ELISA法检测梅毒患者血清中抗心磷脂抗体
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抗磷脂抗体检测方法
抗磷脂抗体检测方法是用于检测人体血清中是否存在抗磷脂抗体(APA),这是一类自身免疫抗体,与磷脂类物质结合而产生。
以下是几种常见的抗磷脂抗体检测方法:
1.免疫酶联免疫吸附试验(ELISA):ELISA是一种常用的检测方法,在抗磷脂抗体检测中也广泛应用。
该方法将标准化的抗磷脂抗原固定在微孔板上,然后通过加入待测血清样本,观察是否有抗磷脂抗体与抗原发生特异性结合。
结果可以通过酶标记的二抗或底物染色来定量或定性分析。
2.凝集试验:抗磷脂抗体可与磷脂类物质结合形成凝集,因此凝集试验也是一种常见的抗磷脂抗体检测方法。
这种方法通常通过向抗原和血清混合后进行观察,观察是否有凝集形成。
3.血浆高灵敏度C反应蛋白(hs-CRP):hs-CRP是一种炎症标志物,但高水平的hs-CRP也可能与抗磷脂抗体的存在相关。
因此,测量血浆中的hs-CRP水平也可以作为抗磷脂抗体的间接指标。
两种梅毒检测方法的比较分析梅毒是由梅毒螺旋体(TP)引起的一种性传播疾病,其主要通过性行为和血液传播,也可通过胎盘母婴垂直传播。
这种病原体进入人体后,经淋巴系统及血液循环播散到全身,几乎可以侵犯全身所有脏器和组织。
梅毒患者是梅毒的惟一传染源,对梅毒进行早诊断、早治疗是控制其蔓延的一个主要环节。
本研究旨在对TP-ELISA和TRUST两种方法进行方法学比较,以期为梅毒的早期诊断、临床治疗、梅毒患者的复发或再感染提供判断依据。
资料与方法研究对象:3246份标本均来自本市2011年1月~2011年12月的性病监测人群。
试剂:ELISA试剂盒,TRUST试剂盒,TPPA试剂盒。
所有试剂均在有效期内。
主要检测仪器:TP-ELISA法使用的洗板机;酶标仪。
方法:采用ELISA及TRUST两种方法同时对性病监测人群标本进行梅毒螺旋体血清学检测,两种方法有一种为阳性的标本采用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法确证。
检测过程严格按照试剂盒说明书进行操作。
结果TP-ELISA法和TRUST法的检测结果:3246份标本经TP-ELISA(198份阳性,阳性率6.1%)和TRUST法(169份阳性,阳性率5.2%)筛查,221份(TP-ELISA 和TRUST法检测有一种为阳性即认定为筛查阳性)筛查结果为阳性,见表1。
两种梅毒血清学实验结果比较:221份筛查结果为阳性的标本经TPPA法确证,其中阳性197份,阴性24份。
以TPPA法为标准,对TP-ELISA法和TRUST 法筛选的阳性血清进行分析。
197例确证(TPPA法)阳性标本经TP-ELISA法检测196例结果为阳性,敏感性99.5%;TP-ELISA法检出的198例阳性标本中2例经TPPA法确证为阴性,特异性92.3%。
197例确证(TPPA法)阳性标本经TRUST 法检测148例结果为阳性,敏感性80.1%;TRUST法检出的169例阳性标本中21例经TPPA法确证为阴性,特异性47.3%。
抗核抗体和抗心磷脂抗体在梅毒患者的检测及临床意义周建伟;孔翠;蔡淑静;张昭才;杨永军;申爱华【摘要】目的探讨梅毒患者血清抗核抗体(ANA)和抗心磷脂抗体(ACA)检测的临床意义.方法以血清梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)呈阳性的梅毒患者为研究对象,健康体检者为对照.采用间接免疫荧光法检测血清中的ANA,用ELISA检测血清中的ACA.患者血清同时做甲苯胺红不加热血清试验(TRUST).结果 200例梅毒患者样本中,有45例ANA呈阳性,阳性率为22.5%;有54例ACA-IgM阳性(27.0%)和25例ACA-IgG阳性(12.5%).与健康对照相比,差异有统计学意义(P<0.01).ANA阳性率与TRUST滴度的相关系数仅为0.393;ACA-IgM阳性率与TRUST滴度的相关系数为0.762;ACA-IgG阳性率与TRUST滴度的相关系数为0.417.结论梅毒患者ANA阳性率较高,ACA-IgM的阳性率与TRUST滴度有较好的相关性;建议临床将ANA和ACA作为梅毒患者的实验室常规检测指标.【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》【年(卷),期】2018(017)004【总页数】3页(P317-319)【关键词】抗核抗体;抗心磷脂抗体;甲苯胺红不加热血清试验【作者】周建伟;孔翠;蔡淑静;张昭才;杨永军;申爱华【作者单位】济宁医学院附属医院,山东济宁272000;济宁医学院附属医院,山东济宁272000;济宁医学院附属医院,山东济宁272000;济宁医学院附属医院,山东济宁272000;济宁市皮肤病防治院,山东济宁272000;济宁医学院附属医院,山东济宁272000【正文语种】中文【中图分类】R759.1;R446.6梅毒是由苍白螺旋体(TP)感染所致的一种慢性性传播疾病,可通过血液、胎盘及性传播,并可侵犯全身多个器官,临床表现复杂多样。
近年来,梅毒感染人数在我国呈逐年上升趋势。
TP对人体的致病机制尚不完全清楚。
梅毒血清学实验分两类:1、非梅毒螺旋体抗原血清试验:用心磷脂做抗原,检查血清中的抗心磷脂脂抗体,即反应素,属于这一类的试验的VDRL试验,USR试验及RPR(快血清反应素)试验,可作定量测定,可用于观察疗效,判断是否复发及再感染,2、梅毒螺旋体特异性抗原血清试验:用活的或死的梅毒螺旋体或其成份来测抗螺旋体抗体,属于这一类的试验有荧光螺旋体吸收试验FTA-ABS;梅毒螺旋体血凝试验TPHA:这类试验的特异性强,可用作证实试验,但不能用作观察疗效,判断复发及再感染。
当感染梅毒后,人体内会产生两类抗体,类是直接针对梅毒螺旋体的抗体,另一类则是针对类脂质的抗体。
针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体,因此无特异性,除感染梅毒外,患另外一些疾病以及生理状况的改变,体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。
诊断梅毒时,所做的梅毒血清学检查即检测这两类抗体。
前面提到的RPR试验,即为检测类脂质抗体的实验;而TPHA则为直接检测梅毒螺旋体的实验。
因RPR是检测类脂质抗体,而不是直接检测抗梅毒螺旋体抗体的实验,因而无特异性,凡能导致产生类脂质抗体的疾病,均能使RPR阳性。
除梅毒外,患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等,都可导致RPR阳性。
梅毒以外其他原因造成的RPR阳性有一个特点,滴度一般较低,小于1:8。
RPR实验容易出现假阳性,医生常同时做特异性较强的TPHA实验来证实梅毒诊断。
值得一提的是,TPHA等直接针对梅毒螺旋体的特异性实验,在一般人中也有1%的假阳性。
国内曾报道某医院内科住院患者中,TPHA阳性者竟有一半是假阳性。
已知可造成TPHA阳性的疾病有:类风湿性关节炎、红斑狼疮、糖尿病、结肠癌、淋巴肉瘤、丙型肝炎、肝硬化、AIDS、麻风、生殖器疱疹、海洛因成瘾等。
除疾病外,某些生理状况的改变,如妊娠,也可导致RPR及TPHA阳性。
抗心磷脂抗体(ACA) IgG ELISA磷酯有着广泛的生理意义。
循环抗磷脂抗体的存在可引起种种疾病,这些抗磷脂抗体的作用途径至今不清楚。
可能通过与内皮细胞膜上磷脂的交叉反应防止花生四烯酸释放,致使前列环素合成减少,从而促进血小板凝聚;另一种机理是防止血纤维蛋白溶解酶原激活剂的释放,降低血纤维蛋白溶酶原转变成血纤维蛋白溶酶,致使血纤维蛋白裂解减低。
ACA的存在常易发生静脉及动脉血栓形成。
ACA对血小板膜上的磷脂具有交叉反应,导致网状内皮系统摄血小板作用加强。
ACA阳性见于急性缺血性脑病,缺血性视神经病、脑血栓形成、偏头痛样头痛、肺源性高血压和习惯性流产。
抗磷脂抗体综合症的实验室诊断主要是抗磷脂抗体测定。
本试剂盒用于定性检测人血清中的抗心磷脂抗体ACA IgG浓度。
酶标板96wells 浓缩洗涤液(20X) 25ml吸收液12ml 酶联物12ml底物A 6ml 阴性对照 1 vial底物B 6ml 终止液6ml1.避免溶血、高血脂标本。
2.标本中若有悬浮物,应离心去除。
3.标本若不及时检测,请冻存于-20°C。
1.取出所需板条,其余立即密封放回2-8°C。
取出的板条应放入自封袋内(密封)平衡至室温再试验,以防水滴凝聚在冷板条上。
2.浓缩洗涤液(20X)用双蒸水稀释成1X(至500ml)。
未用完的放回2-8°C。
3.试剂盒应平衡至室温再试验。
1.样品孔内先加入100ul吸收液,再加入10ul血清标本。
2.加入100ul阴性对照至相应孔内。
(必要时加入100ul阳性血清至适当孔内)3.空白孔内加入100ul吸收液。
4.轻轻混匀30秒钟,封住板孔,37°C 45分钟。
5.洗板:甩尽孔内液体,每孔加入洗涤液350ul,静止30秒后甩尽液体,在厚叠吸水纸上拍干,洗5次。
6.每孔加入100ul 酶联物, 轻轻混匀30秒钟,封住板孔,37°C 30分钟。
7.洗板:甩尽孔内液体,每孔加入洗涤液350ul,静止30秒后甩尽液体,在厚叠吸水纸上拍干,洗5次。
梅毒诊治指南梅毒是由苍白螺旋体引起的一种全身慢性传染病,主要通过性交传染,侵入部位大多为阴部。
临床表现极为复杂,几乎侵犯全身各器官,造成多器官损害。
早期主要侵犯皮肤黏膜,晚期可侵犯血管、中枢神经系统及全身各器官。
可通过胎盘传给胎儿。
梅毒螺旋体的运动极为活跃。
在人体外很容易死亡,在干燥的环境中和阳光直射下迅速死亡,在潮湿的器皿和毛巾上可生存数小时,39℃,4小时死亡。
40℃失去传染力,3小时死亡。
48℃可生存30min,60℃仅生存3~5min。
100℃立即死亡。
对寒冷抵御力强,0℃可存活1~2天,-78℃以下经年不丧失传染性。
肥皂水和一般消毒液均可使其死亡。
梅毒螺旋体的致病能力与粘多糖及粘多糖酶有关,螺旋体表面似荚膜样的粘多糖能够保护菌体免受环境中不良因素的伤害并有抗吞噬作用。
粘多糖酶能作为细菌受体与宿主细胞膜上的粘多糖相粘附,TO藉其粘多糖酶与组织细胞粘附。
粘多糖物质几乎遍布全身组织,因而,TP感染几乎累及全身组织,在不同组织粘多糖含量不一,其中尤以皮肤、眼、主动脉、胎盘、脐带中粘多糖基质含量较高,故对这些组织的损伤也较为常见和严重,此外,胎盘和脐带在妊娠18周才发育完善,含有大量的粘多糖,故TP从母体转移到胎儿必须在18周以后才发生。
人类是梅毒螺旋体的唯一宿主。
临床上绝大多数病例是通过有活动性病灶感染者的亲密接触而获得。
病原体经由完整的黏膜表面或皮肤微小破损灶进入体内,在临床症状出现前,菌体在感染局部繁殖,数小时后侵入局部淋巴结,2~3d经血播散全身。
由此可见,早在下疳发生前机体既有传染性。
生殖器溃疡(硬下疳)是一期梅毒最常见的表现,在感染后2~3周。
此后,在机体免疫作用下,原发灶中梅毒螺旋体大部分被杀死,硬下疳自然消退,进入无症状期,此即一期潜伏梅毒。
残存的梅毒螺旋体继续在体内繁殖,经6~8周,大量入血,全身播散,引起二期早发梅毒。
二期早发梅毒以典型皮损为主要表现,常伴有低热、不适和弥漫性无痛性淋巴结肿大等,亦可有各种内脏并发症发生。
康氏试验是又称类脂质抗原起沉淀反应。
指梅毒的血清测试。
使用酒精浸泡牛心粉,提取磷脂部分做为抗原,加入胆固醇以增加灵敏度,与待测血清中抗体(反应素),在电解质作用下,抗原抗体形成可见的沉淀反应,称为康氏沉淀反应,简称康氏反应。
不过,现在康氏试验(Kahn'stest)已被更敏感更特异的方法所替代。
用于梅毒筛查。
(血梅毒实验室检测方法按目标不同课分为三类1 检测梅毒病原体及抗原 2 检测梅毒“非特异性抗体”浆反应素、非梅毒螺旋体抗原试验)3 检测梅毒特异性抗体(梅毒螺旋体抗原试验)。
目前一般医疗单位第二类中的一种作为初筛实验,将第三类中的一种作为确证实验检测梅毒“非特异性抗体”血浆反应素的方法:VDRL、USR、RPR、TRUST;②检测梅毒特异性抗体方法:TP-ELISA、TP-GICA、TPHA、TPPA。
目前我国一般医疗卫生单位常用的梅毒初筛血清学试验为费用低廉、方法简便的RPR、TRUST、TP-ELISA、TP-GICA。
试验的阳性检出有赖于被检者体内抗脂质抗体和抗密螺旋体抗体的存在。
综合文献报道,初筛方法选择以TP-ELISA主,辅以RPR/TRUST方法较好。
在梅毒螺旋体定性试验阳性的情况下,必须进行确诊试验,若阳性可肯定梅毒的诊断。
确诊试验灵敏度高,特异性强,不受药物治疗的影响。
特异性抗体可持续数年甚至终生。
梅毒螺旋体血凝试验(treponema pallidum hemagglutination assay,TPTA)和荧光螺旋体抗体吸收试验(fluoresent treponemal antibody-absorption test,FTA-ABS)梅毒目前主要是初筛RPR(查抗原检查同trust)和确诊TPPA(查抗体),RPR是梅毒初筛试验,TPPA 是梅毒确诊试验VDRL(Venereal DiseaseResearch Laboratory)性病研究实验室抗原当抗原与梅毒血清抗体(免疫球蛋白IgG、IgM)混合时,后者即粘附在胶体微粒的周围,形成疏水性薄膜。
梅毒血清初筛试验及其生物学假阳性反应尹建奇河北省人民医院皮肤科,石家庄 050051人体感染梅毒螺旋体后,患者体内产生一种抗心磷脂的抗体,又称反应素。
在体外,用心磷脂(cardiolipin)作为抗原检测梅毒患者血清中的抗心磷脂的抗体,称为梅毒血清反应素试验,即梅毒血清初筛试验。
目前常用的梅毒血清初筛试验主要有性病研究实验室(venereal disease research laboratory , VDRL)试验、快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma reagin circle card test , RPR)、不加热血清反应素试验(unheated serum reagin test ,USR)、甲苯胺红试验(tolulized red unheated serum test ,TRUST)。
由于它们所用的心磷脂抗原不是梅毒螺旋体本身或其菌体成分,所以也称为非梅毒螺旋体抗原血清试验。
梅毒血清初筛试验检测梅毒敏感性高,但在某些疾病状态下可发生假阳性。
梅毒治疗以后,梅毒血清反应素试验滴度下降,直至阴转,因而可以作为监测病情和观察疗效的指标。
1抗心磷脂抗体的概况1.1梅毒感染中抗心磷脂抗体的产生机理对于梅毒感染中抗心磷脂抗体的产生机理,目前尚不完全清楚[1]。
1942年,Mary从牛心组织中分离纯化出一种能与梅毒患者血清发生反应的抗原,证实这种抗原为一种带阴电荷的磷脂,因此将其命名为心磷脂。
心磷脂属于甘油磷脂,化学名为二磷脂酞甘油,是由2分子磷脂酸和1分子甘油结合而成,是脂质中唯一具有抗原性的磷脂。
心磷脂广泛存在于各种细胞线粒体内膜上。
长期以来,一直推测梅毒螺旋体感染后,造成宿主组织细胞的破坏,宿主细胞的线粒体膜释放出心磷脂,刺激机体产生抗心磷脂抗体[2]。
但并不知道这种抗原性心磷脂究竟来源于人体哪种或哪些组织和细胞。
近年来研究发现,梅毒螺旋体菌体细胞溶解物中含有大量心磷脂,菌体外膜中亦含有少量心磷脂,因此认为梅毒感染中的抗原心磷脂亦有可能是由梅毒螺旋体本身释放的[3]。
主围监垦崖壁蜜枣盎型些生!笪篁11鲞箜兰塑ELISA法检测梅毒患者血清中抗心磷脂抗体郑占才1张荣富2白彦萍1陈锡唐[摘要]目的:探时HJSA法测定抗心磷脂抗体(ACA)在梅毒检测中的应用价值。
方法:用ELlSA法检测67例梅毒患者血清巾ACA水平,并对恐例ACA阳性的自身免疫性疾病患者血清进行RPR、TPPA榆测。
结果:39侧RPR阳性的梅毒血清中,EHSA检测ACA阳性23例,若以RPR为金标准,EHSA法检测梅毒的敏感性只有5897%(23139);28倒RPR阴性(TPPAm性)的梅毒J】『【清中,ELISA检测ACA阿性1例。
^(H的阳性牢与RPR滴度呈正相关(r=0995,P<0001)。
22倒ACA阳性的对照血清,TPPA椅测均阴性,RPR阳性1例=.结论:本研究提示ELISA法检测梅毒患者血清中ACA时,敏感性和特异性均不如RPR法。
[关键词]梅毒;酶联免疫吸附实验;抗心磷脂抗体DetectionofⅫticⅫ蝴anfib础leshtsmofsypl越sbyELISAzk增励删,蜘田蜡胁卿,BaiYanping,d—Departmentof㈣蝴,ChinaJapanf恤rl蛳Hospital,Beijing100029[AlⅪtnlet]Objective:'libevaluatethevalue硝allHISAtechniqueforfiledetectionofanficardiolipinantibodies(ACA)in【mnenbwiths刑filis.Methods:1’Es盯aof67cas瞄ofsyphilisweretestedbyACA—ELISA,and22cas・惜ofautoiFIIITIIIllf'diseaseswithpoaitiveACAwertjtestedwithRPRandTPPARtsulls:Ofthe39cas嘴0fR豫posi—tiresyphilis.Z3wemACApositivebyACA—ELlSACompardtwithRPR,lllesensitivity0fACA—EI,ISAⅧ5897%(23/39).Ofthe28casesofRPRnegative(1胛AFzsitive)syphilis,1wasACApositiveby廿』sA.TherewasapositiveIille81"comj|ati()11betweenthetiter0fRPRandthetr,sitiveriteofACAbyELISA(r=0.995,P<0001).AⅡtht_22controls棚ofACApositive㈣we撺僻Anegative,butOneofthem惴RPRpositive.Clmelusim・Theresultsofthestudysuggestthatthesensiti,:itrandHecitlcityofAC“叫SAintestingforthedia"asisofsyphilisareksatiringthanRPRlKeywordssyphilis;ELISA;anticmatiolipinantibody梅毒螺旋体感染人体后,患者血清中产生一种抗心磷脂抗体,又称反应索。
目前国内主要采用快速血浆反应索环状卡片试验(RPR)来检测之,该方法敏感性高,但偶有生物学假阳性。
其心磷脂抗原可能来源于被损伤的宿主细胞的线粒体膜,或来自梅毒螺旋体菌体本身1。
近年来发现,在一些自身免疫性疾病及血栓形成性疾病电可出现抗心磷脂抗体(antlcanliolipinanti.1岫.ACA),其性质与梅毒患者中出现的抗心磷脂抗体不完拿相同.ACA和抗原性心磷脂的结合需要阻一糖蛋白I的参与2,目前主要用ELISA法检测。
本文用ELISA法检测梅毒患者的抗心磷脂抗体,并与RPR检测结果作比较,以探对其对梅毒诊断的价值。
1材料和方法1.1病例资料梅毒患者67例,来自2002年2月~9作青单位:i北泉中H友好医院皮肤科,i000292北孙中日友好医院临床医学研究所内科实验室,1130029307・论著・月我院皮肤科门诊。
3PPA均为阳性,滴度在1:160—1:5120之间。
其中RPR阳性39例,滴度在弱阳性~>1:32之间,RPR阴性28例。
男43例,女24例,年龄19~75岁,平均379岁。
治疗前35例,包括一期梅毒8例,二期9例,早期潜伏梅毒l例,晚期潜伏梅毒1例,病期不明的潜伏梅毒16例(其巾包括妊娠潜伏梅毒2例),病程在1周~2年之间,平均I.6;8月(标准差4.27H)。
治疗后32例,包括一期梅毒9例,二期19例,晚期潜伏梅毒1例,病期不明的潜伏梅毒3例,病程在4个,】~24年之间,平均27.39月(标准差53.72月)。
另外选择ELISA法检测抗心磷脂抗体rgG或,和IgM阳性的其它疾病患者22例作为对照,其中系统性红斑狼疮15例,类风湿性关节炎3例,过敏性紫癜2例,血小板减少性紫癜1例,抗磷脂综合征1例。
此22例对照患者均做RPR和TPPA检测。
1.2方法1.2.1抗心磷脂抗体IgG含量测定用抗心磷脂抗体IgG抗体ELISA试剂盒(上海太阳生物技术公刊)测定。
采朋酶联免疫吸附原理结合指数方式定量检测血清抗心磷脂抗体I鼬水平。
呈现品色反应后在45011/tl处测得的OD值换算成结合指数,表示血清中抗心磷脂抗体I虾,砖牢是骨正常。
本实验每例标本均采用复管法取均值。
操作步骤:按试剂盒说明进行。
本实验室建立的抗心磷脂抗体IgG结合指数JF常值为<0.48。
1.2.2抗心磷脂抗体I州含量测定用抗心磷脂抗体kM抗体虬[SA试剂盒(上海太阳生物技术公司)测定。
力法同抗心磷脂抗体IgG含量测定。
本实验窒建立的抗心磷脂抗体[gM结合指数正常值为<0.17。
I2.3I{PI{和’lHM试剂分别购自衙兰BioM6rieux公T{i:J和f!j本寓上瑞必欧公司,均按说明书进行操作。
2结果2.167例梅毒患者EHSA检测结果其中RPR阳性的39例梅毒患者,用ELISA法检测抗心磷脂抗体1舡和IgM:项均阳性或其中一项阳性者共23例,其中单纯酥;阳性者8例,单纯I州阳性者4例,I如和lgM均阳性暂11例。
I一;和T91Ⅵ均阴性者17例。
ELISA法对抗心磷脂抗体的榆出率比RPR低,若以RPR为金标准,EI.ISA法的敏感性仅为58.97%(23/39)。
28例即一PA阳性但RPR阴性已获有效治疗的梅毒“患者”,EIJSA法有l例显示抗心磷脂抗体IgM|5|=|性。
22EHSA检测抗心磷脂抗体的阳性率与RPR滴度的相戈性分析见表1。
经线性相关分析,患者抗心磷脂抗体的检出率‘jRPR滴度的相关系数r=0.995,P<0.001,有非常鼎著的统计学意义,二者之间呈正相关。
表lnISA检测抗心磷脂抗体的阳性率与RPR滴度的相关性2.322例对照病例梅毒血清实验的检测结果在抗心磷脂抗体IgG或,和lgM阳性的22例其它疾病患者,什l,A榆测均为刚性,RPR仅有1例阳性,滴度1:4,为SI.E患者,划为梅毒血清反应生物学假阳性。
3讨论州代梅毒m清反应素试验包括RPR、VDRL等,用从牛心纰织提取的心磷脂作为抗原,井分别用卵磷脂和胆l司醇增加其抗原性和敏感性,检测梅毒患者血中的反应素,其敏感性和特异性分别达95%和90%,偶有ChinaJk丝SkinDis.A1骣2003,Vol19No.4生物学假阳性反应。
抗心磷脂的抗体具有明硅异质性,以心磷脂为靶抗原的抗体至少包括抗心磷脂抗体、梅毒血清反J缸素、狼疮抗凝物质等2。
町分为二大类,第・类见于系统性红斑狼疮、抗磷脂综合征、原发性『|lL小板减少件紫癜、动静脉血栓形成、反复流产等;第二类见于感染性疾病,如梅毒、雅司、品它、HIv感染等。
在第类巾+抗心磷脂抗体与心磷脂的结合需要雎一糖蛋白I作为辅助因子,即抗心磷脂抗体的靶抗原是心磷脂和阻一糖蛋白I的复合物,称为胆一糖蛋山I依赖性抗心磷脂抗体;而在第二类如梅毒中,抗心磷脂抗体主要是与磷脂本身反应,没有胆一糖蛋白I的参‘l,称为非口2一糖蛋白I依赖性抗心磷脂抗体23。
本研究采用的ELISA法直接用纯的心磷脂作为包被抗原,目前临床上主要用r检测自身免疫性等疾病中的陧一糖蛋白I依赖性抗心磷脂抗体。
近来国内定献有报道口r用于梅毒的检测4。
然而我们的研究显示.EIJSA法对梅毒患者中抗心磷脂抗体的检出率不如RPR高,如果以RPR为会标准,其敏感性仅为58.97%。
['klnliagy,等5用J_cl|ISA法对74例VDRL和Fn—Abs均阳性的梅毒患者进行抗心磷脂抗体榆测,结果I¥或/和lgM抗体阳性共16例,阳性率21.6%,比本研究中扰心磷脂抗体的阳性率低。
我们发现ELISA法检测抗心磷脂抗体,其阳性率与RPR的滴度呈正线性相关(r=o.995,P<0.001),这哼Santiago{笋的研究结果相吻合。
在RPR滴度≥l:16时,所有RPR阳性者ELISA法均阳性,而RPR滴度≤1:4时,E1.ISA法的榆出率明显下降,这也提示1jcl.ISA法榆测梅毒中的掘0磷脂抗体敏感度不够高。
因此我们不推荐用ELISA法检测梅毒。
我们选择了22例抗心磷脂抗体I船或[gM阳性的自身免疫病患者,进行梅毒血清学检测,结果7I'PFA均阴性,RPR仅有1例阳性。
这说明:(1)EHSA虽然对梅毒的检出率低,但对fi2一糖蛋白I依赖性抗心磷脂抗体的榆测很有敛;(2)ELKSA法对梅毒的低敏感性并非为实验者操作不当所致,而是由实验本,身的特性决定的;(3)ELISA检测梅毒特异性不如RPR高;(4)进一步印证了一类抗心磷脂抗体的不同。
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