茶多酚测定原始记录

茶多酚的含量测定高锰酸钾直接滴定法目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾水解的物质基本上都属茶多酚物质。

根据消耗1ml0.318g/ml的高锰酸钾相等于5.82mg茶多酚的折算系数，可以排序茶多酚的含量。

仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500ml白瓷皿。

试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50ml，冷却后用蒸馏水定容至1000ml，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50ml，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000ml，过滤后贮于棕色瓶中。

2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000ml。

3、高锰酸钾标准溶液：称取ar的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水熔化后定容至1000ml。

精确汲取0.630%草酸溶液10ml，放进250ml锥形瓶中（平行3份），重新加入蒸馏水50ml，再重新加入相对密度为1.84的浓硫酸10ml，容器，在70~80℃水浴中保温5分钟，抽出后用高锰酸钾展开电解。

已经开始快几滴，等待红色消失后再几滴第二几滴，以后可以逐渐大力推进，边滴边挥，等待溶液发生淡红色维持1分钟维持不变即为为终点。

排序高锰酸钾溶液的百分比浓度。

测定步骤1、可供测试液的准备工作：精确称取茶叶切碎样品1g，放到250ml锥形瓶中，重新加入沸蒸馏水80ml，在沸水浴中金属粉末30分钟，然后试液、冲洗，滤液放入100ml容量瓶中，热至室温，最后用蒸馏水定容至100ml，容器。

2、测量：挑200ml蒸馏水放进白瓷皿中，重新加入0.1%靛红溶液5ml，再重新加入可供测试液5ml，停下磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边烘烤边电解，电解速度以1几滴/s为宜，吻合终点时应慢滴。

茶多酚的含量测定高锰酸钾直接滴定法目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的状况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

依据耗费1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于 5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

仪器与试剂仪器：剖析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。

试剂：1 、 0.1% 靛红溶液：称取靛红1g 加入少许水搅匀后，再慢慢加入相对密度为 1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，假如靛红不纯，可下法磺化办理是：称取靛红1g ，加浓硫酸50mL ，在80 ℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h ，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。

2 、0.630%草酸溶液：正确称取草酸 6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取 AR的高锰酸钾 1.27g，用蒸馏水溶解后定容至 1000mL 。

正确汲取0.630%草酸溶液 10mL，放入 250ml 锥形瓶中（平行 3 份），加入蒸馏水 50mL，再加入相对密度为 1.84 的浓硫酸 10mL，摇匀，在 70~80℃水浴中保温 5 分钟，拿出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消逝后再滴第二滴，此后可渐渐加速，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持 1 分钟不变即为终点。

计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

测定步骤1、供测试液的准备：正确称取茶叶磨碎样品1g，放在 250mL 锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在开水浴中浸提30 分钟，而后抽滤、清洗，滤液倒入100mL 容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。

2、测定：取200ml 蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液 5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以 1 滴/s 为宜，靠近终点时应慢滴。

茶多酚的提取实验报告
一、实验目的
本实验旨在通过提取茶叶中的茶多酚，掌握茶多酚的提取方法，了解茶多酚的性质和应用。

二、实验原理
茶多酚是茶叶中的一种重要成分，具有抗氧化、抗菌、抗病毒等多种生物活性。

茶多酚的提取方法主要有水提法、有机溶剂提取法和超临界流体提取法等。

本实验采用水提法提取茶多酚。

三、实验步骤
1.将10克干燥的绿茶叶粉末加入500毫升蒸馏水中，加热至沸腾，保持沸腾10分钟。

2.将煮沸后的茶叶汁过滤，收集滤液。

3.将滤液加入等量的乙醇中，搅拌均匀，过滤，收集滤液。

4.将滤液加入等量的正己烷中，搅拌均匀，过滤，收集滤液。

5.将滤液加入等量的氯仿中，搅拌均匀，过滤，收集滤液。

6.将收集的氯仿溶液挥发干燥，得到茶多酚。

四、实验结果
经过提取和干燥，得到了0.5克茶多酚。

五、实验分析
茶多酚是茶叶中的一种重要成分，具有多种生物活性。

本实验采用水提法提取茶多酚，水是一种绿色、环保的提取溶剂，不会对环境造成污染。

但是，水提法提取茶多酚的效率较低，需要多次提取和分离，操作较为繁琐。

此外，茶多酚的提取量受到茶叶品种、加工工艺、提取条件等多种因素的影响。

六、实验结论
本实验通过水提法提取茶叶中的茶多酚，得到了0.5克茶多酚。

茶多酚是一种重要的生物活性物质，具有多种保健功效。

本实验掌握了茶多酚的提取方法，对茶多酚的性质和应用有了更深入的了解。

茶多酚的含量测定高锰酸钾直接滴定法目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的状况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

依据耗费1mLmL的高锰酸钾相当于茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

仪器与试剂仪器：剖析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL 白瓷皿。

试剂：1、%靛红溶液：称取靛红1g加入少许水搅匀后，再慢慢加入相对密度为的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL ，假如靛红不纯，可下法磺化办理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h ，用蒸馏水定容至1000mL ，过滤后贮于棕色瓶中。

2、%草酸溶液：正确称取草酸，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

正确汲取%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，拿出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消逝后再滴第二滴，此后可渐渐加速，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持 1 分钟不变即为终点。

计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

测定步骤1、供测试液的准备：正确称取茶叶磨碎样品 1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在开水浴中浸提30分钟，而后抽滤、清洗，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。

2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，靠近终点时应慢滴。

直到溶液由深蓝色转变成亮黄色为止，记下耗费的高锰酸钾毫升数。

同时做空白测定。

五、结果计算式中：X—茶多酚的含量，%，B—空白耗费的高锰酸钾毫升数，mLA—样品耗费的高锰酸钾毫升数，mLω--高锰酸钾的浓度，%，m—样品的质量g，V1—测定用供测试液的体积，mL，V2--供测试液的体积，mL 酒石酸铁比色法原理：茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20％～35％，由约30种以上的酚类物质所构成，通称茶多酚。

实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

三、仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。

试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。

2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。

计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

四、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。

2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。

直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。

实验七 茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、实验原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

根据消耗1ml0.318g/ml 的高锰酸钾相当于5.82mg 茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

二、实验试剂0.1%靛红溶液：称取靛红1g 加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50ml ，冷却后用蒸馏水定容至1000ml ，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g ，加浓硫酸50ml ，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h ，用蒸馏水定容至1000ml ，过滤后贮于棕色瓶中。

0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g ，用蒸馏水溶解后定容至1000ml 。

高锰酸钾标准溶液：称取AR 的高锰酸钾 1.27g ，用蒸馏水溶解后定容至1000ml 。

准确吸取0.630%草酸溶液10ml ，放入250ml 锥形瓶中（平行2份），加入蒸馏水50ml ，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10ml ，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边颠边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。

按下式计算高锰酸钾溶液的浓度：三、仪器分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500ml 白瓷皿。

四、测定步骤⑴供测试液的准备：准备称取茶叶磨碎样品1g ，放在200ml 三角烧瓶中，加入沸蒸馏水80ml ，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100ml 容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100ml ，摇匀。

⑵测定：取200ml 蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5ml ，再加入供测试液5ml ，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1()44KMnO 63.100%KMnO =浓度ω滴/s 为宜，接近终点时应慢滴。

实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

根据消耗1mL mL的高锰酸钾相当于茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

三、仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。

试剂：1、%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。

2、%草酸溶液：准确称取草酸，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

准确吸取%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。

计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

四、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。

2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。

直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。

同时做空白测定。

五、结果计算X=)(120.005820.318m V VA B-⨯ω⨯⨯式中：X—茶多酚的含量，% ，B—空白消耗的高锰酸钾毫升数，mLA—样品消耗的高锰酸钾毫升数，mL ω--高锰酸钾的浓度，%m—样品的质量g， V1—测定用供测试液的体积，mL ，V2--供测试液的体积，mL实验三茶叶中茶多酚含量的测定——酒石酸铁比色法一、实验目的：1、掌握酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量的原理及操作。

茶多酚的含量测定高锰酸钾直接滴定法目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。

试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。

2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。

开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。

计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。

2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。

直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。

茶多酚的提取实验报告一、实验目的通过茶叶中茶多酚的提取实验，掌握茶多酚的提取方法和纯化技术，了解其物理化学性质和应用价值。

二、实验原理茶多酚是一种天然的多酚类物质，具有很强的氧化还原能力。

在茶叶中含量较高，可通过水或有机溶剂提取。

本实验采用乙醇-水混合溶剂提取法。

首先将干燥粉碎后的茶叶样品与乙醇-水混合溶剂进行浸泡，使其充分吸收并释放出茶多酚。

然后通过过滤、蒸发、结晶等步骤纯化得到茶多酚。

三、实验步骤1.准备工作：称取适量干燥的绿茶叶样品，并将其粉碎成细粉末。

2.提取：将5g左右的茶叶粉末加入100mL乙醇-水混合溶剂（体积比为7:3），在恒温搅拌器上搅拌约2h。

3.过滤：用滤纸过滤提取液，收集滤液。

4.蒸发：将滤液加热蒸发至干燥。

5.结晶：将蒸发后的提取物溶于少量水中，放置冷藏室中结晶，用滤纸过滤得到茶多酚。

四、实验结果通过实验得到了茶多酚的黄色粉末，并进行了红外光谱分析。

红外光谱图显示主要峰位在3100-3600cm-1和1600-1700cm-1之间，这是由于茶多酚分子中含有-OH和C=O基团所致。

同时，在2800-3000cm-1之间还有一个弱峰，表明样品中还存在一些杂质。

五、实验分析本实验采用的是乙醇-水混合溶剂提取法，该方法具有简单、易操作、成本低等优点。

但同时也存在着对杂质的提取和对茶多酚的破坏等缺点。

因此，在实际生产中需要根据不同情况选择适当的提取方法。

六、实验心得通过本次实验，我深刻地认识到了茶叶中含量丰富的茶多酚物质，并掌握了一种简单的提取方法。

同时，我也发现了该方法的不足之处，需要进一步改进和完善。

在今后的学习中，我将更加努力地学习化学知识，不断提高自己的实验技能。

实验一茶多酚总量的测定一实验目的茶多酚是茶叶中多元酚物质的总量，具有苦涩味，对茶汤的滋味和茶叶的保健功能有非常重要的影响。

药理学研究表明，茶多酚对心血管系统疾病、癌症等具有一定的防治效果。

因此，检测茶多酚总量对评价茶叶品质具有非常重要的作用，同时对于茶叶深加工产品如茶饮料、茶叶提取物、速溶茶等的品质评判也有重要作用。

福林酚法由于采用没食子酸为标准品，因而其适用范围较宽，不仅可以用于茶叶，而且还可适用于茶叶提取物、茶叶深加工制品等。

而酒石酸亚铁法由于采用经验系数1.957，因而仅适用于茶叶中多酚总量测定，而不适于茶叶提取物制品等其他产品中多酚总量测定。

二实验原理本实验引用国家标准方法《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》（GB/T 8313-2008）中的“方法二茶叶中茶多酚的检测”的方法。

茶叶磨碎样中茶多酚用70%的甲醇在70℃水浴上提取，福林酚试剂（主要成分为磷钨酸和磷钼酸）在碱性条件下氧化茶多酚中-OH基团并显蓝色，最大吸收波长为765 nm，用没食子酸作校正标准，根据标准曲线定量茶多酚。

三实验材料、仪器与试剂1 实验材料：均匀磨碎茶样。

2 仪器：电子天平（感量分别为0.000 1g和0.01g）、分光光度计、恒温水浴锅、低速离心机、移液管、容量瓶（10、100、250、500mL）、10mL离心管、10mL具塞刻度试管。

3 10%福林酚（Folin-Ciocalteu）试剂：将25mL福林酚试剂转移到250mL容量瓶中，用水定容并摇匀，避光储存，现配现用。

4 Na2CO3溶液：按质量浓度7.5%配置，即称取37.50g Na2CO3，加适量水溶解，转移到500mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。

该试剂在室温下可保存30天。

5 没食子酸标准储备溶液：按1mg/mL（1 000 μg/mL）的浓度现配，即称取0.110g没食子酸（GA，相对分子质量188.14）于100mL容量瓶中溶解，并定容至刻度，摇匀，避光保存。

一、实验目的茶多酚是茶叶中的一种重要活性成分，具有抗氧化、抗菌、抗癌、降血脂、降血压等多种保健功效。

本实验旨在通过离子沉淀法提取茶叶中的茶多酚，并对其含量进行测定，以了解茶多酚在茶叶中的分布情况。

二、实验原理茶多酚是一类具有多种酚羟基的化合物，包括儿茶素、儿茶酸和可溶性花青素等。

在离子沉淀法中，通过调节溶液的pH值和加入适量的沉淀剂，使茶多酚形成沉淀，从而实现茶多酚的提取。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）茶叶：绿茶、红茶、乌龙茶等；（2）试剂：氯化钠、亚硫酸氢钠、硫酸铝、碳酸氢钠、盐酸等；（3）溶剂：蒸馏水、甲醇等。

2. 实验仪器：（1）分析天平；（2）恒温加热器；（3）离心机；（4）pH计；（5）分光光度计；（6）玻璃仪器：烧杯、锥形瓶、漏斗、滤纸等。

四、实验步骤1. 茶叶处理：称取一定量的茶叶，加入适量的蒸馏水，进行煮沸，然后过滤，得到茶叶提取液。

2. 浸提：将茶叶提取液置于恒温加热器中，在一定温度下加热，使其充分浸提茶多酚。

3. 盐析：向浸提液中加入一定量的氯化钠，静置一段时间，使茶多酚发生盐析。

4. 沉淀：向盐析后的溶液中加入适量的亚硫酸氢钠和硫酸铝，加热至一定温度，调节pH值至5-6，使茶多酚沉淀。

5. 过滤：将沉淀过滤，得到茶多酚沉淀物。

6. 酸溶：将茶多酚沉淀物放入锥形瓶中，加入适量的盐酸溶液，使其溶解。

7. 测定：采用分光光度计测定茶多酚溶液的吸光度，根据标准曲线计算茶多酚含量。

五、实验结果与分析1. 茶叶种类对茶多酚含量的影响实验结果表明，不同种类的茶叶中茶多酚含量存在差异。

绿茶中的茶多酚含量最高，其次是红茶，乌龙茶中的茶多酚含量最低。

2. 离子沉淀法提取茶多酚的效果通过实验发现，离子沉淀法可以有效提取茶叶中的茶多酚，且沉淀率较高。

3. 茶多酚含量测定结果根据实验数据，计算出不同茶叶中茶多酚的含量，并绘制出标准曲线，以供后续分析。

六、结论本实验采用离子沉淀法提取茶叶中的茶多酚，并对其含量进行了测定。

编号:FZD0121 绿茶提取物中茶多酚(Total Polyphenol)含量测定方法一、试剂
酒石酸铁溶液：称取硫酸亚铁0.100g，酒石酸钾钠0.500g，加水溶解定容至100mL。

低温保存，有效期为10天。

PH7.5索氏缓冲液：分别称取磷酸氢二钠2.030g和磷酸二氢钾
0.136g加水溶解定容至100mL。

二、样品测定
称取样品0.1000g于100mL容量瓶中，用20-30mL80-90℃的蒸馏水溶解，冷却后用蒸馏水定容，摇匀，即为供试液。

吸取供试液1.00mL，置于25mL容量瓶中，加酒石酸铁溶液5.00mL，充分混匀，再用PH7.5索氏缓冲液定容，以试剂空白液为参比，于540nm测吸光度。

A×2.9 V1
茶多酚含量(%) = ××100
1000 V2×M×m
式中
V1：供试液总量mL；V2：吸取供试液用量mL；
M ：样品称样量g ；m：样品干物率%；
A ：吸光度
2.9：用10mm比色杯，当吸光度等于1.00时，每1mL试
液中含茶多酚相当于2.9mg。

茶多酚的含量测定实验组员：赵龙飞赵奇慧刘芳陈小丽一、实验原理茶多酚能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。

对热、酸较稳定，在碱性条件下易氧化变质。

酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物，络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比，络合物在540nm处有最佳吸收。

因此可以用比色方法测定。

二、仪器与试剂仪器：分光光度计、天平、1ml移液枪、100ml容量瓶*6、100ml量筒、100ml烧杯*3 10ml EP管试剂：(1)FeSO4•7H2O 1.000g，含4个结晶水的酒石酸钾钠5.000g(2) Na2HPO4•12H2O 6.02g ，NaH2PO4•2H2O 0.50g(3)儿茶素标准品 10mg三、操作步骤（1）酒石酸钾铁溶液：称取FeSO4•7H2O 0.100g，含4个结晶水的酒石酸钾钠0.500g，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至100mL。

（2）pH7.5的磷酸缓冲液：6.020g Na2HPO4•12H2O ，0.500g NaH2PO4•2H2O，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至100mL。

(3) 儿茶素标准液：称取10mg儿茶素，用蒸馏水定容至10ml，浓度为1000μg/ml。

分别稀释到200、400、600、800μg/ml，得5个浓度标准品溶液。

(4) 标准曲线：分别吸取1ml标准液，磷酸缓冲液3ml，酒石酸钾铁1ml混匀，3000转离心10min。

吸取上清液3ml加入玻璃比色皿，用分光光度计测定540nm处的OD值三次求平均值，并绘制浓度-OD标准曲线。

以蒸馏水代替标准品溶液加入同样的试剂作空白对照。

(5) 取提取物10mg，用蒸馏水定容至10ml。

取1ml，按上述同样方法测定540nm处的OD值3次求平均值。

以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作空白对照。

四、计算茶多酚含量 W=C/1000×100%C ：所测吸光度带入标准曲线得到样品中茶多酚浓度μg/ml1000：样品浓度μg/m l五、实验结果样品吸光度浓度含量（%）1 2 3 平均有机溶剂萃取法0.45 0.449 0.45 0.449666667 402.6303833 40.26%金属离子沉淀法0.449 0.449 0.449 0.449 402.07015 40.21%打孔树脂30%醇洗脱0.525 0.526 0.525 0.525333333 466.2168667 46.62%打孔树脂50%醇洗脱0.349 0.349 0.348 0.348666667 317.7550333 31.78%打孔树脂80%醇洗脱0.111 0.111 0.111 0.111 118.03185 11.80%六、实验分析由实验结果看出，30%的乙醇提取大孔树脂法提取的茶多酚的含量是最高的，而其余的溶剂提取法、金属离子沉淀法，都相对较低。

附 录 A（规范性附录）A1茶多酚的含量测定1.1 原理 茶多酚与酒石酸铁可生成紫褐色络合物，其颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。

儿茶素系茶多酚的主体成分，如儿茶素、没食子儿茶素、没食子酸酯、儿茶素没食子酸酯等，以没食子酸乙酯制作标准曲线，由标准曲线查得的量乘以茶多酚换算系数，计算出样品中茶多酚含量。

1.2 仪器和试剂1.2.1 仪器 721分光光度计。

1.2.2 试剂1.2.2.1酒石酸铁溶液称取硫酸亚铁1.0g ，酒石酸钾钠5.0g ，加水溶解并定容至1L 。

1.2.2.2 pH7.5磷酸盐缓冲溶液a 液1/15mol/L 磷酸氢二钠溶液：称取磷酸氢二钠23.877g ，加水溶解并稀释至1L 。

b 液1/15mol/L 磷酸二氢钾溶液：称取110℃烘干2h 的磷酸二氢钾9.078g ，加水溶解并稀释至1L 。

取a 液85ml 、b 液15ml 混匀即得。

1.2.2.3没食子酸乙酯标准溶液取没食子酸乙酯在100℃干燥1h ，用水定容配制成100mL 中含没食子酸乙酯50mg 浓度的标准溶液。

1.3 操作步骤1.3.1 标准曲线的绘制精密吸取0.5mg/ml 没食子酸乙酯标准溶液0.0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml （相当于含没食子酸乙酯0.00，0.05，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mg ）于10ml 具塞比色管中，加酒石酸铁溶液2ml ，加pH7.5磷酸盐缓冲液至5ml ，各加水至10ml 刻度，以1cm 比色皿，在535nm 处测定吸光度，绘制标准曲线。

1.3.2 样品测定精密称取经均匀的固体样品0.2—2.0g 于50ml 烧杯中，加入约30ml 沸水溶解，冷却至室温，洗涤并移入100ml 容量瓶中，用滤纸过滤，弃去最初滤液约20ml 后收集余下滤液作供试液。

依据样品中茶多酚含量吸取0.2—3.0ml 供试液于10ml 具塞比色管中，自加入酒加酸铁溶液开始按标准曲线的绘制项下同样操作。

茶叶茶多酚含量的测定上图中的横坐标为每25ml 没食子酸标准液中没食子酸的含量，纵坐标为吸光度值。

样品待测液含量对应关系：25ml 待测液中茶多酚含量=10ml 1/10=0.2g 茶叶中茶多酚总含量的1/100。

由对应关系进行公式推导：茶叶样品中茶多酚含量（%）=浸提液中茶多酚的含量/（样品质量*干物质含量）浸提液中茶多酚的含量=1ml 中茶多酚含量*10ml=10ml 稀释液中茶多酚的含量*10*10ml=25ml 待测液中茶多酚的含量*10*10ml茶多酚含量（%）=A*V*d/(L*m*m1*(10^6)),稀释因子d应该为10。

同时由于：A=K*X+b,所以此公式应该调整为：茶多酚含量（%）=[(A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100A----待测液平均吸光度b----标准曲线公式中的常量，本实验为-0.0134V----浸提液体积本实验为10mld----稀释因子，在以没食子酸含量为横坐标的计算方法中，d=10L----标准曲线斜率m----样品质量，本实验为0.2m1----样品干物质含量，本实验为80%详细过程如下：A1=0.885 A2=0.822 A3=0.784平均光度值A=（A1+A2+A3）/3=0.830将A值带入公式:茶多酚含量（%）= [( A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100,可以求得茶叶样品中茶多酚的含量=13.5%二、以没食子酸浓度作标准曲线上图中的横坐标为没食子酸标准溶液的浓度，纵坐标吸光度A此时的计算公式推导过程为：茶叶样品中茶多酚含量（%）=0.2g茶叶中茶多酚含量/（0.2*干物质含量）0.2g茶叶中茶多酚的含量为=浸提液浓度*10浸提液浓度=10ml稀释液浓度*10010ml稀释液浓度=25ml待测液浓度*25ml/10ml25ml待测液浓度可以由标准曲线公式：A=L*X+b测得。

综上，可推的计算公式为：茶多酚含量（%）=[(A-b)*V1*d*V/L*m*10^6*m1]*100 A----待测液平均吸光度b----标准曲线公式中的常量，本实验为-0.0134V1----待测液体积，本实验为25mld----稀释因子，本实验为100V----浸提液体积，本实验为10mlL----以浓度为横坐标获得的标准曲线的斜率m----样品干物质含量，本实验为80%m1----样品质量，单位为g。