾醇为玉米须的有效物质之一。

进一步研究玉米须Β2谷甾醇与抗肿瘤的关系,对玉米须的开发利用具有重要意义。

315　实验结果表明:不同产地玉米须中Β2谷甾醇的量差异显著,河南省中牟县与山东省临沐县产的玉米须中Β2谷甾醇的量较高,河南省新密市与西平县产的玉米须中Β2谷甾醇的量较低,可能与品种、采收时间、产地等因素有关。

References:[1]　Ch P(中国药典)[S]1V o l 119771[2]　J iangsu N ew M edical Co llege1D ictionary of Ch inese M ateriaM ed ica(中药大辞典)[M]1Shanghai:Shanghai Peop le′sPublish ing House,19771[3]　Bobryshev N E1Co rn—a m edicinal p lant[J]1K uku ruz a,1962(9):591[4]　N ozzo lillo C,R eid L1A nhhocyanin p igm entati on of m aizesilk[J]1B u ll L iaison2G roup e P olyp henols,1992(16):1871 [5]　Peng Y,L iu F Z,Gao X1R esearch on and app licati on ofphyto stero ls[J]1Che m Ind ust E ng P rog r(化工进展),2002,21(1):491[6]　D ai L M,Zhu X R,Zhao T G1A nalysis of free stero l in V Eby gas ch rom atography[J]1Ch in O il(中国油脂),2000,25(3):411[7]　A bidi S L1Ch rom atograph ic analysis of p lant stero ls in foodand vegetable o ils[J]1J Ch ro m atog r A,2001,935(2):17322011[8]　Careri M,E lviri L1M angia A1L iquid ch rom atography2UVdeterm inati on and liquid ch rom atography2atomo speric p re2ssure chem ical i onizati on m ass spectrom etric characteri2za2ti on of sito stero l and stigm astero l in soybean o il[J]1J Ch ro2 m atog r A,2001,935(2):24922571[9]　L iu F P,D ai H,L i Y J,et al1D eterm inati on of stero l byH PL C w ith evapo rative ligh t2scatte detecto r[J]1J A nal S ci(分析科学学报),2002,18(3):2301[10]　M a H1Effect of extract of stigm a m aydison on K562andSGC Cell[J]1J N anj ing U niv T rad it Ch in M ed(南京中医药大学学报),1998,14(1):281[11]　Sun W J,Sheng J F1Concise H and book of B ioactive Co m2p ound s f ro m N atu ral P rod ucts(天然活性成分简明手册)[M]1Beijing:Ch ina M edico2Pharm aceutical Science andT echno logy Publish ing House,19971・4881・中草药　Ch inese T raditi onal and H erbal D rugs　第36卷第12期2005年12月。

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高效液相色谱法测定油脂中β-谷甾醇的含量

高效液相色谱法测定油脂中β-谷甾醇的含量

高效液相色谱法测定油脂中β-谷甾醇的含量邱丰艳;丁力;曹红云【摘要】建立了高效液相色谱法准确、高效测定油脂混合体系中β-谷甾醇含量的方法，并对油脂混合物中β-谷甾醇的提取工艺进行了优化。

采用C18反相色谱柱对β-谷甾醇含量进行测定，流动相为甲醇-水(体积比98．5：1．5)，检测波长210 nm。

结果表明：β-谷甾醇在25~500μg/mL范围内，质量浓度与峰面积呈良好的线性关系(R2=0．9998)，仪器检出限为7．5μg/mL，相对标准偏差(RSD)为0．85%；油脂混合物中β-谷甾醇的最佳提取工艺条件为提取次数4次，离心转速2000 r/min，皂化温度80℃，皂化时间210 min；在最佳提取工艺条件下β-谷甾醇的回收率为93．44%~96．48%，RSD为1．70%。

%The accurate and efficient method for determing β-sitosterol content of oil mixture by HPLC was established,and the extraction process of β-sitosterol from oil mixture was optimized. C18 reverse-phase chromatography column was used for the determination ofβ-sitosterol content under the conditions of mobile phase methanol - water (volume ratio 98. 5:1. 5 ) and detection wavelength 210 nm. The re-sults showed that the mass concentration of β-sitosterol had a good linear relationship with peak area in the range of 25-500μg/mL. The correlation coefficient, the instrumental limit of detection and the rela-tive standard deviation (RSD) were 0. 999 8, 7. 5 μg/mL and 0. 85% respectively. The optimal extrac-tion conditions of β-sitosterol from oil mixture were obtained as follows:extraction times four, centrifugal speed 2 000 r/min, saponification temperature 80℃ and saponification time 210min. Under these conditions,the recovery rate and RSD of β-sitosterol were 93. 44% -96. 48% and 1. 70%, respectively.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】5页(P91-94,95)【关键词】HPLC;β-谷甾醇;油脂混合物【作者】邱丰艳;丁力;曹红云【作者单位】龙岩学院生命科学学院，福建龙岩364012;龙岩学院生命科学学院，福建龙岩364012;龙岩学院生命科学学院，福建龙岩364012【正文语种】中文【中图分类】TS225.1;TQ646β-谷甾醇是天然植物脂质中分布最广的甾醇类物质，具有良好的生理活性和安全性，不仅可降低人体对胆固醇的吸收，还可降低血浆中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量[1-3]。

HPLC_ELSD法测定不同时期玉米须中_谷甾醇的含量

HPLC_ELSD法测定不同时期玉米须中_谷甾醇的含量

第25卷第4期河南大学学报(医学版)Vol .25　No .42006年11月Journal of Henan University (M edical Science )Nov .2006HP LC ΟE LS D 法测定不同时期玉米须中βΟ谷甾醇的含量张海波,李　钦3(河南大学中药研究所,河南开封475001)摘　要:目的:测定不同时期玉米须中βΟ谷甾醇的含量。

方法:采用高效液相色谱法蒸发光散射检测器(HP LC ΟE LS D )测定玉米须中βΟ谷甾醇的含量。

色谱条件为:VP ΟODS 柱(150mm ×4.6mm ),甲醇为流动相,蒸发光散射检测器检测参数为漂移管温度37℃,载气(N 2)流速2.51L /m in 。

结果:发现了βΟ谷甾醇在玉米须生长过程中的含量变化规律,即在7月中旬达到浓度最大值(2.3256mg/g )后,就开始呈现下降趋势。

结论:本方法可作为玉米须中βΟ谷甾醇质量控制的一种有效方法。

关键词:高效液相色谱;蒸发光散射检测器;玉米须;βΟ谷甾醇中图分类号:R927.3 文献标识码:A文章编号:1672-7606(2006)04-0053-03　收稿日期:2006-10-11　作者简介:张海波(1980-),男,河南延津人,硕士生,从事中药质量控制研究工作。

　3通讯作者:李钦(1965-),男,河南中牟人,博士,教授,硕士生导师,从事中药质量控制研究工作。

Deter m i n ati on of βΟsitosterol i n corn silk of di fferent ter m by HP LC ΟE LS DZ HANG Hai Οbo,L IQ in3(Institute of Chinese M ateria M edical,Henan university,Henan Kaifeng 475001,China )Abstract:O bjecti ve:　To deter m ine the contents of βΟsit oster ol in corn silk of different ter m.M ethods:　The contents ofβΟsit oster ol in corn silk has been deter m ined by the HP LC method with E LS D (evaporative light scattering detect or ).Thechr omat ographic conditi ons included VP ΟODS colu mn (150mm ×4.6mm )and the mobile phase consisted of pure methanol .The assay para meters of E LS D:te mperature of drifting tube in E LS D is 37℃;vel ocity of carrying gas (N 2)is2.51L /m in -1.Results:　The contents of βΟsit oster ol in corn silk of different ter m will reach a maxi m u m of 2.3256mg/g-1in m id ΟJuly,then it will become little .Conclusi on:　The method can be used for the quality contr ol of βΟsit oster ol incorn silk effectively .Key words:HP LC;E LS D;corn silk;βΟsit oster ol 玉米须为禾本科植物玉蜀黍Zea mays L.的干燥花柱和柱头。

玉米须中高含量植物甾醇的提纯工艺

玉米须中高含量植物甾醇的提纯工艺

玉米须中高含量植物甾醇的提纯工艺
植物甾醇的提纯工艺是在玉米须中提纯高品质的生物植物甾醇的一项重要行业
技术。

首先，应在实验室中进行筛选分析，包括细胞壁组成、灵敏度、表观密度等，以确定该植物提纯物的质量。

接着，应制定一整套检验报告方案，以便对提纯物的质量进行综合的控制（QC）。

其次，应采用不同的溶剂技术，如脱色、萃取、冷凝和纯化等，将原材料细分为不同类别提纯物，以解决不同植物间品质差异性问题。

此外，为提纯过程中引入的衍生物、重金属和有机混合物提供有效的水解管理，以确保玉米须中提纯物的安全可靠。

最后，对提纯产品进行表征性分析，将实验室结果与商业上使用的标准进行全面比较，以保证提纯物的可操作性和高品质。

总的来说，在植物甾醇的提纯工艺中，玉米须中的提纯物必须经过体外筛选分析、多重检测、不同溶剂技术、有效的水解处理以及表征性分析等系列步骤，以保障产品的安全可靠和高质量。

β-谷甾醇检测

β-谷甾醇检测

β-谷甾醇检测
β-谷甾醇（β-sitosterol）又称为谷甾醇、麦固醇，是一种天然的植物甾醇，广泛存在于各种植物油和坚果中，具有抗氧化、降胆固醇、修复组织等作用，因此广泛应用于医药原料和功能性食品。

迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)配备蒸发光散射检测器(ELSD)或二极管阵列检测器(DAD)，可高效、精准地检测β-谷甾醇含量变化。

此外，我们还提供其他多种甾醇检测服务，以满足您的不同需求。

送样要求和检测周期。

HPLC测定β-谷甾醇样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目报告。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

2. 相关参数（中英文）。

3. 质谱图片。

4. 原始数据。

5. β-谷甾醇含量信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。