1.3 Alamar Blue 法
原理: 此试剂的主要成分是一种氧化还原指示剂其在氧化状态下呈现紫蓝色无荧 光性,而在还原状态下,转变为呈粉红或红色荧光的还原产物,其吸收峰为530- 560nm。在细胞增殖过程中,细胞内NADPH/NADP、 FADH/FAD、 FMNH/FMN和
NADH/NAD的比值升高,处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些线粒体酶还原后释
产生的甲臜产物不溶于水,需被溶解后才能检测。生成的甲瓒不易
充分溶解。测试后的细胞不能继续培养。
图2.MTT处理后的显微图像
图3. Morteza等用此法检测到不同浓度SPIONs处理下心 脏细胞,脑细胞,肾细胞数量的变化
1.2
CCK-8试剂盒法
原理: WST-8是一种类似MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,
是大分子, 只有靶细胞膜完全被破坏后才能释放出来,不能较早的反
映细胞的存活状况。影响因素较多, 例如, 培养基、测定环境的温度、 p超顺磁性 纳米颗粒等不同纳米颗粒对PC 12细胞 后细胞活力的变化。
3. 针对细胞凋亡的检测(形态学观察)
在荧光显微镜下,吖啶橙染色后,活细胞核染色质呈现均匀分 布的黄绿色荧光, 胞质呈橘红色荧光,而凋亡细胞核染色质的黄绿 色荧光浓聚在核膜内侧。
图7.台盼蓝染色后的显微图像
4.3 乙酰氧甲基钙黄绿素和溴化乙锭
原理: 乙酰氧甲基钙黄绿素,是电中性的酯分子,可以通过扩
散进入细胞,一旦进入细胞就会被酯酶转化为带绿色荧光的钙黄
绿素分子。相反,若细胞损坏或死亡,本身不能渗透进入细胞的 溴化乙锭与核酸结合,可激发发红色荧光,在495nm出激发,乙酰
氧甲基钙黄绿素和溴化乙锭分别在515nm、635nm荧光信号最明显。