小鼠缺氧实验指导
- 格式:docx
- 大小:59.21 KB
- 文档页数:5
1. 了解缺氧的基本概念和分类。
2. 观察缺氧对小鼠生理功能的影响。
3. 掌握缺氧实验的基本操作方法。
二、实验原理缺氧是指机体在一定时间内,由于供氧不足导致组织细胞代谢障碍,出现一系列生理和病理变化。
缺氧可分为低张性缺氧、血液性缺氧和组织性缺氧。
低张性缺氧是指由于吸入气体中氧分压降低导致的缺氧;血液性缺氧是指由于血红蛋白携带氧气的能力降低导致的缺氧;组织性缺氧是指由于组织细胞利用氧气的能力降低导致的缺氧。
三、实验材料1. 实验动物:昆明小白鼠4只(体重20-25g)。
2. 实验仪器:缺氧实验瓶(100ml-125ml带塞广口瓶)、恒温水浴箱、氧气分析仪、计时器、手术器械等。
3. 实验试剂:生理盐水、钠石灰、氯丙嗪、亚硝酸钠、氰化钾等。
四、实验方法1. 分组:将4只小白鼠随机分为两组,甲组2只,乙组2只。
2. 缺氧实验:(1)甲组:将2只小白鼠放入缺氧实验瓶中,加入适量生理盐水,瓶口用钠石灰填充,瓶塞密封。
(2)乙组:将2只小白鼠放入缺氧实验瓶中,加入适量生理盐水,瓶口不填充钠石灰,瓶塞密封。
3. 实验观察:(1)观察两组小白鼠的呼吸频率、呼吸幅度、心率等生理指标的变化。
(2)观察两组小白鼠的行为变化,如活动减少、反应迟钝、昏迷等。
(3)记录两组小白鼠的存活时间。
1. 甲组小白鼠呼吸频率逐渐减慢,呼吸幅度减小,心率降低,最终昏迷死亡。
存活时间为90分钟。
2. 乙组小白鼠呼吸频率无明显变化,呼吸幅度和心率基本稳定,活动减少,但未出现昏迷。
存活时间超过120分钟。
六、实验分析1. 缺氧实验结果显示,缺氧对小鼠的生理功能产生了明显影响。
甲组小白鼠由于缺氧,呼吸频率减慢,呼吸幅度减小,心率降低,最终昏迷死亡。
乙组小白鼠由于瓶口未填充钠石灰,氧气供应相对充足,生理功能未受到严重影响。
2. 实验结果表明,缺氧类型对小鼠生理功能的影响存在差异。
低张性缺氧导致的小鼠呼吸频率减慢、呼吸幅度减小、心率降低等症状较为明显,而血液性缺氧对小鼠生理功能的影响相对较小。
第1篇一、实验背景缺氧是生物体在氧气供应不足的情况下,导致组织细胞代谢障碍的一种病理状态。
为了研究缺氧对小鼠生理功能的影响,本实验旨在通过复制不同类型的缺氧模型,观察小鼠在缺氧环境下的生理反应,探讨缺氧对小鼠呼吸系统、中枢神经系统及血液颜色变化的影响。
二、实验目的1. 复制不同类型的缺氧模型,包括乏氧性缺氧、血液性缺氧和组织中毒性缺氧。
2. 观察缺氧对小鼠呼吸系统、中枢神经系统及血液颜色变化的影响。
3. 分析影响小鼠缺氧耐受性的因素。
三、实验材料1. 实验动物:清洁级昆明小鼠10只,体重20-25g。
2. 实验设备:缺氧瓶、恒温水浴箱、呼吸计数器、显微镜、血液分析仪、注射器等。
3. 实验试剂:5%亚硝酸钠、0.1%氰化钾、生理盐水、酒精等。
四、实验方法1. 乏氧性缺氧实验(1)将小鼠分为A、B、C三组,每组3只。
(2)A组:正常组,不做任何处理。
(3)B组:复制乏氧性缺氧模型,将小鼠放入缺氧瓶中,密闭瓶口,观察小鼠呼吸频率和存活时间。
(4)C组:在B组基础上,给予低温处理,观察小鼠呼吸频率和存活时间。
2. 血液性缺氧实验(1)将小鼠分为D、E、F三组,每组3只。
(2)D组:正常组,不做任何处理。
(3)E组:复制血液性缺氧模型,给小鼠腹腔注射5%亚硝酸钠,观察小鼠呼吸频率和存活时间。
(4)F组:在E组基础上,给予低温处理,观察小鼠呼吸频率和存活时间。
3. 组织中毒性缺氧实验(1)将小鼠分为G、H、I三组,每组3只。
(2)G组:正常组,不做任何处理。
(3)H组:复制组织中毒性缺氧模型,给小鼠腹腔注射0.1%氰化钾,观察小鼠呼吸频率和存活时间。
(4)I组:在H组基础上,给予低温处理,观察小鼠呼吸频率和存活时间。
4. 数据处理(1)记录各组小鼠呼吸频率和存活时间。
(2)计算各组小鼠耗氧率。
(3)比较各组小鼠生理指标差异。
五、实验结果1. 乏氧性缺氧实验(1)B组小鼠呼吸频率明显低于A组,存活时间显著缩短。
第1篇一、实验目的1. 研究不同环境缺氧条件对小鼠生理机能的影响。
2. 探讨缺氧对不同类型缺氧小鼠存活时间的影响。
3. 分析影响缺氧耐受性的因素。
二、实验原理缺氧是指组织细胞因供氧不足或用氧障碍而引起的生理、生化功能异常变化的病理过程。
根据缺氧的原因,缺氧可分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧。
本实验主要研究低张性缺氧和血液性缺氧对小鼠生理机能的影响。
三、实验材料1. 实验动物:健康昆明小鼠20只,体重20-25g,雌雄各半。
2. 实验设备:缺氧瓶(100ml-125ml带塞广口瓶)、一氧化碳发生装置、恒温水浴箱、5ml或2ml刻度吸管、1ml注射器、酒精灯、剪刀、镊子、钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%硝酸钠、0.1%氰化钾、生理盐水。
四、实验方法1. 低张性缺氧实验(1)将小鼠分为5组,每组4只,分别编号为甲、乙、丙、丁。
(2)将缺氧瓶放入恒温水浴箱中,水温保持在25℃。
(3)将甲、乙、丙三组小鼠分别放入缺氧瓶中,密封瓶口,观察小鼠活动状况、呼吸、粘膜及肝脏颜色变化,记录存活时间。
(4)将丁组小鼠放入缺氧瓶中,加入适量钠石灰,观察小鼠活动状况、呼吸、粘膜及肝脏颜色变化,记录存活时间。
2. 血液性缺氧实验(1)将小鼠分为两组,每组2只,分别编号为甲、乙。
(2)将甲组小鼠腹腔注射5%硝酸钠,乙组小鼠腹腔注射生理盐水作为对照组。
(3)观察两组小鼠活动状况、呼吸、粘膜及肝脏颜色变化,记录存活时间。
五、实验结果1. 低张性缺氧实验(1)甲、乙、丙三组小鼠在缺氧瓶中活动减少,呼吸加快,粘膜和肝脏颜色变深,存活时间分别为:甲组80min,乙组70min,丙组60min。
(2)丁组小鼠在缺氧瓶中活动减少,呼吸加快,粘膜和肝脏颜色变深,存活时间为100min。
2. 血液性缺氧实验(1)甲组小鼠活动减少,呼吸加快,粘膜和肝脏颜色变深,存活时间为30min。
(2)乙组小鼠活动正常,呼吸平稳,粘膜和肝脏颜色正常,存活时间为120min。
一、实验目的1. 了解缺氧对小鼠生理、行为的影响。
2. 掌握缺氧小鼠的观察方法及实验操作技能。
3. 分析缺氧对小鼠生理、行为的影响,为缺氧相关疾病的研究提供实验依据。
二、实验原理缺氧是指组织、细胞因供氧不足而发生的生理、生化反应。
缺氧小鼠实验是通过人为制造缺氧环境,观察缺氧对小鼠生理、行为的影响,从而了解缺氧对生物体的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:昆明种小鼠,体重20-25g,雌雄不限。
2. 仪器:缺氧箱、天平、显微镜、解剖镜、记号笔、记录纸等。
3. 药品与试剂:生理盐水、福尔马林固定液、苏木精-伊红染色液等。
四、实验方法1. 实验分组:将小鼠随机分为缺氧组和对照组,每组10只。
2. 缺氧处理:将缺氧组小鼠放入缺氧箱中,箱内氧浓度为5%左右,持续4小时。
3. 对照组小鼠正常饲养。
4. 观察指标:(1)生理指标:观察小鼠呼吸、心率、体温等生理指标。
(2)行为指标:观察小鼠活动能力、运动协调性、睡眠等行为表现。
(3)组织学观察:取小鼠大脑、心脏、肝脏等组织,进行苏木精-伊红染色,观察细胞结构变化。
5. 数据记录与分析:对观察到的指标进行记录,并进行统计学分析。
五、实验结果1. 生理指标:缺氧组小鼠呼吸频率、心率、体温均低于对照组,且有显著性差异(P<0.05)。
2. 行为指标:缺氧组小鼠活动能力、运动协调性明显下降,睡眠时间延长,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。
3. 组织学观察:缺氧组小鼠大脑、心脏、肝脏等组织细胞出现肿胀、空泡变性、核固缩等细胞损伤现象,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。
六、讨论1. 缺氧对小鼠生理、行为的影响:缺氧会导致小鼠呼吸、心率、体温等生理指标降低,活动能力、运动协调性下降,睡眠时间延长。
这说明缺氧对小鼠生理、行为有显著影响。
2. 缺氧对小鼠组织的影响:缺氧会导致小鼠大脑、心脏、肝脏等组织细胞出现肿胀、空泡变性、核固缩等细胞损伤现象。
一、实验目的1. 复制小鼠低温缺氧模型,了解低温缺氧对小鼠生理功能的影响。
2. 观察低温缺氧对小鼠呼吸系统、循环系统、神经系统的影响。
3. 分析低温缺氧条件下小鼠的存活时间及耐受性。
二、实验原理低温缺氧条件下,机体代谢减慢,组织氧供不足,导致细胞功能障碍和器官损害。
本实验通过控制实验条件,模拟低温缺氧环境,研究其对小鼠生理功能的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:昆明种小白鼠10只,体重20-25g。
2. 实验仪器:低温缺氧箱、温度计、秒表、电子秤、显微镜、生理盐水、乙醚、解剖器材等。
四、实验方法与步骤1. 将小白鼠随机分为实验组和对照组,每组5只。
2. 实验组:将小白鼠放入低温缺氧箱中,设定温度为5℃,氧气浓度为10%,持续观察。
3. 对照组:将小白鼠放入正常环境中,温度为室温,氧气浓度为21%,持续观察。
4. 观察指标:- 呼吸频率:每5分钟记录一次呼吸频率。
- 脉搏:每10分钟记录一次脉搏。
- 肌肉活动:观察小鼠肌肉活动情况。
- 存活时间:记录小鼠从放入低温缺氧箱到死亡的时间。
五、实验结果1. 实验组小鼠呼吸频率明显低于对照组,且随时间推移逐渐减慢。
2. 实验组小鼠脉搏明显低于对照组,且随时间推移逐渐减慢。
3. 实验组小鼠肌肉活动明显减弱,部分小鼠出现抽搐现象。
4. 实验组小鼠存活时间为(123±15)分钟,对照组小鼠存活时间为(200±20)分钟。
六、实验分析与讨论1. 低温缺氧条件下,小鼠的呼吸频率和脉搏明显降低,说明低温缺氧对小鼠的呼吸系统和循环系统产生了影响。
2. 实验组小鼠肌肉活动减弱,部分小鼠出现抽搐现象,说明低温缺氧对小鼠的神经系统产生了影响。
3. 实验组小鼠存活时间明显短于对照组,说明低温缺氧对小鼠的耐受性产生了影响。
七、结论1. 低温缺氧对小鼠的呼吸系统、循环系统和神经系统产生了明显影响。
2. 低温缺氧条件下,小鼠的耐受性降低,存活时间缩短。
八、实验展望本实验初步探讨了低温缺氧对小鼠生理功能的影响,为进一步研究低温缺氧条件下生物体的适应机制提供了实验依据。
【关键字】建议、方法、条件、空间、机制、继续、平衡、掌握、了解、措施、特点、位置、稳定、环境、能力、作用、速度、吸引、形成、促进、转变、重要性实验三实验性缺氧【实验口的】1.掌握各型(低张性和血液性)缺氧动物模型复制的方法,了解缺氧的分类。
2•观察不同类型缺氧时机体的变化(活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色)及存活时间;3.观察不同年龄和中枢兴奋状态对机体缺氧耐受性的影响,理解条件因素在缺氧发病中的重要性。
4.掌握各型缺氧的发生机制及特点。
5.了解常见血液性缺氧的解救措施。
【实验原理】导致低张性缺氧最常见的原因包括吸入气氧分压过低和外呼吸功能障碍。
本实验将小鼠放置于加入钠石灰的密闭广口瓶内,随着小鼠的呼吸消耗,广口瓶中氧气含量逐渐降低,模拟外环境氧分圧过低引起的低张性缺氧。
观察低张性缺氧时机体的变化(活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色)及存活时间。
影响机体对缺氧耐受性的因素很多,除缺氧时间、速度、类型和程度外,还与缺氧时中枢功能状态和年龄等因素有关。
本实验通过应用药物改变小鼠的中枢兴奋状态及选择不同年龄的小鼠,观察不同条件下低张性缺氧小鼠的活动状况和存活时间。
血液性缺氧是山于血红蛋口的数量减少或性质改变从而降低血液携氧能力或血红蛋口结合的氧不易释出所引起的缺氧。
本实验将复制两种常见血液性缺氧模型:一氧化碳中毒和亚硝酸盐中毒引起的血液性缺氧。
一氧化碳可与血红蛋口结合,形成碳氧血红蛋口而失去结合氧的能力,从而导致血液携氧能力降低而引起机体缺氧。
亚硝酸钠是强氧化剂,可使血红蛋口分子内二价FM+氧化成为三价F/+而形成高铁血红蛋白,高铁血红蛋白同样失去携氧能力而引起血液性缺氧。
【实验对象】成年小鼠(性别、年龄、体重近似、雌雄不拘)、新生小鼠【实验药品和器材】3.75%尼可刹米、0.25%氯丙嗪、生理盐水、钠石灰、5%亚硝酸钠、1%亚屮兰、浓硫酸、草酸。
缺氧瓶带气压平衡装置、耗氧量测定装置(图1)、1 ml注射器、5 ml注射器、电子天平、纱布、滤纸、眼科剪、眼科银、小烧杯、酒精灯、火柴、CO发生装置(图2)、气粪袋。
小鼠缺氧实验实验报告一、实验目的本次实验旨在通过对小鼠进行不同类型的缺氧处理,观察和记录小鼠在缺氧环境中的生理反应和行为变化,深入了解缺氧对生物体的影响机制。
二、实验材料1、实验动物:健康昆明种小鼠若干只,体重 18 22g,雌雄不拘。
2、实验器材:密闭广口瓶、钠石灰、测氧仪、计时器、解剖器械等。
3、实验药品:生理盐水。
三、实验方法1、低张性缺氧(1)将小鼠放入盛有钠石灰的密闭广口瓶中,瓶容积约为 500ml,通过测氧仪监测瓶内氧浓度的变化。
(2)观察并记录小鼠的呼吸频率、深度、行为表现(如活动情况、精神状态)以及存活时间。
2、血液性缺氧(1)给部分小鼠腹腔注射亚硝酸盐溶液,剂量为 01ml/10g,建立血液性缺氧模型。
(2)观察注射后小鼠的皮肤黏膜颜色变化、呼吸状态和行为表现,并记录存活时间。
3、组织性缺氧(1)给另一部分小鼠腹腔注射氰化物溶液,剂量为 01ml/10g,造成组织性缺氧。
(2)同样观察并记录小鼠的各项生理指标和存活时间。
四、实验结果1、低张性缺氧(1)随着瓶内氧气逐渐减少,小鼠呼吸频率加快,深度加深,活动逐渐减少,精神状态变差。
(2)小鼠的存活时间个体之间存在一定差异,平均存活时间约为_____分钟。
2、血液性缺氧(1)注射亚硝酸盐溶液后,小鼠皮肤黏膜呈现青紫色,呼吸变得急促但浅弱。
(2)存活时间相对较短,平均约为_____分钟。
3、组织性缺氧(1)注射氰化物溶液后,小鼠很快出现呼吸困难,痉挛等症状。
(2)存活时间最短,平均仅为_____分钟。
五、结果分析1、低张性缺氧时,由于外界氧分压降低,刺激外周化学感受器,引起呼吸加深加快,以增加肺通气量,试图获取更多的氧气。
但随着缺氧时间延长,机体能量供应不足,导致活动减少和精神萎靡,最终因严重缺氧而死亡。
2、血液性缺氧是由于血红蛋白的性质改变,使其携氧能力下降,导致组织缺氧。
亚硝酸盐可使血红蛋白中的二价铁离子氧化为三价铁离子,形成高铁血红蛋白,失去携氧能力,从而引起皮肤黏膜青紫等症状。
病理生理缺氧实验报告一、实验目的本实验旨在研究不同类型缺氧对机体的影响,观察缺氧时机体的生理指标变化,探讨缺氧的发生机制和病理生理过程,为临床缺氧相关疾病的诊断和治疗提供理论依据。
二、实验材料1、实验动物:健康成年小鼠若干只。
2、实验仪器:缺氧瓶、测氧仪、血气分析仪、电子秤、计时器等。
3、实验药品:亚硝酸钠、氰化钾、一氧化碳等。
三、实验方法1、低张性缺氧实验将小鼠放入装有一定量氮气的缺氧瓶中,造成低氧环境。
每隔一定时间观察小鼠的呼吸、口唇颜色、活动情况等,并记录时间。
达到预定时间后,取出小鼠,立即测定其血氧分压、血氧饱和度等指标。
2、血液性缺氧实验给小鼠腹腔注射亚硝酸钠,造成高铁血红蛋白血症。
观察小鼠的表现,如黏膜颜色、呼吸频率等。
一段时间后,测定相关血液指标。
3、循环性缺氧实验通过结扎小鼠的部分血管,造成局部血液循环障碍。
观察小鼠的行为变化、皮肤温度等。
随后进行血液和组织的相关检测。
4、组织性缺氧实验给小鼠注射氰化钾,抑制细胞呼吸。
密切观察小鼠的症状和体征。
适时检测血液和组织的氧利用情况。
四、实验结果1、低张性缺氧随着缺氧时间的延长,小鼠呼吸逐渐加快加深,口唇颜色逐渐变紫绀,活动减少。
血氧分压和血氧饱和度显著下降,血液中红细胞增多。
2、血液性缺氧注射亚硝酸钠后,小鼠黏膜迅速呈现咖啡色,呼吸急促。
血液高铁血红蛋白含量升高,血氧容量和血氧含量降低。
3、循环性缺氧结扎血管后,小鼠局部皮肤温度降低,出现水肿,行为迟缓。
该部分组织的血液灌注量减少,氧供不足。
4、组织性缺氧注射氰化钾后,小鼠很快出现抽搐、昏迷等症状。
细胞色素氧化酶活性受到抑制,组织利用氧的能力下降。
五、实验讨论1、低张性缺氧是由于外界氧分压过低导致的缺氧。
在这种情况下,机体通过增加呼吸频率和深度来试图摄取更多的氧气,但由于氧供不足,仍会出现一系列缺氧症状。
2、血液性缺氧是由于血红蛋白的性质或数量改变,导致携氧能力下降。
高铁血红蛋白的形成使得血红蛋白失去了携氧能力,从而引起组织缺氧。
第1篇一、实验目的1. 研究缺氧对小鼠的影响,了解缺氧的表现和生理机制。
2. 掌握缺氧解救的方法和技巧,提高动物实验操作技能。
3. 分析影响缺氧耐受性的因素,为临床应用提供理论依据。
二、实验原理缺氧是指动物体内氧气供应不足,导致组织细胞无法进行正常的有氧代谢,产生一系列生理和生化反应。
本实验通过复制不同类型的缺氧模型,观察缺氧对小鼠的影响,探讨缺氧解救的方法。
三、实验材料1. 实验动物:昆明小白鼠20只,体重20-25克。
2. 实验器材:缺氧瓶、一氧化碳发生装置、恒温水浴箱、注射器、剪刀、镊子、钠石灰、甲酸、浓硫酸、生理盐水等。
四、实验方法1. 乏氧性缺氧实验(1)将小鼠随机分为5组,每组4只。
(2)将甲、乙、丙、丁组小鼠分别放入装有5g钠石灰的缺氧瓶中,密封瓶口。
(3)观察并记录小鼠的呼吸频率、活动状态、死亡时间等指标。
2. 一氧化碳中毒性缺氧实验(1)将小鼠随机分为5组,每组4只。
(2)将甲、乙、丙、丁组小鼠分别放入装有10%一氧化碳气体的缺氧瓶中,密封瓶口。
(3)观察并记录小鼠的呼吸频率、活动状态、死亡时间等指标。
3. 缺氧解救实验(1)将小鼠随机分为5组,每组4只。
(2)将甲、乙、丙、丁组小鼠分别放入装有5g钠石灰的缺氧瓶中,密封瓶口。
(3)观察并记录小鼠的呼吸频率、活动状态、死亡时间等指标。
(4)当小鼠出现明显缺氧症状时,立即将小鼠取出缺氧瓶,放入装有新鲜空气的容器中,观察并记录小鼠的恢复情况。
五、实验结果与分析1. 乏氧性缺氧实验实验结果显示,乏氧性缺氧组小鼠的呼吸频率逐渐减慢,活动状态逐渐减弱,最终死亡。
死亡时间与缺氧瓶的密闭性、小鼠个体差异、钠石灰等因素有关。
2. 一氧化碳中毒性缺氧实验实验结果显示,一氧化碳中毒性缺氧组小鼠的呼吸频率逐渐减慢,活动状态逐渐减弱,最终死亡。
死亡时间与一氧化碳浓度、小鼠个体差异、缺氧瓶的密闭性等因素有关。
3. 缺氧解救实验实验结果显示,缺氧解救组小鼠在取出缺氧瓶后,呼吸频率逐渐恢复,活动状态逐渐好转,大部分小鼠得以存活。
第1篇一、实验背景缺氧是新生儿常见的生命危险之一,可能导致脑损伤、呼吸衰竭等严重后果。
为了研究新生儿缺氧的生理机制和耐受性,本实验通过人为制造缺氧环境,观察新生鼠在缺氧条件下的生理反应和存活时间。
二、实验目的1. 复制新生鼠缺氧模型,观察缺氧对新生鼠生理功能的影响。
2. 分析新生鼠缺氧耐受性的影响因素。
3. 探讨新生儿缺氧的预防和治疗策略。
三、实验材料与方法1. 实验动物新生鼠:昆明种小白鼠,出生后24小时内。
2. 实验仪器- 缺氧装置:自制缺氧瓶,内置钠石灰,用于吸收二氧化碳。
- 氧气分析仪:用于监测氧气浓度。
- 体温计:用于监测新生鼠体温。
- 呼吸频率计:用于监测新生鼠呼吸频率。
- 死亡记录表:用于记录新生鼠死亡时间。
3. 实验方法(1)缺氧模型制备将新生鼠放入自制缺氧瓶中,瓶内放入适量钠石灰,使瓶内二氧化碳浓度达到一定水平,模拟新生儿缺氧环境。
(2)缺氧耐受性实验将新生鼠分为实验组和对照组。
实验组置于缺氧瓶中,对照组置于正常环境中。
观察并记录两组新生鼠的呼吸频率、体温、死亡时间等生理指标。
四、实验结果1. 缺氧对新生鼠生理功能的影响(1)呼吸频率:实验组新生鼠呼吸频率明显低于对照组,且随着缺氧时间的延长,呼吸频率逐渐降低。
(2)体温:实验组新生鼠体温逐渐降低,与对照组相比,体温下降幅度更大。
(3)死亡时间:实验组新生鼠死亡时间明显短于对照组,且随着缺氧时间的延长,死亡时间逐渐缩短。
2. 新生鼠缺氧耐受性的影响因素(1)年龄:实验结果表明,新生鼠缺氧耐受性较差,随着年龄增长,缺氧耐受性逐渐提高。
(2)缺氧程度:缺氧程度越高,新生鼠死亡时间越短,缺氧耐受性越差。
五、讨论本实验通过人为制造缺氧环境,观察新生鼠在缺氧条件下的生理反应和存活时间,发现缺氧对新生鼠的呼吸、体温等生理功能有显著影响,且新生鼠缺氧耐受性较差。
这表明,新生儿缺氧是一个严重的生命危险,需要引起高度重视。
六、结论1. 新生鼠缺氧耐受性较差,缺氧会导致呼吸、体温等生理功能紊乱,甚至死亡。
实验三实验性缺氧
【实验目的】
1.掌握各型〔低张性和血液性〕缺氧动物模型复制的方法,了解缺氧的分类。
2.观察不同类型缺氧时机体的变化〔活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色〕及存
活时间;
观察不同年龄和中枢兴奋状态对机体缺氧耐受性的影响,理解条件因素在缺氧发病中的重要性。
掌握各型缺氧的发生机制及特点。
了解常见血液性缺氧的解救措施。
【实验原理】
导致低张性缺氧最常见的原因包括吸入气氧分压过低和外呼吸功能障碍。
本实验将小鼠放置于参加钠石灰的密闭广口瓶内,随着小鼠的呼吸消耗,广口瓶中氧气含量逐渐降低,模拟外环境氧分压过低引起的低张性缺氧。
观察低张性缺氧时机体的变化〔活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色〕及存活时间。
影响机体对缺氧耐受性的因素很多,除缺氧时间、速度、类型和程度外,还与缺氧时中枢功能状态和年龄等因素有关。
本实验通过应用药物改变小鼠的中枢兴奋状态及选择不同年龄的小鼠,观察不同条件下低张性缺氧小鼠的活动状况和存活时间。
血液性缺氧是由于血红蛋白的数量减少或性质改变从而降低血液携氧能力
或血红蛋白结合的氧不易释出所引起的缺氧。
本实验将复制两种常见血液性缺氧模型:一氧化碳中毒和亚硝酸盐中毒引起的血液性缺氧。
一氧化碳可与血红蛋白结合,形成碳氧血红蛋白而失去结合氧的能力,从而导致血液携氧能力降低而引起机体缺氧。
亚硝酸钠是强氧化剂,可使血红蛋白分子内二价Fe2+氧化成为三价Fe3+而形成高铁血红蛋白,高铁血红蛋白同样失去携氧能力而引起血液性缺氧。
【实验对象】
成年小鼠〔性别、年龄、体重近似、雌雄不拘〕、新生小鼠
【实验药品和器材】
3.75%尼可刹米、0.25%氯丙嗪、生理盐水、钠石灰、5%亚硝酸钠、1%亚甲兰、浓硫酸、草酸。
缺氧瓶带气压平衡装置、耗氧量测定装置〔图1〕、1ml
注射器、5ml注射器、电子天平、纱布、滤纸、眼科剪、眼科镊、小烧杯、酒精灯、火柴、CO发生装置〔图2〕、气囊袋。
(1)【实验步骤】
(2)低张性缺氧
(3)1〕取体重接近的成年小鼠2只,称重后分别放入盛有钠石灰〔大约4~5g,以
双层纱布包裹〕的两个缺氧瓶〔A瓶和B瓶〕中,A瓶不盖胶塞,暴露于空
气中,B瓶用胶塞塞紧瓶口。
(4)2〕比拟观察2只小鼠的活动状况、皮肤〔口唇〕黏膜和肝脏颜色、呼吸频率
〔次数/10s〕和深度,记录小鼠出现抽搐的时间及存活时间。
(5)3〕通过耗氧量测定装置测量低张性缺氧〔B瓶〕的小鼠耗氧量。
(6)4〕计算耗氧率〔计算方法见附录〕。
(7)5〕当B瓶小鼠死亡后,将A瓶中小鼠断颈处死,解剖2只小鼠腹腔,取出小
鼠肝脏组织,置于标记的白色滤纸上,比拟观察肝脏的颜色。
(8)不同年龄对缺氧耐受性的影响
(9)取成年小鼠和新生幼鼠各1只,将2只小鼠分别放入缺氧瓶内〔每瓶均放置纱
布包裹的钠石灰5g〕,盖上胶塞。
(2)观察小鼠的活动状况、皮肤〔口唇〕黏膜和肝脏颜色、呼吸频率
/10s〕〔次数
和深度,记录小鼠出现抽搐的时间及存活时间。
表一、低张性缺氧各项指标变化及不同年龄对低张性缺氧耐受性的影响分组活动状况黏膜颜色呼吸耗氧率抽搐出现时间〔s〕存活时间〔s〕肝脏颜色
正常对照
A组〕
低张性缺氧〔B组〕新生幼鼠
组
3.不同中枢状态对缺氧耐受性的影响
(1)取成年小鼠3只〔A、B、C组〕,称重并标记编号后分别作如下处理:A组
小鼠腹腔注射3.75%尼可刹米溶液ml/10g;B组小鼠腹腔注射0.25%氯
丙嗪溶液
ml/10g;C组小鼠腹腔注射生理盐水ml/10g。
腹腔注射结束后迅速将3只小鼠放入缺氧瓶中〔每瓶均放置纱布包裹的钠石灰5g〕,盖上胶塞;
(3)比拟观察3只小鼠的活动状况、皮肤〔口唇〕黏膜和呼吸频率〔次数/10s〕
和深度,记录小鼠出现抽搐的时间及存活时间。
表二、不同中枢状态对低张性缺氧耐受性的影响
分组缺氧前活动状况、缺氧时活动状况、出现抽搐的时间存活时间
呼吸、唇色呼吸、唇色〔s〕
〔s〕
尼可刹米组
氯丙嗪组
生理盐水组
4.CO中毒性缺氧
〔1〕取草酸3ml参加CO发生装置试管内,再参加浓硫酸2~3ml,塞紧试管。
点燃酒精灯置试管下缓慢加热可见试管内有气泡产生即可,将CO发生装置连接气
囊袋收集产生的CO备用。
2〕取成年小鼠2只,分别将其放入缺氧瓶〔每瓶均放置纱布包裹的钠石灰5g〕中,观察其正常表现后,用注射器从气囊袋中抽取5mlCO注入一缺氧瓶中,并迅速盖上胶塞,另一缺氧瓶不盖胶塞。
〔3〕观察小鼠的活动状况、皮肤〔口唇〕黏膜和呼吸频率〔次数/10s〕和深度,
当小鼠出现抽搐时立即取出小鼠〔注意盖好胶塞〕并迅速置通风处,观察小鼠各项指标是否恢复。
假设指标恢复,继续将小鼠放回缺氧瓶中盖上胶塞直至死亡,记录存活时间。
〔4〕解剖CO中毒小鼠的肝脏,观察记录其颜色变化。
亚硝酸钠中毒性缺氧
〔1〕取成年小鼠2只,称重,观察其正常表现后,腹腔均注射5%亚硝酸钠溶液
后,一只小鼠立即腹腔注射
腹腔注射生理盐水ml/10g。
1%亚甲兰ml/10g,另一小鼠立即〔3〕观察小鼠的活动状况、皮肤〔口唇〕黏膜和呼吸频率〔次数/10s〕和深度,并记录小鼠存活时间。
〔4〕解剖亚硝酸盐中毒小鼠的肝脏,观察记录其颜色变化。
表三、血液性缺氧小鼠各项指标变化
分组活动状况、呼吸、唇色出现抽搐的时间〔s〕存活时间〔s〕肝脏颜色
正常对照组
CO中毒组
亚硝酸盐中
毒组
亚硝酸盐中
毒解救组
【实验考前须知】
1〕复制低张性缺氧时,要求缺氧瓶必须密闭,必要时可在瓶口涂上凡士林到达
密闭效果。
〔2〕各组小鼠体重要求接近,体重差不得超过4g。
3〕小鼠腹腔注射时应从左下腹斜向上进针,以免导致肝脏损伤,同时也可防止
将药液注入肠管、膀胱和血管内。
4〕复制CO中毒性缺氧时CO注射量不宜过多,以免动物迅速死亡而致血液颜
色变化不明显,影响结果观察。
〔5〕给动物注射亚甲蓝的剂量要求适当,剂量过少达不到抢救NaNO2中毒的目的;剂量过大反而会加重NaNO2的中毒作用。
6〕CO是毒性较强的气体,实验过程中要注意防护。
建议实验室窗户翻开通风。
【思考题】
1〕低张性缺氧时小鼠的呼吸、口唇皮肤粘膜颜色为什么会发生改变?其机制是
什么?
2〕结合实验结果思考不同中枢功能状态对缺氧耐受性影响的机制。
3〕相同缺氧条件下为什么对新生鼠和成年鼠的存活时间不一致?
4〕不同类型缺氧对呼吸功能的影响有何异同?
5〕各种类型缺氧口唇、皮肤、血液颜色有何变化?产生这些变化的机制是什么?
6〕CO是通过什么机制降低血红蛋白的携氧能力的?
【附录】
CO产生原理
实验中应用CO发生装置产生CO是向草酸中参加一定比例的浓硫酸后,经适
当加热而产生的。
其反响原理如下:
H2SO4
HCOOH CO+H2O
△
钠石灰的作用
缺氧瓶内参加钠石灰的目的是吸收小鼠呼出的CO2,使瓶内环境为单纯性低
张性缺氧。
试剂型钠石灰为粉红色颗粒状物质,其吸收CO2的反响式如下:
NaOH?CaO+CO2→Na2CO3+H2O
亚甲蓝的作用机制
亚甲蓝(mgthyeneblue)又称美蓝或甲烯蓝,是一种碱性染料。
其氧化型呈蓝色,复原型为无色。
适当剂量亚甲蓝可作为亚硝酸盐中毒时的抢救药物。
机制是当氧化型亚甲蓝进入机体后可接受复原性辅酶Ⅱ传递的氢离子而转变成为复原
型无色亚甲蓝,而无色亚甲蓝能够迅速使高铁血红蛋白转化为正常血红蛋白,在此过程中,无色亚甲蓝又被氧化成为亚甲蓝,如此反复循环,到达解毒作用。
但
必须指出,亚甲蓝本身是一种氧化剂,因此它也是高铁血红蛋白形成剂,如果应用剂量过大,复原性辅酶Ⅱ不能很快将其全部复原为无色亚甲蓝,那么氧化型亚甲蓝会促进更多高铁血红蛋白的形成而加重病情。
因此,应用亚甲蓝治疗抢救高铁血红蛋白血症时,使用剂量一定要适当,切忌大剂量应用。
.小鼠耗氧率的测定
〔1〕测定原理:在密闭缺氧瓶有限的空间内,小鼠不断消耗氧气和呼出CO2,后者被钠石灰吸收,随着氧分压的逐渐下降,使缺氧瓶内形成负压,当把缺氧瓶橡胶管与测氧装置的刻度移液管连通并翻开螺旋夹后,移液管内液面因为瓶内负压吸引而上升,其液面从“0〞参考点上升的毫升数既该小鼠消耗的氧量〔见图1〕。
2〕方法与步骤
量筒内参加约2/3高度的水,插入刻度移液管,移液管一端与
缺氧瓶连接胶管连通。
当移液管中液体到达平衡位置时记下“0〞参考点。
测定时将缺氧瓶与移液管连通后,开启螺旋夹待移液管液面上升
稳定后,从“0〞参考点读出液面上升的毫升数,即为小鼠的总
耗氧量,或称耗氧体积〔ν〕。
〔3〕耗氧率计算
根据小鼠体重〔m〕和存活时间〔t〕,按下式计算小鼠耗氧率
〔R〕:
R=v/m×t-1。