纳氏试剂配制方法探讨

纳氏试剂的配制方法
纳氏试剂是一种常用的生化试剂，用于测定蛋白质含量。

它是由Na2CO3和NaOH混合而成的一种碱性试剂，因其配制简单、使用方便而被广泛应用于实验室中。

下面将介绍纳氏试剂的配制方法及注意事项。

首先，准备所需原料和仪器。

配制纳氏试剂所需的原料包括Na2CO3和NaOH，需要准备的仪器有天平、烧杯、磁力搅拌器等。

其次，按照一定比例将Na2CO3和NaOH称量。

一般情况下，纳氏试剂的配制比例为Na2CO3，NaOH=10，1。

在称量时，要求精确，以确保配制出的纳氏试剂浓度准确。

然后，将称好的Na2CO3和NaOH溶解于适量的去离子水中。

在搅拌的同时缓慢加入NaOH，直至Na2CO3和NaOH完全溶解并混合均匀。

这一步需要注意搅拌速度和时间，以确保试剂溶解均匀。

接着，将配制好的纳氏试剂转移至干净的烧杯或容器中。

在转移过程中，要注意避免杂质的混入，以免影响后续实验的准确性。

最后，使用PH试纸或PH计检测纳氏试剂的PH值。

纳氏试剂的PH值应在11左右，若偏离过大，应适量添加Na2CO3或NaOH进行调节，直至达到所需的PH值。

在配制纳氏试剂的过程中，需要注意以下几点：
1. 配制过程中要保持实验环境的清洁，避免杂质的混入。

2. 配制好的纳氏试剂应密封保存，避免受潮和污染。

3. 配制过程中要佩戴防护眼镜和实验服，避免发生意外。

总之，纳氏试剂的配制方法简单易行，但在操作过程中仍需严格按照标准操作程序进行，以确保配制出的试剂符合实验要求。

希望本文所述内容能够对您有所帮助。

- 56 -工 业 技 术０　引言工农业的快速发展往往伴随着对自然环境的破坏。

近年来，国家大力提倡“绿水青山就是金山银山”的理念，使得对土壤和水质的监测达到前所未有的重视。

由于氮肥的广泛使用，土壤中总氮含量的监控是必不可少的；提倡节能减排的同时，水和废水中氨氮的监测更加重要。

纳氏试剂分光光度法是总氮和氨氮含量检测的经典方法。

在某公司的试剂销售中，纳氏试剂的销售额占有一定比重，并且每年都呈递增趋势增长，这就要求寻找到一种既能保证纳氏试剂的质量，又能提高生产效率的配制方法。

该文阐述了直接以市售K 2[HgI 4]为主要原料，以超纯水代替去离子水制备纳氏试剂的过程，并与《水和废水监测分析方法》（第四版）[1]中介绍的以KI、HgCl 2和KOH 制备的方法进行对比得知，新方法也有较好的灵敏度，较低的空白值，且应用于工业生产时能使生产效率得到大幅提高。

１　实验部分１．１　实验原理HgCl 2与KI 反应生成朱红色的HgI 2不溶物，当KI 过量时，则继续反应生成淡黄色的可溶性络合物纳氏试剂，化学式为K 2[HgI 4]。

反应式[2]如下：HgCl 2+2KI= HgI 2↓+2KCl 过量2KIK 2[HgI 4]（淡黄色）纳氏试剂之所以能够显色，是由于[HgI 4]2-在碱性条件下可与游离态的氨或化合态的铵盐反应生成黄色至红棕色的络合物NH 2Hg 2OI，其色度与氨氮含量成正比[3]。

反应过程为：NH 4++4OH -+2[HgI 4]2-⇌NH 2Hg 2OI ↓+7I -+3H 2O 配制过程中要控制好HgCl 2的量，因为只有KI 过量时才会生成K 2[HgI 4]，如果KI 的量不足，Hg 2-会与[HgI 4]2-解离出来的I -生成HgI 2[4]，导致试剂显色不够灵敏；但是如果KI 的量过多，由于I -的过量存在也会降低显色反应灵敏度。

所以配制时需使HgCl 2稍稍过量，待生成的HgI 2全部沉降后取上层清液使用即可。

纳氏试剂配制方法讨论和在实际操作中的应用及改进（成都市排水有限责任公司监测中心，成都 610063）摘要：研究了纳氏试剂分光光度法测定氨氮的试验中不同浓度的碘汞络离子和碱度对纳氏试剂试剂性能的影响。

选用了氯化汞，碘化钾和氢氧化钠分别配置了碘汞络离子浓度为0.22 mol/L、0.11 mol/L、0.055 mol/L，碱度为0.12 mol/L和0.066 mol/L的5种纳氏试剂从2012年4月16日到2012年9月18日，对其试剂性能进行了考察，得到了其中试剂性能最佳的配制方法：碘汞络离子浓度为0.055 mol/L，碱度为0.066 mol/L。

关键字：氨氮纳氏试剂HgI42-碱度Abstract:纳氏试剂比色法是测定水质中氨氮含量的主要方法之一。

纳氏试剂（Nessler）是该反应中的关键试剂。

纳氏试剂是一种碱性碘化汞溶液，其溶液中的HgI42- 可与铵根离子发生如下反应[1][2]：2 HgI42－+ 4OH－+ NH4＋=== O (Hg)2NH2I + 3H2O + 7I－O (Hg)2NH2I是一种黄色胶状染色物质，在波长420nm处有强烈吸收，通过测定吸光度，绘制吸光度与浓度的关系曲线，可以测定水样中的氨氮含量。

文献[3]中所述的配方其HgI42-浓度为0.22 mol/L，碱度为4 mol/L，其反应浓度为：0.22×1.5÷50 = 6.6×10-3 mol/L（加1.5mL纳氏试剂，定容至50mL）。

标准[4]规定最高可测定浓度为2 mg/L ，C最高反应浓度=2/14=1.42×10-4mol/L，则碘汞络离子浓度要求至少要有2×1.42×10-4 mol/L = 2.84×10-4 mol/L，可见其HgI42-已经过量20倍以上，故有必要降低其浓度。

本文选用的试剂最低浓度为0.055 mol/L，为其1/4，亦过量5倍以上，完全可以满足测定要求。

详述纳氏试剂的配制方法纳氏试剂法测氨氮的详细步骤：一、原理碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物,其色度与氨氮含量成正比,通常可在波长410—425nm范围内测其吸光度,计算其含量.本法最低检出浓度为0.025mg/L （光度法）,测定上限为2mg/L.二、仪器1．500mL全玻璃蒸馏器 .2．50mL具塞比色管.3．分光光度计.4．pH计.三、试剂配制试剂用水均应为无氨水.1．无氨水：可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后,重蒸馏得到. 2．1mol/L氢氧化钠溶液.3．吸收液：①硼酸溶液：称取20g硼酸溶于水中,稀释至1L.②0.01mol/L硫酸溶液.4．纳氏试剂：称取16g氢氧化钠,溶于50mL水中,充分冷却至室温.另称取7g碘化钾和碘化汞(HgI2)溶于水,然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中.用水稀释至100mL,贮于聚乙烯瓶中,密塞保存.5．酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)溶于100mL水中,加热煮沸以除去氨,放冷,定容至100mL.6．铵标准贮备溶液：称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NH4Cl)溶于水中,移入1000mL 容量瓶中,稀释至标线.此溶液每毫升含1.00mg氨氮.7．铵标准使用溶液：移取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中,用水稀释至标线.此溶液每毫升含0.010mg氨氮.四、测定步骤1．水样预处理：无色澄清的水样可直接测定；色度、浑浊度较高和含干扰物质较多的水样,需经过蒸馏或混凝沉淀等预处理步骤.2．标准曲线的绘制：吸取 0 、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0mL铵标准使用液于50mL比色管中,加水至标线,加1.0mL酒石酸钾钠溶液,混匀.加1.5mL纳氏试剂,混匀.放置10min后,在波长420nm处,用光程10mm比色皿,以水为参比,测定吸光度.由测得的吸光度,减去零浓度空白管的吸光度后,得到校正吸光度,绘制以氨氮含量（mg）对校正吸光度的标准曲线.3．水样的测定：分取适量的水样（使氨氮含量不超过0.1mg）,加入50mL比色管中,稀释至标线,加1.0mL酒石酸钾钠溶液（经蒸馏预处理过的水样,水样及标准管中均不加此试剂）,混匀,加1.5mL的纳氏试剂,混匀,放置10min.4．空白试验：以无氨水代替水样,作全程序空白测定.五、计算由水样测得的吸光度减去空白实验的吸光度后,从标准曲线上查得氨氮含量（mg）.氨氮(N,mg/L)=m×1000/V式中：m-——由校准曲线查得样品管的氨氮含量（mg）；V——水样体积（mL）.注意事项1、纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例,对显色反应的灵敏度有较大影响.静置后生成的沉淀应除去.2、滤纸中常含痕量铵盐,使用时注意用无氨水洗涤.所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污.。

关于纳氏试剂优化配制及验收的探讨纳氏试剂比色法因其操作简便、灵敏度高，稳定性好，是目前广泛用于测定污水和清洁水中氨氮的标准方法。

在氨氮实际监测分析中，空白值的大小对分析结果的准确性有很大影响，特别是对清洁水样尤为重要。

因实验用水、化学试剂的纯度、玻璃器皿的洁净度及分析人员的水平和经验等等都会影响空白值的大小，而纳氏试剂的配制是影响空白值的主要因素[1]。

市售分析纯试剂常达不到要求，只有通过预实验检验才能判断。

《实验室资质认定评审准则》[2]中规定实验室采购品和试剂需验收合格后才能投入使用，并作为室内质量管理的重要一环，但如何验收及相应合格标准却无具体描述。

笔者在长期工作实践中，参阅文献，优化纳氏试剂的配制方法过程和明确了本实验室的验收方法。

1 实验原理和材料1.1实验原理水中氨与纳氏试剂（K2HgI4）在碱性条件下生成黄至棕色的化合物（NH2HgOI），其色度与氨氮含量成正比。

1.2仪器与主要试剂722分光光度计（上海精密仪器有限公司）酒石酸钾钠(KNaC4H4O6.4H2O)、氢氧化钠(NaOH)、碘化钾(KI)、二氯化汞(HgCl2)、无氨水、氨氮标准储存溶液（1.00mg/ml）临用前纯水稀释定容至10μg/ml为氨氮标准使用液.1.3仪器工作参数420nm，3cm比色皿，纯水作参比2 配制方法过程及讨论2.1实验用水（无氨水）的制备氨氮实验用水要求为无氨水。

实验室中因使用氨水或铵盐等试剂容易造成污染，所以实验前需开窗通风，使用新开封的纯水；也可用一般纯水通过强酸型阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后重蒸馏制得。

2.2 酒石酸钾钠溶液的配制称取50克酒石酸钾钠溶于100ml纯水中。

市售酒石酸钾钠可能含有铵盐，国标方法[3]中用加热煮沸的方法并不能完全除去，可采取以下两种方法：（1）向定容后的酒石酸钾钠溶液加入5ml纳氏试剂，沉淀后取上清液使用。

（2）向酒石酸钾钠溶液中加少量碱，煮沸蒸发至50ml左右，冷却后定容至100ml.一般第二种方法优于第一种。

纳氏试剂的配制方法嘿，你问纳氏试剂的配制方法呀？那咱就好好唠唠。

这纳氏试剂可是在实验里挺常用的呢。

先说说要准备的东西吧。

得有碘化汞、碘化钾、氢氧化钠这些玩意儿。

还有蒸馏水，可别用那种不干净的水哦。

然后找几个干净的瓶子和搅拌棒啥的。

接着就开始配制啦。

先称出一定量的碘化钾，放进一个瓶子里。

然后加一些蒸馏水，搅拌搅拌，让碘化钾溶解。

这就像给碘化钾洗了个澡，让它在水里舒舒服服的。

接着再称出一定量的碘化汞，慢慢地加到这个瓶子里。

碘化汞可得小心加哦，别弄得到处都是。

加进去后再搅拌搅拌，让它们混合在一起。

这时候溶液可能会有点黄黄的。

然后再称出一些氢氧化钠，加到另一个瓶子里，也加一些蒸馏水，让氢氧化钠溶解。

这氢氧化钠溶解的时候会发热呢，可别吓着。

等氢氧化钠溶解好了，把这个溶液慢慢地倒进装着碘化汞和碘化钾的瓶子里。

一边倒一边搅拌，就像在给它们做个大混合。

倒完后继续搅拌一会儿，让溶液充分混合均匀。

这时候溶液可能会变成有点棕色的样子。

然后把配好的纳氏试剂放在一边，让它冷静冷静，沉淀一下。

等沉淀好了，上面的溶液就是纳氏试剂啦。

我给你讲个例子哈。

我有个朋友在实验室里工作，有一次他们要做一个实验，需要用到纳氏试剂。

他们就按照这个方法配制。

一开始他们还不太熟练，有点手忙脚乱的。

但是慢慢地就找到了窍门。

配好的纳氏试剂在实验里发挥了很大的作用呢。

他们可高兴了，说以后再配制就有经验了。

所以啊，纳氏试剂的配制方法其实不难，只要认真仔细，按照步骤来，就能配出好用的纳氏试剂。

加油吧！。

纳氏试剂（Nessler）是指一种利用紫外－可见分光光度法原理用于测定空气中、水体中氨氮含量的试剂。

制备方法
有两种
1. Hgcl2-ki-koh解决方案
称重15.0 G氢氧化钾（KOH），溶于50 ml水中，冷却至室温。

称取5.0克碘化钾（KI）并将其溶解在10毫升水中。

在搅拌下，将2.50 g HgCl2粉末添加到碘化钾溶液中几次，直到溶液变为深黄色或微红色。

当溶液缓慢溶解时，充分搅拌并混合，然后更改以添加二氯化汞饱和溶液。

当少量朱红色沉淀不再溶解时，停止滴下。

在搅拌下，将冷却的氢氧化钾溶液缓慢加入氯化汞和碘化钾的混合物中，并稀释至100毫升。

在黑暗中放置24小时后，将上清液倒出并储存在聚乙烯瓶中。

橡胶塞或聚乙烯盖用于紧紧盖住。

在阴暗处可以稳定保存1个月。

2. Hgi2-ki-naoh解决方案
称量16.0 g氢氧化钠（NaOH），溶于50 ml水中，冷却至室温。

称量7.0 g碘化钾（KI）和10.0 g碘化汞（HgI2）并将其溶解在水中，然后在搅拌下将溶液缓慢加入上述50 ml氢氧化钠溶液中，并用水稀释至100 ml。

存放在聚乙烯瓶中，用橡胶塞或聚乙烯盖紧盖，在阴暗处保存，有效期一年。

使用注意事项
1.内斯勒试剂中的汞是有毒的。

使用时要小心，触摸皮肤时要及
时清洗。

2. Nessler试剂的使用寿命相对较短，通常在制备后仅三周即可保存。

降水量的增加会影响测定结果。

3.配制溶液时，所有水都必须不含氨，并且不能用普通滤纸过滤，否则很容易污染Nessler试剂。

纳氏试剂配制方法纳氏试剂是一种用于检测蛋白质浓度的试剂，其基本原理是通过与蛋白质中的酚酸反应生成蓝色化合物，然后利用比色法来测定蓝色化合物的吸光度，从而计算蛋白质的浓度。

下面我将详细介绍纳氏试剂的配制方法。

纳氏试剂的主要成分包括硫酸铜、硝酸钠和酒石酸。

硫酸铜会与蛋白质中的酚酸发生反应生成蓝色化合物；硝酸钠作为络合剂用于稳定试剂；酒石酸用于调节溶液的PH值。

以下是纳氏试剂的配制步骤：步骤一：准备所需的试剂和器材，包括硫酸铜、硝酸钠、酒石酸、蒸馏水、容量瓶、比色皿等。

步骤二：取一定的硫酸铜溶液。

硫酸铜的浓度可根据需要调整，一般为1 mM。

根据实验需求，可以根据需要调整浓度。

步骤三：准备硝酸钠溶液。

将适量的硝酸钠溶解在蒸馏水中，浓度一般为4%。

步骤四：准备酒石酸溶液。

将适量的酒石酸溶解在蒸馏水中，浓度一般为2%。

步骤五：将硝酸钠溶液和酒石酸溶液按照1:1的体积比混合，得到一定体积的硝酸钠-酒石酸缓冲液。

这样做是为了调节试剂的PH值，一般为8.5-9。

调节PH 的目的是为了使试剂在反应过程中呈现最佳效果。

步骤六：将硫酸铜溶液和硝酸钠-酒石酸缓冲液按照9:1的体积比混合。

慢慢滴加缓冲液，同时用漏斗控制滴液速度，避免产生剧烈的化学反应。

步骤七：将滴加后的溶液进行充分的搅拌混合，确保试剂均匀混合。

步骤八：最后将试剂转移至容量瓶中，并用蒸馏水补足至刻度线。

步骤九：检查试剂的颜色和透明度，确保试剂无混浊或沉淀。

如果有，说明反应不完全，需要重新调整试剂的配制方法。

以上就是纳氏试剂的配制方法。

在实际操作中，还需要注意以下几点：1. 所使用的试剂和器材必须干净，以避免对试剂制备和测定结果产生干扰。

2. 在试剂配制过程中，尽可能避免与皮肤接触，避免对人体和环境造成伤害。

3. 配制好的纳氏试剂应保存在避光、干燥的地方，以保证试剂的稳定性。

纳氏试剂是一种常用的蛋白质浓度测定试剂，具有灵敏度高、稳定性好等优点。

通过合理的配制方法，可以得到满足实验需求的纳氏试剂。

试剂配制方法氨氮在线监测仪试剂配制1、纳氏试剂称取80g氢氧化钠，溶于250ml水中，充分冷却至室温。

另称取35g碘化钾（KI）和50g碘化汞（HgI2）溶于250ml水，搅拌至充分溶解，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入经充分冷却过的氢氧化钠溶液中，用水稀释至500ml，静置5小时以上。

小心倒出上层清夜待用。

在配制该溶液时应该注意：①氢氧化钠溶液必须充分冷却至室温，有条件的可以放在冰箱中冷却；②碘化钾和碘化汞必须充分溶解，在与氢氧化钠溶液混合前，不能有未溶解固体存在。

且要慢慢混合，边混合边搅拌均匀。

另外，纳氏试剂在常温下是略显淡黄绿色的透明溶液，随着曝光时间增加逐渐生成黄棕色沉淀，溶液惠渐渐变黄。

沉淀产生与普通玻璃仪器有关，少量沉淀不会影响测量结果，使用时倒出上层清夜即可。

纳氏试剂最好是用棕色瓶冰箱中或阴暗处保存，室温下最好不要超过1个月。

由具体情况定，文度越高保存期越短。

纳氏试剂中的汞有毒，使用时要小心，皮肤触碰时要及时冲洗。

2、酒石酸钾钠溶液的配制称取250g酒石酸钾钠（KNaC4H4O6 ?4H2O）溶解于500ml水中，加热煮沸20分钟以除去氨，放冷定容至500ml。

3、硫代硫酸钠溶液的配制称取2.5g硫代硫酸钠（Na 2S2O3）溶于200ml水中，另称取1.5g乙二胺四乙酸二钠和2.5g氢氧化钠（NaOH）溶于200ml水，然后将两溶液混合，搅拌，稀释至500ml。

4、氨氮标准溶液的配制Cl）溶于水中，移入1000ml 称取3.891g经100℃干燥过的优级纯氯化铵（NH4容量瓶中，用水稀释至标线并混匀。

此标准溶液浓度为1000mg/L，其它各浓度标准溶液以1000mg/L标准溶液依次稀释得到。

Cl）于称物瓶中，置于100℃的烘箱中干干燥过程为：称取约5g 氯化铵（NH4燥1-2小时，取出盖上盖子置于干燥器中放冷后再称量配制标准溶液。

注：以上试剂除非特别说明外，皆为分析纯试剂。