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仿真模拟训练(四)一、选择题(本题共6小题，每小题6分，共36分。
在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
)1．(2019·天津南开区二模)下列有关实验的叙述正确的是()A．采用目测估算法探究培养液中酵母菌种群数量动态变化B．探究温度对淀粉酶活性的影响，不宜用斐林试剂对产物进行检测C．橙色重铬酸钾溶液在酸性条件下与二氧化碳发生化学反应，变成灰绿色D．观察质壁分离及复原现象实验操作流程：取材→滴加0.3 g/mL的蔗糖溶液→制片→观察→滴加清水→观察答案 B解析探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化可采用抽样检测法，用血细胞计数板进行计数，A错误；斐林试剂可用于检测还原糖，但需要进行水浴加热，对“温度对淀粉酶活性的影响”的实验结果产生干扰，B正确；橙色的重铬酸钾在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色，C错误；在观察质壁分离与复原现象时，流程为：取材→制片→观察→滴加0.3 g/mL的蔗糖溶液→观察→滴加清水→观察，D错误。
2．(2019·河南名校期末)研究者将乳腺细胞(M)诱导成乳腺癌细胞(M e)，如图表示细胞癌变前后的有关代谢水平变化情况，其中图2是在培养液中加入线粒体内膜呼吸酶抑制剂后测得的相关数据。
下列有关叙述正确的是()A．数据显示，M e对葡萄糖的摄取能力低于MB．M e细胞膜上糖蛋白会增加，其根本原因是原癌基因和抑癌基因表达能力下降C．M对该呼吸酶抑制剂的敏感性大于M e，有氧呼吸第三阶段受到直接影响D．若M e进行无氧呼吸，则其培养液中酒精含量高于M培养液中酒精含量答案 C解析图1数据显示，M e对葡萄糖的摄取能力高于M，A错误；M e是乳腺癌细胞，癌细胞膜上的糖蛋白减少而不会增加，且细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因突变，B 错误；由图2分析，加入呼吸酶抑制剂以后，M的实验组细胞数/对照组细胞数，比值明显低于M e组，因此M对该呼吸酶抑制剂的敏感性大于M e，因加入的是线粒体内膜呼吸酶抑制剂，因此有氧呼吸第三阶段受到直接影响，C正确；M e为人体细胞，无氧呼吸产生乳酸而不是酒精，D错误。
2020年全国统一高考生物试卷（新课标Ⅰ）一、选择题：本题共6小题，每小题6分，共36分。
在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．（6分）新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯，提高公共卫生安全意识。
下列相关叙述错误的是（）A．戴口罩可以减少病原微生物通过飞沫在人与人之间的传播B．病毒能够在餐具上增殖，用食盐溶液浸泡餐具可以阻止病毒增殖C．高温可破坏病原体蛋白质的空间结构，煮沸处理餐具可杀死病原体D．生活中接触的物体表面可能存在病原微生物，勤洗手可降低感染风险2．（6分）种子贮藏中需要控制呼吸作用以减少有机物的消耗。
若作物种子呼吸作用所利用的物质是淀粉分解产生的葡萄糖，下列关于种子呼吸作用的叙述，错误的是（）A．若产生的CO2与乙醇的分子数相等，则细胞只进行无氧呼吸B．若细胞只进行有氧呼吸，则吸收O2的分子数与释放CO2的相等C．若细胞只进行无氧呼吸且产物是乳酸，则无O2吸收也无CO2释放D．若细胞同时进行有氧和无氧呼吸，则吸收O2的分子数比释放CO2的多3．（6分）某研究人员以小鼠为材料进行了与甲状腺相关的实验，下列叙述错误的是（）A．切除小鼠垂体，会导致甲状腺激素分泌不足，机体产热减少B．给切除垂体的幼年小鼠注射垂体提取液后，其耗氧量会增加C．给成年小鼠注射甲状腺激素后，其神经系统的兴奋性会增强D．给切除垂体的小鼠注射促甲状腺激素释放激素，其代谢可恢复正常4．（6分）为达到实验目的，需要选用合适的实验材料进行实验。
下列实验目的与实验材料的对应，不合理的是（）实验材料实验目的A大蒜根尖分生区细胞观察细胞的质壁分离与复原B蝗虫的精巢细胞观察细胞的减数分裂C哺乳动物的红细胞观察细胞的吸水和失水D人口腔上皮细胞观察DNA、RNA在细胞中的分布A．A B．B C．C D．D5．（6分）已知果蝇的长翅和截翅由一对等位基因控制。
多只长翅果蝇进行单对交配（每个瓶中有1只雌果蝇和1只雄果蝇），子代果蝇中长翅：截翅＝3：1．据此无法判断的是（）A．长翅是显性性状还是隐性性状B．亲代雌蝇是杂合子还是纯合子C．该等位基因位于常染色体还是X染色体上D．该等位基因在雌蝇体细胞中是否成对存在6．（6分）土壤小动物对动植物遗体的分解起着重要的作用。
仿真模拟训练(一)一、选择题(本题共6小题，每小题6分，共36分。
在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
)1．(2019·江西南昌第二次模拟)下列四个实验中所用的酒精浓度最高的是()A．观察花生子叶中脂肪颗粒B．观察口腔上皮细胞中DNA和RNA的分布C．观察洋葱根尖细胞的有丝分裂D．土壤中小动物类群丰富度的研究答案 C解析观察花生子叶中脂肪颗粒，用苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液将花生子叶薄片染色后，需用体积分数为50%的酒精洗去浮色；观察口腔上皮细胞中DNA和RNA的分布，在操作过程中，需用点燃的酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干，酒精灯一般用体积分数为90%左右的工业酒精做燃料；观察洋葱根尖细胞的有丝分裂的实验中，用体积分数为95%的酒精与15%盐酸按1∶1混合配制解离液，以使细胞相互分离；在“土壤中小动物类群丰富度的研究”实验中，通常用体积分数为70%的酒精对小动物进行固定和防腐。
2．(2019·太原高三期末)最新研究表明，由光驱动的分子转子被用来在单个细胞的膜上钻孔，有望将治疗试剂运送到这些细胞中，或者直接诱导这些细胞死亡，如图为钻孔过程的示意图，有关说法错误的是()A．分子转子钻孔需要钻开细胞膜上的磷脂双分子层B．必须钻孔后才可以运送治疗试剂说明了细胞膜具有选择透过性C．分子转子与特定细胞膜识别主要取决于细胞膜上的糖蛋白D．分子转子的驱动需要线粒体提供ATP答案 D解析细胞膜的基本支架是由磷脂双分子层构成的，因此钻孔需钻开磷脂双分子层，A 正确；钻孔后治疗试剂的进入说明了细胞膜能控制物质进出细胞，具有选择透过性，B正确；细胞膜的识别作用取决于细胞膜表面的糖蛋白，C正确；分子转子是光能驱动的，不需要线粒体提供ATP，D错误。
3．果蝇的红眼和白眼分别受位于X染色体的等位基因W和w控制；鸡的芦花和非芦花分别受位于Z染色体上的等位基因B和b控制。
下列相关叙述，错误的是() A．在自然界中，非芦花雄鸡数量应多于非芦花雌鸡B．在自然界中，红眼雌果蝇数量应多于红眼雄果蝇C．红眼雄果蝇与白眼雌果蝇交配，子代雌果蝇均为红眼D．芦花雌鸡与非芦花雄鸡交配，子代雌鸡均为非芦花答案 A解析果蝇的性别决定方式为XY型，雄蝇性染色体组成为XY，雌蝇性染色体组成为XX，鸡的性别决定方式为ZW型，雄鸡性染色体组成为ZZ，雌鸡性染色体组成为ZW。
2020年全国统一高考生物试卷（新课标Ⅱ）一、选择题：本题共6小题，每小题6分，共36分。
在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．（6分）新冠病毒（SARS﹣CoV﹣2）和肺炎双球菌均可引发肺炎，但二者的结构不同，新冠病毒是一种含有单链RNA的病毒。
下列相关叙述正确的是（）A．新冠病毒进入宿主细胞的跨膜运输方式属于被动运输B．新冠病毒与肺炎双球菌均可利用自身的核糖体进行蛋白质合成C．新冠病毒与肺炎双球菌二者遗传物质所含有的核苷酸是相同的D．新冠病毒或肺炎双球菌的某些蛋白质可作为抗原引起机体免疫反应2．（6分）当人体的免疫系统将自身物质当作外来异物进行攻击时，可引起自身免疫病。
下列属于自身免疫病的是（）A．艾滋病B．类风湿性关节炎C．动物毛屑接触性鼻炎D．抗维生素D佝偻病3．（6分）下列关于生物学实验的叙述，错误的是（）A．观察活细胞中的线粒体时，可以用健那绿染液进行染色B．探究人体红细胞因失水而发生的形态变化时，可用肉眼直接观察C．观察细胞中RNA和DNA的分布时，可用吡罗红甲基绿染色剂染色D．用细胞融合的方法探究细胞膜流动性时，可用荧光染料标记膜蛋白4．（6分）关于高等植物细胞中染色体组的叙述，错误的是（）A．二倍体植物的配子只含有一个染色体组B．每个染色体组中的染色体均为非同源染色体C．每个染色体组中都含有常染色体和性染色体D．每个染色体组中各染色体DNA的碱基序列不同5．（6分）取某植物的成熟叶片，用打孔器获取叶圆片，等分成两份，分别放入浓度（单位为g/mL）相同的甲糖溶液和乙糖溶液中，得到甲、乙两个实验组（甲糖的相对分子质量约为乙糖的2倍）。
水分交换达到平衡时，检测甲、乙两组的溶液浓度，发现甲组中甲糖溶液浓度升高。
在此期间叶细胞和溶液之间没有溶质交换。
据此判断下列说法错误的是（）A．甲组叶细胞吸收了甲糖溶液中的水使甲糖溶液浓度升高B．若测得乙糖溶液浓度不变，则乙组叶细胞的净吸水量为零C．若测得乙糖溶液浓度降低，则乙组叶肉细胞可能发生了质壁分离D．若测得乙糖溶液浓度升高，则叶细胞的净吸水量乙组大于甲组6．（6分）河水携带泥沙流入大海时，泥沙会在入海口淤积形成三角洲。
第2练代谢第1组酶和ATP1．下列有关细胞内的物质、结构和功能的叙述中，正确的是( )A．衰老的细胞中自由水含量和酶的活性都会明显降低B．细胞内各酶促反应所需空间是细胞需要适度生长的原因之一C．同一生物个体中，各种酶的最适温度和最适pH都相同D．胰岛B细胞中，具有降血糖作用的胰岛素最可能出现在内质网形成的囊泡中答案 B解析衰老的细胞中并非所有酶的活性都下降，如与细胞衰老相关的酶的活性较高，A错误；细胞内各酶促反应所需空间和细胞器有一定的体积是细胞需要适度生长的主要原因，B正确；同一生物个体中酶的最适pH可以不同，如动物体内的酶最适pH大多在6.5～8.0之间，而胃蛋白酶的最适pH为1.5，C错误；分泌蛋白形成过程中，经过内质网初步加工的蛋白质需要在高尔基体中进一步加工，才具有生物活性，胰岛B细胞中具有降血糖作用的胰岛素最可能出现在高尔基体形成的囊泡中，D错误。
2．酶抑制剂有两类，其中竞争性抑制剂与底物竞争酶的活性位点，从而降低酶对底物的催化效应；非竞争性抑制剂和酶活性位点以外的其他位点结合，能改变酶的构型，使酶不能与底物结合，从而使酶失去催化活性。
下列叙述正确的是( )A．酶的催化作用的实质是为化学反应提供活化能B．改变底物的量对两种抑制剂的作用效果均无影响C．竞争性抑制剂通过降低酶本身的活性来降低酶促反应速率D．高温、非竞争性抑制剂都能通过改变酶的空间结构使酶失去催化活性答案 D解析酶的催化作用的实质是降低化学反应的活化能，A错误；改变底物的量对竞争性抑制剂的作用效果有影响，对非竞争性抑制剂的作用效果无影响，B错误；竞争性抑制剂与底物竞争酶的活性位点，从而降低酶对底物的催化效应，对酶本身的活性没有影响，C错误；高温、非竞争性抑制剂都是通过改变酶的空间结构使酶失去催化活性，D正确。
3．下列有关酶和ATP的叙述，正确的是( )A．真核细胞的核外也含有参与DNA合成的酶B．人体成熟的红细胞既能产生酶又能产生ATPC．叶绿体中合成的ATP可为Mg2＋的吸收提供能量D．为了延长酶的保存时间，保存温度应设为酶的最适温度答案 A解析除细胞核外真核细胞的线粒体和叶绿体中也含有DNA，含有参与DNA合成的酶，A正确；人体成熟的红细胞中没有细胞核和众多细胞器，不能合成酶，但能进行无氧呼吸产生ATP，B 错误；叶绿体中合成的ATP只能用于暗反应阶段，吸收Mg2＋所需的能量由细胞呼吸提供，C 错误；低温下酶的结构更稳定，故酶要在低温下保存，D错误。
(浙江专用)2020高考生物考前增分专项练辑综合模拟卷（二）考生注意:1．本试卷分选择题和非选择题两部分，共4页。
2．答卷前,考生务必用蓝、黑色字迹的钢笔或圆珠笔将自己的姓名、班级、学号填写在相应位置上.3．本次考试时间90分钟，满分100分。
选择题部分一、选择题(本大题共23小题，每小题2分，共46分。
每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，不选、多选、错选均不得分)1．2018年诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家詹姆斯·艾利森和日本科学家本庶佑，以表彰他们在癌症免疫治疗方面所作出的贡献.他们的研究提供了一种治疗癌症的方法-—通过刺激免疫系统原有的能力，来对抗肿瘤细胞,该项研究发现一种名为PD－1的细胞表面成分能帮助免疫系统识别癌症细胞，请问PD－1的化学成分是（)A．磷脂B．胆固醇C．蛋白质D．脂肪答案C解析由磷脂分子组成的脂双层构成质膜的基本骨架，没有特异性，不能识别癌细胞,A项错误；人体质膜含有少量胆固醇，没有识别作用，B项错误；质膜上含有大量的蛋白质,其与质膜的物质交换、细胞识别、免疫等功能密切相关，如蛋白质与多糖形成的糖蛋白具有识别功能，C项正确；质膜上不含脂肪，D项错误.2．下列关于生态系统的生产量和生物量的叙述，正确的是( ）A．生物量高的生态系统，其净初级生产量也高B．次级生产量归根结底是要依靠植物在光合作用中所产生的有机物质C．生物量约等于总初级生产量减去所有生物的呼吸消耗量D．与海洋生态系统相比，陆地生态系统的次级生产量更高答案B解析生物量高的生态系统，其净初级生产量不一定高,A项错误；次级生产量归根结底是要依靠植物在光合作用中所产生的有机物质,B项正确；生物量实际上就是净生产量在某一调查时刻前的积累量，净初级生产量等于总初级生产量减去所有生物的呼吸消耗量，C 项错误；海洋次级生产量相当于陆地次级生产量的三倍多,D项错误。
3．下列有关细胞结构和功能的叙述，正确的是（）A．被台盼蓝染液染成蓝色的细胞,其质膜具有选择透性B．核膜上的核孔复合体是RNA和蛋白质等大分子物质自由进出细胞核的通道C．生物膜系统包括叶绿体类囊体膜，也包括视网膜、口腔黏膜等D．真核细胞中有维持细胞形态的细胞骨架，细胞骨架与物质运输等有关答案D解析活细胞的质膜具有选择透性，大分子的台盼蓝不能通过，因此被台盼蓝染液染成蓝色的细胞，其质膜丧失了选择透性,A错误；核孔复合体是大分子物质进出细胞核的通道，具有选择性，大分子物质并不能自由通过，B错误;生物膜系统指的是细胞内的所有膜结构，包括叶绿体类囊体膜,但是不包括视网膜、口腔黏膜等，C错误;真核细胞中有维持细胞形态的细胞骨架，细胞骨架与物质运输等有关，D正确。
(浙江专用）2020高考生物考前增分专项练辑综合模拟卷（一）考生注意：1．本试卷分选择题和非选择题两部分，共4页。
2．答卷前,考生务必用蓝、黑色字迹的钢笔或圆珠笔将自己的姓名、班级、学号填写在相应位置上。
3．本次考试时间90分钟,满分100分。
选择题部分一、选择题(本大题共23小题，每小题2分，共46分。
每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，不选、多选、错选均不得分）1．下列关于叶绿体内光合色素的描述,正确的是（）A．植物生长过程中，叶绿体内各种色素的比例保持不变B．叶绿素a吸收的光能可在类囊体膜上转化为ATP中的化学能C．层析液中溶解度最大的光合色素是叶绿素aD．叶绿素呈绿色是因为它大量吸收绿光，几乎不吸收其他颜色的光答案B解析植物生长过程中，叶绿体内各种色素的比例是改变的,如叶片衰老后，叶绿素的含量降低，类胡萝卜素的含量升高,A项错误；层析液中溶解度最大的光合色素是胡萝卜素，C项错误；叶绿素呈绿色是因为它吸收绿光最少，大量的绿光被反射，D项错误。
2．下列关于中心法则的叙述，正确的是（）A．大肠杆菌DNA复制是染色体形成两条染色单体的过程B．转录产物RNA必须在细胞核中经加工成熟后，才用于蛋白质合成C．劳氏肉瘤病毒能以RNA为模板反向合成DNA，这也是对中心法则的补充D．间隙期的细胞内DNA含量明显上升答案C解析大肠杆菌是原核生物，细胞内不存在染色体，A项错误；真核生物核基因的转录产物RNA必须在细胞核中经加工成熟后,才用于蛋白质合成，原核细胞是边转录边翻译，B项错误;间隙期是指G1期、G2期，DNA含量不变，合成期（S期)细胞中的DNA才会复制,DNA含量加倍，D项错误.3．成熟植物液泡膜上有转运钙离子或氢离子的载体蛋白，这些载体蛋白将钙离子或氢离子运进液泡时需消耗能量(ATP）。
下列相关叙述正确的是（）A．液泡膜两测钙离子和氢离子的浓度都将趋于相等B．钙离子进入液泡时，细胞内ATP含量会明显下降C．该植物细胞内腺苷三磷酸均生成于原生质层内部D．成熟植物细胞内载体蛋白的合成与无膜细胞器无关答案C解析根据题干信息可知，钙离子和氢离子进入液泡的转运方式为主动转运，而主动转运不会引起液泡膜两侧钙离子和氢离子浓度趋于相等，A项错误;细胞内ATP含量少而稳定，即ATP含量不会因主动转运的消耗而明显下降，B项错误；植物的原生质层是由细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质构成，细胞溶胶、线粒体和叶绿体都属于细胞质，在这些场所均可合成腺苷三磷酸(ATP)，C项正确；蛋白质的合成场所是核糖体，而核糖体无膜结构,D项错误. 4．下列关于蛋白质的叙述,正确的是( ）A．蛋白质空间结构多样，血红蛋白像一个表面光滑的球B．蛋白质需通过主动转运的方式进出细胞C．鸟的羽毛和人的指甲主要是同一种蛋白质组成的D．蛋白质变性后结构被破坏,与双缩脲试剂不再发生紫色反应答案C解析血红蛋白像一个表面粗糙的球,A项错误；蛋白质是一种大分子化合物,不能够通过主动转运进出细胞，B项错误；鸟的羽毛和人的指甲主要是同一种蛋白质(角蛋白)组成的，C项正确；蛋白质变性只是破坏了空间结构，肽键未断裂，仍可与双缩脲试剂发生紫色反应，D项错误。
题型专项练一图示图解类一、选择题1.(2018湖北黄冈阶段,14)溶酶体的吞噬消化作用有两种:一种是自体吞噬;另一种是异体吞噬,如下图所示。
据图判断,下列叙述错误的是( )A.消除细胞内衰老的细胞器是通过自噬作用实现的B.溶酶体参与抗原的加工处理过程C.溶酶体与吞噬体的融合体现了生物膜的流动性D.吞噬细胞通过吞噬作用特异性识别抗原2.下图表示光合作用时ATP形成的图解,图中b6f复合体能将叶绿体基质中的质子(H+)转移到类囊体腔内,该过程需要依赖于水光解时产生的电子(e-)进行推动,有关分析错误的是( )A.图示过程发生在叶绿体的类囊体薄膜上B.质子从叶绿体基质转移到腔内的运输方式是协助扩散C.光合作用中ATP合成过程会减小类囊体内外的质子浓度差D.物质X既具有催化功能又具有运输功能3.下图1为某果蝇染色体上与白眼基因S有关的示意图,图2为该染色体上相关基因转录过程示意图。
下列相关叙述错误的是( )图1图2A.该果蝇体细胞中可能没有与基因S相对应的等位基因B.图2与图1中不同的碱基配对方式是A—UC.由图2可知,一个DNA上不同基因的转录模板可能不同D.S基因若发生图2过程,催化该过程酶的结合位点在图1的Ⅰ区段4.为了研究酵母菌细胞内蛋白质的合成,研究人员在其培养基中添加3H标记的亮氨酸后,观察相应变化。
其相关结构如下图,几种结构中最早检测到放射性的时间如下表。
下列叙述错误的是( )细胞结构附有核糖体的内质网高尔基体靠近细胞膜的囊泡时间/min 3 17 117A.从表中可知,图中首先可观察到3H标记的细胞器是③B.能在图中④上观察到3H标记表明可能有分泌蛋白合成C.观察到3H标记的靠近细胞膜的囊泡,是由高尔基体形成的D.培养一段时间后,细胞膜外能观察到3H标记5.人类白化病是常染色体隐性遗传病。
某患者家系的系谱图如下图甲。
已知某种方法能够使正常基因A显示一个条带,白化基因a则显示为另一个条带。
非选择题特训特训1光合作用和细胞呼吸的基本原理1．(2018·江西名校质检)已知玉米叶肉细胞中有CO2“泵”，使其能在较低的CO2浓度下进行光合作用，水稻没有这种机制。
图1为玉米幼苗体内光合作用与有氧呼吸的部分过程图；图2为玉米和水稻在不同胞间CO2浓度下的光合速率情况。
回答下列问题：(1)图1中能产生A TP的过程有______(填图中序号)；过程②需要光反应提供的物质有______________。
(2)要比较图2中两条曲线的交点对应的玉米和水稻向外界释放O2速率的关系，还应了解的情况是____________________________。
(3)由图2可知，随着胞间CO2浓度的升高，玉米的光合速率不再变化而水稻的光合速率逐渐上升。
请从暗反应酶的角度分析原因：_____________________________________________________________________________________________________________。
(4)已知环境中的CO2需要通过植物的气孔才能进入植物胞间，气孔导度越大，气孔开放程度越高。
请说出一种情况来说明导致玉米幼苗光合速率降低的主要因素不是气孔导度：________________________________________________________________________。
答案(1)③④A TP与[H](2)玉米和水稻的呼吸速率(3)水稻暗反应相关的酶活性比玉米的高(或水稻暗反应相关的酶数量比玉米的多)(4)玉米幼苗气孔导度下降，但胞间CO2浓度却升高解析(1)图1中过程④和过程③分别为有氧呼吸的第一阶段和第二阶段，这两个阶段均可产生ATP。
过程①为光合作用暗反应中CO2的固定，过程②为光合作用暗反应中C3的还原，过程②需要消耗光反应产生的ATP与[H]。
(2)图2中两条曲线交点处表示玉米和水稻的实际光合速率相等，要比较这两种植物向外界释放O2的速率大小，即这两种植物的净光合作用速率大小，还需知道这两种植物的呼吸速率。
特训5 基因工程的应用1．(2018·广东四校联考)如图所示的质粒中，Tet r为四环素抗性基因，LacZ′基因的表达产物能使白色的大肠杆菌菌落变成蓝色。
现用EcoRⅠ切割目的基因及质粒载体并进行连接，将得到的重组质粒转化大肠杆菌，以对目的基因进行保存和扩增。
请回答下列问题：(1)将目的基因和质粒载体连接需使用的工具酶是________________。
为将载体导入大肠杆菌，常用Ca2＋处理使之处于________________。
(2)LacZ′基因在基因工程中起__________基因的作用。
为筛选导入重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入________，筛选________(填“蓝色”或“白色”)菌落。
(3)若需要将这个质粒改造成基因工程表达载体，还需要插入________和________部分。
将改造后的表达载体和目的基因经EcoRⅠ酶切连接，并成功导入受体细胞后，发现仍有部分细胞不能表达出目的蛋白，最可能的原因是____________________________________。
为了避免上述情况发生，最好用________________切割目的基因和表达载体。
(4)我国对农业转基因生物实施标识制度，比如由转基因大豆加工制成的大豆油，标注为“本产品加工原料中含有转基因大豆，但本产品已不再含有转基因成分”，其相关的生物学依据是________________________________________________________________________。
答案(1)DNA连接酶感受态(2)标记四环素白色(3)启动子终止子目的基因与质粒载体反向连接两种限制酶(4)大豆油属于脂肪，不含目的基因编码的蛋白质解析(1)将目的基因和质粒载体连接需要使用的工具酶是DNA连接酶；为将载体导入大肠杆菌，常用Ca2＋处理使之处于感受态。
(2)LacZ′基因在基因工程中起标记基因的作用；为筛选导入重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入四环素；由于构建重组表达载体过程中LacZ′基因已经被破坏，因此应该筛选白色菌落。
(3)基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、标记基因、终止子、复制原点等；将改造后的表达载体和目的基因经EcoR Ⅰ酶切连接，并成功导入受体细胞后，发现仍有部分细胞不能表达出目的蛋白，最可能的原因是目的基因与质粒载体反向连接，为了避免上述情况发生，最好用两种限制酶切割目的基因和表达载体。
(4)我国对农业转基因生物实施标识制度，比如由转基因大豆加工制成的大豆油，标注为“本产品加工原料中含有转基因大豆，但本产品已不再含有转基因成分”，其相关的生物学依据是大豆油属于脂肪，不含目的基因编码的蛋白质。
2．(2018·东北五校联考)透明质酸酶临床常用作药物渗透剂，目前市场上出售的透明质酸酶主要从动物组织中提取，成本高且提纯困难，科研人员尝试将透明质酸酶基因转入大肠杆菌，使其高效表达。
部分过程如图所示，请回答下列问题：(1)步骤①代表的是基因工程操作程序中的________________________，由图可知，此步骤中，选择用限制酶______________去切割DNA分子中的____________键。
(2)基因工程一般选择大肠杆菌作为受体，这是因为大肠杆菌具有________________________________________________________________________的特点。
(3)透明质酸酶基因进入大肠杆菌，并且____________________的过程，称为转化。
转化时，首先需要用________处理大肠杆菌，使其处于感受态。
(4)透明质酸酶基因导入受体细胞后，需通过_______________技术检测其是否成功转录。
答案(1)基因表达载体的构建NcoⅠ和XhoⅠ磷酸二酯(2)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(3)维持稳定和表达Ca2＋(4)RNA－DNA分子杂交解析(1)步骤①代表将目的基因即透明质酸酶基因和作为载体的质粒连接，完成基因表达载体的构建；据图可知，要用限制酶Nco Ⅰ和Xho Ⅰ去切割DNA，断开磷酸二酯键，便于目的基因和质粒连接。
(2)基因工程中一般选择大肠杆菌作为载体的原因是大肠杆菌属于单细胞生物，繁殖速度快，容易培养，遗传物质相对较少，容易对遗传物质进行改造。
(3)透明质酸酶基因导入大肠杆菌，并且能维持稳定，在大肠杆菌细胞内能表达，控制合成透明质酸酶，这个过程称作转化；转化时，需要用Ca2＋(氯化钙)处理大肠杆菌，使其处于感受态，即能吸收周围环境中DNA分子的状态。
(4)透明质酸酶基因导入大肠杆菌后，需要通过RNA－DNA分子杂交技术来检测目的基因是否转录出了mRNA。
3．(2018·广州毕业班测试)现有重组质粒甲(共含2 686 个碱基对，不含T－DNA)和乙，为避免基因反接，研究人员用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重组质粒甲、乙，再利用所得片段构建了重组质粒丙(如图所示)，然后采用农杆菌转化法将丙导入胡萝卜愈伤组织细胞。
培养后得到转VP1基因胡萝卜植株。
请回答下列问题：(1)构建重组质粒丙的目的是_________________________________________________________________________________________________________________，利用重组质粒甲、乙构建丙的过程中，用到的工具酶是________________________。
(2)实验过程中，将愈伤组织浸入农杆菌(含重组质粒丙)培养液中一段时间，其目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(3)将重组质粒甲、乙和丙进行分组，每组中含其中一种重组质粒，同时用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割，结果如下表所示：切割前，重组质粒甲含有________个游离的磷酸基团，限制酶Ⅰ在重组质粒甲中有________个切割位点，表中第________组是切割重组质粒丙的结果。
(4)在植物组织培养过程中需要无菌操作，因此对外植体(离体的组织块)要进行________处理。
用于培养外植体的培养基不适用于培养胚状体，原因是_______________________ ________________________________________________________________________。
答案(1)将VP1基因插入到T－DNA中，从而使VP1基因进入植物细胞后，能整合到染色体的DNA上限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA连接酶(2)利用农杆菌感染植物，将VP1基因转移到受体细胞中(3)0 1 2 (4)消毒培养基中添加的植物激素(植物生长调节剂)的种类和含量比例有所不同解析(1)由图可知，重组质粒甲中含有目的基因，不含T－DNA，而重组质粒乙中含有T －DNA，不含目的基因，所以构建重组质粒丙的目的是将VP1基因插入到T－DNA中，从而使VP1基因进入植物细胞后，能整合到染色体的DNA上；在构建重组质粒时，用到的工具酶是限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA连接酶。
(2)将愈伤组织浸入含重组质粒丙的农杆菌培养液中，其目的是利用农杆菌感染植物，将VP1基因转移到受体细胞中。
(3)因为质粒是小型环状的DNA分子，环状DNA分子没有游离的磷酸基团；由表中数据可知，第1组经切割后产生含有2 146和540个碱基对的2种DNA片段，两个片段之和为2 686个碱基对，所以第1组为重组质粒甲，重组质粒甲中有2个限制酶切割位点，其中限制酶Ⅰ在重组质粒甲中只有一个切割位点；第2组中含有重组质粒甲中的540个碱基对片段，所以第2组为切割重组质粒丙的结果。
第3组为切割重组质粒乙的结果，重组质粒丙中含有重组质粒甲中的540个碱基对片段和重组质粒乙中的12 400个碱基对片段。
(4)为了防止杂菌感染，植物组织培养过程中需要对外植体进行消毒处理，处理方法一般用酒精、无菌水和次氯酸钠清洗；培养外植体是使其发生脱分化形成愈伤组织，培养胚状体是使其发芽和生根，所以培养基中添加的植物激素(植物生长调节剂)的种类和含量比例有所不同。
4．(2018·湖北八校联考)北极比目鱼中有抗冻基因，如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图。
请回答下列问题：(1)利用过程①的方法构建的基因文库是________(填“基因组文库”或“部分基因文库”)。
(2)过程②中常需要使用限制酶和DNA连接酶，既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是________________。
(3)为使过程①获取的目的基因在番茄细胞中能够表达，在构建表达载体时，需在目的基因的两端加入________________。
(4)将重组质粒导入农杆菌，并通过农杆菌的转化作用，可以将目的基因导入番茄体细胞中染色体的DNA上，其原理是_______________________________________________ ________________________________________________________________________。
(5)要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中正确表达，应检测转基因番茄植株中该基因的____________是否呈阳性。
答案(1)部分基因文库(2)T4DNA连接酶(3)启动子、终止子(4)目的基因随农杆菌中的Ti质粒上的T－DNA 转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上(5)表达产物解析(1)用某种生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的多种互补DNA片段属于部分基因文库。
(2)既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是T4DNA连接酶。
(3)在构建表达载体时，需在目的基因的两端加入启动子和终止子。
(4)将重组质粒导入农杆菌，通过农杆菌的转化作用，可以将目的基因导入番茄体细胞中染色体的DNA上，其原理是农杆菌中的Ti质粒上的T－DNA 可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
(5)检测目的基因是否表达，可从转基因生物中提取基因的表达产物即蛋白质(抗冻蛋白)，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交，若呈阳性，表明目的基因已成功表达。
5．(2018·石家庄毕业班质检)资料一：PCR(聚合酶链式反应)三个基本反应步骤是模板DNA在体外加热至95 ℃时解旋成单链，温度降至55 ℃左右，引物与模板单链按碱基互补配对的原则结合，再调至72 ℃左右时，DNA聚合酶沿5′→3′(磷酸到五碳糖)的方向延伸引物合成互补链。
