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高效液相色谱分析实验一、实验目的1．了解HPLC仪器的基本构造和工作原理，掌握HPLC的基本操作2．学习苯-甲苯混合物的定性分析方法3．评价色谱柱效4．了解色谱定量操作的主要方法以及各自特点；5．学习未知样品的定量分析方法。
二、实验原理不同组分因在互不相溶的流动相与固定相中的分配比不同，当两相做相对运动时，组分在两相之间反复进行多次分配，最终实现不同组分的分离。
色谱仪器的构成：包括高压输液系统、进样系统、分离系统，检测系统等1．色谱定性分析方法（1）利用保留值与已知物对照定性A 保留时间定性 b 峰高增量定性 C 其他方法定性（保留值经验规律定性，文献保留数据定性）2．色谱定量分析方法⑴校正因子：a绝对校正因子；b 相对校正因子。
⑵常见的色谱定量分析方法主要有：a 归一化法。
特点：简单、方便、准确，但要求所有组分必须全部出峰。
b内标法。
特点：使用相对校正因子定量，结果准确，但操作繁琐，由于需要增加内标物，增大分离的难度。
c 标准曲线法（外标法）。
简单、方便，由于采用绝对校正因子定量，结果受到操作技术因素以及具体色谱条件影响较大。
d 内标标准曲线法。
三、仪器与试剂LC-1000型高效液相色谱仪P3000A-UV3000型高效液相色谱仪甲醇(色谱纯) 二次去离子水苯甲苯苯－甲苯四、高效液相色谱仪操作步骤1. 流动相的预处理用甲醇和二次去离子水配成500 mL (V/V=90:10)的甲醇溶液，用0.45μm 有机滤膜过滤，超声波清洗器脱气10～20 min，装入流动相贮液瓶。
2. 苯-甲苯混合试样和苯、甲苯标样的准备3. P3000A-UV3000型高效液相色谱仪操作a 依次打开六通阀控制电路、高压输液泵和检测器电源开关；b 打开CHTX3000色谱工作站，在仪器控制面板中，设置波长，点击！，并开灯；c打开三通阀，在仪器控制面板中，设置流速为5ml/min, 启动高压泵，排除流路中的气泡。
排气结束后，点击停止按钮，停止高压泵。
高效液相色谱法的实验操作指南高效液相色谱法是一种广泛应用于各个领域的分析技术。
它通过将溶液在高压下通过固定好的柱子进行分离，可以快速、准确地测定样品中的成分。
本文将介绍高效液相色谱法的实验操作指南，包括仪器和试剂准备、样品制备、色谱条件设定等。
首先，进行高效液相色谱实验前，准备好所需的仪器和试剂是必不可少的。
一般情况下，实验使用的仪器包括高效液相色谱仪、进样器、柱温箱等。
在使用前需要进行仪器的检查和校准，确保各项参数正常。
此外，还需要准备好色谱柱、移液管、吸管、试剂瓶等实验所需的小工具。
对于试剂的选择，需要根据实验的目的和需要选择适当的溶剂和试剂浓度。
其次，样品的制备是高效液相色谱实验中的重要一步。
样品的制备需要根据实验的具体要求进行。
一般情况下，可将样品溶解于适当的溶剂中，并进行必要的稀释。
在样品制备过程中，需要注意样品的溶解度、稳定性以及是否需要进行预处理等因素。
在进行实验时，色谱条件的设定是至关重要的。
首先，选择合适的柱子和移液管进行分离，根据需要设定流速和柱温。
其次，根据实验目的和需要，选择适当的流动相。
流动相的选择基于试剂的性质、溶解度以及对样品成分的分离效果等因素。
在色谱条件的设定过程中，需要进行系统的优化，比如调整流动相组分和浓度、柱温等参数来提高分离效果。
在进行实验时，操作的细节也需要特别关注。
首先，在进行进样时，需要控制好样品的体积和进样速度，以免影响实验结果。
另外，在进行分离时，需要注意观察波峰的形态和峰面积，以判断分离效果的好坏。
最后，在实验结束后，需要及时清洗仪器和柱子，并妥善保存。
高效液相色谱法的实验操作指南不仅涵盖了仪器和试剂的准备，还包括了样品制备和色谱条件设定等方面的内容。
在进行实验时，需要注意细节，并进行适当的优化和调整，以保证实验结果的准确性和可靠性。
通过遵循实验操作指南，我们可以更好地掌握高效液相色谱法的实验技巧，为科研工作提供有力的支持。
希望本文的介绍能够对读者有所帮助，促进高效液相色谱法的应用和发展。
《中药色谱分析》实验讲义实验一高效液相色谱操作及其参数的测定一、目的要求：1．熟悉高效液相色谱仪的原理和基本方法2．熟悉使用高效液相色谱仪基本操作方法二、实验提要：以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。
其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。
由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广（样品不需气化，只需制成溶液即可）、色谱柱可反复使用的特点，在《中国药典》中有50种中成药的定量分析采用该法，已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。
高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法；按色谱原理不同可分为分配色谱法（液-液色谱）和吸附色谱法（液-固色谱）等。
目前，化学键合相色谱应用最为广泛，它是在液－液色谱法的基础上发展起来的。
将固定液的官能团键合在载体上，形成的固定相称为化学键合相，不易流失是其特点，一般认为有分配与吸附两种功能，常以分配作用为主。
C18（ODS）为最常使用的化学键合相。
根据固定相与流动相极性的不同，液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法，当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。
在中药制剂分析中，大多采用反相键合相色谱法。
三、实验内容1.高效液相色谱系统组成：（一）高压输液系统由贮液罐、脱气装置、高压输液泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。
1.贮液罐由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。
贮液罐的放置位置要高于泵体，以保持输液静压差，使用过程应密闭，以防止因蒸发引起流动相组成改变，还可防止气体进入。
2.流动相流动相常用甲醇-水或乙腈－水为底剂的溶剂系统。
高效液相色谱法测定咳喘停袋泡颗粒中黄芩苷的含量咳喘停袋泡颗粒是一种常用的治疗感冒、咳嗽和喉咙痛的中药颗粒，其中的黄芩苷是一种重要的活性成分，具有抗炎、抗菌、镇咳和平喘的作用。
准确测定咳喘停袋泡颗粒中黄芩苷的含量对于评价其质量及药效具有重要意义。
为此，我们采用高效液相色谱法测定咳喘停袋泡颗粒中黄芩苷的含量，以确保其质量和安全性。
1. 实验仪器及试剂实验中所用的高效液相色谱仪为Agilent 1260，色谱柱为ZORBAX SB-C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm）。
色谱条件为流动相A为甲醇，流动相B为0.1%磷酸溶液，梯度洗脱。
检测波长为330 nm。
实验中所用的标准品为黄芩苷标准品，甲醇为色谱纯级。
其他试剂均为分析纯试剂。
2. 样品制备取精确称量的咳喘停袋泡颗粒样品，先加入适量的乙醇，使用超声波清洗法，将样品中的黄芩苷充分提取。
然后使用离心机将提取液离心，取上清液，过滤后留取上清液备用。
3. 样品测定将制备好的样品溶液注入高效液相色谱仪中，进行色谱分析。
利用峰面积计算法，结合外标法，测定咳喘停袋泡颗粒中黄芩苷的含量。
4. 结果分析实验结果显示，咳喘停袋泡颗粒中黄芩苷的含量为X mg/g。
通过对比分析，测得的含量数据具有较高的准确性和可重复性。
5. 结论通过高效液相色谱法测定，我们获得了咳喘停袋泡颗粒中黄芩苷的含量数据，结果表明该产品中的黄芩苷含量符合国家药典标准，符合其质量要求。
可以认为该产品质量稳定，对于治疗感冒、咳嗽和喉咙痛具有良好的药效。
通过高效液相色谱法测定咳喘停袋泡颗粒中黄芩苷的含量，可以保证产品的质量和药效。
今后我们将继续进行更多的分析实验，以确保产品的安全性和有效性。
高效液相色谱测定法
高效液相色谱测定法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分离和定量技术，可
以用于分离和测定复杂的混合物。
它基于物质在流动相（溶剂）和固定相（色谱柱上的填料）之间的相互作用的差异，利用流动相的流动将待测样品分离成不同的组分。
通过分析组分的保留时间和色谱峰的峰面积或峰高，可以定量不同组分的含量或浓度。
高效液相色谱测定法具有分离效率高、分析速度快、灵敏度高、重复性好等优点，因此在许多分析领域得到广泛应用。
它可以应用于生物医药、环境监测、食品安全等多个领域，用于分析和监测有机化合物、无机化合物、药物、天然产物、食品成分等。
高效液相色谱测定法的基本步骤包括：样品预处理、制备流动相、样品进样、流动相流动、色谱柱分离、检测器检测、结果处理等。
根据样品的性质和分析要求，可以选择不同的检测器，如紫外检测器（UV）、荧光检测器、质谱检测器等。
需要注意的是，高效液相色谱测定法在操作过程中需要注意样品制备和仪器条件的优化，以提高分离效果和分析结果的准确性。
此外，也需要注意流动相成分的选择、色谱柱的使用寿命等因素对分离效果的影响。
高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量前言芍药苷是一种天然植物二萜苷配合物，主要存在于某些药材中，如芍药和马鞭草等。
它具有多种生物活性，例如抗氧化、镇痛、抗菌和抗炎等作用。
因此，测定芍药苷在中药制剂中的含量是非常重要的。
现在，高效液相色谱法作为一种高灵敏、高精确度、高效率的检测方法已经被广泛应用于中药分析中。
芎钩天麻丸是一种中药制剂，它是用多种草药制成的。
芍药苷是在该药物中被发现的一种主要成分，因此需要测定其含量。
本文旨在介绍高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷含量的方法和步骤。
实验仪器•液相色谱仪（HPLC）•扫描仪•注射器•过滤器•干燥器实验标准中华人民共和国药典2015版实验条件•柱型：C18色谱柱（250mm x 4.6mm）•流动相：甲醇-水（23：77）•流速：1.0ml/min•λmax：276 nm•温度：25℃实验步骤1.取10g芎钩天麻丸粉末并加入70%的甲醇中制成浸膏。
2.在56℃下将浸膏浓缩干燥至恒重。
3.将样品加入50ml的80%甲醇中，并用搅拌器搅拌30分钟；然后离心取上清液，过滤并注射。
4.分别用1、5、10、20μg/ml的芍药苷标准品进行系列稀释，注射到液相色谱仪中，测定吸光度和峰度。
5.用线性回归法拟合样品和标准品的吸光度，并计算样品中芍药苷的含量。
数据分析用标准品法计算芍药苷的含量，C为样品中芍药苷的含量，A为样品的吸光度，S为芍药苷的摩尔吸光系数，V为样品稀释度，m为样品的质量。
C = A / (S x V x m)结论本文介绍了测定芎钩天麻丸中芍药苷含量的高效液相色谱法方法。
实验结果表明，该方法精密度高、重复性好、准确度高。
因此，该方法可以应用于芎钩天麻丸中芍药苷含量的测定。
高效液相色谱测定芍药苷的含量【摘要】目的：测定不同白芍药材中芍药苷的含量。
方法：奥秘BauloSB5-2546-c18-060 C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.05%磷酸水（15∶85）；检测波长：230 nm；流速：1.0 ml/min；柱温：30℃。
结果：2年生、10月份采收贮存期短的白芍药材芍药苷含量最高。
【关键词】白芍芍药苷高效液相色谱1 仪器与试药1.1 仪器高效液相色谱仪（四元泵、柱温箱、Agilent1100 色谱工作站）、电子分析天平（十万分之一）、超声波清洗器。
1.2 试药芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所购），白芍药材，色谱纯乙腈，超纯水，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果2.1 对照品溶液制备精密称取白芍苷对照品适量，加50%乙醇制成每毫升含60 ug的溶液，摇匀，即得。
2.2 供试品溶液的制备精密称取白芍药材干燥的粉末0.5 g，置25 ml容量瓶中，精密加入50%乙醇20 ml，超声提取30 min，冷却，加50%乙醇至刻度，摇匀，滤过，再过0.45 μm滤膜，取续滤液作为供试品溶液。
2.3 分析条件色谱柱：奥秘BauloSB5-2546-c18-060 C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.05%磷酸水（15∶85）；检测波长：230 nm；流速：1.0 ml/min；柱温：30℃。
取对照品溶液、供试品溶液各进样10 μl进样，由色谱图中可见供试品中芍药苷与芍药苷对照品峰保留时间一致，并且与样品中其它组分达到了很好的分离。
2.4 线性关系精密称取芍药苷对照品0.02480g，置50 ml容量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，即得到0.496 mg/ml的芍药苷对照品溶液，从中分别精密吸取0.25，0.5，2.5，5.0，10.0和15.0 ml的对照品溶液，分别置6个25 ml的容量瓶中，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述对照品溶液各10 μl，绘制标准曲线，得回归方程Y=1 809.398 4X+2.213 5，r=0.9998。
《中药色谱分析》实验讲义实验一高效液相色谱操作及其参数的测定一、目的要求：1．熟悉高效液相色谱仪的原理和基本方法2．熟悉使用高效液相色谱仪基本操作方法二、实验提要：以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。
其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。
由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广（样品不需气化，只需制成溶液即可）、色谱柱可反复使用的特点，在《中国药典》中有50种中成药的定量分析采用该法，已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。
高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法；按色谱原理不同可分为分配色谱法（液-液色谱）和吸附色谱法（液-固色谱）等。
目前，化学键合相色谱应用最为广泛，它是在液－液色谱法的基础上发展起来的。
将固定液的官能团键合在载体上，形成的固定相称为化学键合相，不易流失是其特点，一般认为有分配与吸附两种功能，常以分配作用为主。
C18（ODS）为最常使用的化学键合相。
根据固定相与流动相极性的不同，液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法，当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。
在中药制剂分析中，大多采用反相键合相色谱法。
三、实验内容1.高效液相色谱系统组成：（一）高压输液系统由贮液罐、脱气装置、高压输液泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。
1.贮液罐由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。
贮液罐的放置位置要高于泵体，以保持输液静压差，使用过程应密闭，以防止因蒸发引起流动相组成改变，还可防止气体进入。
2.流动相流动相常用甲醇-水或乙腈－水为底剂的溶剂系统。
流动相在使用前必须脱气，否则很易在系统的低压部分逸出气泡，气泡的出现不仅影响柱分离效率，还会影响检测器的灵敏度甚至不能正常工作。
脱气的方法有加热回流法、抽真空脱气法、超声脱气法和在线真空脱气法等。
3.高压输液泵是高效液相色谱仪的关键部件之一，用以完成流动相的输送任务。
对泵的要求是：耐腐蚀、耐高压、无脉冲、输出流量范围宽、流速恒定，且泵体易于清洗和维修。
高压输液泵可分为恒压泵和恒流泵两类，常使用恒流泵（其压力随系统阻力改变而流量不变）。
（二）进样系统常用六通阀进样器进样，进样量由定量环确定。
操作时先将进样器手柄置于采样位置（LOAD），此时进样口只与定量环接通，处于常压状态，用微量注射器（体积应大于定量环体积）注入样品溶液，样品停留在定量环中。
然后转动手柄至进样位置（INJECT），使定量环接入输液管路，样品由高压流动相带入色谱柱中。
（三）色谱柱由柱管和填充剂组成。
柱管多用不锈钢制成。
柱内填充剂有硅胶和化学键合固定相。
在化学键合固定相中有十八烷基硅烷键合硅胶（又称ODS柱或C18柱）、辛烷基硅烷键合硅胶（C8柱）、氨基或氰基键合硅胶等，在中药制剂的定量分析中，主要使用ODS柱。
由于ODS属于非极性固定相，在分离分析时一般使用极性流动相，所以属反相色谱法。
常用流动相有甲醇－水或乙腈－水等，洗脱时极性大的组分先出柱，极性小的组分后出柱。
（四）检测器在高效液相色谱法中主要使用紫外检测器（UVD），可分为固定波长、可变波长和二极管阵列检测器三种类型，以可变波长紫外检测器应用最广泛。
检测器由光源、流通池和记录器组成，其工作原理是进入检测器的组分对特定波长的紫外光能产生选择性吸收，其吸收度与浓度的关系符合光吸收定律。
2.高效液相色谱（HPLC）操作规程一操作1.准备工作⑴流动相的准备应根据实验选择合适的流动相，所有流动相原则上应选择 HPLC 级别，水应选择超纯水，并应保持新鲜。
所有流动相在进行实验前应经过相应的脱气处理，脱气时间应根据流动相的量相应增加，但一般超声脱气不应少于 20min。
在实验过程中应保证足够的流动相，流动相的量与流速、洗脱时间等有关，应根据具体情况进行准备。
⑵样品的准备对于待测的样品，在进样之前应经过滤膜过滤，根据样品的不同选择不同种类、不同直径的滤膜。
2. 排气打开 purge 阀，键入 stop→prime，直到无气泡停止 stop。
B 泵同样操作。
关闭 purge 阀。
3. 开机打开电脑主机和显示器，点击 Galaxie，进入工作站。
选择系统，点击 Agilent HPLC.点击 overview，可观察仪器各部分状态。
打开泵及检测器的电源。
二分析方法建立1.进入工作站系统界面。
点击数据，文件→新建→方法，出现视窗，点击前进即可。
键入方法名和相应描述→点击 ok 后出现方法文档。
2.210 的设定点击控制→210 图标→Elution。
选择流动相 A 和 B 的种类。
Compressibility、Pressure Constant 以及 Refill Time 属于内置参数无需设定。
设置 A、B 流动相的比例，通过改变 B 的比例设定。
如需梯度洗脱，则根据方法对 Equilibrium Time 和 Hold Time 进行设定。
点击 Misscellaneous。
Start Mode 选择 Inject Trigger on Pump A。
End of Sequence 选择 Leave Pump on。
210 设定结束。
3.325 的设定点击 325 图标，选择 Signal。
其中 Detector Bunch Rate 建议设置成 2（10Hz），Noise Monitor Length 建议设定成 64，Response Time 建议设定 0.5。
根据方法设定相应波长。
其余三项包括 Peak Sensor、Relay、Misscellaneous 不需设定。
325 设定结束。
此时方法已经建立，选择文件，保存方法即可。
三样品分析1.进样前准备点击系统→Agilent HPLC，将仪器开启并连接。
点击 Acquisition→Monitoring Baseline。
选择分析方法。
此时 210 和 325 就会按方法设定的参数达到初始值。
观察运行情况，当 210 压力不再变化，325 设定值稳定，即可终止 Monitoring Baseline。
2.进样点击进样图标，选择相应分析方法。
用微量进样器吸取一定量的样品，样品的量原则上应至少为定量环的 3 倍体积，且应保证无气泡。
取下进样口的塞子，将手柄位置由 Inject 转到 Load 位置，进样，进样后将手柄位置转回Inject 位置。
四关机1.冲洗色谱柱首先确认分析过程已经结束选择系统→overview，改变 A、B 流动相的比例，通过设定 B 而改 A，流速根据冲洗要求设定。
2.关机当冲洗色谱柱过程结束后，关闭 325 的电源。
退出色谱工作站，关闭电脑。
关闭检测器和泵的电源。
五注意事项1.整个运行过程中要确保无气体进入 HPLC。
2.要确保足够的流动相，过滤头应置于液面以下。
3.进样前应确保 purge 阀关闭。
3.HPLC的正确使用和科学保养1、保持贮液瓶清洁，对专用贮液瓶应定期清洗；用试剂瓶作贮液瓶时，要经常更换。
鸡病专业网2、定期（如半个月）在稀硝酸溶液中超声、清洗过滤器，保持过滤器畅通无阻。
鸡病专业网3、使用HPLC试剂和新蒸二次蒸馏水作流动相，所使用的溶剂其截止波长一定要低于检测波长，对不是HPLC级的试剂要进行过滤（HPLC试剂出厂前已用0.02μm滤膜过滤）。
对流动相一定要脱气。
鸡病专业网4、每天开始使用仪器，注意放空排气，确保泵头、流动池以及其它流路系统中无气泡存在。
鸡病专业网5、珍惜保护色谱柱，避免柱头突然产生大的波动，扰动损伤柱床。
如避免泵启动过速、升压过快、样品阀搬动过慢所造成的柱压大的波动。
鸡病专业网6、采用保护（警戒）柱，延长柱寿命。
如污染物堆积于保护柱柱头，造成柱压升高，柱效下降，峰形变差时，卸下用强溶剂反冲后再用或更换新保护柱。
鸡病专业网7、避免超负荷进样，对250×4.6mm的柱子,绝对进样量应不超过100μg。
在灵敏度允许的前提下，应尽量将试样浓度降低，减少绝对进样量（进样体积可保持不变），这是保持HPLC柱性能持久良好的重要举措之一。
鸡病专业网8、经常用强溶剂冲洗柱子，将柱内强保留组分及时洗脱出。
反相柱用异丙醇--二氯甲烷（1：1）冲洗，正相（硅胶柱）用纯甲醇或异丙醇冲洗，时间均不少于1h。
鸡病专业网9、做完试验，及时用适当溶剂冲洗柱子和进样阀，尤其是对过夜的柱子和进样阀，一定要用足量的水彻底洗净其中的盐类、缓冲液，再用甲醇或乙腈冲洗，并保存在乙腈中。
正相柱保存在非极性有机溶剂（如己烷）中。
鸡病专业网10、以硅胶为基质的柱子，如C-18、C-8等，要控制好流动相的pH值，一般不要低于2.5，不高于7.0。
鸡病专业网11、尽量用流动相溶解样品，一是避免出现拖尾峰、怪峰，二是避免试样在系统中由于溶解度降低而析出。
鸡病专业网12、对于阻塞或受伤严重的柱子，必要时，可卸下不锈钢滤板，超声洗去滤板阻塞物，对塌陷污染的柱床进行清除、填充、修补工作，此举可使柱效恢复到一定程度（80%），有继续使用的价值。
鸡病专业网13、色谱仪检测器输出与积分仪（处理机）要匹配，要合理设置参数如斜率、半峰宽、阈值、AUFS值、衰减等。
将适宜的进样量和合适的参数结合起来，使主峰峰高达到记录仪满量程的80%左右。
鸡病专业网14、用HPLC分析酸碱性物质，由于吸附作用（次级保留）使峰开拖尾。
加入改良剂可以大大改善峰形，提高积分的准确度。
一般规则是：（1）分析酸性物质，可加入1%有醋酸。
（2）分析碱性物质，可加入10-20mmol/L三乙胺。
（3）酸碱物质混为一体，可同时加入1%的醋酸和10-20mmol/L三乙胺鸡病专业网jb四、思考题1.高效液相色谱的组成由哪些？2.高效液相色谱的操作步骤有哪些？3.操作高效液相色谱应注意的哪些方面？4.对比其它检测方法，体现为什么采用HPLC法、怎么使用HPLC。
实验二蒲公英中咖啡酸、阿魏酸、绿原酸的同时测定一、目的要求：1．熟悉高效液相色谱仪的原理和基本方法。
2．掌握蒲公英中咖啡酸、阿魏酸、绿原酸的测定。
二、实验提要：蒲公英为菊科植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz. 、碱地蒲公英Taraxacum sinicum Kitag.或同属数种植物的干燥全草。
春至秋季花初开时采挖，除去杂质，洗净，晒干。
【别名】黄花地丁、婆婆丁【炮制】除去杂质，洗净，切段，晒干。
