艾滋病实验室检查(PPT课件)

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艾滋病PPT优秀课件

中国艾滋病流行趋势转变可能向普通人群蔓延（2009年）
全国累计报告艾滋病病毒感染人数前5名的省份为河南、安徽、湖北、云南、山西，占全国总数的80％左右，主要集中在既往采供血严重的地区。
iceberg性病（↑30%/年）
吸毒(30省,上海1.1万）婚前/外性活动卖淫嫖娼同性恋流动人口采供血知晓率歧视治标与治本
皮肤卡氏肉瘤
斑丘疹
水痘-带状疱疹病毒（VZV）感染
带状疱疹
皮肤疱疹病毒感染
5、眼部巨细胞病毒视网膜炎及弓形虫
视网膜炎常见，可表现为眼底絮状白班。
下眼睑卡氏肉瘤
五、实验室检查
（一）常规：贫血、WBC降低、尿蛋白阳性。
（二）HIV抗体：初筛阳性时，用蛋白印迹法（WB）确认。
（4）其他：败血症相关性脑病等。
脑部弓形虫病
新型隐球菌
3．消化系统疾病：口腔念珠菌病口疮肛周疱疹病毒感染和疱疹性直肠
炎
口腔念珠菌病
口腔念珠菌病蔓延至食道
鹅口疮
口腔溃疡
4、皮肤黏膜皮肤黏膜病变可分为感染、
炎症性皮肤病及肿瘤三类。
皮肤卡肉瘤氏
皮肤卡氏肉瘤
七、鉴别诊断 1．特发性CD4+T淋巴细胞减少症 2．继发性CD4+T淋巴细胞减少症
类慢病毒亚科。
HIV对外界抵抗力低。对热敏感， 56℃30分钟能灭活，能被75%酒精、 0.2%次氯酸钠及漂白粉灭活。对0.1%甲醛、紫外线及γ射线均不敏感。
二、流行病学
患者（一）传染源无症状携带者
（窗口期）
（二）传播途径 ①性接触传播 ②血液传播

【正式版】艾滋病初筛实验室PPT资料

❖ 用于检测器材、污染物质的高压蒸汽消毒。
更换好防护用品进入半污染区
220v电插座倒各使用位置；血清样品、检测试剂存储冰箱------传递窗------污染区；
27平方米的一间用塑钢玻璃分为二个区，分别为：半污染区、污染区（注：血清库放在半污染区就可以）
检测仪器：酶标分析仪、电脑洗板机，电热恒温培人员由清洁区-----半污染区-------污染区
艾滋病初筛实验室
优选艾滋病初筛实验室
1. 建筑结构
❖ 平面布局合理；设置清洁区、半污染区、污染区、血清库。
❖ 门窗设有防节肢动物和啮齿动物进入的措施；墙面、天花板、地面应平整，易清洁和消毒；门具有可视窗，带闭门器
2. 设施要求
❖ 良好的通风和照明，走廊设应急灯； ❖ 近门位置设洗手盆，配备感应水龙头和洗眼器； ❖ 实验台面平整，防水、耐腐蚀、易清洗； ❖ 室内配备高压蒸汽灭菌器、污物消毒桶； ❖ 配备生物安全柜。 ❖ 这是一个符合标准初筛实验室的平面布局示范图：
递窗为机械互锁门带紫外线消毒。墙面为仿瓷涂料，地板为水磨石地坪；门、窗、隔断所有接缝用发泡剂填实；窗安装金属网纱窗；门米以上为玻璃；
2.设施、设备
❖Hale Waihona Puke 水：配置纯水（没有可放置纯水储存设备）、自来水双龙头，自来水为感应水龙头，配置洗眼器，拖
布清洗槽；两间房屋统一为HIV初筛实验室；电：每个区域配置40w日光灯、40w紫外线杀菌灯，实验台面平整，防水、耐腐蚀、易清洗；
再往左是血清库区，放置冰箱或冰柜。往右就是污染区了，主要的检测工作和设备都在这里
污染区的设备
人员由清洁区-----半污染区-------污染区墙面、天花板、地面应平整，易清洁和消毒；生物安全柜，它就是一个检测工作的洁净环境，保护操作人员免遭病毒侵害，是工作中必须配备。更换好防护用品进入半污染区再往左是血清库区，放置冰箱或冰柜。这是一个符合标准初筛实验室的平面布局示范图：（县级初筛实验室一般要求在47平方米及以上）往右就是污染区了，主要的检测工作和设备都在这里门具有可视窗，带闭门器门、窗、隔断所有接缝用发泡剂填实；检测仪器：酶标分析仪、电脑洗板机，电热恒温培养箱，酶标工作站；电：每个区域配置40w日光灯、40w紫外线杀菌灯，220v电插座倒各使用位置；传递窗为机械互锁门带紫外线消毒。血清样品、检测试剂存储冰箱------传递窗------污染区；墙面为仿瓷涂料，地板为水磨石地坪；更换好防护用品进入半污染区用于检测器材、污染物质的高压蒸汽消毒。检测仪器：酶标分析仪、电脑洗板机，电热恒温培养箱，酶标工作站；用于检测器材、污染物质的高压蒸汽消毒。

艾滋病初筛实验室.pptx

4、初筛检测的流程图三、检测结果的判定和处理
1
学海无涯
对 HIV 抗体阳性者应做好咨询、保密和报告工作。对 HIV 抗体阴性者，如近期有高危行为如性乱史、吸毒史、受血史，或有急性流感样症状等情况，为排除窗口期的可能，建议每 3 个月复查一次，连续 2 次。对 HIV 抗体可疑的对象要做好咨询和随访工作。
（五）不要用戴着手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等；
（六）尽量避免使用尖锐物品和器具；宜用不易破碎材料制品；禁止用口吸任何物质；
（七）工作结束后，要对工作台面消毒，如用消毒液清洗后要干燥 20 分钟以上；操作时有标本、检测试剂外溅时应及时消毒；平时要保持环境整洁；
（八）工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手；
附件 1：艾滋病初筛实验室标准一、必备条件
学海无涯
（一）人员条件有 3 名以上的医技人员，其中中级卫生技术职称人员 1 名以上（采供血机构的 HIV 抗体检测人员须具有技师以上卫生技术职称），从事病毒血清学检测技术工作 2 年以上，接受过国家或省级 HIV 抗体确认中心举办的 HIV 抗体检测学习班培训，并获得合格证书。
三、样本的处理（一）对从其他实验室送来的样品，注意检查并注明其送检单与标本记录的符合、样品管破损、溢漏情况。如有溢漏应立即将尚留存的血样移出，并对管壁和盛器消毒。要检查并记录样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸等情况。如经过某些临床治疗可导致样品自发荧光的，不能供荧光方法测试用。
（九）遇有意外事故，应立即处理并分别以口头和书面报告上级部门。如工作人员皮肤被刺伤，可以用流动水局部清洗或用刺激性较轻的含氯消毒剂浸泡皮肤创口；样品或检测试剂溅入眼内立即用生理盐水冲洗，溅入嘴内，先吐出残留的液体后，用水反复漱口；

艾滋病常用实验室检测及临床意义分析PPT演示课件

核酸检测
病毒载量检测
检测血液中病毒核酸，用于感染后1-2周的早期诊断。适用于高度怀疑感染或窗口期不确定的情况。
检测血液中病毒数量，用于病情评估、疗效监测和预测疾病进展。适用于治疗过程中的监测。
05
艾滋病实验室检测的未来展望
新检测技术的发展和应用
下一代测序技术
利用高通量测序技术，对病毒基因组进行全面检测，提高检测灵
艾滋病的症状和体征
01
02
03
急性期
发热、头痛、咽痛、肌肉关节痛、皮疹、淋巴结肿大等类似感冒症状。
无症状期
无明显症状，部分人可出现持续性淋巴结肿大。
艾滋病期
体重下降、发热、腹泻、疲劳、咳嗽等症状，以及各种机会性感染和恶性肿瘤的出现。
02
艾滋病常用实验室检测方法
抗体检测
抗体检测是艾滋病诊断的金标准，通过检测血液中的艾滋病抗体，可以确定是否感染了HIV病毒。
抗原检测的缺点是操作复杂、价格昂贵，且可能出现假阳性结果。
病毒载量检测
病毒载量检测是通过检测血液中病毒的数量，以评估病情和治疗反应。
病毒载量检测的优点是能够反映病毒复制水平和病情进展，有助于指导治疗方案的选择。
病毒载量检测的缺点是操作复杂、价格昂贵，且不同试剂和方法学之间存在差异。
CD4+ T细胞计数
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析ppt演示课件
目录
• 艾滋病概述 • 艾滋病常用实验室检测方法 • 艾滋病实验室检测的临床意义 • 艾滋病实验室检测的局限性 • 艾滋病实验室检测的未来展望 • 结论
01
艾滋病概述
定义与特性
定义
艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的传染病，主要攻击人体免疫系统，导致免疫功能缺陷或丧失。

艾滋病PPT课件

流行病学
传染源：病人和无症状HIV携带者
病毒主要存在于：血液、精子、子宫和阴道分泌物中。
唾液、眼泪、乳汁中也含有少量的病毒。
流行病学
传播途径：
➢性接触传播：同性、双性、性乱 ➢输血注射传播：静脉吸毒 ➢母婴传播： ➢其他传播途径：器官移植、人工授精
流行病学
易感人群：普遍易感高危人群：
➢男同性恋者 ➢性乱交者 ➢静脉药瘾者 ➢血友病和多次输血者。 ➢50岁以下的青壮年
发病机制
HIV是细胞毒性病毒 CD4+T淋巴细胞受损和大量破坏，导致细
胞免疫缺陷其他免疫细胞也不同程度受损导致并发各种严重的机会性感染和肿瘤
病理解剖
组织中炎症反应少，病原繁殖多淋巴结病变：
反应性病变：滤泡增殖性淋巴结肿肿瘤性病变：卡波济肉瘤、其他淋巴瘤胸腺病变：萎缩性、退行性、炎性病变中枢神经系统病变：神经胶质细胞的灶性坏死，血管周围炎性浸润和脱髓鞘改变
艾ห้องสมุดไป่ตู้病PPT课件
2024年2月4日星期日
概述
获得性免疫缺陷综合征(acquired immune deficiency syndrome, AIDS)
人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)所引起的致命性慢性传染病
主要通过性接触和注射传播辅助性T淋巴细胞(CD4+T淋巴细胞) 无症状病毒携带者、持续性全身淋巴结肿
III级：CD4+T淋巴细胞<0. 2×109/L 总淋巴细胞数< 1.0×109/L
临床表现
艾滋病患者常见各系统的临床表现：
肺部：卡氏肺孢子虫肺炎和巨细胞病毒肺炎最常见。临床上起病隐匿，以发热、干咳、和渐进性呼吸困难为主

HIV实验室管理及质量控制ppt课件

（2）外部对照质控血清不可反复冻融，一旦融化后应该存放2-8℃，一周内使用。
3. 外部对照质控血清的使用
原则上每一次实验必须使用外部对照质控血清，以便监控实验的重复性和稳定性。同时可以了解各批试剂盒的批间差异，绘制质量控制图。
22
（二）质控图计算方法 1x、 3…先…将xn(测x1定为值最从小小值到，大xn为排最列大：值x1，) x2， 2、计算X和s 3、计算SI上限值和SI下限值
应使用最可靠的检测方法和仪器，并定期进行评价。
11
（六）设备维护与校准
应该设立常用仪器的维护制度，以保证正常运转。推荐方法如下：
1. 酶标读数仪、洗板机
每天：核对滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。
每周：清洁仪器表面，保护光学零件不沾灰。
每月：检查洗涤时各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求。
（4）提供检测前、后的咨询服务。
8
艾滋病实验室质量管理
实验室质量管理包括质量保证、质量控制和质量评价。
9
一、质量保证（QA）
（一）行政支持行政部门要关心艾滋病实验室的建设和发展，保证
实验室负责人和主要技术人员的稳定，保证实验室的建筑和设备需要、给予充足的经费支持，并进行经常性监督检查。（二）实验室规范化建设
3
二、设备条件
HIV筛查实验室：有独立的实验用房（或至少有专用的检测
台），要分清洁区、半污染区和污染区。酶标读数仪和洗板机、精确的移液器、普通专用冰箱、离心机、水浴箱或温箱、各种污物及消毒设施、安全防护用品和恒温设施。
4
实验室的任务
筛查中心实验室
（1）对本地区按规定和自愿要求检测的对象作 HIV抗体筛查检测。

(四)艾滋病梅毒丙肝检测及结果意义PPT课件

进行血清学检查。
最新课件
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血清学检测
• 非梅毒螺旋体抗原血清试验
性病研究实验室试验（VDRL）
不加热血清反应素试验（USR）
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR、TRUST）
• 梅毒螺旋体抗原血清试验
荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）
梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）
梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）
• 1 耐药监测
• 用于HIV-1感染人群和抗病毒治疗人群。用于新近感
染人群的耐药性监测，了解耐药毒株流行的情况；用
于治疗前人群的监测，指导制定一线抗病毒治疗方案；
用于抗病毒治疗人群的耐药性监测，进行HIV-1耐药
发生、发展趋势以及影响因素的分析，指导和完善大
规模公共卫生模式抗病毒治疗的程序，以及制定二线
梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（TP-ELISA）
梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RT）
最新课件
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非梅毒螺旋体抗原血清试验
• 以心磷脂、卵磷脂、胆固醇为抗原,检测抗类脂质抗体（反
应素），主要是IgM和IgG混合体。
• 方法简单、快速、价格低廉、敏感性和特异性较好，适用
于大量人群的筛查。
• 治疗后血清滴度可下降并转为阴性，可作为疗效观察、判
• 3 确证方法包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫
试验、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试
验（IFA）等。
最新课件
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HIV抗体不确定（±）
结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带
型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间
出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展，
但不满足阳性标准，应继续随访到8周。如带型没有进

HIV检测技术 ppt课件

复检试验
对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验。
如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包括一种抗原抗体联合试剂。
艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品，确证实验室可以直接进行确证试验。
原有试剂＋另一种原理初筛试剂
（3）快速检测（RT）及其它检测试验
优点:试验简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测。不需专门设备和人员培训,一般可在 10～30分钟内得出结果。
缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保存。
快速诊断试剂
（1）明胶颗粒凝集试验（PA）将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作
用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含有 HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。
加样温育洗板显色
标准化操作及流程
试剂准备、标本收集、测定方法和仪器操作写出正确的“标准操作程序”(SOP)，所有的实验技术人员在进行相关测定时，必须严格按相应的SOP进行操作。
ELISA法结果判断
临界值概念: 将检测的阳性和（或）阴性对照的 OD值代入计算公式计算出来的判断阳性和阴性结果的界值
吸附－穿入－脱壳－生物合成－组装成熟和释放
HIV-1通过gp120与靶细胞表面CD4分子和趋化因子受体结合
HIV感染后的血清学改变
HIV抗体检测目的
诊断：确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。
监测：了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。

HIV感染的实验室检测(共36张PPT)

• （3）实验结果
• ①阴性对照（NC），HIV-1阳性对照（PC1），HIV-2阳性对照（PC2）
NC 必须＜0.25方可用，排除NC≥0.25的值，计算NC平均值。
NC界限范围：0.6倍NC均值＜NC＜1.4倍NC均值。
• 竞争法、捕获包被法等 4、严格遵守实验室标准操作规程（SOP）。
为了达到以上的某个目的的HIV 检测可能不适合其他目的，比如输血服务的检测不适合临床诊断HIV感染（4）艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶免疫间接法。监测(为了知晓人群流行状况) Introduction to HIV Testing ⑥在2h内置于酶标仪读数，单波长450nm，或双波长450/630nm测OD值。常用HIV抗体检测方法: 加受检标本，保温反应。（1）明胶颗粒凝集试验（PA）：PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后保温（一般为室温）。
ELISA的原理
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
ELISA的原理
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。
ELISA
酶联免疫吸附试验 + ve
HIV
包被了HIV 抗
原的检测板
患者的抗体

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无症状期、艾滋病期临床表现。
Ø 实验室检查： ① HIV 抗体阳性，并经确证试验确认。 ②
CD4+T淋巴细胞数明显减少。③HIV RNA和P24抗原的检测有助于早期诊断新生儿的HIV感染。
12
诊断标准
急性期
★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性 ★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性
胞>500/mm3，病毒载量<103拷贝/ml
Ø长期存活型 (极少)：进展到艾滋病期后能稳定较长
一段时间
19
放映结束感谢各位的批评指导！
谢谢！
让我们共同进步
20
Ø 并发的机会性感染：
同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；合并丙型肝炎者预后差
Ø 抗逆转录病毒治疗：
治疗改变了艾滋病进程
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HIV感染未治疗者的结局
Ø典型 (70%～80%)：5～10年进展为艾滋病 Ø 快速进展型(10%～15%)：2～3年 Ø长期无进展型 (<5%)：HIV感染超过10年CD4+细
无症状期
★流行病学史、HIV抗体阳性 13
诊断标准
艾滋病期
★ 流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列
一项或以上：
1.短期（6个月内）体重下降10％以上；2.咳嗽或腹泻超过4周；3.持续或间歇发热超过4周；4.全身淋巴结
肿大；5.反复带状疱疹或慢性播散性HSV感染；6.口
咽念珠菌病；7.全身搔痒性皮炎；8.反复发生的败血
6
分子生物学检测（1）
HIV RNA检测—RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应）
核酸定量技术原理
PCR：高温变性(94℃)→低温退火 (55℃)→适温延伸(72℃)；经25~30 个循环，成倍数扩增
荧光定量PCR：比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）
应用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR 查血浆中的病毒RNA
症；9.深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；10.肺孢子
虫肺炎；11.活动性巨细胞病毒感染；12.弓形虫脑病。
13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性
结核病；14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、
青年痴呆症；15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。
14
诊断标准
★HIV抗体阳性
CD4+T淋巴细胞数<200/mm3 无上述表现或症状
7
分子生物学检测（2）
淋巴细胞HIV RNA检测——
Northern印迹杂交(Northern blot)
原理： RNA片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交
8
分子生物学检测（3）
HIV变异株检测——Sanger测序法
原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生A、T、 C、G四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的PAGE 胶上电泳，获得DNA序列
15
鉴别诊断
原发性CD4+淋巴细胞减少症
无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。
继发性CD4+淋巴细胞减少
肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免疫抑制治疗后。
16
预后
17
影响预后的因素
Ø 感染的HIV型别及亚型：
HIV-1较HIV-2临床进展快
艾滋病 (AIDS)
1
实验室检查
2
免疫学检测
R2
M1
流式细胞仪测定
3
血清学检测（１）
HIV抗体的初筛试验——ELISA（酶联免
疫试验）
4
血清学检测（２）
HIV抗体的确证试验——Western blot （免疫印迹
试验）
5
血清学检测（３）
HIV抗原检测——ELISA夹心法
测定p24抗原敏感性很高（7～10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性）
9
病毒检测
血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV 操作复杂，主要用于科研
10
诊
断
有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活
史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。
Ø 临床表现：
高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现，颈、腋及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。