生化分离的一般过程.
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《生化产品分离纯化工》职业标准一、职业概况1.1职业名称生化产品分离纯化工1.2 职业定义从事从生物材料(包括动植物材料或发酵液或酶反应液或动植物细胞培养液或组织浸提液等)中提取有用物质制备成生物产品的人员。
1.3 职业等级本职业共设三个等级,分别为:生化产品分离纯化工(五级)(国家职业资格五级)、生化产品分离纯化工(四级)(国家职业资格四级)、生化产品分离纯化工(三级)(国家职业资格三级)。
1.4 职业环境条件室内、常温(具有一定或特殊操作要求等)1.5 职业能力特征各类等级的生化产品分离纯化工掌握必备的职业知识和技能需具备的基本能力应包括:正常的感觉(色觉、味觉、嗅觉、听觉和触觉等)能力,灵活自如的动作能力,敏锐的观察、判断、思维、理解能力,较好的计算、表达、交流能力。
1.6 基本文化程度初中毕业生学历以上1.7 鉴定要求1.7.1 适用对象从事或准备从事本职业的人员。
1.7.2 申报条件具备以下条件之一者,可申报生化产品分离纯化工(五级):(1)初中及初中以上学历,经本职业五级正规培训达到规定的标准学时数;具备以下条件之一者,可申报生化产品分离纯化工(四级):(1)取得本职业五级资格证书后,经本职业四级正规培训达规定标准学时数;(2)连续从事本职业5年以上,经本职业四级正规培训达标准学时数;(3)取得经劳动保障行政部门审核认定的,以中级技能为培养目标的中等以上职业学校专业毕业证书,经本职业四级正规培训达标准学时数;(4)普通高校在校的与本职业相关的二年级以上的本专科大学生。
具备以下条件之一者,可申报生化产品分离纯化工(三级):(1)取得本职业四级资格证书后,从事本职业2年以上,经本职业三级正规培训达标准学时数;(2)从事本职业5年以上,且具备中级职称1年以上,经本职业三级正规培训达规定标准学时数;(3)相关专业专科或同等及同等以上学历,从事本职业2年以上,经本职业三级正规培训达规定标准学时数,并取得毕(结)业证书。
《生化分离》考试复习题库一、选择题1.下列不是超临界萃取工艺的方法是()。
A 等温法B 等压法C 吸附法D 交换法2.影响絮凝效果的因素有很多,但不包括()。
A 絮凝剂的浓度B 溶液pH值C 溶液含氧量D 搅拌速度和时间3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱,在化合物分离中,先被洗脱下来的为()。
A 杂质B 小分子化合物C 大分子化合物D 两者同时下来4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度()。
A 增大B 减小C 先增大,后减小D 先减小,后增大5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是()。
A 增大滤过面积B 降低料液温度C 加压或减压D 加入助滤剂6.下列方法中,哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法A 调节等电点B 降低温度C 添加表面活性物质D 添加助滤剂7.助滤剂应具有以下性质()A 颗粒均匀、柔软、可压缩B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩C 粒度分布广、坚硬、不可压缩D 颗粒均匀、可压缩、易变形8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法,不包括()A 沉淀法B 变性法C 吸附法D 萃取法9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是()A 样品可被分离成一系列的样品组分区带B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质C 离心时间越长越好D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒,它能使滤饼疏松,滤速增大。
以下不属于助滤剂的是()A 氯化钙B 纤维素C 炭粒D 硅藻土11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类,下列不属于机械法的是()A 加入金属螯合剂B 高压匀浆法C 超声破碎法D 珠磨法12.萃取操作是利用原料液中各组分()的差异实现分离的操作。
A 溶剂中的溶解度B 沸点C 挥发度D 密度13.两相溶剂萃取法的原理为:A 根据物质在两相溶剂中的分配系数不同B 根据物质的熔点不同C 根据物质的沸点不同D 根据物质的类型不同14.下列溶液不是双水相的是()。
A PEG/葡聚糖B PEG/磷酸盐C PEG/硫酸铵D 磷酸盐/硫酸铵15.在萃取操作中,分离系数越小,组分()分离。
第一章绪论1、何为生化分离技术?其主要研究那些容?生化分离技术是指从动植物组织培养液和微生物发酵液中分离、纯化生物产品的过程中所采用的方法和手段的总称。
2、生化分离的一般步骤包括哪些环节及技术?一般说来,生化分离过程主要包括4个方面:①原料液的预处理和固液分离,常用加热、调PH、凝聚和絮凝等方法;②初步纯化(提取),常用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作;③高度纯化(精制),常选用色谱分离技术;④成品加工,有浓缩、结晶和干燥等技术。
3、生化分离工程有那些特点,及其重要性?特点:1、目的产物在初始物料(发酵液)中的含量低;2、培养液是多组分的混合物,除少量产物外,还有大量的细胞及碎片、其他代物(几百上千种)、培养基成分、无机盐等;3、生化产物的稳定性低,易变质、易失活、易变性,对温度、pH值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面力等非常敏感;4、对最终产品的质量要求高重要性:生物技术产品一般存在于一个复杂的多相体系中。
唯有经过分离和纯化等下游加工过程,才能制得符合使用要求的产品。
因此产品的分离纯化是生物技术工业化的必需手段。
在生物产品的开发研究中,分离过程的费用占全部研究费用的50%以上;在产品的成本构成中,分离与纯化部分占总成本的40~80%;精细、药用产品的比例更高达70~90%。
显然开发新的分离和纯化工艺是提高经济效益或减少投资的重要途径。
4、生物技术下游工程与上游工程之间是否有联系?它们之间有联系。
①生物工程作为一个整体,上游工程和下游工程要相互配合,为了利于目的产物的分离与纯化,上游的工艺设计应尽量为下游的分离纯化创造条件,例如,对于发酵工程产品,在加工过程中如果采用液体培养基,不用酵母膏、玉米浆等有色物质为原料,会使下游加工工程更方便、经济;②通常生物技术上游工程与下游工程相耦合。
发酵-分离耦合过程的优点是可以解除终产物的反馈抑制效应,同时简化产物提取过程,缩短生产周期,收到一举数得的效果。
《生化分离》考试复习题库一、选择题1.下列不是超临界萃取工艺的方法是()。
A 等温法B 等压法C 吸附法D 交换法2.影响絮凝效果的因素有很多,但不包括()。
A 絮凝剂的浓度B 溶液pH值C 溶液含氧量D 搅拌速度和时间3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱,在化合物分离中,先被洗脱下来的为()。
A 杂质B 小分子化合物C 大分子化合物D 两者同时下来4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度()。
A 增大B 减小C 先增大,后减小D 先减小,后增大5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是()。
A 增大滤过面积B 降低料液温度C 加压或减压D 加入助滤剂6.下列方法中,哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法A 调节等电点B 降低温度C 添加表面活性物质D 添加助滤剂7.助滤剂应具有以下性质()A 颗粒均匀、柔软、可压缩B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩C 粒度分布广、坚硬、不可压缩D 颗粒均匀、可压缩、易变形8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法,不包括()A 沉淀法B 变性法C 吸附法D 萃取法9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是()A 样品可被分离成一系列的样品组分区带B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质C 离心时间越长越好D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒,它能使滤饼疏松,滤速增大。
以下不属于助滤剂的是()A 氯化钙B 纤维素C 炭粒D 硅藻土11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类,下列不属于机械法的是()A 加入金属螯合剂B 高压匀浆法C 超声破碎法D 珠磨法12.萃取操作是利用原料液中各组分()的差异实现分离的操作。
A 溶剂中的溶解度B 沸点C 挥发度D 密度13.两相溶剂萃取法的原理为:A 根据物质在两相溶剂中的分配系数不同B 根据物质的熔点不同C 根据物质的沸点不同D 根据物质的类型不同14.下列溶液不是双水相的是()。
A PEG/葡聚糖B PEG/磷酸盐C PEG/硫酸铵D 磷酸盐/硫酸铵15.在萃取操作中,分离系数越小,组分()分离。
生化分离工程的一般工艺流程生化分离工程是一种利用不同物质的化学或生物特性差异进行分离的工程技术。
它主要应用于制药、食品、化工等领域,用于提取、分离和纯化目标物质。
下面将介绍一般的生化分离工艺流程。
一、前处理前处理是生化分离工程的第一步,主要目的是将原料进行预处理,以去除杂质、减少影响分离效果的物质,为后续的分离步骤做好准备。
前处理的具体步骤包括物料破碎、浸泡、搅拌等。
二、提取提取是生化分离工程的核心步骤,它是将目标物质从原料中提取出来的过程。
提取方法多种多样,常用的方法包括溶剂提取、超临界流体提取、浸提等。
在提取过程中,需要控制好提取的时间、温度、pH值等因素,以提高提取效率和提取纯度。
三、分离分离是将提取得到的混合物中的目标物质与其他物质进行分离的过程。
常用的分离方法有蒸馏、结晶、萃取、吸附、离心、膜分离等。
分离的选择要根据目标物质的特性以及产品的要求来确定。
四、纯化纯化是将分离得到的目标物质进一步提纯的过程。
纯化的方法有很多种,常用的方法有晶体生长、再结晶、色谱层析、电泳等。
纯化的目的是提高产品的纯度和质量。
五、精制精制是对纯化后的物质进行进一步处理,以达到更高的纯度和质量要求。
精制的方法包括洗涤、溶解、过滤、干燥等。
在精制过程中,需要注意控制操作的条件,防止杂质的污染。
六、成品制备成品制备是将精制后的物质进行最终的加工和包装,以获得成品产品。
成品制备的步骤包括配制、混合、包装等。
在成品制备过程中,需要严格控制生产工艺,确保产品的质量和安全性。
七、检测与分析检测与分析是生化分离工程的重要环节,它用于检验产品的质量和性能。
常用的检测与分析方法包括色谱分析、质谱分析、核磁共振等。
通过检测与分析,可以对产品进行定性和定量的分析,为产品的质量控制提供依据。
八、工艺优化与改进工艺优化与改进是生化分离工程的持续改进过程。
通过对工艺流程的优化和改进,可以提高产品的产率、纯度和质量,降低生产成本,提高经济效益。
第一章绪论1.生物分离工程在生物技术中的地位?2、生物分离工程的特点是什么?3、生物分离过程的一般流程?4、不同生物物质分离提取常用的单元操作?5. 生化分离和化工分离的主要区别是什么?6.对于氨基酸类物质通常采用哪些分离纯化方法?并说明理由。
7.对于蛋白质类物质通常采用哪些分离纯化方法?并说明理由。
8.提取与精制技术在现代生物化学工程中占有十分重要的地位,与传统化学化工中的分离过程相比,阐述生物技术产品对提取与精制技术的特殊要求及近几年来发展起来的一些新方法新技术。
第二章.发酵液预处理、细胞破碎及固液分离一、名词解释1. 凝聚和絮凝答:(1)凝聚:在中性盐的作用下,可以使菌体表面双电位层排斥,电位下降(即中和沉淀物质的电荷)。
(2)凝絮:向含菌的料液中加入高分子絮凝剂,可使菌体之间产生架桥作用而产生较大的凝聚颗粒。
2.渗透压冲击法破碎细胞答:是较温和的一种破碎细胞的方法,将细胞放在高渗透压的介质中,达到平衡后介质突然被稀释或者将细胞转入水中或缓冲液中,由于渗透压的突然变化,水迅速进入细胞内,引起细胞壁的破裂。
渗透压冲击法仅对细胞壁较脆弱的或者细胞壁预先用酶处理的或合成受抑制而强度减弱时才是适合的。
3.高压匀浆细胞破碎法答:细胞悬浮液在高压作用下,从阀座与阀之间的环隙高速喷出后撞击到碰撞环上,细胞受到高速撞击作用后,急剧释放到低压环境中,从而在撞击力和剪切力等综合作用下破碎。
此法不适用于团状或丝状真菌、较小的革兰氏阳性菌及含有包含体的基因工程菌。
适用于酵母菌和大多数细菌细胞的破碎。
4.超声波破碎法答:细胞的破碎是由于超声波的空穴作用,从而产生一个极为强烈的冲击波压力,由它引起的粘滞性漩涡在介质的悬浮细胞上造成了剪切应力,促使细胞内液体发生流动,从而使细胞破碎。
适用于多数微生物细胞的破碎。
5.差速离心答:主要采用逐渐提高离心速度的方法分离不同大小细胞器的方法。
二、单项选择题1. 去除高价金属离子Mg2+,加入( B ) 试剂。
绪论.生化分离技术:是指从含有目标产物的发酵液、酶反应液或动植物细胞培养液中,提取、精制并加工制成高纯度的、符合规定要求的各种生物技术产品的技术,又称为下游加工技术。
生物技术产品:是指在生产过程应用微生物发酵技术、酶反应技术、动植物细胞培养技术等生化反应技术制得的产品。
生物技术产品有哪些特点:生物技术产品有些是胞内产品,有些是胞外产物; 通常是由产物浓度很低的发酵液或培养液中提取的; 生物技术产品的稳定性差,易随时间变化,如易受空气氧化、微生物污染、蛋白质水解、自身水解等; 生物技术产品的生产多为分批操作,生物变异性大,各批发酵液或培养液不尽相同。
生化分离技术按其分离原理可分为机械分离与传质分离两大类。
生化分离过程主要包括哪几个方面?生化分离过程主要包括四个方面:①原料液的预处理和固液分离;②初步纯化(提取);③高度纯化(精制);④产品加工这四个步骤。
第一章固液分离技术排斥电位和产生吸附架桥作用的双重机制是絮凝的主要原因。
发酵液的相对纯化方法有哪些?固液分离的目的:除去固体杂质,得到溶液;分离掉溶液获得固体。
固液分离方法:过滤、沉降改善过滤性能的方法工艺上一般采用如下方法:降低混合液粘度、增大被分离颗粒的粒度、加入助滤剂、提高离心机的转速或提高操作压力、增大真空度、降低滤饼层厚度、除去滤饼第二章细胞破碎细胞破碎是指选用物理、化学、酶或机械的方法来破坏微生物菌体的细胞壁或细胞膜,释放其中的目标产物。
细胞破碎的方法有哪些?各有何特点?一、球磨破碎特点:适用范围较广;但有效能量利用率很低,设计操作时应充分考虑冷却系统的热交换能力;影响破碎率的操作参数较多,过程优化设计较复杂。
二、高压匀浆法特点:适用于酵母和大多数细菌细胞的破碎,不宜用于团状或丝状菌的破碎,易堵塞;由于操作中温度会升高,需对料液作冷却处理,保护目的产物活性。
三、超声破碎法特点:是很强烈的破碎方法;适用范围广;但有效能量利用率极低,对冷却要求相当苛刻,不易放大,多在实验室使用。
生化分离工程知识点归纳第一章绪论1、生物物质分离工程:在工业规模上,通过适当的分离纯化技术与装备并消耗一定的能量和分离介质来实现生物物质(产品)制备的过程,是生物产业的一个重要组成部分。
2、生物工程下游加工过程的特点:(1)成分复杂:固体成分、液体成分(2)悬液中的目标产物浓度低(3)稳定性差:化学(温度和pH值)或微生物引起的降解(4)生物产品质量要求高:纯度、卫生、生物活性3、下游加工过程的一般流程(4个阶段):发酵液的预处理与固液分离、初步纯化(提取)、高度纯化(精制)、成品加工。
4、某一具体产品的分离提取工艺设计中应考虑的问题:①产物本身的性质;②是胞内产物还是胞外产物;③原料中产物和主要杂质浓度;④产物和主要杂质的理化特性及差异;⑤产品用途和质量标准;⑥产品的市场价格;⑦不同分离方法的技术经济比较及废液的处理方法等。
第二章发酵液的预处理与过滤1、发酵液的预处理发酵液的预处理的方法:(1)加热:最简单、最经济的预处理方法是加热,降低料液黏度,也可以对其进行灭菌。
但加热变性的方法只适合于对热稳定性的产物。
(2)调节料液的pH值:促进全细胞聚集。
(3)凝聚和絮凝:凝聚是指通过加入简单电解质降低了胶体粒子间的排斥电位,从而使得范德华引力起主导作用,聚合成较大的胶粒,粒子的密度越大,越易分离。
常用凝聚剂多为阳离子型如明矾、三氯化铁。
絮凝是指预处理时加入絮凝剂(通常指天然或合成的生物大分子聚电解质)既能降低排斥电位,又吸附了周围的微粒,形成桥架作用,促使胶粒形成粗大,密度低的絮凝团。
这些絮凝团很容易被过滤得到。
主要絮凝剂:聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、多聚胺衍生物。
(4)使用惰性助滤剂:硅藻土、珍珠岩。
2、真空过滤器的优点:连续自动操作,节省人力,生产能力大。
真空过滤器的缺点:附属设备多,投资费用高,推动力小适用于量大易过滤的料液。
3、压滤器的优点:过滤推动力大,过滤面积大。
压滤器的:缺点:板框压滤机劳动强度大,投资、维护费用高。
生物分离过程第一章:绪论1.生物分离工程的一般流程:1)发酵液的预处理:(也称不溶物的去除)作用:将固相分离。
特点:采用凝聚和絮凝等技术来加速固相,液相分离,提高过滤速度。
方法:最基本的单元操作:过滤,离心。
2)产物的提取;作用:将目标物和与其性质差别较大的杂质分开,使产物的浓度有较大幅度的提高。
特点:多单元协同操作。
方法:沉淀,吸附,萃取,超滤等单元操作。
3)产物的精制:作用:高度纯化,除去与目标物性质相近的杂质。
特点:采用对目标物具有高选择性的分离方法。
方法:首选色谱分离技术:层析(柱层析,薄层层析),离子交换,亲和色谱,吸附色谱,电色谱。
4)成品的加工处理:作用:将上述分离纯化过程得到的产物进行最后加工使其成为商用成品。
特点:将产品根据用途,质量要求进行加工。
方法:浓缩,结晶和干燥。
2.生化分离过程特点:①生物材料成分复杂,产物浓度低,分离难度大;②产物稳定性差,分离纯化过程的操作条件要求严格;③产物易变质,难保存,分离过程必须快速高效;④质量要求高(药品或食品)。
第二章:发酵液的预处理3.1)预处理的目的:①改善发酵液的物理性质:流变性质、颗粒粒度②去除部分杂质:杂蛋白、多糖、高价无机离子等。
2)预处理的方法:①物理性质的改善:加热(降低黏度、去除杂蛋白),凝聚与絮凝(增大粒度),加助滤剂(改善过滤);②杂质的去除:去杂蛋白(等电点、变性剂、吸附),去多糖(酶解),去离子(沉淀)。
4.凝聚,絮凝,盐析的异同点:凝聚:高价盐,不可逆中和,盐浓度低,去除杂蛋白。
絮凝:增大胶粒尺度,形成絮凝凝团粗大。
盐析:低价中性盐,可逆中和,破坏水化膜。
盐的用量大,浓度比较高,回收蛋白质。
(凝聚是在高价无机盐作用下,由于双电层排斥电位的降低,而使胶体体系不稳定的现象。
絮凝是指在某些高分子絮凝剂存在下,基于架桥作用,使胶粒形成粗大的絮凝团的过程,是一种以物理的集合为主的过程。
)第三章:细胞分离技术5.常见的细胞破碎的方法与特点:机械法四种方法较重要,适应性也是其特点6.破碎率的测定1)直接测定法: 细胞计数2)测定释放的蛋白质量或酶的活力或相对电导率第四章:沉淀技术7.常见的沉淀方法:(前三种重要)(1)盐析法:成本低,不需要特别昂贵的设备;操作简单、安全;不会引起蛋白质变性,经透析去盐后,能得到保持生物活性的纯化蛋白质;分离效果不理想,通常只是作为初步的分离纯化,还需要结合其它的纯化方法。
生物分离原理与技术知识点汇总第一章绪论1、各类分离纯化技术分别利用了生物分子的哪些特性来实现分离?利用这些性质进行分离的方法有哪些?⑴形状和大小:凝胶过滤、超滤、透析;⑵电荷性质:离子交换层析、电泳(除SDS); ⑶极性(疏水性):疏水层析、反相层析;⑷生物功能或特殊化学基团:亲和层析;⑸等电点 pI:层析聚焦、等电聚焦、等电点沉淀;⑹溶解性:盐析、有机溶剂提取、结晶;⑺密度、大小:超离心、SDS-PAGE。
2、一个完整的分离纯化操作有哪些基本步骤?各个阶段所用的分离方法分别侧重哪些指标?生化分离基本步骤:(1)选材: 来源丰富,含量相对较高,杂质尽可能少。
(2)提取(预处理):将目的物从材料中以溶解状态释放出来,方法与存在部位及状态有关(3)分离纯化: 核心操作,须根据目的物的理化性质,生物学性质及具体条件确定。
(4)浓缩、结晶、干燥。
(5)保存。
整个过程应有快速灵敏准确的分析方法来衡量效果(收率、纯度)。
第二章生物样品的预处理1、简述常用细胞破碎的主要方法、原理、特点、适用范围及细胞破碎今后的发展方向。
机械法:(1)胞捣碎法。
原理:机械运动产生剪切力,适用于动植物组织。
(2)高速匀浆法。
破碎程度较上法好,且机械剪切力对生物大分子的破坏较小,处理量大。
原理:利用高压使细胞悬浮液通过针型阀,由于突然的减压和高速冲击撞击环使细胞破碎。
适用于:较柔软、易分散的组织细胞。
(3)研磨法和珠磨法。
由陶瓷的研钵和研杆组成,加入少量研磨剂(如精制石英砂、玻璃粉、硅藻土。
适用于微生物与植物细胞。
(4)挤压法。
微生物细胞在高压下通过一个狭窄的孔道高速冲出,因突然减压而引起一种空穴效应,使细胞破碎。
适用于细菌(G - )。
物理法:(1)超声破碎。
频率为20kHz 以上的波,超过人耳可听范围。
其对细胞的破碎与空穴的形成有关。
一般样品浓度、声强、频率、介质的离子强度、pH、处理时间都对破碎有影响。
(2)反复冻融动物材料。
生化分离技术:描述回收生物产品分离过程原理和方法的术语,是指从动植物组织培养液或微生物发酵液中分离、纯化生物产品过程中所采用的方法和手段的总称。
生化分离过程是生物技术转化为生产力不可缺少的重要环节,其技术进步程度对生物技术的发展有着举足轻重作用,为突出其在生物技术领域中的地位和作用,常称它为生物技术的下游工程。
分离纯化过程的难点:目的产物在细胞或反应液中含量不高,杂质种类多,数量大;杂质性质与产物相似;产物稳定性不高。
生化分离技术的主要种类:沉淀分离(盐析、有机溶剂沉淀、选择性变性沉淀、非离子聚合物沉淀);膜分离(透析、微滤、超滤、纳滤、反渗透);层析分离(吸附、凝胶、离子交换、疏水、反相、亲和层析);电泳分离(SDS-PAGE、等电聚焦、双向电泳、毛细管电泳);离心分离(低速、高速、超速离心分离技术),生化分离的特点:成分复杂;含量甚微;易变性/易被破坏;具经验性;均一性的相对性。
预处理需注意的条件:⑴温度尽可能低⑵提取液的量要保证“充分浸入”⑶加入足量酚类吸附剂⑷加入足量氧化酶抑制剂⑸搅拌转速要恰当⑹pH控制在合适范围,一般5.5~7细胞的破碎:用一定方法(机械/物理/化学/酶法)打开细胞壁或膜,使细胞内含物有效释放出来。
挤压:微生物细胞在高压下通过一个狭窄的孔道高速冲出,因突然减压而引起一种空穴效应,使细胞破碎。
沉淀:溶液中溶质由液相变成固相析出的过程。
本质:通过改变条件使胶粒发生聚结,降低其在液相中的溶解度,增加固相中的分配率。
作用:分离、澄清、浓缩、保存盐溶:低浓度中性盐离子对蛋白质分子表面极性基团及水活度的影响,增加蛋白质与溶剂相互作用力,使其溶解度增大。
盐析:中性盐浓度增至一定时,水分子定向排列,活度大大减少,蛋白质表面电荷被中和,水膜被破坏,从而聚集沉淀。
有机溶剂沉淀法:使溶液的介电常数大大降低,从而增加带电粒子自身之间的作用力,易聚集沉淀;争夺酶、蛋白质等物质表面的水分子,破坏水化层,使分子易碰聚产生沉淀。