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2022综合野外实习报告3篇综合野外实习报告篇1一、实验名称：1、植物群落数量特征调查2、西宁野生动物园动物认知实习二、实习目的：1、根据课堂学习的知识，通过实习活动，进一步感性的认知植物的群落数量特征，了解动物形态特征，通过科学的方法了解、加深对植物群落、动物的认识。
2、通过野外实习，进一步培养独立工作能力。
3、学习植物群落数量特征的调查方法。
4、初步各种动物的基本特征，为以后的学习打下基础。
三、实习意义：1、野外实习可以复习和巩固课堂所学的理论知识，是课堂的拓展和延伸。
2、实习提高动手能力，进一步培养独立工作能力。
用科学的方法观察和研究植物群落的基本特征，系统的归纳概括植物群落的特征。
3、通过野外实习端正学习态度，培养吃苦耐劳的精神，严明纪律和团结协作的精神。
4、丰富大学生活，扩大知识面，激发对自然奥秘的探索，增强保护生态环境的意识。
四、实习用具：钢卷尺（2m）；皮卷尺；方格纸；记录表格；铅笔。
五、实习方法：此法开始使用小样方，随后用一组逐渐扩大的巢式样方，逐一统计每个样方面积内的植物总数，并以种的数目为纵坐标，样方面积为横坐标，绘制种——面积曲线。
此曲线开始陡峭上升，而后水平延伸，有时会再上升。
曲线开始平伸的一点即为群落最小面积，它可以作为样方面积大小的初步标准。
方法步骤1.依实地场所的具体情况，选取两种不同的群落（如灌丛、草原、草甸），按巢式样方操作过程逐级扩大样方面积，同时逐级统计每级样方中主物的种类数量，将表中结果在方格纸上绘制成种——面积曲线，找出最小样方面积。
2.以最小面积作为一个样方面积单位，设置若干个样方，并调查植物的种类数量，种类不再增加时的样方数量就是调查该群落时的最少样方数量。
上述调查数据记入表-2。
3.以最小面积和最少样方数量作为群落数量调查时确定取样的样方数量的基本参考依据。
六、实习内容：1、青海大学西山——7月通过调查西山植物群落数量的特征，感性认知植物群落特征。
生物实验报告范文实验报告。
实验名称，观察豌豆种子的发芽过程。
实验目的，通过观察豌豆种子的发芽过程，了解种子生长的基本过程和条件。
实验材料，豌豆种子、培养皿、水、湿纸巾、温度计、显微镜。
实验步骤：1. 将培养皿中铺上湿纸巾，然后均匀地放置豌豆种子在湿纸巾上。
2. 在室温条件下，观察豌豆种子的发芽情况，并记录下发芽的时间。
3. 每天观察豌豆种子的生长情况，记录下每天的发芽率和生长情况。
4. 在观察的过程中，可以使用显微镜观察豌豆种子的微观结构，了解更多种子的生长情况。
实验结果：第一天，观察到部分豌豆种子开始发芽，发芽率约为20%。
第二天，发芽率上升到50%，发芽的豌豆种子开始生长出幼嫩的根和叶芽。
第三天，发芽率达到80%，豌豆种子的根和叶芽继续生长，根部开始向下延伸，叶芽开始向上生长。
第四天，发芽率达到100%，所有豌豆种子均已发芽，根和叶芽的生长速度加快。
第五天，豌豆种子的根和叶芽继续生长，根部开始向土壤深处延伸，叶芽开始展开。
实验分析：通过观察豌豆种子的发芽过程，我们可以得出以下结论：1. 豌豆种子在潮湿的环境下，能够迅速发芽并生长。
2. 发芽率随着时间的推移逐渐增加，说明豌豆种子的生长受到温度和湿度等条件的影响。
3. 豌豆种子的根和叶芽在发芽后迅速生长，根部向下生长以吸收水分和养分，叶芽向上生长以进行光合作用。
4. 通过显微镜观察，可以看到豌豆种子内部的胚芽和营养组织，了解更多种子的生长结构和过程。
结论：通过本次实验，我们了解了豌豆种子的发芽过程和生长情况，豌豆种子在潮湿的环境下能够迅速发芽并生长，发芽率随着时间的推移逐渐增加。
豌豆种子的根和叶芽在发芽后迅速生长，根部向下生长以吸收水分和养分，叶芽向上生长以进行光合作用。
通过显微镜观察，可以看到豌豆种子内部的胚芽和营养组织，了解更多种子的生长结构和过程。
这些观察结果为我们了解种子生长的基本过程和条件提供了重要的参考。
致谢：感谢实验中给予我指导和帮助的老师和同学们，让我能够顺利完成这次实验并得出结论。
生物实验社会实践报告范文前言本次生物实验社会实践活动是由我们大学生物学专业的学生自发组织开展的。
本次实践活动的目的是通过实地考察，深入了解生物实验在社会中的应用，提高我们的实践能力和专业知识应用能力。
在活动中，我们参观了一家生物技术公司，并与公司的工作人员进行了交流和讨论。
以下是对活动过程和所得收获的总结。
实验考察内容为了更好地了解生物实验在社会中的应用，我们选择了一家生物技术公司进行考察。
该公司是一家专业从事基因工程研究和生产的企业。
在考察过程中，我们参观了公司的实验室，了解了他们的研究方向和项目进展。
同时，我们还和公司的科研人员进行了深入的交流，讨论了科研方法、实验技术以及市场应用等问题。
实验考察成果通过对生物技术公司的实地考察，我们获得了以下几方面的收获：一、实验室设备我们参观了公司的实验室，了解了各种先进的实验设备和仪器。
这些设备包括PCR扩增仪、凝胶电泳仪等，其高效的性能和先进的技术让我们切身感受到了科技在生物实验中的重要作用。
同时，我们还发现，操作这些设备需要有扎实的理论基础和熟练的实验技能，这进一步激发了我们学习的热情。
二、科研项目公司工作人员向我们介绍了他们正在进行的一些科研项目，这些项目涉及到基因工程、细胞生物学等领域。
通过了解这些项目，我们深入了解了生物技术在医药、农业等领域的应用，对现代生物技术的发展前景有了更深刻的认识。
三、实践能力和专业知识应用能力与公司的科研人员进行交流和讨论，我们亲身体验到了科学家们的严谨工作态度和对科学的不断追求。
通过与他们的交流，我们了解到了做科研不仅仅需要扎实的专业知识，还需要追求真理的精神和耐心。
这对我们今后的学习和科研意义重大，激励我们更加努力地学习和实践。
实验考察总结通过本次生物实验社会实践活动，我们不仅了解了生物技术在社会中的应用，还提高了实践能力和专业知识应用能力。
从实地参观和交流中，我们深刻认识到了生物技术对社会发展的重要意义和应用前景。
生物实习报告实习时间，2021年7月1日-2021年7月30日。
实习地点，XX大学生物实验室。
实习内容：在本次生物实习中，我主要参与了实验室的日常工作和研究项目。
实验室的研究方向主要集中在细胞生物学和分子生物学领域，我有幸参与了一些有关细胞培养、PCR技术和蛋白质分离等方面的实验工作。
在细胞培养方面，我学习了细胞的处理、培养和观察技术。
通过观察细胞在培养皿中的生长和形态变化，我对细胞的生长特点有了更深入的了解，并学会了如何进行细胞的传代和冻存。
在PCR技术方面，我参与了DNA提取、PCR扩增和凝胶电泳等实验。
通过这些实验，我学会了如何从细胞中提取DNA，并且掌握了PCR技术的操作流程和原理。
在蛋白质分离方面，我学习了蛋白质的提取、纯化和鉴定技术。
通过实验，我了解了不同的蛋白质分离方法，掌握了SDS-PAGE凝胶电泳技术，并学会了如何使用Western blot技术检测目标蛋白质。
实习收获：通过这一个月的实习，我不仅学到了大量的实验操作技能，还深入了解了细胞生物学和分子生物学的理论知识。
在实验室的指导下，我学会了如何认真细致地进行实验操作，如何分析实验结果，以及如何与同事合作共同完成研究项目。
此外，实习还让我对生物科学研究有了更深入的了解，也增强了我对科学研究的兴趣。
在实习期间，我还参与了实验室的讨论和学术报告，与老师和同学们进行了深入的交流和讨论，这让我受益匪浅。
总结：这次生物实习是我大学生涯中非常宝贵的经历。
通过实习，我不仅学到了专业知识和实验技能，还培养了团队合作意识和科学研究的思维方式。
我将会把这次实习所学到的知识和经验，运用到今后的学习和科研中，为将来的发展打下坚实的基础。
感谢实验室的老师和同学们在我实习期间的悉心指导和帮助，让我收获颇丰。
生物实习报告
实习单位，XX生物研究中心。
实习时间，2021年6月1日-2021年6月30日。
实习内容：
在本次生物实习中，我主要参与了XX生物研究中心的日常实验
室工作和野外调查研究。
在实验室工作中，我学习了细胞培养、PCR
技术、基因克隆等实验操作，对细胞生物学和分子生物学有了更深
入的了解。
在野外调查研究中，我和团队成员一起前往自然保护区
进行生物多样性调查，记录了大量野生动植物的信息，对生物多样
性保护和生态环境保护有了更直观的认识。
实习收获：
通过本次生物实习，我不仅学到了丰富的实验操作技能，还深
刻理解了生物学理论知识在实际研究中的应用。
在野外调查研究中，我体验到了真正的科学研究过程，对生物多样性保护和生态环境保
护有了更深刻的认识。
同时，通过和研究人员的交流，我也对未来
的科研方向有了更清晰的规划。
实习心得：
本次生物实习让我受益匪浅，不仅提升了自己的实验技能，还增加了对生物学研究的热情和信心。
我深刻认识到生物多样性保护的重要性，也更加坚定了未来从事生物研究的决心。
感谢XX生物研究中心给予我这次宝贵的实习机会，我会继续努力学习，为生物科学研究做出自己的贡献。
科技实践活动报告范文第1篇开展校园文化艺术节活动。
每年的校园文化艺术节，有一个主题不变，那就是创新活动。
或学生创新作品展示，或老师作品展示；有时我们围绕当年九月份的全国科技创新周活动主题开展活动；有时我们围绕三月份的全国气象日开展活动；有时围绕着如何预防地震开展活动；有时我们围绕着每年的世界环境日开展活动；有时开展“百名科普专家进校园讲科普活动”如科大教授孙立广教授的《两极归来看两极》讲座；丰富的科技活动，极大地拓展了学生的知识视野，让我校学生享受美妙的精神大餐。
为更好灌输创新意识，校长积极动脑，布置了一道特殊的寒暑假作业。
即每年的寒暑假创新“金点子”活动，至今已经举行两年，为创新意识的培养起了一个很好的厚积薄发的作用。
学校将学生的“创新金点子”的部分作品装订成册，成了我校一道独特的创新之景。
营造创新教育氛围。
为更好将创新意识根植学生心中，根植老师心中，还是校长运用其智慧想到将校园环境尽量布置成创新氛围，为此，将教室走廊上的伟人画换成了学生每年获奖的创新作品，行走在走廊上，印入眼帘的是创新作品，行走在走廊上，印入眼帘的是学生自己的作品，让学生产生冲动，让学生产生创新意识，我也要创新。
这几年我校的创新作品虽然获奖层次不是很高，但参加人数却不断增加，这与我校不断营造创新氛围有着不可分割的关系。
成果收获。
几年来，在科技创新方面，我校一路探索一路收获：学校先后成功地组织了“合肥之水”夏令营、“生态科技”夏令营、XX年科技夏令营、英国夏令营、日本夏令营，夏令营归来的日子里，科技兴趣组的同学们递交了生物类科技论文一百多篇，如《蚯蚓有眼睛吗？》、《跳舞草“跳舞”的秘密》、《沼虾的特别特征》、《蚂蚁》、《枯叶蝶》等等；在合肥市科技创新各届大赛中，陆云龙同学的旋转式牙膏，谢蒙辰、陈禾同学的科技论文《甲醛的绿色客星》、李衎同学的《人民币灭菌的新方法》、柴路同学的《一支黄花的再利用》，丁冬刘琪同学《一次性笔心的调查报告》，周立川同学《中学生心理调查报告》等科技论文在社会上引起广泛的关注。
生物实验报告范文
实验名称，果蝇的遗传实验。
实验目的，通过观察果蝇的遗传特征，了解遗传规律。
实验材料，果蝇、果蝇培养基、显微镜、显微镜玻片、显微镜盖玻片、酒精灯、显微镜镜头、实验记录本。
实验步骤：
1. 实验前，将果蝇放置于果蝇培养基中，保持其生长繁殖。
2. 选择具有不同遗传特征的果蝇进行实验。
例如，选择具有红眼睛和白眼睛的果蝇进行交配。
3. 在显微镜下观察果蝇的遗传特征，记录观察结果。
4. 根据观察结果，分析果蝇遗传特征的遗传规律。
实验结果：
经过观察，我们发现果蝇的眼睛颜色具有遗传规律。
红眼睛果蝇与白眼睛果蝇交配后，F1代果蝇的眼睛颜色为红色，符合显性遗传规律。
而F2代果蝇的眼睛颜色呈现3:1的比例，符合孟德尔遗传规律。
这表明果蝇的眼睛颜色受到单基因的控制。
实验结论：
通过本次实验，我们了解到果蝇的遗传特征具有遗传规律，遵循孟德尔遗传规律。
果蝇的眼睛颜色受到单基因的控制，符合显性遗传规律。
通过观察果蝇的遗传特征，我们可以更好地了解遗传规律，为遗传学研究提供了重要的实验数据。
实验总结：
果蝇的遗传实验是遗传学实验中常见的实验之一，通过观察果蝇的遗传特征，可以更好地了解遗传规律。
在实验中，我们需要仔细观察果蝇的遗传特征，记录观察结果，并进行数据分析。
通过这些实验数据，我们可以更深入地了解遗传规律，为遗传学研究提供重要的实验基础。
实验中还需要注意果蝇的培养和实验操作，保证实验的准确性
和可靠性。
希望通过这次实验，同学们对果蝇的遗传特征有了更深入的了解，对遗传学有了更加深刻的认识。
生物技术野外实习报告一、实习背景随着科技的不断发展，生物技术在农业、医学、环境保护等领域发挥着重要作用。
为了进一步深入了解生物技术在实际应用中的情况，我参加了一次生物技术野外实习活动。
二、实习目的1.了解生物技术在农业领域的应用情况。
2.学习生物技术实验技能。
3.加深对生物技术的理论知识的理解。
三、实习过程在野外实习中，我首先参观了一个农业科技园区。
园区内有多个大棚，分别种植着各种蔬菜。
导游向我们介绍了这里采用的生物技术方法，包括基因改良、组织培养、基因测定等。
特别是在蔬菜的栽培中，应用基因改良技术可以提高产量、改善品质，减少病虫害的发生率。
随后，我们参观了一家生物技术公司的实验室。
在实验室中，我得到了一次亲身实践的机会。
导师向我们介绍了基因克隆的流程，并让我们进行实际的操作。
我们提取了DNA样本，并用PCR技术扩增目标基因。
接着，我们将扩增产物进行凝胶电泳分析，确认了基因的存在。
此外，我们还参观了一家生物技术企业的生产车间。
在车间内，工作人员正在进行生物制剂的生产。
他们利用发酵技术大规模生产农药、医药等产品。
在这里，我进一步了解到了生物技术在工业上的应用情况，并且看到了一系列严格的质量控制手段。
四、实习收获五、实习感想这次生物技术野外实习让我深刻认识到生物技术的广泛应用和无限潜力。
同时也发现，在生物技术领域的实践中，我们需要保持谦虚和冷静，因为生物技术的发展是一个缓慢而复杂的过程。
在接下来的学习和研究中，我将继续努力学习生物技术的理论知识，并在实践中不断提高自己的实验能力，为生物技术的发展做出自己的贡献。
生物实习报告
实习日期，2022年6月1日-2022年6月30日。
实习地点，XX大学生物实验室。
实习内容：
在本次生物实习中，我主要参与了XX教授的研究团队，进行了
一系列与植物生长和发育相关的实验。
实习内容包括植物种子萌发
实验、植物生长素处理实验以及植物组织切片观察等。
在植物种子萌发实验中，我学习了如何准备不同浓度的培养基、如何处理种子以及如何观察和记录种子的萌发情况。
通过这个实验，我深刻理解了植物营养物质对种子萌发和生长的重要性。
在植物生长素处理实验中，我学习了如何处理植物组织，如何
测定生长素的浓度以及如何观察植物的生长情况。
这个实验让我对
植物生长素的作用机制有了更深入的了解。
最后，在植物组织切片观察实验中，我学习了如何制备植物组
织切片、如何染色以及如何使用显微镜观察和拍摄组织结构。
通过这个实验，我对植物细胞和组织的结构有了更清晰的认识。
实习收获：
通过本次生物实习，我不仅学到了丰富的实验操作技能，还深入了解了植物生长和发育的相关知识。
在实习期间，我还与实验室的老师和同学们进行了深入的交流和讨论，从他们身上学到了很多宝贵的经验和知识。
未来展望：
在未来的学习和科研中，我将继续深入研究植物生长和发育的相关问题，努力提升自己的实验技能和科研能力，为推动植物科学研究做出自己的贡献。
同时，我也将继续与老师和同学们保持良好的交流和合作，共同进步，共同成长。
2024年生物实习报告范本一、引言本次生物实习是在某某大学生物实验室进行的，实习时间为两个月。
实习期间，我有幸参与了多个实验项目，包括遗传学、细胞生物学和生物化学等方面的研究。
通过实习，我进一步了解了科研工作的流程和方法，并深入学习了一些常用的实验技术和仪器操作。
在本报告中，我将详细介绍我所参与的实验项目以及我的实习心得体会。
二、实验项目1. 遗传学实验在这个实验项目中，我们研究了一种新型的遗传突变体的形成机制。
通过对果蝇的育种和交叉实验，我们发现了一些有趣的现象。
首先，我们选取了一对具有不同的突变体特征的果蝇进行交叉，得到了一代F1的果蝇。
我们将F1的果蝇再次交叉，得到了F2的果蝇。
通过观察F2果蝇的表型，我们发现了一些F2果蝇的表型特征与F1果蝇的表型特征不同的现象。
通过进一步的实验，我们确定了该新型遗传突变体是由单基因的隐性突变引起的。
通过这个实验项目，我对遗传学的一些基本原理有了更深入的理解。
我学会了进行育种和交叉实验，掌握了果蝇的饲养和观察技巧，并学会了分析实验结果和从中得出结论。
2. 细胞生物学实验在细胞生物学实验中，我们主要研究了细胞的增殖和分化机制。
通过对小鼠胚胎干细胞的培养和处理，我们探究了一种新的细胞分化诱导因子的作用机制。
通过添加不同浓度的诱导因子到培养基中，我们发现了不同浓度的诱导因子可以促使胚胎干细胞分化为不同类型的细胞。
我参与了该实验项目的细胞培养和处理工作。
通过细胞培养，我学会了细胞的培养和处理方法，并掌握了细胞培养的基本技巧。
通过观察和记录细胞的形态和增殖情况，我对细胞的增殖和分化机制有了更深入的认识。
3. 生物化学实验在生物化学实验中，我们主要研究了一种新型酶的催化机制。
通过对该酶的纯化和酶活性测定，我们发现了一种新的底物对该酶的催化效率具有显著影响的现象。
通过进一步的实验证明，底物的结构对酶的催化效率具有决定性的影响。
我主要负责该实验项目的酶的纯化工作。
通过对酶的提取和分离纯化，我学会了常用的酶纯化方法，并掌握了一些酶活性测定的技术。
生物技术综合实验甘薯γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的克隆和原核表达学生：学号：同实验者：<研究背景>谷胱甘肽(glutathione, GSH) GSH具有多种重要生理功能, 抗自由基和抗氧化应激作用, 保护细胞膜的完整性等。
γ-GCS是植物细胞中GSH生物合成的限速酶, 可以调控GSH的生物合成量。
GSH在生物体抵御冷害、干旱、重金属、真菌等胁迫过程中起着重要作用, 说明γ-GCS也与植物抗逆过程密切相关。
实验一甘薯叶片RNA提取一、实验目的1. 了解真核生物RNA提取的原理；2. 掌握Trizol提取的方法和步骤。
二、实验原理Trizol?试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂，在匀浆和裂解过程中，能在破碎细胞、降解细胞其它成分的同时保持RNA的完整性。
TRIzol的主要成分是苯酚。
苯酚的主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白，核酸物质解聚得到释放。
苯酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中还加入了8－羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase（RNA酶）。
%的8－羟基喹啉可以抑制RNase，与氯仿联合使用可增强抑制作用。
异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失，导致细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离。
β-巯基乙醇的主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键。
在氯仿抽提、离心分离后，RNA处于水相中，将水相转管后用异丙醇沉淀RNA。
用这种方法得到的总 RNA中蛋白质和DNA污染很少。
1.材料甘薯（Ipomoea batatas Lam）叶片，品种为徐薯182. 试剂① 无RNA酶灭菌水：加入%的DEPC，处理过夜后高压灭菌；② Trizol试剂；③ 氯仿；④ 异丙醇、75％乙醇；⑤ TBE缓冲液；⑥ 上样缓冲液（6×）3. 仪器高压灭菌锅、微量移液器、台式离心机、超净工作台、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、塑料离心管、枪头和EP管架四、实验方法1. 将叶片取出放入研钵中，加入适量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100 mg植物叶片加入1 mL Trizol试剂，室温放置5 min，使样品充分裂解；2. 每1 mL Trizol试剂加入200 μL氯仿，用手剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min 使其自然分相；3. 4℃ 12,000 rpm 离心15 min，吸取上层水相转移到新管中；在上清中加入等体积冰冷的异丙醇，室温放置15 min；4. 4℃ 12,000 rpm 离心10 min，弃上清，RNA沉淀于管底；5. RNA沉淀中加入1 mL 75%的乙醇（用RNase-free水配制），温和震荡离心管，悬浮沉淀；4℃ 8,000 rpm离心2 min，弃上清；6. 室温放置10 min晾干沉淀；7. 沉淀中加入20μL RNase-free ddH2O，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存；8. 用1%的琼脂糖凝胶电泳进行检测，用EB染色并照相。
1.RNA提取结果依照Trizol?试剂盒方法，提出的RNA较少，此部分未以图或数据显示。
2. RNA后电泳结果如图1. 其中9a为本组实验结果。
由图可知RNA条带非常模糊，拖尾现象严重，几乎无法分清具体条带，亮度较大。
点样孔附近的红色部分为杂质，在提取过程中并未很好除去。
图1. RNA提取跑胶结果。
其中1泳道为样品Marker，9a泳道为本小组RNA样品。
与标准对照可见条带模糊，拖尾现象严重。
六、分析与讨论1. RNA的提取产量并不多，可能是因裂解样品不充分或RNA沉淀未完全溶解所致。
在实验过程中，由于对操作时间的掌握不熟练、操作技巧不完善，留上清与弃上清时令RNA损失了部分，使最终RNA产量不理想。
2. RNA电泳结果有EB存在时，电泳后28S rRNA和18S rRNA在紫外灯下应看得很清楚，另出现条由tRNA， rRNA和5S rRNA组成的较模糊、迁移较快的带。
如果RNA没有降解，则28S rRNA的亮度应为18S rRNA的2倍，且这两条带都无弥散现象发生。
由图1. 9a可知，RNA拖尾现象严重，说明RNA已大部分被降解；此外点样孔附近出现红色部分杂质，分析可能有并未除尽的蛋白质，同样影响RNA电泳结果。
在进行实验时，本小组成员未严格戴上口罩并勤换手套，这可能使外源RNAase进入样品，导致其降解严重。
另外，提取出RNA后本小组未立即将样品放入-70℃保存，也为导致结果不理想的重要原因之一。
在最初用氯仿萃取分层的过程中，由于水相吸取过多，掺杂入部分蛋白质杂质而未于后续纯化步骤除尽，RNA条带拖尾严重可能还受该蛋白质影响。
七、总结：本次试验RNA提取非常失败，从跑胶结果可见其降解严重。
虽然大实验无法避免试剂交叉污染的可能性，且电泳用胶的质量也会影响实验结果，但从图1. 2a，3a，2b等条带较为清晰的小组实验结果可知，琼脂糖凝胶质量以及试剂对结果干扰不大。
那么本小组成员在提取过程中的操作一定出现了很大失误。
首先口罩、手套应该严格按规定佩戴，提取过程对移液枪等仪器使用需谨慎仔细，尽量避免混入杂质。
其次为排除部分杂质影响可对RNA样品用紫外线分光光度计测定吸光值检验，将有助于结果分析。
最后，细节决定成败，我们应汲取教训避免接下来的实验出现类似问题。
实验二第1链cDNA的合成和模板的验证一、实验目的1.掌握第1链cDNA的合成方法和步骤二、实验原理真核生物基因多为断裂基因，编码区不连续，需经转录后加工才能成为成熟mRNA。
以真核成熟mRNA为模板合成cDNA，进而获得有连续氨基酸编码的DNA序列，无需转录后加工，即可在原核细胞中表达。
真核生物的mRNA都有PolyA尾巴。
引物：Oligo dT（12-18个T）。
莫洛尼氏鼠白血病毒逆转录酶（M-MLV ）以单链RNA为模板，在引物的引发下合成与模板互补的DNA链（cDNA）。
mRNA 反转录生成的cDNA可作为PCR的模板进行扩增称为RT-PCR，RT-PCR 比Northern杂交更灵敏，对RNA的质量要求较低，操作简便，它是在转录水平上检测基因时空表达的常用方法。
三、实验材料1. 材料徐薯18叶片RNA样品2. 试剂① dNTP mixture（10 mM each）；② Oligo (dT) Primer (10 μM)；③ Total RNA；④ RNase free ddH2O；⑤ M-MLV 反转录酶；⑥ 5×F irst-strand Buffer；⑦ M DTT；⑧ Ribonuclease Inhibitor (40 U/μL)3. 仪器10μL 和100μL 的移液枪、的EP管、PCR仪等四、实验方法1. 在RNase free Microtube 管中配制下列混合液：dNTP mixture（10 mM each） 1 μL*Oligo (dT) Primer (10 μM) 4 μLTotal RNA 2 μLRNase free ddHO up to 12 μL22.将混合物65 °C加热5 min，迅速在冰上冷却2 min，快速离心，然后加入下列成分：5×First-strand Buffer 4 μLM DTT 2 μLRibonuclease Inhibitor (40 U/μL) 1 μL3. 将混合物轻轻混匀，37℃温浴2 min；4. 加入M-MLV反转录酶（200U/μL）1 μL，用枪头轻轻吹打混匀；5. 37℃温浴50 min；6. 70 ℃加热15 min，使反转录酶失活，所得反转录产物可直接用于PCR反应。
附反转录模板的看家基因的验证（β-actin）引物以第一链cDNA为模板，β-actin-F和β-actin-R为引物，使用Taq酶进行PCR。
表1 β-actin PCR 反应体系（25μL体系）DNA模板1μL(约50 ng)10×PCR缓冲液(Mg2+ plus)μLMg2+μL10 mol/L TPS -F 1 μL10 mol/L TPS -R1μLmmol/L dNTPμLTaq 酶μL灭菌去离子水μL合计25 μL* PCR反应条件94℃ 2min95℃ 30sec62℃ 30sec68℃30sec最后，1%琼脂糖凝胶上电泳检测扩增产物。
五、实验结果1.β-actin验证如图1. 其中编号1为Marker，3为本小组RNA样品β-actin验证结果。
由图可知，使用RNA模板通过RT-PCR得到了长度为198bp类似条带，但因产物浓度较低，该条带不甚清晰，并有部分弥散现象发生。
图1. β-actin验证电泳结果。
其中编号1为Marker，编号3为本小组RNA样品经RT-PCR 在加入引物IbActinF 、IbActinR后扩增出的β-actin产物。
六、分析与讨论1. RNA提取因实验一本小组RNA提取失败，故此实验采用老师准备的RNA进行验证。
2.β-actin验证结果如图1. 第3组为本小组验证结果。
其中β-actin能被cDNA模板扩增出，但条带模糊并有拖尾现象出现。
首先，因所得产物量较少，故电泳条带模糊，推测可能是在进行RT-PCR前，RNA有部分降解或于操作过程中损失部分所致。
其次，本实验在对β-actin产物进行电泳后结果出现拖带，可能原因主要有：1）30个循环cDNA第一链产物的含量过高；2）DNase降解DNA产生的寡核苷酸有非特异性扩增；3）PCR反应中引物过多；4）循环次数过多；5）退火温度过低；6）Taq酶过多；7）Mg2+浓度不合适。
综合本次试验分析，因实验条件已预先经过尝试，故导致拖带的最可能因素应为cDNA降解产生了寡核苷酸非特异性扩增片段。
由于照片清晰度欠佳，非特异性扩增片段无法清晰显示，但若与图2. 进行对比则可发现第2组β-actin验证图出现了非特异性扩增片段。
图2. 第2组β-actin验证图。
其中1为Marker，编号2、6可见清晰的两条带。
若要进行改进，则需尽量提取高质量RNA，防止其被DNA污染。
另外进一步优化PCR反应条件也是必不可少的环节，提高退火温度可防止非特异性起始与延伸。
七、总结本次实验虽只进行了模板验证，但让我们理解了RT-PCR的原理与其在真核生物基因克隆方面的运用。
整个过程中本小组成员较严格按照操作规范进行，所得β-actin产物验证也较成功。
今后实验需更加注意细节，不断完善自己的操作技巧，积累经验。
实验三甘薯γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因克隆一、实验目的1. 掌握PCR的方法和步骤。
二、实验原理聚合酶链反应(PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。
