氮的定量测定方法

一、植物全氮测定（一）H2SO4-H2O2消煮法1、适用范围本方法不包括硝态氮的植物全氮测定,适合于含硝态氮低的植物样品的测定。

2、方法提要植物中的氮、磷大多数以有机态存在,钾以离子态存在。

样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮,有机物被氧化分解,有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐,钾也全部释出。

消煮液经定容后,可用于氮、磷、钾的定量。

采用H2O2为加速消煮的氧化剂,不仅操作手续简单快速,对氮、磷、钾的定量没有干扰,而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。

但要注意遵照操作规程的要求操作,防止有机氮被氧化成N2气或氮的氧化物而损失。

3、试剂（1）硫酸(化学纯,比重1.84);（2）30% H2O2(分析纯)。

4、主要仪器设备。

消煮炉，定氮蒸馏器。

5、操作步骤称取植物样品(0.5mm)0.3～0.5g(称准至0.0002g)装入100ml开氏瓶或消煮管的底部,加浓H2SO45ml,摇匀(最好放置过夜),在电炉或消煮炉上先小火加热,待H2SO4发白烟后再升高温度,当溶液呈均匀的棕黑色时取下。

稍冷后加班10滴H2O2(3),再加热至微沸,消煮约7～10min,稍冷后重复加H2O2,,再消煮。

如此重复数次,每次添加的H2O2应逐次减少, 消煮至溶液呈无色或清亮后,再加热10min,除去剩余的H2O2。

取下冷却后,用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中,冷却至室温后定容(V1)。

用无磷钾的干滤纸过滤,或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。

每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差。

6、注释（1）所用的H2O2应不含氮和磷。

H2O2在保存中可能自动分解,加热和光照能促使其分解,故应保存于阴凉处。

在H2O2中加入少量H2SO4酸化,可防止H2O2分解。

（2）称样量决定于NPK含量,健状茎叶称0.5g,种子0.3g,老熟茎叶可称1g,若新鲜茎叶样,可按干样的5倍称样。

称样量大时,可适当增加浓H2SO4用量。

植物全氮、磷、钾的测定植物中氮、磷、钾的测定包括待测液的制备和氮磷钾的定量两大步骤。

植物全氮待测液的制备通常用开氏消煮法(参考有机肥料全氮的测定)。

植物全磷、钾可用干灰化或其他湿灰化法制备待测液。

本书介绍H2SO4—H2O2消煮法，可用同一份消煮液分别测定氮、磷、钾以及其它元素(如钙、镁、铁、锰等)。

一、植物样品的消煮(H2SO4—H2O2法)方法原理植物中的氮磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在。

样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮，有机物被氧化分解，有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐，钾也全部释出。

消煮液经定容后，可用于氮、磷、钾等元素的定量。

本法采用H2O2加速消煮剂，不仅操作手续简单快速，对氮磷钾的定量没有干扰，而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度，但要注意遵照操作规程的要求操作，防止有机氮被氧化成N2或氮的氧化物而损失。

试剂：(1)硫酸(化学纯、比重1.84)(2)30%H2O2（分析纯)操作步骤：(1)常规消煮法称取植物样品(0.5mm)0.3～0.5g(准确至0.0002g)装入100ml开氏瓶的底部，加浓硫酸5ml，摇匀(最好放置过夜)，在电炉上先小火加热，待H2SO4发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下，稍冷后加6 滴H2O2，再加热至微沸，消煮约7—10 分钟，稍冷后重复加H2O2再消煮，如此重复数次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热约10 分钟，除去剩余的H2O2，取下冷却后，用水将消煮液无损转移入100ml 容量瓶中，冷却至室温后定容(V1)。

用无磷钾的干燥滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。

每批消煮的同时，进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。

(2)快速消煮法称取植物样品(0.5mm)0.3～0.5g(称准至0.0002g)，放入100ml 开氏瓶中，加1ml水润湿，加入4ml 浓H2SO4摇匀，分两次各加入H2O2 2ml，每次加入后均摇匀，待激烈反应结束后，置于电炉上加热消煮，使固体物消失成为溶液，待H2SO4发白烟，溶液成褐色时，停止加热，此过程约需10 分钟。

凯氏定氮法中文名称：凯氏定氮法英文名称：Kjeldahl determination定义：测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。

即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。

由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

凯氏定氮法凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。

即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。

由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

原理蛋白质是含氮的有机化合物。

食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。

然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，蛋白质含量。

含氮量*6.25=蛋白含量.有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4作用下，硝化生成（NH4）2SO4凯氏定氮法反应式为：2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4（其中CuSO4做催化剂）2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3，收集于H3BO3溶液中反应式为:(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O3. 用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量反应式为：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3 (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3试剂所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。

2.1 硫酸铜。

凯氏定氮法标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述凯氏定氮法是一种常用的分析方法，用于确定物质中的氮含量。

该方法基于凯氏反应，即将有机或无机物中的氮转化为氨，再通过氨测定确定氮的含量。

凯氏定氮法简单、灵敏度高，并能够适用于各种类型的样品。

文章的概述部分旨在介绍凯氏定氮法的基本背景和重要性。

首先，我们将对凯氏定氮法的原理和相关的基本步骤进行阐述。

接着，我们将探讨凯氏定氮法在不同领域中的广泛应用，并特别关注其在环境科学、农业和食品安全等领域的应用情况。

凯氏定氮法具有一些独特的优点，如操作简便、成本低廉、准确性高等。

然而，同时我们也必须认识到凯氏定氮法存在一定的局限性，如对某些有机物的测定存在困难等。

针对这些问题，本文还将展望凯氏定氮法未来的发展方向，并探讨可能的改进和创新。

总而言之，本文将全面介绍凯氏定氮法的原理、步骤和应用，并对其优点、局限性进行评估。

通过深入了解凯氏定氮法，我们可以更好地理解其在实际应用中的潜力和局限性，并为其未来的研究和应用提供参考。

文章结构部分的内容可以如下所示：1.2 文章结构本文将按照以下结构来展开对凯氏定氮法的介绍和分析：第一部分，引言，将对凯氏定氮法进行概述，简要介绍该方法的背景和相关概念。

同时，本部分还将描述文章的目的，即通过对凯氏定氮法的详细介绍和分析，帮助读者更好地理解和应用该方法。

第二部分，正文，将重点介绍凯氏定氮法的原理、步骤和应用。

2.1小节将详细阐述凯氏定氮法的原理，包括氛围压降法和热导法两种常见的方法。

2.2小节将详细描述凯氏定氮法的步骤，包括样品的预处理、试剂的选择和实验操作等。

2.3小节将探讨凯氏定氮法在不同领域的应用，例如土壤分析、环境监测等，以及其在实际应用中的优点和限制。

第三部分，结论，将对凯氏定氮法进行总结并展望其未来的发展。

3.1小节将概述凯氏定氮法的优点，如准确性高、灵敏度好等。

3.2小节将强调凯氏定氮法的局限性，如样品处理过程中的误差、仪器设备的限制等。

Van Slyke氨基测定法和凯氏定氮法是化学分析中常用的两种方法，它们分别用于测定氨基和定量氮含量。

本文将从两种方法的原理、操作步骤、优缺点以及适用范围等方面进行详细介绍。

一、Van Slyke氨基测定法1. 原理Van Slyke氨基测定法是通过将待测样品中的氨基与硼酸铵在碱性条件下发生反应，生成铋酸铵沉淀来测定氨基含量的方法。

其反应方程式如下所示：R-NH2 + 2H3BO3 → 2(B(OH)4)- + NH4+其中R-NH2代表待测样品中的氨基。

2. 操作步骤（1）样品预处理：样品先用盐酸或氢氧化钠处理，使其中的氨基全部转化为游离态。

（2）反应过程：将处理后的样品与适量硼酸铵和氢氧化钠溶液混合，保持碱性条件下进行反应。

（3）沉淀分离：反应后生成的沉淀通过过滤分离，并用硝酸钡溶液沉淀沉淀中所含的硼。

（4）滴定测定：用硫酸标准溶液滴定沉淀中的盐酸，根据反应的等当点，计算出样品中氨基的含量。

3. 优缺点优点：方法简便，测定灵敏度高，适用范围广。

缺点：需要样品预处理，且在测定过程中易受其他酸碱物质的干扰。

4. 适用范围Van Slyke氨基测定法适用于测定酪蛋白、蛋白质等含氨基丰富的物质。

二、凯氏定氮法1. 原理凯氏定氮法是通过将待测样品中的氮转化为氨基后，再进行VanSlyke氨基测定法测定氨基含量的方法。

其反应方程式如下所示：R-NH2 + 3H2O + NaOH → [Na(NH3)2]OH + R-OH2. 操作步骤（1）样品预处理：样品先与氢氧化钠和氢氧化钙混合，在加热的条件下将其中的氮转化为游离态氨基。

（2）反应过程：将处理后的样品与硼酸铵和氢氧化钠溶液混合，保持碱性条件下进行反应。

（3）沉淀分离、滴定测定：步骤同Van Slyke氨基测定法。

3. 优缺点优点：能够准确测定样品中氮的含量，适用范围广。

缺点：操作相对复杂，需多次反应才能得到最终结果。

4. 适用范围凯氏定氮法适用于测定肥料、肌肉组织等含氮物质。

土壤全氮的测定半微量开氏法1.1 方法提要土样在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮，各种含氮有机化合物转化为铵态氮，碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括硝态氮）。

包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化为铵态氮。

1.2 应用范围本方法适用于测定各类型土壤的全氮含量。

1.3 主要仪器设备①硬质开氏烧瓶：50ml，100ml;②半微量定氮蒸馏器；③半微量滴定管：10ml，25ml；④电炉：300W变温电炉；⑤玛瑙研钵。

1.4 试剂⑴硫酸：化学纯，密度1.84；⑵ 2%（m/V）硼酸溶液：称取硼酸20.00g溶于水中，稀释至1L；⑶ 10mol L-1氢氧化钠溶液: 称取400g（工业用或化学纯）氢氧化钠溶于水中，稀释至1L；⑷ 0.01mol L-1盐酸标准溶液（或0.01mol L-1硫酸标准溶液）：0.01molL-1盐酸标准溶液：配制及标定方法配制量取9ml盐酸，注入1L水中,此盐酸的标准溶液浓度为0.1molL-1,并对此标准溶液进行标定.将已标定的0.1molL-1的盐酸标准溶液,用水稀释10倍,即为0.01molL-1的标准溶液.即准确吸取0.1molL-1盐酸标准溶液10ml到100ml容量瓶中,用水定容.必要时可对稀释后的盐酸标准溶液进行重新标定.标定称取0.2g(精确至0.0001g)于270～300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠，溶于50ml水中，加10滴溴甲酚绿—甲基红混合指示剂，用0.1molL-1盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定直至溶液呈暗红色。

同时做空白试验。

盐酸标准溶液准确浓度按下式计算：C =m / [(V1-V2)*0.05299]式中：c—盐酸标准溶液浓度，molL-1；m—称取无水碳酸钠的质量，g；V1—盐酸溶液用量，ml；V2—空白试验盐酸溶液用量，ml；0.05299—1/2Na2CO3的毫摩尔质量，g。

土壤铵态氮的测定方法一、浸提法浸提法是目前土壤中铵态氮测定的常用方法之一、它是通过将土壤样品浸提到提取液中，从而得到土壤中铵态氮的浓度。

具体步骤如下：1.取一定量的土壤样品，精确称量，并进行一定的均质处理。

2.将土壤样品与一定比例的提取液（常用的提取液有钡氢氧化溶液、甲醇-氢氯酸溶液等）混合搅拌，使铵态氮从土壤中解吸出来。

3.将浸提液与铵态氮试剂进行反应，在一定的条件下转化为氨气。

4.将转化后的氨气收集起来，并使用滴定法对其进行定量测定。

二、直接测定法直接测定法是一种不需要提取液的方法，直接将土壤样品与试剂反应，测定土壤中的铵态氮浓度。

具体步骤如下：1.取一定量的土壤样品，精确称量，并进行一定的均质处理。

2.将土壤样品与铵态氮试剂进行反应，将土壤中的铵态氮转化为氨气。

3.将转化后的氨气收集起来，并使用滴定法对其进行定量测定。

三、自动分析仪器法自动分析仪器法是近年来较为常用的方法，它通过先将土壤样品与试剂反应，将铵态氮转化为氨气，然后使用自动分析仪器对氨气进行定量测定。

具体步骤如下：1.取一定量的土壤样品，精确称量，并进行一定的均质处理。

2.将土壤样品与铵态氮试剂进行反应，将土壤中的铵态氮转化为氨气。

3.将转化后的氨气导入自动分析仪器中，该仪器能对氨气进行定量测定，并将结果输出。

四、光度法光度法是一种利用测量溶液的吸光度来确定其中物质浓度的方法。

对于土壤中铵态氮的测定，可以使用光度法来进行定量测定。

具体步骤如下：1.取一定量的土壤样品，精确称量，并进行一定的均质处理。

2.将土壤样品与铵态氮试剂进行反应，将土壤中的铵态氮转化为有色物质。

3.使用分光光度计对反应产物的吸光度进行测定，根据标准曲线可以计算出土壤中铵态氮的浓度。

总之，以上介绍的是一些常用的土壤铵态氮测定方法。

不同方法的选择可以根据实际需求和实验条件进行确定。

同时，为了获得更准确的结果，还需要根据具体情况进行适当的改进和调整。

非蛋白氮的定量检验在非蛋白氮定量的检测方法中，比较常用的方法是硫酸铜沉淀法和氨基酸测定法。

除此之外，本文根据非蛋白氮的组成结构的不同，采用水解蒸馏法对样品中的非蛋白氮进行检验。

一、硫酸铜沉淀法根据非蛋白氮的化学性质来看，大部分溶于水，一部分在常温下不溶水，但在沸水中溶解。

根据此种性质，可以先将样品煮沸，用硫酸铜将样品中的蛋白质沉淀下来，由于非蛋白氮已经溶于水，故可用过滤方法将其与样品中的蛋白质分离。

在过滤时，水的温度一定不能太低，否则象双缩脲一类的物质会因为不溶于常温水而不能被过滤掉。

用此种方法测定出的蛋白质含量称为样品的真蛋白质。

但实际上，此种方法有很大的局限性。

如果非蛋白氮不溶于沸水，或者将一般的非蛋白氮微囊化，此种方法测出的结果会与样品中的实际真蛋白有很大的差异。

二、氨基酸测定法为了真正能够判定样品中是否掺有非蛋白氮，需测定样品中的氨基酸含量。

无论采用经典的氨基酸自动分析仪分析（柱后衍生），还是采用比较快捷的HPLC分析（往前衍生），将所测定的氨基酸总量相加得到一个总氨基酸数值，然后将此数值乘以6.25为M，和用凯氏定氮法测定的粗蛋白质N相比较，M至少为N的85％（M可能略大于N）。

如果低于此数值，则可以判定该样品中掺有非蛋白氮。

三、水解蒸馏法1、原理：非蛋白氮主要包括五类：尿素及其衍生物类、氨态氮类、铵类、肽类及其衍生物、动物粪便及其它废弃物类。

如果在原料中掺有氨态氮类、铵类和粪便比较容易判断（可采用硫酸铜沉淀法加镜检），一般很少将肽类及其衍生物掺入其中，剩下比较难鉴别的就是尿素及其衍生物。

尿素和尿素衍生物经过强酸或强碱水解为氨盐或氨和其它的物质，在强碱的条件下可以蒸馏出氨气，原料中的蛋白质经过水解成氨基酸盐，氨基酸盐在强碱条件下稳定，从而可将非蛋白氮和真蛋白氮进行分离。

2、仪器和设备：酒精喷灯，试管和其它常用的仪器。

3、试剂与溶液：6mol/l 的盐酸溶液和其它常用的试剂。

4、测定方法：本文只列出用酸水解的方法。

凯氏定氮法标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：凯氏定氮法是一种广泛应用于化学分析中的定量测定方法之一，主要用于测定样品中的氮含量。

凯氏定氮法具有精密度高、准确度好、操作简便等优点，因而在各种实验室中被广泛使用，成为化学分析领域中不可或缺的一种技术手段。

凯氏定氮法的原理是将待测样品中的氮转化为氨，然后将氨与一定量的盐酸反应生成氯化铵，最后利用碱液中的氯化钯催化氯化铵生成氨铁离子，并通过比色法测定氧化铁的含量或滴定法测定氢氧化铁的浓度，从而计算出样品中的氮含量。

凯氏定氮法的操作步骤包括样品准备、试剂配制、试验操作、数据处理等环节。

首先是样品的提取和制备，将待测样品研磨成粉末状或将溶液过滤提取。

其次是配制各种试剂，包括氧化剂、还原剂、盐酸、铁试剂等。

然后是按照一定的比例将样品溶液与试剂混合反应，生成氨气和氯化铵。

最后通过比色法或滴定法测定生成的氨铁离子，计算样品中的氮含量。

在实际操作中，为了提高分析的准确性和可靠性，需要注意几个关键环节。

首先是样品的称量和提取要精确，避免因为操作不当而引入误差。

其次是试剂的配制要准确，遵循操作规程，不得随意更改配制浓度或比例。

最后是在试验操作过程中要注意操作流程，避免外界干扰因素的影响，保证实验的结果准确可靠。

凯氏定氮法广泛应用于生物、环境、食品等领域的氮含量测定中。

在生物领域，凯氏定氮法被用于分析肥料中的氮含量，以指导农业生产。

在环境领域，凯氏定氮法被用于测定水体、土壤中的氮含量，以监测环境污染物的变化。

在食品领域，凯氏定氮法被用于检测食品中的蛋白质含量，保证食品质量和安全。

凯氏定氮法是一种可靠的氮含量测定方法，具有精密度高、准确度好、操作简便等优点。

在化学分析中扮演着重要角色，为各个领域的研究提供了有效的技术手段。

希望通过本文的介绍，读者对凯氏定氮法有了更深入的了解，能够在实验操作中更加熟练和自信。

第二篇示例：凯氏定氮法是一种用于测定样品中氮含量的经典方法，也被称为氮元素定量法。

实验一 尿素中含氮量的测定一、实验目的1.学会用甲醛法测定氮含量，掌握间接滴定的原理。

2.学会NH 4+的强化，掌握试样消化操作。

3.掌握容量瓶、移液管的正确操作。

4.进一步熟悉分析天平的使用。

二、实验原理常用的含氮化肥有NH 4Cl 、(NH 4)2SO 4、NH 4NO 3、NH 4HCO 3和尿素等，其中NH 4Cl 、(NH 4)2SO 4和NH 4NO 3是强酸弱碱盐。

由于NH 4+的酸性太弱(Ka=5.6×10-10)，因此不能直接用NaOH 标准溶液滴定，但用甲醛法可以间接测定其含量。

尿素通过处理也可以用甲醛法测定其含氮量。

甲醛与NH 4+作用，生成质子化的六次甲基四胺(Ka=7.1×10-6)和H +，其反应如下：4NH 4+ + 6HCHO = (CH 2)6N 4H + + 3H + + 6H2 所生成的H +和(CH 2)6N 4H +可用NaOH 标准溶液滴定，采用酚酞作指示剂。

标定NaOH 标准溶液的基准物质为邻苯二甲酸氢钾，其反应为：化学计量点时，溶液呈弱碱性(pH=9.20)，可选用酚酞作指示剂。

三、仪器与试剂 容量瓶(250mL)、移液管(25mL)、锥形瓶(250mL)、碱式滴定管(50mL)、洗耳球、分析天平氢氧化钠、邻苯二甲酸氢钾、硫酸铵、甲基红指示剂(0.2%水溶液)、酚酞(0.2%乙醇溶液)、甲醛溶液(1:1)四、实验步骤1．0.1mol·L -1NaOH 标准溶液的配制及标定COOH COOK +NaOH COOK COONa+H 2O用台秤迅速称取1g NaOH固体于100mL小烧杯中，加约30mL无CO2的去离子水溶解，然后转移至容量瓶中，用去离子水稀释至250mL，摇匀后，用橡皮塞塞紧。

洗净碱式滴定管，检查不漏水后，用所配制的NaOH溶液润洗2～3次，每次用量5～10mL，然后将碱液装入滴定管中至“0”刻度线上，排除管尖的气泡，调整液面至0.00刻度或零点稍下处，静置1min后，精确读取滴定管内液面位置，并记录在报告本上。

一、凯氏（kjeldahl）定氮法优点：用于标准蛋白质含量的准确测定；干扰少优点①可用于所有食品的蛋白质分析中;②操作相对比较简单;③实验费用较低;④结果准确,是一种测定蛋白质的经典方法;⑤用改进方法(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质缺点①最终测定的是总有机氮,而不只是蛋白质氮;②实验时间太长(至少需要2h才能完成);③精度差,精度低于双缩脲法;④所用试剂有腐蚀性.灵敏度低适用于0.2-1.0mg氮干扰物质：非蛋白氮（可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离）；费时太长二Folin-酚试剂法优点：操作简便，灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，样品中蛋白质含量高于5μg即可测得，是测定蛋白质含量应用得最广泛的方法之一。

缺点是费时间较长，要精确控制操作时间，标准曲线也不是严格的直线形式，且专一性较差，干扰物质较多。

对双缩脲反应发生干扰的离子，同样容易干扰lowry反应。

而且对后者的影响还要大得多。

酚类、柠檬酸、硫酸铵、tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。

浓度较低的尿素（0.5%），硫酸纳（1%），硝酸纳（1%），三氯乙酸（0.5%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（0.5%）等溶液对显色无影响，但这些物质浓度高时，必须作校正曲线。

含硫酸铵的溶液，只须加浓碳酸钠—氢氧化钠溶液，即可显色测定。

若样品酸度较高，显色后会色浅，则必须提高碳酸钠—氢氧化钠溶液的浓度1～2倍。

此法也适用于酪氨酸和色氨酸的定量测定。

此法可检测的最低蛋白质量达5mg。

通常测定范围是20~250mg。

三、Bradford法的突出优点是：（1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。

这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。

（2）测定快速、简便，只需加一种试剂。

完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。

由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。

聚维酮含氮量测定方法(一)聚维酮含氮量测定方法聚维酮是一种常用的塑料材料，它广泛应用于塑料制品中。

测定聚维酮中的含氮量对于质量控制和应用研究都具有重要意义。

本文将介绍几种常用的聚维酮含氮量测定方法。

1. 红外光谱法红外光谱法是一种常用的非破坏性测试方法，可以对聚维酮中的含氮化合物进行定性和定量分析。

该方法基于不同化学键和官能团在红外光谱中的特征吸收峰，通过分析峰的强度和位置来确定含氮化合物的含量。

2. 加热解吸法加热解吸法是一种可以将聚维酮中的含氮化合物释放出来进行分析的方法。

首先将样品置于高温环境中，使含氮化合物挥发出来，然后利用适当的分析方法进行定量测定。

这种方法适用于含氮化合物挥发性较好的聚维酮材料。

3. 化学分析法化学分析法常用于聚维酮中含氮化合物的定量测定。

其中，常用的方法包括滴定法、显色反应法、气相色谱法等。

这些方法均可以通过与含氮化合物发生特定反应或分离分析来确定其含量。

4. 元素分析法元素分析法是一种准确测定聚维酮中各元素含量的方法，其中包括测定聚维酮中的氮元素含量。

该方法通过样品燃烧后，利用适当的分析仪器（如元素分析仪）进行测定。

元素分析法不仅可以测定含氮量，还可以同时测定其他元素含量，对于全面了解样品组成具有重要意义。

5. 质谱法质谱法是一种高灵敏度的分析方法，可以用于定性和定量分析聚维酮中的含氮化合物。

该方法基于含氮化合物在质谱仪中产生的特征碎片离子，通过测定离子峰的强度和相对丰度来确定其含量。

6. 光谱法光谱法包括紫外-可见光谱法和荧光光谱法等，可以用于定性和定量分析聚维酮中的含氮化合物。

这些方法基于含氮化合物在特定波长下的吸收或发射特性，通过测定吸光度或荧光强度来确定含量。

以上是几种常用的聚维酮含氮量测定方法，每种方法都有其优缺点。

在具体应用中，可以根据需要选择最适合的方法进行分析。

7. 热解-气相色谱-质谱联用法热解-气相色谱-质谱联用法是一种较为复杂但准确度较高的方法。

土壤中全氮的测定环境工程李婷婷2110921109一、实验目的1、学习掌握土壤中全氮的测定原理和方法；2、了解凯氏定氮仪的使用方法。

二、实验原理测定土壤全氮的方法主要有干烧法和湿浇法。

样品用浓硫酸高温消煮时，各种含氮有机化合物经过复杂的高温分解反应转化为铵态氮（硫酸铵），这个复杂的反应，总称为开氏反应。

开氏法分为样品的消煮和消煮液中铵态氮的定量两个步骤。

土样经浓硫酸消煮，各种含氮有机化合物转化为铵态氮，用氢氧化钠碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以甲基红－溴甲酚绿混合指示剂，用盐酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量凯氏法测定全氮步骤：有机N 加速剂+浓H2SO4 OH- H3BO3 H+（+无机N）NH4+ NH3 NH4++H2BO3- H3BO3消煮液中NH4+的定量（蒸馏）开氏反应的速度不大，通常需要利用加速剂来加速消煮过程。

加速剂的成分，按其效用的不同，可分为增温剂、催化剂和氧化剂三类。

增温剂是硫酸钾或无水硫酸钠；催化剂主要有Hg、HgO、CuSO4、Se 等；常用的氧化剂有K2Cr2O7、KMnO4、HclO4和H2O2 等。

凯氏定氮仪可完成对消解样品的全自动加碱、蒸馏和滴定过程。

消解完的样品上机后和碱生成氨，氨气和水蒸气一起经冷凝管冷凝后，被收集在加入硼酸吸收液的接收瓶中，而后自动进行滴定、显示、记录盐酸消耗量，计算机根据公式计算含氮量，并打印出结果。

三、实验过程1.称量样品。

在电子天平上称量土样约0.5g。

2.消解。

土样中先加入5mL浓硫酸，煮沸，然后冷却，再加入1mL高氯酸，继续煮沸至土样呈灰白色。

3.过滤，定容。

将土样冷却后，用定量滤纸过滤到100mL容量瓶中，定容。

4.调节仪器，测量。

调整仪器，设置好参数。

取样品20mL放到消煮管中，进行测量（测一个空白值）。

四、实验结果与分析结果计算：N％＝1.401×M（V-V0）/W其中：M：盐酸标准浓度，mol/L；V：滴定样品盐酸的消耗量，mL；V0：滴定空白样盐酸的消耗量，mL；W：样品重量，g。

凯氏定氮法编辑锁定凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。

即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。

由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

中文名凯氏定氮法外文名kjeldahl method分类蛋白质类型生物化学与分子生物学目录1. 1原理2. 2试剂1. 3仪器2. 4操作1. 5计算2. 6注意凯氏定氮法原理编辑蛋白质是含氮的有机化合物。

蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。

然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，并换算成蛋白质含量。

含氮量*6.25=蛋白含量.有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4凯氏定氮法反应式为：2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 （其中CuSO4做催化剂）2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中反应式为:(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O3. 用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量反应式为：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3凯氏定氮法试剂编辑所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。

2.1 硫酸铜。

2.2 硫酸钾。

2.3 硫酸。

2.4 2%硼酸溶液。

2.5 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。

也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。

游离铵态氮测定
游离铵态氮测定，是指对水体、土壤、废水等样品中游离铵态氮含量进行定量分析的方法。

游离铵态氮是指存在于水体、土壤、废水等样品中的铵离子，它是氮素循环中的重要组成部分，也是植物生长的重要营养元素之一。

因此，对游离铵态氮的测定具有十分重要的意义。

游离铵态氮的测定方法有很多种，常用的有蒸馏-滴定法、自
动分析仪法、纳米金颗粒增敏光谱法等。

其中，蒸馏-滴定法
是一种简单易行、准确可靠的测定方法，广泛应用于水环境监测和土壤肥力评价等领域。

蒸馏-滴定法的基本原理是将样品中的游离铵态氮转化为氨气，然后通过蒸馏将氨气收集到酸溶液中，最后用盐酸标准溶液滴定测定其含量。

该方法操作简单，准确度高，但需要较长时间才能得到结果。

自动分析仪法是一种自动化程度高、操作简便、快速准确的测定方法。

该方法利用自动分析仪对样品进行加热和蒸馏处理，将游离铵态氮转化为氨气，并通过化学反应将氨气转化为硝酸盐，最后利用紫外可见光谱仪测定硝酸盐含量来计算游离铵态氮含量。

该方法操作简单、自动化程度高，可以大大提高分析效率和准确度。

纳米金颗粒增敏光谱法是一种新型的测定方法，具有灵敏度高、选择性强、操作简便等优点。

该方法利用纳米金颗粒对游离铵态氮进行增敏作用，使其在紫外可见光谱仪上形成特征吸收峰，从而实现对游离铵态氮的快速准确测定。

该方法不仅可以应用于水环境监测和土壤肥力评价等领域，还可以应用于食品安全检测、生物医学等领域。

总之，游离铵态氮测定是一项重要的分析技术，在环境保护、农业生产、食品安全等领域具有广泛应用前景。

不同的测定方法各有优缺点，需要根据具体情况选择合适的方法进行分析。