教 案
教师姓名 王承莉 授课班级 0911食品 授课地点 系实训室
授课日期 2011年5月29日 第14周 授课时数 2
授课内容 学习情境6 微生物检测
任务二：水中大肠杆菌的测定
教学设计 1、 学生根据任务通知单收集信息
2、 学生领取工作任务并梳理和学习相关知识
（1） 中国安全饮用水国家标准GB5479-2006 ；细菌培养的条件
（2） 大肠杆菌的特性：能发酵乳糖产酸产气
（3） 培养基的配制、灭菌技术；
（4） 细菌培养和分离纯化的操作过程；革兰氏染色鉴定等
3、 根据任务单初步写出检测方案
4、 学生分组讨论、教师指导总结，最终确定检测方法
5、 学生根据检测方案对水样进行检测，填写检验报告
6、 教师对学生任务完成情况进行总结分析
教学目标 知 识
目 标 1、掌握安全饮用水标准、大肠杆菌特性及检测方法及培养细菌的条件
2、学会使用MPN检索表
能 力
目 标 1、掌握培养基配制技术
2、掌握过微生物发酵培养技术
3、掌握分离纯化技术
教学重点、
难点
重点：发酵试验、分离培养
难点：复发酵验证
能力训练
任 务 1、发酵培养
2、分离纯化
课外作业 1.大肠菌群的定义是什么？有何特点？
2.大肠菌群认为是被肠道病原菌污染的指示菌，为什么？
3.乳糖胆盐培养基是哪一类型的培养基？
课后体会
审 阅
评 语
审 阅 人
授课主要内容及板书设计
第一步：根据任务通知单引导学生收集信息，进行课程导入
水质安全事故频发，水质检验势在必行。大肠菌群是评价水质好坏的一个重要的卫生指标，也是反映水体被生活污水污染的一项重要监测项目。
第二步：根据工作任务，收集相关信息，获得相关知识
一、大肠杆菌的特性
大肠菌群是一群以大肠埃希氏菌为主的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，在37℃生长时，能在48h发酵乳糖并产酸才产气。
二、食品中大肠菌群的含义和相关标准
大肠菌群及检验
一、大肠菌群介绍
大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。 二、大肠菌群检验方法：
由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。
目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。
（一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。
乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
大肠杆菌查验大概步骤(精) 1 / 1
大肠杆菌的查验方法 (大概步骤
1、稀释样品匀液依据对样品污染状况的预计 ,用稀释剂将样品匀液制成一系列
十倍递加的样品稀释液。
2、对每个样品 ,选择适合的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三
管月桂基硫酸盐胰蛋白 (月示 (LST 肉汤 ,每管接种 1mL。将接种管置于 36±1℃培育
48±2h。
3、将全部 48±2h 内产气的 LST 肉汤管培育物移种于 EC 肉汤管中 ,在 30min 内放入带盖 44.5 ±0.5℃水浴箱内 ,培育 48±2h。
4、取其产气管的培育物划线接种于伊红美蓝 (EMB 平板 ,36 ±1℃培育 24±2h。
5、若有黑色中心有光彩或无光彩的典型菌落用接种针从每个平板上起码挑取
2 个典型菌落移种到营养琼脂斜面上 ,36 ±1℃培育 18~
24h。
6、将斜面培育物移种到色氨酸肉汤 (24h ±2、MR-VP 培育基 (48 ±2h、 Koser 氏
枸椽酸盐肉汤 (96h、LST 肉汤 (48 ±2h、革兰氏染色 .察看判断是不是大肠杆菌。
大肠菌群及检验
一、大肠菌群介绍
大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。 二、大肠菌群检验方法：
由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。
目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。
（一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。
乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
