第14、21章 基因工程与分子生物学常用技术及其应用习题

高中生物必修课---基因工程及其应用知识讲解及巩固练习题(含答案解析)【学习目标】1、简述基因工程的原理。

2、举例说明基因工程在农业、医药等领域的应用。

3、关注转基因生物和转基因食品的安全性。

【要点梳理】要点一、基因工程的原理1、对概念的理解2、基因工程的工具（1）基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶①概念：限制酶是生物体内的一种酶，能将外来的DNA分子切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。

②特点：特异性。

即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。

要点诠释：①限制酶切割的是脱氧核苷酸之间（磷酸和脱氧核糖之间）的化学键——磷酸二酯键，不是切割碱基之间的氢键。

②限制酶切割目的基因不一定都产生黏性末端，也可能产生整齐的末端。

（2）基因的“针线”——DNA连接酶把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，这样一个重组DNA分子就形成了。

如下图：要点诠释：DNA连接酶连接的也是磷酸和脱氧核糖之间的化学键——磷酸二酯键，而不是碱基之间的氢键。

（3）基因的“运载工具”——运载体①常用的运载体:细菌细胞质的质粒、噬菌体或某些动植物病毒。

其中，质粒是基因工程最常用的运载体。

②条件：a．能在受体细胞内稳定保存并大量复制；b．有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；c．有标记基因，便于进行筛选。

3、基因工程的原理：基因重组4、基因重组与基因工程比较要点二、基因工程的基本操作步骤第一步：获取目的基因第二步：目的基因与运载体结合第三步：将目的基因导入受体细胞第四步：目的基因的检测和表达要点三、基因工程的应用【高清课堂：基因工程及其应用高清未发布基因工程的应用】1、基因工程与遗传育种（1）获得高产、抗逆性强的优质转基因植物①抗虫转基因植物②抗病（病毒、细菌、真菌）转基因植物③抗逆转基因植物④利用转基因改良植物的品质（2）具有优良性状或特殊用途的转基因动物2、基因工程与疾病治疗（1）生产基因工程药品：利用基因工程菌等生产的药物有：胰岛素、干扰素、人生长激素、乙肝疫苗等60余种。

分子生物学习题库与参考答案一、单选题（共49题，每题1分，共49分）1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案：D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案：D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案：A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案：B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案：A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案：B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案：C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案：B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案：B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案：C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案：D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案：C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案：C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案：C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案：B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案：B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案：D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案：A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案：C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案：D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案：D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案：C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案：C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案：C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案：A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案：B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案：C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案：D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案：A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案：B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案：A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案：D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案：C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案：D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B二、多选题（共35题，每题1分，共35分）1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案：BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案：G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案：BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案：EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案：AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案：G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案：B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案：G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案：CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案：B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案：D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案：AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案：BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案：F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案：G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案：B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案：D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案：ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案：ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案：AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案：F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG三、判断题（共38题，每题1分，共38分）1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。

重点小专题14
基因工程
考点一 基因工程 考点二 蛋白质工程 备用习题
网 络 构 建
1.判断有关基因工程和蛋白质工程说法的正误
高 (1)DNA连接酶作用的底物可以是DNA片段,也可以是单个核苷酸。 (×)
频 (2)用限制酶处理目的基因和Ti质粒,涉及氢键和磷酸二酯键的断裂。 ( √ )
易 错
(3)外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制。( ×)
料仅指四种脱氧核苷酸。
(4)利用PCR扩增目的基因时,不需要知道目的基因的全部碱基序列。 (√ )
(5)PCR过程中,模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用。 (×)
高 频
(6)PCR扩增区域由2个引物来决定。
(×)
易 (7)耐高温的DNA聚合酶只能从引物的5'端开始连接脱氧核苷酸。 (× )
错 ●
是3'→5',非模板链(也就是a链)是5'→3';DNA复制中子链延伸方向为5'→3',故引物方向为
5'→3',所以F1配对的单链是3'→5'的b链,故其序列应该与a链相应部分的序列相同。
考点一
(3)重组质粒在受体细胞内正确表达后,用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是
否表达以及表达水平,结果如图乙所示。其中,出现条带1证明细胞内表达了J-V5融合蛋白,
错 ●
(3)利用PCR技术扩增抗虫基因时,PCR反应缓冲液中一般要添加Mg2+。(√ )
考 前
[解析] (1)PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行,需提供DNA模板、2种引物、
清 四种脱氧核苷酸及耐高温的DNA聚合酶等。
零 (2)PCR过程中不需要解旋酶,DNA解旋是在高温下实现的,并且PCR需要的原

常用分子生物学技术的原理及其应用作业习题1. PCR技术（聚合酶链式反应）原理：PCR技术是一种在体外合成DNA的技术，通过热循环反应，能够迅速扩增特定DNA片段。

PCR反应主要分为三个步骤：变性、退火和扩增。

•变性（Denaturation）：将目标DNA加热至95°C，使其两条链分离，得到单链DNA模板。

•退火（Annealing）：在低温下，通过引物与目标DNA模板结合，形成DNA双链。

•扩增（Extension）：在适温下，酶引物复合物加入到目标DNA的3’端，使用DNA聚合酶酶合新的DNA链。

应用作业题目：1.解释PCR技术中的变性步骤的目的是什么？2.PCR反应中的引物是什么作用？3.如果需要扩增一个1000bp的目标DNA片段，你会选择哪种PCR引物的长度？4.为什么PCR技术可以实现高灵敏度的DNA检测？5.列举PCR技术的应用领域。

2. Western Blotting技术原理：Western Blotting技术通过检测蛋白质在凝胶中的分布来研究特定蛋白质的表达，该技术主要包括凝胶电泳、转印和探针探测等步骤。

•凝胶电泳：将蛋白质样品进行电泳，按照大小和电荷将蛋白质分离在凝胶平台上。

•转印：将凝胶上的蛋白质迁移到膜上，如聚偏氟乙烯（PVDF）或硝酸纤维素膜。

•探针探测：使用特异性的抗体与目标蛋白质结合，并通过酶标记或荧光标记的二级抗体来检测目标蛋白质。

应用作业题目：1.为什么需要将蛋白质进行凝胶电泳分离？2.列出Western Blotting技术中常用的蛋白检测方法。

3.Western Blotting技术中为什么需要进行蛋白质转印到膜上？4.请解释什么是一级和二级抗体。

5.列举Western Blotting技术的应用场景。

3. DNA测序技术原理：DNA测序技术是以DNA为模板，通过测定不同的碱基序列，确定DNA分子的排列顺序。

目前常用的DNA测序技术主要包括Sanger测序和下一代测序两种方法。

一、名词解释1、分子生物学2、基因工程3、DNA的变性与复性4、细胞学说5、遗传密码的简并性6、DNA半保留复制、半不连续复制7、SD序列8、开放阅读框（ORF）9、多顺反子10、蓝白斑筛选11、中心法则12、限制修饰系统13、断裂基因14、单链结合蛋白15、核酶16、密码子家族17、TA克隆18、PCR19、SNP20、操纵子学说21、DNA重组技术22、减色效应-增色效应23、可变剪接24、反转录25、同尾酶26、加帽反应27、蓝白斑筛选28、表观基因组学29、DNA的溶解温度30、DNA的大C值31、重叠基因32、引物酶33、逆转录34、限制性内切酶35、载体的选择标记36、DNA甲基化37、端粒38、端粒酶39、前导链40、启动子41、反式作用因子42、同义密码子43、多克隆位点（MCS）44、基因组计划45、C值悖论46、顺式作用元件47、胸腺嘧啶二聚体48、寄主的限制修饰现象49、拓扑异构酶50、DNA的溶解51、拓扑异构体52、间隔基因53、假基因54、同源异型蛋白55、翻译56、多重PCR57、抗终止作用58、SD序列59、空载tRNA60、cDNA RACE61、分子杂交62、cDNA文库63、载体64、RT-PCR65、反义RNA66、延伸tRNA67、起始tRNA68、探针69、反式剪接70、增强子71、动物基因工程72、基因组73、限制性内切酶74、单顺反子75、密码子76、转录77、RNA干扰78、中心法则79、回环模型80、TATA box81、前导链82、目的基因83、RFLP84、RACE二、判断1、大肠杆菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。

( )2、DNA半保留复制时，后随链的总体延伸方向与先导链的延伸方向相反。

( )3、原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。

（）4、以一条亲代DNA(3’→ 5’)为模板时，子代链合成方向5’→ 3’，以另一条亲代DNA链5’→ 3’为模板时，子代链合成方向3’→ 5’。

基因及基因工程练习题一、选择题1．我国科学家在利用基因工程培育抗虫棉的过程中，经提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞这三个步骤后，在全部受体细胞中，能够摄入抗虫基因的受体细胞占A．全部B．大部分C．一半D．很少2．质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦B．②④⑥C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦3．下列含有内含子的生物是A.大肠杆菌B.青霉C.放线菌D.蓝藻4．基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A.细胞B.细胞器C.分子D.原子5．细胞内合成RNA聚合酶的场所是A.细胞核B.核区C.核糖体D.内质网6．下列属于基因运载体所必须具有的条件是①具有某些标志基因②具有环状的DNA分子③能够在宿主细胞内复制④具有多种限制性内切酶A. ①②B.③④C. ①③D. ②④7．细菌抗药性基因存在于A．核DNA B．质粒C．RNA D．小的直线型DNA 8．（多选）目前常被使用的基因载体有A．质粒 B．噬菌体C．染色体D．动、植物病毒9．某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，在这个细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白，这个事实说明A．蛋白质合成是在核糖体上进行的 B．各种生物共用一套遗传密码C．兔子和大肠杆菌的基因发生了重组 D．兔子的基因发生了突变10．小麦根尖细胞基因分布在A.染色体，核糖体B.染色体，叶绿体C.染色体，线粒体D.染色体，线粒体，叶绿体11．人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。

人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核苷酸序列。

其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、物理图、序列图和转录图。

工作艰巨可见一斑。

科学家应对多少染色体进行分析A.46条B.24条C.23条D.22条12．基因治疗是把健康的外源基因导入A.有基因缺陷的细胞中B.有基因缺陷的染色体中C.有基因缺陷的细胞器中D.有基因缺陷的DNA分子中13．下列不属于获取目的基因的方法是A.“鸟枪法”B.转录法C.反转录法D.根据已知氨基酸序列合成法14．用“鸟枪法”提取目的基因的步骤为①用限制性内切酶将供体细胞DNA切成许多片段②将许多DNA片段分别载入运载体③选取目的基因片段插入运载体④通过运载体转入不同的受体细胞⑤让供体DNA片段在受体细胞内大量繁殖⑥找出带有目的基因的细胞，并分离出目的基因A．①③④⑤⑥B．①②④⑤⑥C．①②③④⑤⑥D．①②③④⑤15．关于真核细胞基因结构的表达中，正确的是A.不同基因中外显子的碱基对在整个基因碱基对中所占比例很大B.外显子所含碱基对一般多于内含子C.内含子是不能转录，不能编码蛋白质的序列D.非编码区对基因的表达起调控作用16．有关基因工程的叙述正确的是A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可以作为运载体D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料17．细胞核基因与细胞质基因相比，相同的是A.载体B.数目C.分离时机D.随机分离18．植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入特定培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是A．彼此性状极为相似B．都是单倍体植株C．植株的变异频率较高D．都是纯合体植株19．控制细菌合成抗生素的基因、控制放线菌主要性状的基因、控制病毒抗原特异性的基因依次在①核区大型环状DNA ②质粒上③细胞染色体上④衣壳内核酸上A．①③④B．①②④C．②①③D．②①④20．基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是A．质粒、线粒体、噬菌体B．染色体、叶绿体、线粒体C．质粒、噬菌体、动植物病毒D．细菌、噬菌体、动植物病毒21．科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并分泌抗体。

精选全文完整版（可编辑修改）分子生物学1.插入或缺失碱基对会引起移码突变,下列哪种化合物最容易造成这种突变()。

A. 吖啶衍生物B. 5-溴尿嘧啶C. 咪唑硫嘌呤D. 乙基乙磺酸正确答案: A2.产生移码突变可能是由于碱基对的():A. 转换B. 颠换C. 水解D. 插入正确答案: D3.碱基切除修复中不需要的酶是()A. DNA聚合酶B. 磷酸二酯酶C. 核酸外切酶D. 连接酶正确答案: B4.关于DNA的修复,下列描述中,哪些是不正确的?()A. UV照射可以引起相邻胸腺嘧啶间的交联B. DNA聚合酶III参与修复核苷酸切除修复系统行程的单链缺口C. DNA的修复的过程中需要DNA连接酶D. 哺乳动物细胞可以用不同的糖基化酶来除去特异性的损伤碱基正确答案: B5.镰刀形红细胞贫血病是异常血红蛋白纯合子基因的临床表现。

β-链变异是由下列哪种突变造成的():A. 染色体臂交换B. 单核苷酸插入C. 染色体不分离D. 碱基替换正确答案: D6.在细胞对DNA损伤做出的响应中,哪一种方式可能导致高的变异率?()A. 光复活修复B. 碱基切除修复C. 重组修复D. 跨越合成正确答案: D7.下列哪种修复方式,不能从根本上消除DNA的结构损伤?()A. 核苷酸切除修复B. 错配修复C. 光复活修复D. 重组修复正确答案: D8.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是():A. 形成共价连接的嘧啶二聚体B. 碱基替换C. 磷酸酯键的断裂D. 碱基丢失正确答案: A9.紫外线照射引起DNA最常见的损伤形式是生成胸腺嘧啶二聚体。

在下列关于DNA分子结构这种变化的叙述中,哪项是正确的?()A. 是相对的两条互补核苷酸链间胸腺嘧啶之间的共价连接B. 可由核苷酸切除修复系统在内的有关酶系统进行修复C. 是由胸腺嘧啶二聚体酶催化生成的D. 不会影响DNA复制正确答案: B10.光复活修复过程中,以下哪种酶与嘧啶二聚体结合?()A. 光解酶B. 核酸外切酶C. 核酸内切酶D. 连接酶正确答案: A11.在大多数DNA修复中,牵涉到四步序列反应,这四步序列反应的次序是()A. 识别、切除、再合成、再连接B. 再连接、再合成、切除、识别C. 切除、再合成、再连接、识别D. 识别、再合成、再连接、切除正确答案: A12.下列碱基的改变不属于颠换的是():A. A →GB. T →GC. A →TD. C →G正确答案: A13.E. coli中的MutH能识别():A. 扭曲的DNA双链B. 半甲基化的GATCC. 插层剂插入位点D. 冈崎片段间的缺口正确答案: B14.哪一类型的突变最不可逆?()A. 核苷酸的缺失或插入B. 水解脱氨基C. 八氧代鸟嘌呤D. 嘧啶二聚体正确答案: A15.下列何者属于DNA自发性损伤():A. DNA复制时的碱基错配B. 胸腺嘧啶二聚体的形成C. 胞嘧啶脱氧D. DNA交联正确答案: A16.错配修复系统中MutS通过检测子代链序列识别子代链上的错配位点。

基因工程及其应用一、单项选择题：1.基因工程技术也称为DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是( )A．目的基因限制酶运载体受体细胞B．重组DNA RNA聚合酶限制酶连接酶C．工具酶目的基因运载体受体细胞D．模板DNA mRNA 质粒受体细胞2.水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是( )A.促使目的基因导入宿主细胞中B.使目的基因容易被检测出来C.促使目的基因在宿主细胞中复制D.使目的基因容易成功表达3．碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中( )①种子的萌发②病毒的增殖过程③细菌的二分裂过程④目的基因与运载体的结合⑤DNA探针的使用⑥分泌蛋白的加工和运输A．①②③④⑤B．①②③④⑤⑥C．②④⑤D．②③⑤⑥4．下列有关基因工程技术的正确叙述是 ( ) A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达5．人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( )A．大肠杆菌B．T4噬菌体C．酵母菌D．质粒DNA6、下列不属于利用基因工程技术制取的药物是A、从大肠杆菌体内制取白细胞介素B、在酵母菌体内获得的干扰素C、在青霉菌体内提取青霉素D、在肠杆菌体内获得胰岛素7、切取某动物合成生长激素的基因，用某种方法将此基因转移到鲇鱼的受精卵中，从而鲇鱼比同类个体大3～4倍，此项研究遵循的原理是A．基因突变，DNA→RNA→蛋白质 B．基因工程，DNA→tRNA→蛋白质C．细胞工程，DNA→RNA→蛋白质 D．基因重组，DNA→RNA→蛋白质8、下列有关基因工程的叙述中，不正确的是A.DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B.基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.基因治疗主要是对有基因缺陷的细胞进行替换D.蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料9、科学家用纳米技术制造出一种“生物导弹”，可以携带DNA分子。

第十四、二十一章基因工程、分子生物学常用技术段里原理及其应用复习测试（一）名词解释1．DNA重组2．基因工程3．限制性核酸内切酶4．基因组DNA文库5．cDNA文库6．聚合酶链反应（PCR）7．载体8．转化9．感染10．核酸分子杂交11．Southern印迹杂交12．Northern印迹杂交13．斑点印迹14．原位杂交15．DNA芯片16．基因诊断17．基因治疗（二）选择题A型题：1．限制性核酸内切酶作用特点不包括：A．在对称序列处切开DNAB．DNA两链的切点常不在同一位点C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端D．DNA两链的切点常在同一位点E．酶辨认的碱基一般为4～6个2．限制性核酸内切酶：A．可将单链DNA任意切断B．可将双链DNA序列特异切开C．可将两个DNA分子连接起来D．不受DNA甲基化影响E．由噬菌体提取而得3．cDNA文库包括该种生物的：A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因组C．结构基因与不表达的调控区D．内含子和调节区E．内含子和外显子4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的：A．从特定组织或细胞中提取mRNAB．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNAE．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是：A．粘性末端B．RNA聚合酶附着点C．回文对称序列D．聚腺苷酸E．甲基化“帽”结构6．pUC系列是指：A．经人工改造的大肠杆菌质粒B．天然的大肠杆菌质粒C．天然的酵母质粒D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体E．经人工改造的酵母质粒7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是：A．质粒B．噬菌体C．逆转录病毒RNAD．结构基因E．乳糖操纵子8．转化常指：A．噬菌体感染B．基因的转位C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变D．产生点突变E．产生移码突变9．基因工程的操作程序可简单地概括为：A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B．分、切、接、转、筛C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株D．将载体和目的基因接合成重组体E．限制性核酸内切酶的应用10．用于基因治疗较为理想的载体是：A．质粒B．噬菌体C．经改造的逆转录病毒D．人类DNAE．酵母质粒11．常用质粒有以下特性：A．是线形双链DNAB．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C．含有抗生素抗性基因D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E．不随细菌繁殖而进行自我复制12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是：A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出B．用其它限制性酶将其切出C．用S1核酸酶将其切出D．用DNA酶将切出E．用多种限制性内切酶将其切出13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是：A．反应体系内存在特异DNA片段B．反应体系内存在特异RNA片段C．反应体系内存在特异DNA引物D．反应体系内存在特异RNA引物E．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：A．大肠杆菌表达体系B．原核表达体系C．酵母表达体系D．昆虫表达体系E．哺乳类细胞表达体系15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生：A．3′-磷酸基末端和5′-羟基末端B．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端C．3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端D．5′-羟基末端和3′-羟基末端E．3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：A．小型环状双链DNA分子B．携带有某些抗生素抗性基因C．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞D．具有自我复制功能E．获得目的基因17．在分子生物学领域分子克隆主要是指：A．DNA的大量复制B．DNA的大量转录C．DNA的大量剪切D．RNA的大量剪切E．RNA的大量反转录18．在分子生物学领域重组DNA技术又称：A．酶工程B．蛋白质工程C．细胞工程D．发酵工程E．分子克隆技术19．在重组DNA技术中不涉及的酶是：A．限制性核酸内切酶B．DNA聚合酶C．DNA连接酶D．反转录酶E．DNA解链酶20．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：A．平端末端B．3′突出末端C．5′突出末端D．粘性末端E．缺口末端21．可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为：A．限制性核酸外切酶B．限制性核酸内切酶C．非限制性核酸外切酶D．非限制性核酸内切酶E．DNA内切酶22．cDNA是指：A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC．在体外经转录合成的与DNA互补的RNAD．在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAE．在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA23．基因组代表一个细胞或生物体的：A．部分遗传信息B．整套遗传信息C．可转录基因D．非转录基因E．可表达基因24．在基因工程中通常所用的质粒存在于：A．细菌染色体B．酵母染色体C．细菌染色体外D．酵母染色体外E．病毒DNA外25．就分子结构而论质粒是：A．环状双链DNA分子B．环状单链DNA分子C．环状双链RNA分子D．线状双链DNA分子E．线状单链DNA分子26．聚合酶链式反应可表示为：A．PECB．PERC．PDRD．BCRE．PCR27．在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是：A．化学合成法B．基因组文库法C．cDNA文库法D．PCRE．差异显示法28．重组DNA的基本构建过程是将：A．任意两段DNA接在一起B．外源DNA接入人体DNAC．外源基因插入宿主基因D．目的基因接入适当载体E．目的基因接入哺乳类DNA29．EcoRⅠ切割DNA双链产生：A．平端B．5′突出粘端C．3′突出粘端D．钝性末端E．配伍末端30．催化PCR的酶是：A．DNA连接酶B．反转录酶C．末端转移酶D．碱性磷酸酶E．TaqDNA聚合酶31．将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属：A．同聚物加尾连接B．人工接头连接C．平端连接D．粘性末端连接E．非粘性末端连接32．重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶33．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称：A．转化B．转染C．感染D．转导E．转位34．最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：A．营养互补筛选B．抗药性筛选C．免疫化学筛选D．PCR筛选E．分子杂交筛选35．α互补筛选法属于：A．抗药性标志筛选B．酶联免疫筛选C．标志补救筛选D．原位杂交筛选E．免疫化学筛选36．下列常用于原核表达体系的是：A．酵母细胞B．昆虫细胞C．哺乳类细胞D．真菌E．大肠杆菌37．在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用：A．反转录酶B．多聚核苷酸激酶C．引物酶D．RNA聚合酶E．末端转移酶38．在分子生物学领域分子克隆专指：A．细胞克隆B．RNA克隆C．DNA克隆D．抗体克隆E．mRNA克隆39．用于重组DNA 的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的：A．正超螺旋结构B．负超螺旋结构C．α螺旋结构D．回文结构E．锌指结构40．在基因工程中通常所用的质粒是：A．细菌染色体DNAB．细菌染色体以外的DNAC．病毒染色体DNAD．病毒染色体以外DNAE．噬菌体DNA41．构建基因组DNA文库时，首先需要分离细胞的：A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA42．DNA连接酶是从T4 噬菌体感染大肠杆菌中分离的，这种连接酶：A．只能催化平末端连接，而不能催化粘性末端连接B．即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接C．双链DNA中不需一条完整的单链D．单链中的切口位点可缺少几个核苷酸E．切口存在相邻的5′-磷酸和3′-羟基末端，使其以磷酸二酯键连接43．末端转移酶是合成酶类：A．作用时不需模板B．是从小牛胸腺中分离C．能催化单链核苷酸转移到5′-磷酸上D．需要带有5′-端磷酸的末端的ssDNAE．需要有延伸5′-端磷酸的末端dsDNA44．在基因工程中可用碱性磷酸酶：A．防止DNA的自身环化B．同多核苷酸激酶一起进行DNA3′-羟基末端标记C．制备突出的3′-末端D．特异切除DNA或RNA的3′-末端羟基E．水解特异的核苷酸片段45．以下哪种酶作用时需要引物：A．限制性核酸内切酶B．末端转移酶C．反转录酶D．DNA连接酶E．碱性磷酸酶46．S1核酸酶的功能是：A．切割双链的DNAB．切割单链的RNAC．切割发夹环D．切割单链DNAE．以上有两项是正确的47．在cDNA技术中所形成的发夹环可用：A．限制性核酸内切酶切除B．用3′外切酶切除C．用S1核酸酶切除D．用5′外切酶切除E．碱性磷酸酶切除48．下面有关限制性内切酶的叙述正确的是：A．限制酶是外切酶而不是内切酶B．限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割C．同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D．一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA，产生粘性末端E．一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA，产生平末端49．限制性核酸内切酶可以特异识别：A．双链DNA的特定碱基对B．双链DNA的特定碱基序列C．特定的三联码D．双链RNA的特定碱基序列E．双链RNA的特定碱基对50．DNA聚合酶的主要用途：A．利用它的3′→5′聚合活性，合成ds-DNA第二条链B．对DNA的5′-端进行填补或末端标记C．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移，制作DNA标志探针D．DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序E．TaqDNA聚合酶用于PCR51．反转录酶：A．是依赖于DNA的RNA聚合酶B．用于真核DNA反转录生成mRNAC．用于RNA探针的制备D．用于RNA序列测定E．是依赖于RNA的DNA聚合酶52．基因工程中作为载体应具备以下特点：A．能在宿主细胞中复制繁殖B．容易进入宿主细胞C．具有多克隆位点D．容易从宿主细胞中分离出来E．以上均是53．下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大：A．质粒B．粘粒C．酵母人工染色体D．λ噬菌体E．cDNA表达载体54．pUC是一种改造型质粒，含有：A．乳糖操纵子调节基因、启动子B．多克隆位点C．lacZ′基因D．氨苄青霉素抗性基因E．以上均有55．质粒具有以下特点：A．是位于细菌染色体外的RNAB．不能自主复制C．为单链环形DNAD．大小在2～300kb之间E．以上都不对56．粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点：A．可借cos位点将多个粘粒串联成大环B．本身约4～6kb之间C．进入受体细胞后可进行复制D．可克隆DNA大片段E．以上都不是57．下面关于多克隆位点的描述不正确的是：A．仅位于质粒载体中B．具有多种限制性内切酶识别的位点C．不同酶的识别序列可以重叠D．一般是人工合成后添加到载体中E．可位于不同载体中58．下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是：A．限制性内切酶图谱法B．PCRC．Northern印迹法D．Southern印迹法E．抗药性标记基因59．利用基因工程可以进行：A．建立染色体基因文库B．分析基因的结构与功能C．疾病的发生、发展及治疗的分子机制D．疾病的诊断和基因治疗E．以上均可以60．Southern印迹的DNA探针杂交：A．只与序列完全相同的RNA片段B．可与任何含有相同序列的DNA片段C．可与任何含有互补序列的DNA片段D．可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段E．只与含有互补序列的RNA片段61．下列哪个不是Southern印迹法的步骤：A．用限制性核酸内切酶消化DNAB．DNA与载体连接C．用凝胶电泳分离DNA片段D．DNA片段转移至硝酸纤维素膜上E．用一个标记的探针与膜杂交62．下列哪个不是Northern印迹法的步骤：A．从细胞和组织中提取RNAB．用凝胶电泳分离RNAC．将RNA转移到支持物上D．与核酸探针进行杂交E．将RNA反转录合成DNA63．原位杂交具有以下特点：A．不需从组织或细胞中提取核酸B．对靶序列有很高的灵敏度C．可完整保护组织与细胞的形态D．准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态E．以上均是64．下列哪项不是探针的特点：A．要加以标记B．应是双链DNAC．只与靶核酸序列杂交D．探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等E．高灵敏度65．探针的种类包括：A．基因组DNA探针B．cDNA探针C．寡核苷酸探针D．RNA探针E．以上均是66．下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤：A．从基因组文库筛选得到特定基因B．克隆、扩增C．纯化D．连入表达载体E．切取插入片段67．RNA探针具有以下特点，但除外：A．采用反转录方法可以得到B．单链、杂交效率高C．杂交体系稳定D．不存在高度重复序列E．特异性高68．下面哪一步不是cDNA探针的步骤：A．从相应组织细胞直接中分离特异的cDNAB．从相应组织细胞中分离特异的mRNAC．反转录合成cDNAD．与载体连接E．切割cDNA，分离纯化69．常用的标记物有，但除外：A．放射性核素B．生物素C．荧光素D．地高辛E．NTP70．用于标记核酸探针的放射性核素主要有，但除外：A．32PB．35SC．3HD．125IE．14C71．放射性核素标记物具有，但除外：A．检测时间短B．灵敏度和特异性高C．可检出样品少于1000个分子的核酸量D．半衰期短，稳定性差E．污染环境72．非放射性核素标记物包括，但除外：A．生物素B．地高辛C．荧光素D．酶E．核酸73．非放射性核素标记物具有，但除外：A．灵敏度高于放射性核素B．稳定C．经济D．实验周期短E．安全、无污染74．PCR反应体系包括，但除外：A．基因组DNA（模板）B．引物C．dNTPD．TaqDNA聚合酶E．T4DNA连接酶75．PCR技术主要应用于：A．目的基因的克隆B．基因表达与调控C．DNA微量分析D．遗传病与传染性疾病的诊断E．以上均可以76．以DNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．反应体系一般选用50-100μlB．引物、TaqDNA聚合酶C．4种dNTP、模板DNAD．缓冲液E．以上均是77．以mRNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．需将mRNA反转录生成cDNAB．反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物C．需要RNA酶抑制剂、反转录酶D．TaqDNA聚合酶E．以上均是78．关于PCR停滞的原因，取决于很多因素，但除外：A．样品模板的拷贝数B．PCR扩增效率C．DNA酶种类及活性D．dNTP的大量消耗E．非特异性的竞争因素79．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的：A．核糖体B．RNAC．抗体D．抗原E．以上都不是80．Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是：A．用RNA探针检测DNA片段B．用RNA探针检测RNA片段C．用DNA探针检测RNA片段D．用RNA探针检测蛋白片段E．用DNA探针检测蛋白片段81．用免疫化学筛选重组体的原理是：A．根据外源基因的表达B．根据载体基因的表达C．根据mRNA与DNA的杂交D．根据DNA与DNA的杂交E．根据RNA与RNA的杂交82．原位杂交包括：A．转膜杂交B．斑点杂交C．菌落杂交或噬菌斑杂交D．直接对染色体或组织的杂交E．以上均有83．外源性DNA进入菌体的方式是：A．转化B．转录C．翻译D．半保留复制E．以上都不是84．要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起，可在：A．两种片段上都接上聚（dT）尾部B．一种片段接聚（dT）尾部，另一种接聚（dA）尾部C．两种片段都接上聚（dA）尾部D．反应液中加以T4DNA连接酶E．有两项是对的85．用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是：A．大肠细菌只能表达克隆的cDNAB．细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列C．缺乏翻译后加工机制D．表达的蛋白质常形成不溶性包涵体E．以上都正确86．常用载体有：A．质粒B．噬菌体C．病毒DNAD．大肠杆菌基因组DNAE．有3项是正确的87．构建cDNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA88．构建DNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA89．设计PCR的引物时，应考虑引物与模板的：A．5ˊ端特定序列互补B．5ˊ端任意序列互补C．3ˊ端特定序列互补D．3ˊ端任意序列互补E．中间序列互补90．用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是：A．抗药性选择B．分子杂交选择C．RNA反转录D．免疫学方法E．体外翻译91．下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节：A．样品的准备与标记B．芯片的制备C．信号的检测D．数据分析处理E．杂交92．基因诊断常用的技术方法有：A．核酸分子杂交B．单链构象多态性分析C．DNA序列测定D．DNA芯片技术E．以上均是B型题：A．基因从原来位置转到基因组的另一位置B．噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖C．外来DNA引起细胞生物学特性的改变D．移码突变E．非移码突变1．感染是指：2．转化是指：3．转位是指：4．结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指：5．结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指：A．抗药性选择B．分子杂交选择C．RNA转录D．免疫学方法E．体外翻译6．用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是：7．用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法：8．利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是：A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶C．反转录酶D．TaqDNA聚合酶E．碱性磷酸酶9．识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是：10．用于聚合酶链式反应的是：11．将目的基因与载体DNA进行连接的酶是：12．特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是：13．mRNA转录合成cDNA的酶是：A．支原体B．衣原体C．噬菌体D．细菌E．酵母14．常用作原核表达体系的是：15．常用作真核表达体系的是：A．基因组文库B．cDNA文库C．mRNA文库D．tRNA文库E．rRNA文库16．分离细胞染色体可制备：17．分离细胞总mRNA可制备：A．抗药性选择B．RNA反转录C．免疫化学方法D．体外翻译E．PCR18．对重组体内基因进行直接选择的方法是：19．通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是：A．RNA聚合酶B．末端转移酶C．碱性磷酸酶D．反转录酶E．核苷酸酶20．切除DNA末端磷酸基需要用：21．在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用：22．合成cDNA需要用：A．同聚物加尾连接B．人工接头C．粘性末端连接D．缺口末端连接E．平端连接23．外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于：24．在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于：25．在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列，人为制造粘性末端再进行连接属于：26．需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于：A．将单链DNA任意切断B．将双链DNA序列特异切开C．将两个DNA分子连接起来D．将缺口末端连接E．切除DNA末端磷酸基团27．限制性内切酶的作用是：28．DNA连接酶作用是：29．碱性磷酸酶作用是：A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因结构C．不表达的调控区D．内含子和调节区E．外显子和调节区30．cDNA文库包括：31．DNA文库包括：32．真核mRNA包括：A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶33．切除特异DNA片段：34．连接两个DNA片段：35．大量扩增DNA片段：A．反转录酶B．多聚核苷酸激酶C．引物酶D．RNA聚合酶E．末端转移酶36．催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上：37．催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上：38．合成cDNA：（三）问答题1．简述基因工程的主要过程。

第十四、二十一章基因工程、分子生物学常用技术段里原理及其应用复习测试（一)名词解释1．DNA重组2．基因工程3．限制性核酸内切酶4．基因组DNA文库5．cDNA文库6．聚合酶链反应（PCR）7．载体8．转化9．感染10．核酸分子杂交11．Southern印迹杂交12．Northern印迹杂交13．斑点印迹14．原位杂交15．DNA芯片16．基因诊断17．基因治疗（二）选择题A型题：1．限制性核酸内切酶作用特点不包括：A．在对称序列处切开DNAB．DNA两链的切点常不在同一位点C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端D．DNA两链的切点常在同一位点E．酶辨认的碱基一般为4～6个2．限制性核酸内切酶：A．可将单链DNA任意切断B．可将双链DNA序列特异切开C．可将两个DNA分子连接起来D．不受DNA甲基化影响E．由噬菌体提取而得3．cDNA文库包括该种生物的：A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因组C．结构基因与不表达的调控区D．内含子和调节区E．内含子和外显子4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的:A．从特定组织或细胞中提取mRNAB．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后,克隆到噬菌体或质粒中C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNAE．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是：A．粘性末端B．RNA聚合酶附着点C．回文对称序列D．聚腺苷酸E．甲基化“帽"结构6．pUC系列是指：A．经人工改造的大肠杆菌质粒B．天然的大肠杆菌质粒C．天然的酵母质粒D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体E．经人工改造的酵母质粒7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是：A．质粒B．噬菌体C．逆转录病毒RNAD．结构基因E．乳糖操纵子8．转化常指:A．噬菌体感染B．基因的转位C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变D．产生点突变E．产生移码突变9．基因工程的操作程序可简单地概括为：A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B．分、切、接、转、筛C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株D．将载体和目的基因接合成重组体E．限制性核酸内切酶的应用10．用于基因治疗较为理想的载体是：A．质粒B．噬菌体C．经改造的逆转录病毒D．人类DNAE．酵母质粒11．常用质粒有以下特性：A．是线形双链DNAB．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C．含有抗生素抗性基因D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E．不随细菌繁殖而进行自我复制12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是：A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出B．用其它限制性酶将其切出C．用S1核酸酶将其切出D．用DNA酶将切出E．用多种限制性内切酶将其切出13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是:A．反应体系内存在特异DNA片段B．反应体系内存在特异RNA片段C．反应体系内存在特异DNA引物D．反应体系内存在特异RNA引物E．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：A．大肠杆菌表达体系B．原核表达体系C．酵母表达体系D．昆虫表达体系E．哺乳类细胞表达体系15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生：A．3′-磷酸基末端和5′-羟基末端B．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端C．3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端D．5′-羟基末端和3′-羟基末端E．3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：A．小型环状双链DNA分子B．携带有某些抗生素抗性基因C．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞D．具有自我复制功能E．获得目的基因17．在分子生物学领域分子克隆主要是指：A．DNA的大量复制B．DNA的大量转录C．DNA的大量剪切D．RNA的大量剪切E．RNA的大量反转录18．在分子生物学领域重组DNA技术又称：A．酶工程B．蛋白质工程C．细胞工程D．发酵工程E．分子克隆技术19．在重组DNA技术中不涉及的酶是：A．限制性核酸内切酶B．DNA聚合酶C．DNA连接酶E．DNA解链酶20．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：A．平端末端B．3′突出末端C．5′突出末端D．粘性末端E．缺口末端21．可识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为： A．限制性核酸外切酶B．限制性核酸内切酶C．非限制性核酸外切酶D．非限制性核酸内切酶E．DNA内切酶22．cDNA是指：A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC．在体外经转录合成的与DNA互补的RNAD．在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAE．在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA23．基因组代表一个细胞或生物体的：A．部分遗传信息B．整套遗传信息C．可转录基因D．非转录基因E．可表达基因24．在基因工程中通常所用的质粒存在于:A．细菌染色体B．酵母染色体C．细菌染色体外D．酵母染色体外E．病毒DNA外25．就分子结构而论质粒是：A．环状双链DNA分子B．环状单链DNA分子C．环状双链RNA分子D．线状双链DNA分子E．线状单链DNA分子26．聚合酶链式反应可表示为：A．PECB．PERC．PDRD．BCRE．PCR27．在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是：B．基因组文库法C．cDNA文库法D．PCRE．差异显示法28．重组DNA的基本构建过程是将:A．任意两段DNA接在一起B．外源DNA接入人体DNAC．外源基因插入宿主基因D．目的基因接入适当载体E．目的基因接入哺乳类DNA29．EcoRⅠ切割DNA双链产生:A．平端B．5′突出粘端C．3′突出粘端D．钝性末端E．配伍末端30．催化PCR的酶是:A．DNA连接酶B．反转录酶C．末端转移酶D．碱性磷酸酶E．TaqDNA聚合酶31．将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属： A．同聚物加尾连接B．人工接头连接C．平端连接D．粘性末端连接E．非粘性末端连接32．重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是:A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶33．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称：A．转化B．转染C．感染D．转导E．转位34．最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：A．营养互补筛选B．抗药性筛选C．免疫化学筛选D．PCR筛选E．分子杂交筛选35．α互补筛选法属于：A．抗药性标志筛选B．酶联免疫筛选C．标志补救筛选D．原位杂交筛选E．免疫化学筛选36．下列常用于原核表达体系的是：A．酵母细胞B．昆虫细胞C．哺乳类细胞D．真菌E．大肠杆菌37．在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用:A．反转录酶B．多聚核苷酸激酶C．引物酶D．RNA聚合酶E．末端转移酶38．在分子生物学领域分子克隆专指:A．细胞克隆B．RNA克隆C．DNA克隆D．抗体克隆E．mRNA克隆39．用于重组DNA 的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的：A．正超螺旋结构B．负超螺旋结构C．α螺旋结构D．回文结构E．锌指结构40．在基因工程中通常所用的质粒是：A．细菌染色体DNAB．细菌染色体以外的DNAC．病毒染色体DNAD．病毒染色体以外DNAE．噬菌体DNA41．构建基因组DNA文库时，首先需要分离细胞的：A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA42．DNA连接酶是从T4 噬菌体感染大肠杆菌中分离的，这种连接酶：A．只能催化平末端连接，而不能催化粘性末端连接B．即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接C．双链DNA中不需一条完整的单链D．单链中的切口位点可缺少几个核苷酸E．切口存在相邻的5′-磷酸和3′—羟基末端，使其以磷酸二酯键连接43．末端转移酶是合成酶类：A．作用时不需模板B．是从小牛胸腺中分离C．能催化单链核苷酸转移到5′—磷酸上D．需要带有5′-端磷酸的末端的ssDNAE．需要有延伸5′—端磷酸的末端dsDNA44．在基因工程中可用碱性磷酸酶：A．防止DNA的自身环化B．同多核苷酸激酶一起进行DNA3′—羟基末端标记C．制备突出的3′—末端D．特异切除DNA或RNA的3′-末端羟基E．水解特异的核苷酸片段45．以下哪种酶作用时需要引物：A．限制性核酸内切酶B．末端转移酶C．反转录酶D．DNA连接酶E．碱性磷酸酶46．S1核酸酶的功能是:A．切割双链的DNAB．切割单链的RNAC．切割发夹环D．切割单链DNAE．以上有两项是正确的47．在cDNA技术中所形成的发夹环可用：A．限制性核酸内切酶切除B．用3′外切酶切除C．用S1核酸酶切除D．用5′外切酶切除E．碱性磷酸酶切除48．下面有关限制性内切酶的叙述正确的是：A．限制酶是外切酶而不是内切酶B．限制酶在特异序列（识别位点)对DNA进行切割C．同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D．一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA，产生粘性末端E．一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA，产生平末端49．限制性核酸内切酶可以特异识别：A．双链DNA的特定碱基对B．双链DNA的特定碱基序列C．特定的三联码D．双链RNA的特定碱基序列E．双链RNA的特定碱基对50．DNA聚合酶的主要用途：A．利用它的3′→5′聚合活性,合成ds-DNA第二条链B．对DNA的5′-端进行填补或末端标记C．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移,制作DNA标志探针 D．DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序E．TaqDNA聚合酶用于PCR51．反转录酶：A．是依赖于DNA的RNA聚合酶B．用于真核DNA反转录生成mRNAC．用于RNA探针的制备D．用于RNA序列测定E．是依赖于RNA的DNA聚合酶52．基因工程中作为载体应具备以下特点：A．能在宿主细胞中复制繁殖B．容易进入宿主细胞C．具有多克隆位点D．容易从宿主细胞中分离出来E．以上均是53．下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大:A．质粒B．粘粒C．酵母人工染色体D．λ噬菌体E．cDNA表达载体54．pUC是一种改造型质粒，含有：A．乳糖操纵子调节基因、启动子B．多克隆位点C．lacZ′基因D．氨苄青霉素抗性基因E．以上均有55．质粒具有以下特点：A．是位于细菌染色体外的RNAB．不能自主复制C．为单链环形DNAD．大小在2~300kb之间E．以上都不对56．粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点:A．可借cos位点将多个粘粒串联成大环B．本身约4～6kb之间C．进入受体细胞后可进行复制D．可克隆DNA大片段E．以上都不是57．下面关于多克隆位点的描述不正确的是:A．仅位于质粒载体中B．具有多种限制性内切酶识别的位点C．不同酶的识别序列可以重叠D．一般是人工合成后添加到载体中E．可位于不同载体中58．下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是: A．限制性内切酶图谱法B．PCRC．Northern印迹法D．Southern印迹法E．抗药性标记基因59．利用基因工程可以进行:A．建立染色体基因文库B．分析基因的结构与功能C．疾病的发生、发展及治疗的分子机制D．疾病的诊断和基因治疗E．以上均可以60．Southern印迹的DNA探针杂交：A．只与序列完全相同的RNA片段B．可与任何含有相同序列的DNA片段C．可与任何含有互补序列的DNA片段D．可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段E．只与含有互补序列的RNA片段61．下列哪个不是Southern印迹法的步骤：A．用限制性核酸内切酶消化DNAB．DNA与载体连接C．用凝胶电泳分离DNA片段D．DNA片段转移至硝酸纤维素膜上E．用一个标记的探针与膜杂交62．下列哪个不是Northern印迹法的步骤:A．从细胞和组织中提取RNAB．用凝胶电泳分离RNAC．将RNA转移到支持物上D．与核酸探针进行杂交E．将RNA反转录合成DNA63．原位杂交具有以下特点：A．不需从组织或细胞中提取核酸B．对靶序列有很高的灵敏度C．可完整保护组织与细胞的形态D．准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态E．以上均是64．下列哪项不是探针的特点：A．要加以标记B．应是双链DNAC．只与靶核酸序列杂交D．探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等E．高灵敏度65．探针的种类包括:A．基因组DNA探针B．cDNA探针C．寡核苷酸探针D．RNA探针E．以上均是66．下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤：A．从基因组文库筛选得到特定基因B．克隆、扩增C．纯化D．连入表达载体E．切取插入片段67．RNA探针具有以下特点，但除外:A．采用反转录方法可以得到B．单链、杂交效率高C．杂交体系稳定D．不存在高度重复序列E．特异性高68．下面哪一步不是cDNA探针的步骤：A．从相应组织细胞直接中分离特异的cDNAB．从相应组织细胞中分离特异的mRNAC．反转录合成cDNAD．与载体连接E．切割cDNA，分离纯化69．常用的标记物有，但除外：A．放射性核素B．生物素C．荧光素D．地高辛E．NTP70．用于标记核酸探针的放射性核素主要有，但除外： A．32PB．35SC．3HD．125IE．14C71．放射性核素标记物具有，但除外：A．检测时间短B．灵敏度和特异性高C．可检出样品少于1000个分子的核酸量D．半衰期短，稳定性差E．污染环境72．非放射性核素标记物包括，但除外：B．地高辛C．荧光素D．酶E．核酸73．非放射性核素标记物具有,但除外:A．灵敏度高于放射性核素B．稳定C．经济D．实验周期短E．安全、无污染74．PCR反应体系包括，但除外：A．基因组DNA（模板)B．引物C．dNTPD．TaqDNA聚合酶E．T4DNA连接酶75．PCR技术主要应用于：A．目的基因的克隆B．基因表达与调控C．DNA微量分析D．遗传病与传染性疾病的诊断E．以上均可以76．以DNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．反应体系一般选用50—100μlB．引物、TaqDNA聚合酶C．4种dNTP、模板DNAD．缓冲液E．以上均是77．以mRNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．需将mRNA反转录生成cDNAB．反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物C．需要RNA酶抑制剂、反转录酶D．TaqDNA聚合酶E．以上均是78．关于PCR停滞的原因，取决于很多因素,但除外: A．样品模板的拷贝数B．PCR扩增效率C．DNA酶种类及活性D．dNTP的大量消耗E．非特异性的竞争因素79．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的： A．核糖体B．RNAC．抗体E．以上都不是80．Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是： A．用RNA探针检测DNA片段B．用RNA探针检测RNA片段C．用DNA探针检测RNA片段D．用RNA探针检测蛋白片段E．用DNA探针检测蛋白片段81．用免疫化学筛选重组体的原理是：A．根据外源基因的表达B．根据载体基因的表达C．根据mRNA与DNA的杂交D．根据DNA与DNA的杂交E．根据RNA与RNA的杂交82．原位杂交包括：A．转膜杂交B．斑点杂交C．菌落杂交或噬菌斑杂交D．直接对染色体或组织的杂交E．以上均有83．外源性DNA进入菌体的方式是：A．转化B．转录C．翻译D．半保留复制E．以上都不是84．要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起，可在：A．两种片段上都接上聚（dT)尾部B．一种片段接聚（dT)尾部，另一种接聚(dA）尾部C．两种片段都接上聚（dA）尾部D．反应液中加以T4DNA连接酶E．有两项是对的85．用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是：A．大肠细菌只能表达克隆的cDNAB．细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列C．缺乏翻译后加工机制D．表达的蛋白质常形成不溶性包涵体E．以上都正确86．常用载体有：A．质粒B．噬菌体C．病毒DNAD．大肠杆菌基因组DNAE．有3项是正确的87．构建cDNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA88．构建DNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA89．设计PCR的引物时，应考虑引物与模板的:A．5ˊ端特定序列互补B．5ˊ端任意序列互补C．3ˊ端特定序列互补D．3ˊ端任意序列互补E．中间序列互补90．用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是: A．抗药性选择B．分子杂交选择C．RNA反转录D．免疫学方法E．体外翻译91．下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节：A．样品的准备与标记B．芯片的制备C．信号的检测D．数据分析处理E．杂交92．基因诊断常用的技术方法有：A．核酸分子杂交B．单链构象多态性分析C．DNA序列测定D．DNA芯片技术E．以上均是B型题：A．基因从原来位置转到基因组的另一位置B．噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖C．外来DNA引起细胞生物学特性的改变D．移码突变E．非移码突变1．感染是指：2．转化是指：3．转位是指：4．结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指：5．结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指：A．抗药性选择B．分子杂交选择C．RNA转录D．免疫学方法E．体外翻译6．用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是:7．用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法：8．利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是：A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶C．反转录酶D．TaqDNA聚合酶E．碱性磷酸酶9．识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是：10．用于聚合酶链式反应的是：11．将目的基因与载体DNA进行连接的酶是：12．特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是：13．mRNA转录合成cDNA的酶是：A．支原体B．衣原体C．噬菌体D．细菌E．酵母14．常用作原核表达体系的是：15．常用作真核表达体系的是：A．基因组文库B．cDNA文库C．mRNA文库D．tRNA文库E．rRNA文库16．分离细胞染色体可制备：17．分离细胞总mRNA可制备：A．抗药性选择B．RNA反转录C．免疫化学方法D．体外翻译E．PCR18．对重组体内基因进行直接选择的方法是：19．通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是：A．RNA聚合酶B．末端转移酶C．碱性磷酸酶D．反转录酶E．核苷酸酶20．切除DNA末端磷酸基需要用：21．在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用：22．合成cDNA需要用：A．同聚物加尾连接B．人工接头C．粘性末端连接D．缺口末端连接E．平端连接23．外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于：24．在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于：25．在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列,人为制造粘性末端再进行连接属于：26．需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于:A．将单链DNA任意切断B．将双链DNA序列特异切开C．将两个DNA分子连接起来D．将缺口末端连接E．切除DNA末端磷酸基团27．限制性内切酶的作用是：28．DNA连接酶作用是：29．碱性磷酸酶作用是：A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因结构C．不表达的调控区D．内含子和调节区E．外显子和调节区30．cDNA文库包括：31．DNA文库包括：32．真核mRNA包括：A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶33．切除特异DNA片段：34．连接两个DNA片段:35．大量扩增DNA片段:A．反转录酶B．多聚核苷酸激酶C．引物酶D．RNA聚合酶E．末端转移酶36．催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上:37．催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上：38．合成cDNA:（三）问答题1．简述基因工程的主要过程.2．什么是载体？可分为几类?它们各有什么特点？3．pUC质粒有何特点？4．采用哪些方法可获取目的基因？5．目的基因与载体的连接有哪几种方法？简述其各特点?6．重组体主要有哪些筛选与鉴定方法？7．分子杂交的基本原理是什么?有哪些基本的方法？8．简述标记核酸的核素和非核素有哪几种？各自有何特点？9．何为PCR？简述其基本原理。

生物的基因工程与克隆技术练习题一、选择题1、下列关于基因工程的叙述，错误的是（）A 基因工程的原理是基因重组B 常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等C 基因工程能够定向地改造生物的遗传性状D 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列2、下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体（）A 细菌质粒B 噬菌体C 动植物病毒D 细菌核区的 DNA3、以下有关基因工程的叙述，正确的是（）A 基因工程是细胞水平上的生物工程B 基因工程的产物对人类都是有益的C 基因工程产生的变异属于人工诱变D 基因工程育种的优点之一是目的性强4、科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴的生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是（）A 定向提取生物体的 DNA 分子B 定向地对 DNA 分子进行人工“剪切”C 在生物体外对 DNA 分子进行改造D 定向地改造生物的遗传性状5、下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A 基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B 细菌质粒是基因工程常用的运载体C 通常用一种限制酶处理含目的基因的 DNA，用另一种限制酶处理运载体 DNAD 为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体6、下列不属于克隆技术的是（）A 一小块胡萝卜经组织培养，发育成完整的胡萝卜植株B 将人的 DNA 片段植入细菌体内后获得大量人的 DNA 片段C 农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯D 小羊多利的诞生7、利用克隆技术培育良种牛时，如果多个供体细胞来自同一头牛，培育出的多个牛犊个体在性状上也不完全相同，分析其原因，下列叙述不正确的是（）A 性状变异可由环境条件引起B 基因可能会发生突变C 受体细胞的细胞质基因不同D 细胞核基因发生了重组8、下列关于克隆技术的叙述中，错误的是（）A 20 世纪末克隆技术已经成熟B 克隆技术具有广阔的应用前景C 克隆技术可能会带给人类许多负面影响D 克隆实际上是一种无性生殖方式9、下列关于克隆羊多利的叙述，错误的是（）A 多利的诞生证明了高度分化的动物细胞具有全能性B 多利的诞生运用了细胞核移植技术C 提供细胞核的母羊对多利的性状起主要作用D 多利的诞生说明动物细胞的细胞核具有全能性10、下列有关克隆人的说法错误的是（）A 克隆人是一种无性生殖方式B 克隆人违反了人类伦理道德C 克隆人会导致人类基因库的单一性D 克隆人有利于保持人类的优良基因二、填空题1、基因工程是在________水平上进行的遗传操作。

基因工程技术的原理与应用例题和知识点总结一、基因工程技术的原理基因工程，也称为重组 DNA 技术，是一种在分子水平上对基因进行操作和改造的技术。

其基本原理是在体外将不同来源的 DNA 分子进行剪切、拼接和重组，然后将重组的 DNA 分子导入到受体细胞中，使其在受体细胞中表达和遗传。

基因工程的操作主要包括以下几个步骤：1、目的基因的获取从生物体的基因组中直接分离：对于一些结构和功能比较清楚的基因，可以通过限制性内切酶将其从基因组 DNA 中切割下来。

人工合成：如果已知基因的核苷酸序列，可以通过化学方法人工合成目的基因。

PCR 扩增：利用聚合酶链式反应（PCR）技术，以少量的 DNA 为模板，快速扩增出大量的目的基因。

2、基因载体的选择和构建基因载体是能够携带目的基因进入受体细胞的工具。

常用的基因载体有质粒、噬菌体和病毒等。

载体需要具备自我复制能力、多个限制性内切酶切点、标记基因等特点。

3、目的基因与载体的连接通过限制性内切酶切割目的基因和载体，产生相同的黏性末端或平末端。

然后利用 DNA 连接酶将目的基因和载体连接起来，形成重组 DNA 分子。

4、将重组 DNA 分子导入受体细胞常用的导入方法有转化（细菌）、转染（动物细胞）和农杆菌介导转化（植物细胞）等。

5、重组体的筛选和鉴定由于导入受体细胞的重组体中可能存在未成功重组的分子，因此需要进行筛选和鉴定。

常用的筛选方法有抗性筛选、标记基因筛选、核酸分子杂交筛选等。

二、基因工程技术的应用例题1、基因工程在农业领域的应用抗虫棉的培育：将苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中，培育出具有抗虫特性的棉花品种。

举例：某地区常年遭受棉铃虫的侵害，导致棉花产量大幅下降。

科研人员通过基因工程技术，将一种能够编码产生杀虫蛋白的基因导入棉花植株中。

经过筛选和培育，获得了抗虫棉新品种。

在种植过程中，这种抗虫棉能够有效地抵御棉铃虫的危害，减少了农药的使用量，提高了棉花的产量和质量。

第1421章基因工程与分子生物学常用技术及其应用习题第十四、二十一章基因工程、分子生物学常用技术段里原理及其应用复习测试（一）名词解释1．DNA重组2．基因工程3．限制性核酸内切酶4．基因组DNA文库5．cDNA文库6．聚合酶链反应（PCR）7．载体8．转化9．感染10．核酸分子杂交11．Southern印迹杂交12．Northern印迹杂交13．斑点印迹14．原位杂交15．DNA芯片16．基因诊断17．基因治疗（二）选择题A 型题：1．限制性核酸内切酶作用特点不包括：A．在对称序列处切开DNAB．DNA两链的切点常不在同一位点C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端D．DNA两链的切点常在同一位点E．酶辨认的碱基一般为4～6个2．限制性核酸内切酶：A．可将单链DNA任意切断B．可将双链DNA 序列特异切开C．可将两个DNA分子连接起来D．不受DNA甲基化影响E．由噬菌体提取而得3．cDNA文库包括该种生物的：A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因组C．结构基因与不表达的调控区D．内含子和调节区E．内含子和外显子4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的：A．从特定组织或细胞中提取mRNAB．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNAE．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是：A．粘性末端B．RNA聚合酶附着点C．回文对称序列D．聚腺苷酸E．甲基化“帽”结构6．pUC系列是指：A．经人工改造的大肠杆菌质粒B．天然的大肠杆菌质粒C．天然的酵母质粒D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体E．经人工改造的酵母质粒7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是：A．质粒B．噬菌体C．逆转录病毒RNAD．结构基因E．乳糖操纵子8．转化常指：A．噬菌体感染B．基因的转位C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变D．产生点突变E．产生移码突变9．基因工程的操作程序可简单地概括为：A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B．分、切、接、转、筛C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株D．将载体和目的基因接合成重组体E．限制性核酸内切酶的应用．用于基因治疗较为理想的载体是：A．质粒210B．噬菌体C．经改造的逆转录病毒D．人类DNAE．酵母质粒11．常用质粒有以下特性：A．是线形双链DNAB．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C．含有抗生素抗性基因D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E．不随细菌繁殖而进行自我复制12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是：A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出B．用其它限制性酶将其切出C．用S1核酸酶将其切出D．用DNA酶将切出E．用多种限制性内切酶将其切出13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是：．反应体系内存在特异DNA片段．反应体系内存在特异RNA片段．反应体系内存在特异DNA引物．反应体系内存在特异RNA引物．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：．大肠杆菌表达体系．原核表达体系．酵母表达体系．昆虫表达体系．哺乳类细胞表达体系15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生：．3′-磷酸基末端和5′-羟基末端．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端．3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端．5′-羟基末端和3′-羟基末端．3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：．小型环状双链DNA分子．携带有某些抗生素抗性基因．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞．具有自我复制功能3ABCDEABCDEABCDEABCDE．获得目的基因17．在分子生物学领域分子克隆主要是指：A．DNA的大量复制B．DNA的大量转录C．DNA的大量剪切D．RNA的大量剪切E．RNA的大量反转录18．在分子生物学领域重组DNA技术又称：A．酶工程B．蛋白质工程C．细胞工程D．发酵工程E．分子克隆技术19．在重组DNA技术中不涉及的酶是：A．限制性核酸内切酶B．DNA 聚合酶C．DNA连接酶D．反转录酶E．DNA解链酶20．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：A．平端末端B．3′突出末端C．5′突出末端D．粘性末端E．缺口末端21．可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为：A．限制性核酸外切酶B．限制性核酸内切酶C．非限制性核酸外切酶D．非限制性核酸内切酶E．DNA内切酶22．cDNA是指：A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC．在体外经转录合成的与DNA互补的RNAD．在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAE．在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA23．基因组代表一个细胞或生物体的：4A．部分遗传信息B．整套遗传信息C．可转录基因D．非转录基因E．可表达基因24．在基因工程中通常所用的质粒存在于：A．细菌染色体B．酵母染色体C．细菌染色体外D．酵母染色体外E．病毒DNA外25．就分子结构而论质粒是：A．环状双链DNA分子B．环状单链DNA分子C．环状双链RNA分子D．线状双链DNA分子E．线状单链DNA分子26．聚合酶链式反应可表示为：A．PECB．PERC．PDRD．BCRE．PCR27．在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是：A．化学合成法B．基因组文库法C．cDNA文库法D．PCRE．差异显示法28．重组DNA的基本构建过程是将：A．任意两段DNA接在一起B．外源DNA接入人体DNAC．外源基因插入宿主基因D．目的基因接入适当载体E．目的基因接入哺乳类DNA29．EcoRⅠ切割DNA双链产生：A．平端B．5′突出粘端C．3′突出粘端5。

《基因工程及其应用》典型例题例题1 在基因工程中不会出现（）A．DNA连接酶将黏性末端的碱基连接起来B．限制性内切酶用于目的基因的获得C．目的基因须有运载体导入受体细胞D．人工合成目的基因不用限制性内切酶【解析】：基因工程中两个DNA分子的黏性末端的碱基间通过碱基互补配对的方式结合起来，但DNA分子的骨架——糖与磷酸的连接还未接上，DNA连接酶的作用就是使这个断裂处连接起来，因此A的说法是错误的，在基因工程中不会出现。

【答案】：A例题2 要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（）①限制酶②连接酶③解旋酶④还原酶A．①②B．③④C．①④D．②③【解析】目的基因与对应的运载体结合起来的过程是：先用限制酶分别处理目的基因和运载体，使之露出相同的黏性末端；将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处，再用DNA连接酶将处理好的目的基因和运载体的黏性末端接好，就完成了基因的重组。

【答案】 A例题3 下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达【解析】此题考查基因的操作工具、目的基因表达等知识。

解答此类题目须明确以下三方面知识：（1）基因操作的工具有限制酶、连接酶；（2）一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，不同的限制酶识别的核苷酸序列不同；（3）运载体是基因的运输工具；（4）目的基因进入受体细胞后，受体细胞表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程；（5）导入受体细胞中的目的基因主要是为了表达，生产目的基因的产物，因此能够快速繁殖是选择受体细胞的重要条件之一。

据以上分析，A、B、D选项的说法均不正确，应选C。

解答此类题目易出现的思维障碍是：①审题不严，把运载体当成基因工程的工具酶；②存在一定的思维定势，脑海中只有细菌的质粒可作运载体，忽略了细菌也是常用的受体细胞之—这一知识。

初一生物基因工程与生物技术练习题及答案20题1. 选择题(1) 基因工程是一门利用现代生物技术来改变生物的遗传性状的学科。

以下哪项不属于基因工程的应用？A. 利用基因工程的方法治疗遗传性疾病B. 利用基因工程的方法研究物种的进化历史C. 利用基因工程的方法改良农作物的品质和产量D. 利用基因工程的方法生产重要的生物药品答案：B(2) 下列哪项不是基因工程实验所必需的基本步骤？A. 选择合适的宿主细胞B. 分离所需的基因C. 将分离的基因导入宿主细胞中D. 检测和分析基因的表达情况答案：D(3) 下列哪项不属于基因工程中常用的转基因工具？A. 质粒B. 叶绿体基因C. 细菌类D. 病毒答案：B(4) 基因工程方法经常用于改善农作物的产量和品质。

下列哪项不是基因工程在农业上应用的代表作物？A. 转基因大豆B. 转基因玉米C. 转基因水稻D. 转基因小麦答案：D(5) 下列哪项不属于基因工程在医学上的应用？A. 利用基因工程的技术治疗遗传性疾病B. 利用基因工程的技术研发新型药物C. 利用基因工程的技术改良传统草药D. 利用基因工程的技术诊断疾病答案：C2. 填空题(1) 基因工程中，使用作为载体的双链DNA分子被称为______________。

答案：质粒(2) 基因工程中，将外源基因导入宿主细胞的过程称为______________。

答案：转化(3) __________________是一种将DNA片段扩增的方法，可以用于在基因工程中复制大量基因片段。

答案：聚合酶链反应（PCR）(4) ________________是一种利用基因工程技术获取大量某种特定基因产物的方法。

答案：重组蛋白的表达和纯化(5) 利用基因工程的方法，可以在植物细胞中通过基因______________来改变农作物的基因型和表型特征。

答案：转导3. 简答题(1) 请简要解释基因工程的定义和作用。

答：基因工程是一门利用现代生物技术来改变生物的遗传性状的学科。

21-生物化学习题与解析--常用分子生物学技术的原理及其应用常用分子生物学技术的原理及其应用一、选择题（一） A 型题1 ．分子杂交实验不能用于A ．单链 DNA 与 RNA 分子之间的杂交B ．双链 DNA 与 RNA 分子之间的杂交C ．单链 RNA 分子之间的杂交D ．单链 DNA 分子之间的杂交E ．抗原与抗体分子之间的杂交2 ．关于探针叙述错误的是A ．带有特殊标记B ．具有特定序列C ．必须是双链的核酸片段D ．可以是基因组 DNA 片段E ．可以是抗体3 ．下列哪种物质不能用作探针A ． DNA 片段B ． cDNAC ．蛋白质D ．氨基酸E ． RNA 片段4 ．印迹技术可以分为A ． DNA 印迹B ． RNA 印迹C ．蛋白质印迹D ．斑点印迹E ．以上都对5 ． PCR 实验延伸温度一般是A ．90 ℃B ．72 ℃C ．80 ℃D ．95 ℃E ．60 ℃6 ． Western blot 中的探针是A ． RNAB ．单链 DNAC ． cDNAD ．抗体E ．双链 DNA7 ． Northern blotting 与 Southern blotting 不同的是A ．基本原理不同B ．无需进行限制性内切酶消化C ．探针必须是 RNAD ．探针必须是 DNAE ．靠毛细作用进行转移8 ．可以不经电泳分离而直接点样在 NC 膜上进行杂交分析的是A ．斑点印迹B ．原位杂交C ． RNA 印迹D ． DNA 芯片技术E ． DNA 印迹9 ．下列哪种物质在 PCR 反应中不能作为模板A ． RNAB ．单链 DNAC ． cDNAD ．蛋白质E ．双链 DNA10 ． RT-PCR 中不涉及的是A ．探针B ． cDNAC ．逆转录酶D ． RNAE ． dNTP11 ．关于 PCR 的基本成分叙述错误的是A ．特异性引物B ．耐热性 DNA 聚合酶C ． dNTPD ．含有 Zn 2+ 的缓冲液E ．模板12 ． DNA 链末端合成终止法不需要A ． ddNTPB ． dNTPC ．引物标记D ． DNA 聚合酶E ．模板13 ． cDNA 文库构建不需要A ．提取 mRNAB ．限制性内切酶裂解 mRNAC ．逆转录合成 cDNAD ．将 cDNA 克隆入质粒或噬菌体E ．重组载体转化宿主细胞14 ．标签蛋白沉淀是A ．研究蛋白质相互作用的技术B ．基于亲和色谱原理C ．常用标签是 GSTD ．也可以是 6 组氨酸标签E ．以上都对15 ．研究蛋白质与 DNA 在染色质环境下相互作用的技术是A ．标签蛋白沉淀B ．酵母双杂交C ．凝胶迁移变动实验D ．染色质免疫沉淀法E ．噬菌体显示筛选系统16 ．动物整体克隆技术又称为A ．转基因技术B ．基因灭活技术C ．核转移技术D ．基因剔除技术2 ．核酸分子杂交可以形成的杂化双链有A ． DNA/DNAB ． RNA/RNAC ． DNA/RNAD ．寡核苷酸 /RNAE ．寡核苷酸 /DNA3 ． PCR 技术主要用于A ．目的基因的克隆B ．基因的体外突变C ． DNA 和 RNA 的微量分析D ． DNA 序列测定E ．基因突变分析4 ．分子杂交技术的原理涉及A ．分子杂交特性B ．基因文库C ．印迹技术D ．生物芯片E ．探针技术5 ．关于 DNA 链末端合成终止法正确的是A ．需加入的链终止剂 ddNTPB ． dNTP 需要标记C ．引物也需要标记D ．又称 Sanger 法E ． ddNTP 缺乏 5 ' -OH6 ．基因组 DNA 文库建立需要A ．基因组进行限制性内切酶消化B ． DNA 片段克隆到相应载体中C ．重组体感染宿主菌D ．筛选目的基因可以通过核酸分子杂交的方法进行E ．以λ 噬菌体为载体的人基因组 DNA 文库的克隆数目至少应在 10 6 以上7 ．用于构建基因组 DNA 文库的载体有A ．酵母人工染色体B ．粘粒C ．λ 噬菌体D ．腺病毒E ．脂质体8 ．基因诊断较常规诊断其特点有A ．属于病因诊断B ．特异性强C ．适用范围窄D ．灵敏度高E ．有放大效应9 ．基因失活的常用技术包括A ．基因疫苗B ．核酶C ．小干扰 RNAD ．反义核酸E ．基因置换10 ．克隆羊多莉的产生属于A ．同种异体细胞转移技术B ．同种异体细胞核转移技术C ．试管内受精D ．无性繁殖E ．同种异体细胞转基因技术11 ．疾病动物模型可用于A ．探讨疾病的发生机制B ．克隆致病基因C ．新治疗方法的筛选系统D ．新药物的筛选系统E ．新疾病模型的筛选系统12 ．蛋白质芯片主要应用于A ．蛋白质结构的研究B ．蛋白质表达谱的研究C ．蛋白质功能的研究D ．蛋白质之间的相互作用研究E ．疾病的诊断和新药的筛选13 ．研究蛋白质相互作用的技术包括A ．标签蛋白沉淀B ．酵母双杂交C ．凝胶阻滞实验D ．噬菌体显示筛选系统E ． DNA 印迹14 ．基因治疗的基本程序包括A ．治疗性基因的选择B ．基因载体的选择C ．靶细胞的选择D ．基因转移E ．回输体内15 ．目前可用作基因治疗的基因载体包括A ．腺病毒相关病毒B ．噬菌体C ．腺病毒D ．逆转录病毒E ．粘粒二、是非题1 ． Southern blot 主要用于 RNA 的定性和定量分析。

基因重组与基因工程一、选择题（一） A 型选择题1 ．关于基因重组的描述，下列哪项是错误的A ．外源 DNA 片段不能在原核细胞中表达B ．外源 DNA 片段可以在原核细胞中表达C ．基因重组可引起自然突变D ．整段 DNA 能在不同物种间进行交换E ．整段的 DNA 能在细胞间进行交换2 ．在分子生物学领域，重组 DNA 技术又称A ．蛋白质工程B ．酶工程C ．细胞工程D ．基因工程E ． DNA 工程3 ．在重组 DNA 技术中，不常见到的酶是A ． DNA 连接酶B ． DNA 聚合酶C ．限制性核酸内切酶D ．反转录酶E ．拓扑异构酶4 ．由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为A ．转化B ．转导C ．转染D ．转座E ．结合5 ．可识别特异 DNA 序列，并在识别位点或其周围切割双链 DNA 的一类酶称为A ．限制性核酸外切酶B ．限制性核酸内切酶C ．非限制性核酸外切酶D ．非限制性核酸内切酶E ． DNA 内切酶6 ． cDNA 是指A ．在体外经反转录合成的与 RNA 互补的 DNAB ．在体内经转录合成的与 DNA 互补的 DNAC ．在体内经转录合成的与 DNA 互补的 RNAD ．在体外经反转录合成的与 DNA 互补的 DNAE ．在体外经转录合成的与 RNA 互补的 RNA7 ．基因组 DNA 代表一个细胞或生物体的A ．部分遗传信息B ．整套遗传信息C ．可转录基因的遗传信息D ．非转录基因的遗传信息E ．可表达基因的遗传信息8 ．下列有关质粒的描述正确的是A ．质粒分子本身不含有具备复制功能的遗传结构B ．质粒是存在于酵母染色体外的小型环状双链 DNA 分子C ．质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构，能在宿主细胞独立自主进行复制D ．质粒一般不携带遗传信息，不会赋予宿主细胞一些遗传性状E ．以上说法都不正确9 ．重组 DNA 技术常用的限制性核酸内切酶为A ．Ⅰ 类酶B ．Ⅱ 类酶C ．Ⅲ 类酶D ．Ⅳ 类酶E ．Ⅴ 类酶10 ．在重组 DNA 技术中催化形成重组 DNA 分子的酶是A ． DNA 聚合酶B ． RNA 连接酶C ．核酸内切酶E ．反转录酶 E ． DNA 连接酶11 ．已知人乳腺来源的某长度为 1.5 kb 的基因序列，获取该目的基因的最方便的方法是A ．化学合成法B ．基因组文库法C ． c DNA 文库法D ．聚合酶链反应E ．差异显示法12 ．限制性核酸内切酶Hind Ⅲ 切割5′-A▼A GCTT-3′ 后产生A ．平端B ．5 ′ 突出黏端C ．3′ 突出黏端D ．钝性末端E ．配伍黏末端13 ．构建基因组 DNA 文库时，首先需分离细胞的A ．染色体 DNAB ．线粒体 DNAC ． mRNAd ． tRNA E ． rRNA14 ．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称A ．转化B ．转染C ．感染D ．转导E ．转位15 ．关于E . coli 表达载体的描述错误的是A ．有大肠杆菌适宜的选择标志B ．有两套复制原点及选择标记，分别在大肠杆菌和真核细胞中起作用C ．具有能调控转录、产生大量 mRNA 的强启动子D ．含有适当的翻译控制序列E ．还有合理设计的多克隆位点16 ．α- 互补筛选法属于A ．抗药性标志筛选B ．酶联免疫筛选C ．标志补救筛选D ．原位杂交筛选E ． Southern 杂交筛选17 ．下列常用于原核表达体系的是A ．酵母细胞B ．昆虫细胞C ．哺乳类细胞D ．真菌E ．大肠杆菌18 ．真核表达载体不含有A ．选择标记B ．启动子C ．转录翻译终止信号D ． mRNA 加 poly A 信号E ．3′- 加帽信号19 ．就分于结构而论，质粒一般是A ．环状双链 DNA 分子B ．环状单链 DNA 分子C ．环状单链 RNA 分子D ．线状双链 DNA 分子E ．线状单链 DNA 分子20 ．一般不用作基因工程载体的是A ．质粒 DNAB ．昆虫病毒 DNAC ．基因组 DNAD ．噬菌体 DNAE ．逆转录病毒 DNA21 ．用于重组 DNA 的限制性核酸内切酶识别核苷酸序列的A ．正超螺旋结构B ．负超螺旋结构C ．α 螺旋结构D ．回文结构E ．锌指结构22 ．用来鉴定 DNA 的技术是A ． Northern 印迹杂交B ． Western 印迹杂交C ． Southern 印迹杂交D ．离子交换层析E ． SDS-PAGE23 ．建 cDNA 文库时，首先需分离细胞的A ．染色体 DNAB ．线粒体 DNAC ．总 m RNAD ． t RNAE ． r RNA24 ．如果克隆的基因能够在宿主菌中表达，且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补，那我们可以A ．用营养突变菌株进行筛选B ．用营养完全株进行筛选C ．通过α- 互补进行蓝白筛选D ．免疫组化筛选E ．抗药性标志25 ．限制性核酸内切酶切割 DNA 后产生A ．3′- 磷酸基末端和5′- 羟基末端B ．5′- 磷酸基末端和3′- 羟基末端C ．3′- 磷酸基末端和5′- 磷酸基末端D ．5′- 羟基末端和3′- 羟基末端E ．以上都不是26 ．针对载体携带某种或某些标志基因和目的基因而设计的筛选方法称A ．非直接选择法B ．直接选择法C ．免疫学方法D ．免疫化学方法E ．酶免检测分析27 ．无性繁殖依赖 DNA 载体的最基本性质是A ．自我转录能力B ．自我表达能力C ．自我复制能力D ．青霉素抗性E ．卡那霉素抗性28 ．分子遗传学领域里的分子克隆是指A ．细菌克隆B ． DNA 克隆C ． RNA 克隆D ．动物克隆E ．植物克隆29 ．重组 DNA 的连接方式不包括A ．平头末端连接B ．黏性末端连接C ．同聚物加尾连接D ．人工接头连接E ．黏性末端和平头末端连接30 ．下列哪种方法不能获得目的基因A ．化学合成法B ．基因组 DNA 文库C ． cDNA 文库D ．物理方法E ． PCR 法（二） B 型选择题A ．超螺旋结构B ．启动子序列C ． S-D 序列D ．回文序列E ．α - 螺旋结构1 ．限制性核酸内切酶识别的序列通常是2 ．在转录过程中 RNA 聚合酶识别并结合的特异序列是3 ． 16S 核糖体特异结合的特异序列是4 ．属蛋白质二级结构的是A ．基因载体的切割B ．目的基因与载体的连接C ． DNA 重组子导入受体细胞D ．表达目的基因编码的蛋白质E ．筛选、繁殖含有 DNA 重组分子的受体细胞5 ．可以产生重组 DNA 分子的是6 ．需要使用限制性内切酶的是7 ．需要应用转化或转染等技术手段的是8 ．需要选择原核或真核表达体系的是A ．同源重组B ．特异位点重组C ．转座重组D ．人工重组E ．随机重组9 ．在体外将不同来源的 DNA 连接起来称10 ．在两个同源序列间进行 DNA 片段交换称11 ．由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称A ．接合B ．转化C ．转导D ．转座E ．细胞融合12 ．质粒 DNA 从一个细菌转移到另一个细菌称13 ．由噬菌体感染宿主时伴随的基因转移称14 ．自动获取外源 DNA ，使细胞获得新的遗传表型称A ．碱性磷酸酶B ． DNA 连接酶C ． DNA 聚合酶D ．逆转录酶E ．限制性核酸内切酶15 ．能识别特异序列、切割 DNA 的酶是16 ．催化合成 cDNA 的是17 ．来源不同的 DNA 拼接成重组 DNA 分子需A ．5′ 及3′ 突出末端B ．3′ 突出末端C ．5′ 突出末端D ．5′ 或3′ 突出末端E ．平头末端18 ．某识别 6 核苷酸序列的限制性核酸内切酶切割5′-AGCTA▼AGCTT-3′ 产生19 ．某识别 6 核苷酸序列的限制性核酸内切酶切割5′-CTGCA▼GTCTA-3′ 产生20 ．某识别 6 核苷酸序列的限制性核酸内切酶切割5′-AGGAT▼ATCAC-3′ 产生（三） X 型选择题1 ． DNA 克隆包括下列哪些基本步骤A ．目的基因的获得B ．选择和构建合适的克隆载体C ．筛选转化菌D ．将重组 DNA 导入受体菌E ．外源基因和载体连接2 ．关于质粒 DNA 的叙述正确的是A ．是真核生物基因组 DNA 的组成部分B ．具有独立复制功能，能在宿主细胞独立的进行复制C ．不含有各种抗性筛选标记D ．含有感兴趣的目的 DNAE ．具有编码蛋白质的功能3 ．下述操作可能用于 DNA 克隆过程的是A ． PCR 获得目的 DNAB ．限制性核酸内切酶切割目的 DNA 和载体C ．核酸分子杂交D ．细菌的生长和繁殖E ． RT-PCR 制备 cDNA4 ．下述序列属于完全回文结构的是A ．5′-CCTAGG-3′B ．5′-CCATGG-3′C ．5′-CCTTGG-3′D ． 5′-CGATCG-3′E ．5′-CGTTCG-3′5 ．可用作克隆基因载体的 DNA 有A ．细菌质粒 DNAB ．噬菌体 DNAC ．病毒 DNAD ．大肠杆菌基因组 DNAE ．真核细胞基因组 DNA6 ．在分子克隆中，目的 DNA 可来自A ．原核细胞染色体 DNAB ．基因组 DNA 文库C ．真核细胞 mRNA 反转录获得的 cDNAD ．聚合酶链式反应E ．人工化学合成的 DNA7 ．下列哪些方法可应用于重组体的筛选A ．抗药性标记筛选B ．营养突变菌株筛选C ．α- 互补筛选D ．原位杂交筛选E ．免疫化学方法筛选8 ．根据重组 DNA 时所采用的载体性质不同，将重组 DNA 分子导入受体细胞的方式有A ．接合B ．转化C ．转染D ．转座E ．感染9 ．一个典型的插入序列包括A ．两个分离的反向重复序列B ．一个表达产物能引起转座的转座酶编码基因C ．反向重复序列的侧翼有正向重复序列D ．抗生素抗性等有用基因E ．以上都包括10 ．外源基因与载体的连接方式有A ．黏性末端连接B ．平端连接C ．同聚物加尾连接D ．人工接头连接E ．以上都没有11 ．分子医学包括的领域有A ．疾病基因的发现与克隆B ．基因诊断C ．基因治疗D ．遗传病的预防E ．生物制药12 ．在基因工程的中所需的工具酶有A ．限制性核酸外切酶B ． DNA 连接酶C ．逆转录酶D ．限制性核酸内切酶E ．碱性磷酸酶二、是非题1 ．载体和目的基因只有利用一种限制性核酸内切酶切割，才能进行重组。