梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)

trust检测标准
Trust检测，也称为梅毒甲苯胺红不加热血清试验，是一种用于检测梅毒螺旋体抗体的试验方法。

其原理是利用梅毒螺旋体抗原与抗体相结合的原理，检测血清中的反应素。

Trust检测标准主要包括以下几个方面：
正常值范围：Trust检测的正常值范围为阴性或1:2（或1:4）以下。

如果Trust滴度为阴性，说明没有感染梅毒或已经完全治愈。

如果Trust滴度为1:2或1:4，说明体内存在梅毒抗体，但滴度较低，可能处于感染早期或者治愈后复发阶段。

阳性结果判断：如果Trust滴度超过正常值范围，即为阳性结果，说明感染了梅毒螺旋体。

此时需要进一步进行确证试验，如TPPA（梅毒螺旋体颗粒凝集试验）等，以确定是否真正感染了梅毒。

检测方法：Trust检测通常采用静脉采血的方式，将血液分离出血清后进行检测。

也可以采用试纸检测，但准确率相对较低。

临床意义：Trust检测主要用于梅毒的诊断和疗效观察。

如果Trust滴度升高，说明病情在进展或者治疗无效。

如果Trust滴度下降或转阴，说明病情得到控制或者治疗有效。

需要注意的是，Trust检测标准并不是唯一的诊断依据，还需要结合临床其他指标和患者的病史进行综合判断。

同时，
由于Trust检测的灵敏度和特异性存在一定的局限性，可能会出现假阳性和假阴性结果，需要进一步确证和排除其他干扰因素。

梅毒检验 TRUST是什么意思梅毒是由梅毒螺旋体（Treponema Pallidum， TP）导致的一种传染性疾病。

由于多种因素的影响，目前在我国梅毒也属于一种高发疾病，严重威胁着国人的身体健康。

梅毒具有较强致病性及高度传染性，需要尽早发现疾病，尽快采取有效的干预措施，由此可见，检测诊断手段非常重要。

梅毒是一种传染性较强的性传播疾病，主要是通过性接触传播，占比超过95％，也有少部分梅毒螺旋体经母婴垂直传播，一旦被传染上梅毒，往往会对患者的生殖系统造成损伤，严重时还会侵犯其他器官和组织，引发多个部位损伤和多样病灶，危害性较大，因此，做好梅毒筛查工作刻不容缓，以便于在早期及时发现梅毒，对梅毒进行及时的治疗。

当前临床中比较常用的检测方式为血清学检测，酶联免疫吸附法、甲苯胺红不加热血清试验、梅毒螺旋体颗粒凝集试验都具有较强的检测优势，但是它们之间存在着细微的差别。

下面就对TRUST方法检测梅毒螺旋体抗体的诊断价值进行介绍。

一、梅毒的症状表现一期梅毒标志性临床特征是硬下疳。

感染后60到70左右天出现，大多数病人硬下疳为单发生长于生殖器上、无痛无痒、圆形或椭圆形、边界清晰的溃疡高出皮面，疮面较清洁。

有继发感染者分泌物多。

触之软骨样硬度，无明显疼痛，硬下疳的分泌物中含大量梅毒螺旋体，传染性强。

患上梅毒出现硬下疳后1到2周部分病人出现腹股沟或近卫淋巴结肿大，出现梅毒横痃。

二期梅毒多以梅毒疹为特征：有全身症状，硬下疳消退后发生或重叠发生。

苍白螺旋体随血液循环播散，引发多部位损害和多样病灶。

侵犯皮肤、粘膜、骨骼、内脏、心血管、神经系统。

全身症状发生在皮疹出现前，包括发热、头痛、骨关节酸痛、肝脾肿大、淋巴结肿大等。

三期梅毒患者体内及皮损中仍存有少量梅毒螺旋体，传染力弱，但破坏组织力强，常造成组织缺损，器官破坏，已破坏的组织器官则无法修复，可致残甚至危及生命。

二、什么是TRUST梅毒螺旋体侵入人体后可刺激机体产生两类抗体：一类为抗密螺旋体的特异性抗体，而另一类抗体是一种非特异性抗体。

TPPA、TP—AbELISA、TRUST三种方法检测血清梅毒结果分析目的分析TPPA、TP-Ab（ELISA）、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果。

方法采用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、酶联免疫吸附试验（TP-Ab）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）来对比检测150例临床确诊的梅毒阳性血清标本和70例正常血清标本。

结果TP-Ab、TPPA检测方面的灵敏性、特异性显著高于TRUST检测方法，P＜0.05。

结论TPPA具有较高的特异性，可以将其作为梅毒确证实验；TP-Ab（ELISA）法的灵敏度、特异性与TPPA法比较接近，是现阶段对梅毒抗体进行检测的首选方法；TRUST法的特异性较差，可以将其当成TP-Ab（ELISA）法的补充。

标签：TPPA；TP-Ab（ELISA）；TRUST；检测；血清梅毒梅毒作为慢性全身性性传播疾病，主要是因为梅毒螺旋体感染导致的，梅毒的病程较长，临床表现复杂，表现为多样性，会对患者的全身各个器官造成损害；疾病早期主要对黏膜和皮肤造成侵犯，疾病后期则会对中枢神经系统、心血管系统等器官造成侵犯。

现阶段因为人们滥用抗生素药物，导致部分梅毒患者表现为隐性感染，缺乏临床表现，因此在临床诊断中容易出现误诊和漏诊的情况[1]。

世界卫生组织认为，全球输血不安全是导致没有有效筛选传染性因子的主要原因。

所以采用高灵敏度、强特异性的筛选方式，对安全输血非常重要。

本研究主要分析了TPPA、TP-Ab（ELISA）、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果，现将情况做如下分析。

1 资料与方法1.1一般资料1.1.1标本选择选择2014年1月～2016年1月经我院临床确诊的梅毒感染输血患者输血前的标本150例，并选择同期非梅毒感染输血患者的血清标本70例，对血清进行分离后再进行检测。

1.1.2试剂和方法TPPA试剂盒选择富士瑞必欧株式会社所提供的；TP-Ab 试剂盒则是由珠海丽珠试剂有限公司提供；TRUST试剂盒则是由上海荣盛生物技术有限公司所提供；选择SUNRISE酶标仪、新康医疗器械有限公司提供的XK-96型梅毒旋转振荡器和HydroFLex洗板机。

梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂Meidu Jiabenanhong Bujiarexueqingshiyan ZhenduanshijiSyphilis Toluidine Red Untreated Serum Test (TRUST)本品系用性病实验室玻片试验（VDRL）抗原重悬于含有甲苯胺红的特制溶液中制成，检测人血清或血浆中的反应素，用于临床辅助诊断梅毒。

1 基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

2 制造2.1 专用原材料2.1.1 VDRL抗原及VDRL缓冲盐水应符合梅毒快速反应素诊断试剂附录的规定。

2.1.2再混悬液为含有乙二胺四乙酸二钠、氯化胆碱、甲苯胺红、防腐剂的磷酸盐缓冲液。

其中甲苯胺红直径应为2~3μm。

2.1.3 纸卡白色纸卡上印制18mm直径圆圈若干个，纸卡表面光滑，不渗水，不起毛，不吸附蛋白质。

2.1.4 滴头或相应器材使用专用滴头或相应器材，每滴量应符合要求。

2.1.5阳性对照反应素检测为阳性。

2.1.6阴性对照反应素检测为阴性。

2.2 制备程序2.2.1 用VDRL盐水将VDRL抗原配成悬液。

2.2.2 离心弃去上清，沉淀物以“再混悬液”制成均匀的红色混悬液。

2.2.3 阳性对照选用反应素检测为阳性的5份以上人血清或血浆混合。

经60℃加温1小时处理，除菌过滤后于低温保存。

也可选用其它适宜的阳性对照。

2.2.4 阴性对照选用反应素检测为阴性的5份以上人血清或血浆混合。

经60℃加温1小时处理，除菌过滤后于低温保存。

也可选用其它适宜的阴性对照。

2.3 半成品检定按3.1项进行。

2.4 成品2.4.1分批应符合“生物制品分批规程”规定。

2.4.2分装应符合“生物制品分装和冻干规程”，分装后保存于2~8℃。

2.4.3 规格应为经批准的规格。

2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定。

3 检定3.1 半成品检定3.1.1阳性参考品符合率用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。

两种⽅法⽐较差异有显著性,⼼理护理论⽂梅毒是由苍⽩密螺旋体苍⽩亚种（Treponema pallidum subsp，T.pallidum）引起的⼀种性病，可以侵犯⽪肤、黏膜及其他多种组织器官。

近年来，随着发病患者数⽬的增多，梅毒的临床表现和病期也呈现多样化，梅毒⾎清学检测即成了诊断梅毒的常规⼿段和重要依据。

由于该病原体所致的传染病对健康及个⼈名誉造成很⼤伤害（对患者升学、就业、参军、家庭等的影响），因此相关检测结果的正确与否⼀直是⼗分敏感的医学和社会问题。

近⼏年有学者提出并报道了⽼年患者梅毒⾎清学TRUST法实验结果阳性率偏⾼的现象［1，2，3］，我们在⼯作中也留意到有⼀些临床⽆症状、主诉⽆发病史和疾病接触史的⽼年⼈，他们在住院期间做常规检查时发现梅毒螺旋体抗体筛查试验［不加热甲苯胺红实验（TRUST）测定］阳性，经TPPA确诊，结果相差较⼤。

为了深⼊调查分析这⼀现象，本⽂收集了近2年来TRUST阳性的69份⽼年⼈标本资料，现报道如下。

4.统计学⽅法2.试剂和⽅法 资料与⽅法 69例标本均使⽤TRUST法及TPPA法两种⽅法进⾏检测，实验结果显⽰两种检测⽅法存在较⼤的差别，69份TRUST法阳性的标本，⽤TPPA法确认仅有25份标本显⽰为阳性，44例为阴性，阳性率为36.2%。

两种检测⽅法结果⽐较，χ2=61.69，P ＜0.01，阳性率差异有统计学意义(见表1)。

表1 筛查阳性病例两种⽅法检测结果⽐较（略） 常规实验⽅法采⽤甲苯胺红不加热⾎清试验 TRUST法，试剂盒由上海荣盛⽣物技术有限公司提供；配套有专⽤的梅毒旋转震荡器。

确证试验采⽤梅毒螺旋体明胶凝集试验 TPPA法，试剂盒由珠海丽珠公司提供。

均严格按试剂说明书进⾏操作。

讨论 梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病。

⼈体感染梅毒螺旋体后，⾎清中可产⽣抗类脂抗原的⾮特异性抗体和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体(TP�Ab)。

TP�Ab出现早、消失迟，即使经过正规抗梅毒治疗，长时间内仍可从其⾎清中检出其特异性抗体，甚⾄可终⽣检出［4］　。

ELISA法和TRUST法检测梅毒结果比较摘要目的比较酶联免疫吸附试验（ELISA）和梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）检测方法的敏感性和特异性，评价其在临床诊断中的应用价值。

方法应用ELISA和TRUST联合检测1913例血清标本，包括手术前和输血前筛查的1715例以及门诊内镜检查前的198例血清标本，可疑阳性结果采用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）确诊。

结果共检测1913例，用TPPA法确诊32例为阳性。

用TRUST法检出29例阳性，其中26例确诊阳性，3例为假阳性，敏感性为81.3%（26/32），特异性为89.7%（26/29）。

用ELISA法检出33例阳性，其中32例确诊阳性，1例为假阳性，敏感性为100.0%（32/32），特异性为97.0%（32/33）。

结论ELISA法操作相对简单，结果判定可标准化，特异性和敏感性好，可作为梅毒抗体检测较理想的方法，适合大批量标本检测。

TRUST法可作为梅毒筛查方法之一，配合ELISA法使用，特别适合作为临床观察效果的治疗指标。

关键词梅毒螺旋体；梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验；酶联免疫吸附试验；梅毒甲苯胺红不加热血清试验梅毒是一种慢性性传播疾病，具有高度危险性。

该病可累及全身各组织、器官的损害，甚至死亡，也可以呈多年潜伏状态而无症状。

梅毒螺旋体是引起人类梅毒的病原体，梅毒患者是唯一传染源，传染方式有母婴垂直传播、经血传播和性传播。

目前检测梅毒的方法主要有病原学、血清学检测，其中血清学检测又有多种不同的方法，一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验，如TRUST；另一类是采用梅毒螺旋体抗原血清试验，如TPPA、ELISA等[1]。

本文就两种方法在梅毒检测中的比较进行探讨，现报告如下。

1 材料与方法1. 1 标本来源本院2006年6月～2014年6月手术前和输血前筛查的1715例以及门诊内镜检查前的198例血清标本，无性别年龄限制。

1. 2 标本采集采集以上所有标本，用普通试管，清晨空腹采集，1 h内分离血清，严格避免溶血。

TRUST与TP-ELISA同步联合检测在梅毒诊断中的临床应用目的探讨TRUST与TP-ELISA同步联合检测在梅毒诊断中的临床应用。

方法采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)同步联合检测血清中的梅毒抗体，阳性标本再用明胶凝集试验（TPPA）确证，并对结果进行评价。

结果16 383例标本TP-ELISA法检出1019例阳性，阳性检出率为6.22%，经TPPA确证阳性1010例，两种试验结果基本吻合，阳性符合率为99.12%；1019例TP-ELISE阳性标本进行TRUST法检出阳性725例，阳性符合率为71.15%，符合率明显低于TP-ELISA法。

结论TP-ELISA试剂的敏感性远远高于TRUST试剂，由于TPPA试剂较贵，操作较繁琐，不利于批量检测，所以无法直接采用TPPA法。

TP-ELISA法适用大批量检测血清梅毒抗体。

TRUST法可作为病程观察和疗效判断的指标，因此用TP-ELISA结合TRUST同步联合检测血清梅毒抗体。

标签：梅毒；TPPA；TRUST；TP-ELISA梅毒（syphilis）是一种由梅毒螺旋(Treponema pallidum,Tp)引起的、主要经性行为传播的慢性疾病,人类是Tp的唯一自然宿主。

梅毒的临床表现多样,而血损害是主要病理特征。

梅毒的危险性极大,可致多系统病变而出现不可逆性损害,如心血管梅毒、神经梅毒等；也能经胎盘造成胎儿感染,出现早产、畸形,甚至死胎。

因此及时早期地做出诊断并治疗,对控制梅毒的蔓延具有重要意义。

1资料与方法1.1一般资料1.1.1标本来源16 383例血清标本来自2009年1月～2009年12月笔者所在医院门诊及住院患者，60例正常对照血清标本来自笔者所在医院健康体检人员。

1.1.2试剂TRUST试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供,TP-ELISA试剂由北京万泰生物药业股份有限公司生产，TPPA试剂由日本株式会社生产。

甲苯胺红梅毒不加热试验（TRUST）简易操作流程
1、将血液离心；从冰箱中取出甲苯胺红试剂（包括TRUST抗原悬液、阳性和阴性对照血清。

专用滴管及
针头、专用纸卡片）
2、在纸卡上做好标本号的标记（阴性对照、阳性对照、1：1、1：2、1：4、1：8、1：16、1：32；1：
64）孔，如下图
3、
4、分别吸取阴性对照、阳性对照、待检血清或血浆各50ul均匀铺在先对应的纸卡圆圈中（阴性对照、
阳性对照、1：1孔）；
5、在做好标记的纸片1：2、1：4、1：8、1：1
6、1：32；1：64孔中加入50ul生理盐水，再吸取待测
样本50ul加入1：2孔中，然后逐孔混匀稀释，混匀过程动作轻柔，避免产生气泡；最末孔稀释后，弃液50ul；
6、更换新枪头从（1：2向后涂到1：64的话，每涂一个圆圈必须更换一个枪头），将待测稀释液均匀铺
好
7、充分混匀抗原悬液，双手持滴管针孔，垂直均匀滴悬液；
8、纸片置于摇床上， 100转/min，摇动8min；
9、结果判读，与阴性对照对比判读，以凝集反应的最高稀释度作为样本凝集效价；
10、检验结果的解释：
a)阳性反应：可见中等或较大快的粉红色凝块；如下图++++～+++
b)弱阳性反应：可见较小的，明显的粉红色凝块；如下图++～+
c)阴性反应：可见粉红色均匀的沉淀物无凝集物。

如下图。