甲苯胺蓝染色液(软骨专用)使用说明书

软骨细胞甲苯胺蓝染色
1%甲苯胺蓝配制
原液：1g甲苯胺蓝粉末+10ml 70%酒精溶解（据说可保存6个月）
工作液：取上述原液1ml+9ml 1% NaCl 溶解，滤纸过滤（用时新鲜配制）
1% NaCl：1gNaCl + 100ml 蒸馏水（用时新鲜配制）
染色步骤：
（1）爬片用PBS洗2次，直接用4% 多聚甲醛固定于6孔板中1h或更长时间（4度）（2）自来水洗15分钟，最好不要直接冲爬片，易脱片
（3）蒸馏水洗5分钟
（4）加1%甲苯胺蓝浸染2h
（5）去除多余染液，我觉得可以用注射器从6孔板中吸走。

有人说用90%酒精的，但一定要慎重。

否则时间稍长，就会将颜色洗脱。

当然洗脱后仍然可以从（4）开始重复。

（6）镜下观察，满意后晾干，中性树胶封片（或者镜下观察）。

软骨染色液（番红O法）步骤及注意事项软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项货号：G2540规格：100ml有效期：12个月有效产品简介：软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。

番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。

自备材料：10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。

操作步骤（仅供参考）：1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2.常规脱蜡至水。

3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。

4.酸性乙醇分化液分化15s。

5.蒸馏水洗10min。

6.（可选）在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗1min。

7.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。

8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

9.二甲苯透明，光学树脂封固。

染色结果：软骨基质深红色软骨细胞核蓝色软骨细胞浆红色细胞核灰黑色注意事项：1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。

2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h 失去染色能力。

3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

4.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。

5.95%乙醇脱水时间不宜过长。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

尼氏染色液(甲苯胺蓝法)说明书
货号：G1436
规格：100ml
保存：室温，避光，6个月。

产品简介：
尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。

尼氏染色液(Nissl Stain，甲苯胺蓝法)主要优点是操作简便、染色稳定、适用范围广，可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。

操作步骤(仅供参考)：
1、新鲜组织固定于10%甲醛液中，常规脱水包埋。

2、石蜡切片厚5µm，常规脱蜡至水。

3、用尼氏染色液(Nissl Stain，甲苯胺蓝法)置于50-60℃温箱浸染20-40min。

4、蒸馏水稍洗。

5、95%乙醇迅速分化。

6、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：
尼氏小体紫蓝色
细胞核淡蓝色
背景无色或浅蓝色
注意事项：
1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。

2、组织固定起着非常重要的作用，固定可采用乙醇或中性福尔马林溶液。

3、本染色试剂盒对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。

4、95%乙醇分化应迅速进行，肉眼观察至切片清晰，背景呈淡蓝色或无色为适宜。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

软骨染色液（甲苯胺蓝法）B1104（Toluidine blue Staining Solution）货号产品名称规格价格B1104软骨染色液（甲苯胺蓝法）100ml240元描述：甲苯胺蓝，英文名称为Toluidine blue，CAS号为92-31-9，分子式为C28H20N2O10S2·2Na，分子量为305.8256。

甲苯胺蓝属于常用的人工合成的醌亚胺染料类的一种，是具有两个发色团和两个助色团的碱性染料。

甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用。

软骨基质中含有大量的多糖类（硫酸软骨素或硫酸角质素）阴离子基团，具有嗜碱性；组织细胞的细胞核、神经元的尼氏体、肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等酸性物质的特殊颗粒等的酸性物质与甲苯胺蓝中的阳离子相结合而被染色，呈现发光色团的颜色，蓝色。

本品适用于软骨组织、细胞核、尼氏体、肥大细胞的特殊颗粒的染色。

本产品用于软骨染色，可以间接反应软骨基质中蛋白多糖的含量和分布，当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，导致染色减弱或不着色，用于软骨组织损伤和粘多糖代谢的研究。

适用范围：适用于鉴定细胞或基质内酸性物质的存在，主要用于软骨、细胞核、尼氏体、肥大细胞颗粒的染色。

储存：室温下保存3个月，4℃保存6个月。

染色步骤：1.组织切片入蒸馏水（石蜡切片需脱蜡至水）。

2.入甲苯胺蓝染液染色30分钟左右。

（镜下观察，适当调整染色时间）3.自来水冲洗2分钟去掉浮色，滤纸吸干水分。

4.丙酮或醋酸分化液分化，至软骨细胞呈清晰的紫蓝色为止。

（可省）5.常规酒精脱水、透明后中性树胶封片或蒸馏水洗后冷风吹干，甘油明胶封片。

染色结果：软骨细胞、成骨细胞呈紫红色，基质呈淡蓝色。

说明：1.第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验，确定合适的染色时间。

2.固定、脱水、透明所需的试剂需要另购置。

本公司有甘油明胶封片液。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

广州市外显子生物技术有限公司
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苯胺蓝染色液
产品说明：
苯胺蓝染色液是 Masson 三色染色试剂盒的组成之一。

苯胺蓝染色液主要有苯胺蓝、弱酸等组成，呈酸性，常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

产品组成：
货号 产品 规格 储存条件 S-1528 苯胺蓝染液 100ml
2-4℃ -- 说明书
1份
有效期：12个月 操作步骤(仅供参考)： 以Masson 三色染色为例 1.切片脱蜡至水。

2.Weigert 铁苏木素使用前（Weigert 铁苏木素 A 、 B 液等比例混合）。

染 10-20 分钟，流水稍洗。

3.盐酸酒精分化，流水冲洗数分钟。

4.丽春红酸性品红染液染 5-10 分钟，蒸馏水稍冲 洗。

5.磷钼酸溶液处理约 5 分钟，去掉溶液，不用水洗， 直接用苯胺蓝染液复染 5 分钟。

6.1%冰醋酸处理 1 分钟，95%酒精脱水。

7.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封固。

注意事项：
1. 切片脱蜡应尽量干净。

2. 切片入苯胺蓝染色液染色前不要水洗，否则可能出现不着色。

3. 不同染色参照具体的实验要求。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作 染色结果：
神经节组织×400 结果判定：主要用于神经组织、细胞、结缔组织的染色，使胶原纤维呈蓝色。

甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)简介：甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。

甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。

另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。

Leagene 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。

组成：操作步骤(仅供参考)：(一)肥大细胞染色1、脱蜡至蒸馏水。

2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。

3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。

4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。

5、快速和无水乙醇脱水。

6、 二甲苯透明，封固。

染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

(二)软骨染色1、 石蜡切片入二甲苯。

2、 系列乙醇各。

3、 自来水洗。

4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。

5、 自来水洗，滤纸吸干水分。

6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。

7、 逐级乙醇脱水。

编号 名称 DA0059 Storage Toluidine Blue O stain (0.5%,硼酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份8、二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

(三)细胞涂片染色1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。

2、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。

3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。

4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。

5、无需干燥，直接镜检。

北京雷根生物技术有限公司
甲苯胺蓝染色液(软骨专用)
简介：
甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。

甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。

Leagene 甲苯胺蓝染色液(软骨专用)呈强碱性，更利于软骨组织的着色。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 常规脱钙，包埋、固定。

2、 石蜡切片入二甲苯2次每次。

3、 系列乙醇各1min ，自来水洗。

4、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。

根据不同组织，染色时间不完全相同。

5、 自来水洗，滤纸吸干水分。

6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。

7、 逐级乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

注意事项：
1、 针对于较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。

2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

编号 名称 DA0054 Storage Toluidine Blue O stain (软骨专用) 50ml RT 避光 使用说明书 1份。

Masson 三色染色试剂盒（甲苯胺蓝）说明书修订日期：2018.07.31Cat number：KGMST-8004Store at 2-8℃ for 12 monthsFor Research Use Only（科研专用）【适用范围】Masson 三色染色试剂盒主要用于结缔组织染色。

用于判定各种组织、器官的病变程度与修复情况，以不同色调显示与区分某些非结缔组织及物质成分；如显示与区分肌肉及其肿瘤组织的正常或异常成分。

尤适用于软组织肿瘤的鉴别诊断。

【主要成分】【染色步骤】1、切片脱蜡处理至水。

2、滴加 1 滴（50-100µl）苏木素染色液（试剂 A）染色 5-10 分钟。

蒸馏水冲掉染液。

3、蒸馏水或自来水冲洗 2-5 分钟。

4、滴加 1 滴（50-100µl）复合染色液（试剂 B）染色 5 分钟。

5、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。

6、滴加 1 滴（50-100µl）磷钼酸（试剂 C）染色 1 分钟。

7、甩干或自然晾干。

8、滴加 1 滴（50-100µl）甲苯胺蓝染色液（试剂 D）染色 5min 左右。

9、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。

10、放入烘箱（50－60 摄氏度）烘干。

中性树胶封片。

【结果】胶元纤维、黏液、软骨、神经纤维呈蓝色；肌肉、弹力纤维呈红色；神经轴索呈粉红色；纤维素呈紫红色；红血球呈橘红色。

细胞核呈蓝紫色。

【注意事项】1、不同的固定液或固定时间以及不一样的组织，染色效果可有差异，要根据显微镜下观察来掌握染色或分化时间。

2、染色液必须充分淹盖组织。

3、每次染色宜用阳性切片作对照。

【有效期】12 个月仅供研究、不用于临床诊断。

肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)简介：肥大细胞(Mast cell)是疏松结缔组织内常见的细胞，常成群的沿着小血管和淋巴管分布，也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围，一般细胞较大，直径约为20-30μm ，呈圆形或椭圆形，胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。

甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。

肥大细胞颗粒呈紫红色，其他呈蓝色。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 取新鲜组织立即固定于10%中性福尔马林固定液中，常规脱水包埋。

2、 切片厚度4-5μm ，常规脱蜡至水。

3、 系列乙醇各，自来水洗2min 。

4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。

5、 自来水稍洗。

6、 TBO 分化液分化，直至细胞核和颗粒清晰，可在显微镜下控制。

7、 自来水稍洗，滤纸吸干或吹风机吹干水分。

8、 95%乙醇1min ，无水乙醇2次，每次2min 。

9、 二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果： 肥大细胞颗粒紫蓝色 背景 淡蓝色注意事项：1、 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 编号 名称 DA0050 Storage 试剂(A): Toluidine Blue O Stain 100ml RT 避光 试剂(B): TBO 分化液 250ml RT 使用说明书 1份相应延长。

2、应注意组织要新鲜，取出后立即固定。

3、甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水，否则容易导致褪色。

4、分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色。

有效期：6个月有效。

相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DF0111 中性福尔马林固定液(10%)DG0005 糖原PAS染色液DH0001 改良Lillie-Mayer苏木素染色液DJ0001 普鲁士蓝染色液(核固红法)DK0022 尼氏染色液(焦油紫法)NH0043 SSC缓冲液(20×,pH7.0)TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。