动物体细胞杂交技术过程

杂种细胞
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2.制备过程：
注射抗原的目的是什么
诱导其融合的方法有哪些？
融合后培养液中有几种细胞
怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交 瘤细胞有何优点
为何要进行克隆化培养和专 一抗体检测，多次筛选
大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
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二、单克隆抗体
3.单克隆抗体的应用：
①在基础理论研究中具有重要意义
②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有 特异性高、灵敏度高等优越性。
③生物导弹
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思考题
★制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细 胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？
★假如你掌握了动物细胞融合技术，你想用它 来解决什么问题？
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细胞融合后培养液中有几种细胞？ B BB B瘤 瘤瘤 瘤 筛选杂种细胞
诱导方法
物理（离心、振 物理、化学方法
动、电刺激）
（同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途
获得杂种植株 主要用于制备
单克隆抗体
思考题
7、你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？ 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞
8、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体
二、单克隆抗体 提
1.抗体是由何种细胞产生的？
每个Ｂ淋巴细胞只能分泌一种抗体，由一个Ｂ淋巴细胞 增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份是单一的。
如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？
体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体
体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?
怎样解决这个问题？
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二、单克隆抗体
设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖
问
？ ２、一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种
抗体吗？
３、一种抗原侵入机体之后，引起机体免 疫反应产生的抗体只有一种吗？
４. 简述获得抗体的传统途径？
５、这种方法获得的抗体有什么缺陷？
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传统血清抗体的制备
特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏
抗原 刺激 动物体 抗原不纯
浆细胞 抗体
抗体不纯
细胞
AB
脱 分
化
伤 组 织
植物细胞B
胞
促进融合 壁
的方法？
杂
种
再植
分 化
株
成果和未解决的问题
成果：克服不同生物远缘杂交的障碍，出 现自然界没有的新品种。
未解决的问题：未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
如果将牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶 牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶啦！
动物细胞也能融合吗？
一、动物细胞融合
1、动物融合的过程 请同学们阅读课本P52动物融合
1、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细 胞 灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞 进行有丝分裂
思考题
1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？
酶解法，如纤维素酶或果胶酶
2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？
已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中
D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有
这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。
鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断
分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加
PEG促融，在筛选培养基上筛选获得杂种细
胞。
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幻 17灯
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通过长期的实验，科
学家们采用体细胞杂交 技术获得了“番茄—马 铃薯”植株。
“番茄—马铃薯”理想图 可编辑ppt
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植物体细胞杂交技术过程
原理？
植物细胞的融合
原理？ 植物组织培养
植物细胞A
方法？
融合 完成
去壁
的 标志
原生质体A 原生质体B
去壁
筛选融 杂种
愈
人 工 诱 导
合AB
的原生 质体
再 生 出 细
无需，因为动物细胞无细胞壁
3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？
离心、电激等物理方法；PEG等化学方法
4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？
？ 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5、植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？
不能
6、你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？
2、动物细胞融合的概念
动物细胞融合也称细胞杂交， 是指两个或多个动物细胞形成一个 细胞的过程
植物、动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性 植物细胞全能性
细胞融合的方法 去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 导原生质体融合 导细胞融合