实验一分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作
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实验一分子生物学实验室的安全规范,常规仪器设备及有关操作,常.实验一分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作【实验目的】(1了解实验室规则与安全;(2了解分子生物学实验室的常规仪器、设备、耗材;枪头,离心管的灭菌(3掌握本实验所用仪器的功能和使用方法,尤其是移液枪的使用。
(4学会常用溶液的配置。
【实验原理】生物技术实验不可避免地需要与各种有毒化学药品、废气废液以及病原微生物等打交道,所以安全工作是实验工作中的重中之重。
忽视生物安全可导致实验室工作人员的感染,有毒物质的泄漏可造成严重后果,因此实验室生物安全问题已越来越受关注,并且已成为全世界共同关注的问题。
溶液的配置和用具的灭菌是实验的第一步,也是很实验成功与否很关键的一步。
【实验器具、药品试剂】一、实验器具1L 蓝盖瓶4个,500mL 蓝盖瓶1个,精细天平,1L量筒2个,500mL 量筒2个, 1L 烧杯2个,移液枪2套,高压灭菌锅, 白色枪头1袋,黄色枪头1袋,蓝色枪头1袋,枪头盒3种各5个,离心管3种规格各1袋,铝饭盒,PH试纸二、药品试剂Tris,HCl,NaCl,EDTA,NaOH,ddH2O,无水乙醇【实验内容】一、实验室常见事故分析及若干安全管理对策二、常规仪器设备的使用(一温度控制系统:冰箱,液氮罐,培养箱,水浴锅,烘箱(二水的净化装置:蒸馏水皿,离子交换器,超纯水(三菌消毒设备:蒸汽消毒锅,紫外线、75%乙醇、0.1%SDS(消毒剂,滤器滤膜, 煮沸消毒(四计量系统:称量系统,液体体积的度量,pH值测量,OD值测量,(五离心机:普通离心机,高速离心机,超速离心机,台式超速离心机(六电泳系统:(七PCR仪:电泳装置,电泳槽装置,(八凝胶成像分析系统:(九干燥设备:真空加热干燥箱,电泳凝胶干燥箱,液氮冷冻干燥,真空泵(十其他:微波炉,制冰机,磁力搅拌器,Tip头、Eppendorf管,常规的玻璃或塑料器皿(十一移液器的使用三、常用储液的配置1.1 L 灭菌双蒸水2.1 L 1 M Tris HCl pH 8.0取121.1 g Tris加入到700 ml H2O中,用HCl调PH值到8.0 (大约需要50 ml HCl,定容到1 L。
分子生物学实验室仪器使用说明书一、引言分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节,正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。
本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导,以确保实验室工作的顺利进行。
二、常用仪器1. 基因扩增仪基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一,其中最常见的是PCR仪。
以下是PCR仪的使用步骤:- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中;- 根据所需的扩增程序,在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数;- 启动PCR仪,开始扩增;- 扩增结束后,及时取出试管或孔板,并进行下一步实验操作。
2. 凝胶电泳仪凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。
以下是凝胶电泳仪的使用步骤:- 准备所需的琼脂糖凝胶,并注入到电泳槽中;- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中;- 在电泳槽两侧连接正负极电源,并设置合适的电压和时间参数;- 启动电源,进行电泳;- 电泳结束后,取出凝胶,进行染色或进一步分析。
3. 离心机离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体,是分子生物学实验室必备的仪器之一。
以下是离心机的使用步骤:- 将待离心的样品均匀加入离心管中,并保持离心管的平衡;- 将离心管放入离心机转盘的相应位置,并注意转盘的平衡;- 根据离心速度和时间要求,设置合适的参数;- 启动离心机,开始离心过程;- 离心结束后,小心取出离心管,注意避免离心管的倾斜或颠倒。
三、常见问题及处理方法1. 仪器出现异常- 若仪器出现异常操作或显示异常,应首先检查是否按照正确的使用步骤进行操作;- 仔细阅读仪器说明书,查看是否存在使用特殊注意事项;- 若仍无法解决问题,及时联系仪器维修人员进行检修。
2. 仪器维护- 每次使用仪器后,应进行基本的清洁和消毒,保持仪器干净整洁;- 定期检查仪器是否正常,如电源是否接触良好,仪器表面是否有明显损坏等;- 根据仪器的要求,及时更换耗材和维护配件。
分子生物学实验室的器材配置分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。
所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器?1. 冰箱:根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱。
最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。
4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。
-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。
0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
2. 培养箱:37℃恒温箱用于细菌的平板培养及分子生物学实验。
3. 恒温培养摇床:用于大肠杆菌等生物工程菌种的扩增。
4. 水浴锅:用于保温并进行各类实验。
25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验,各种生物化学酶反应等试验的保温。
含低温的水浴槽可以用于分子生物学的质粒与基因片段的连接等实验及用于42度的大肠杆菌感受态的热激。
5. 烘箱:主用于烘干实验器皿,有些需要温度高些,有些需要温度低些。
用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。
6. 超纯水机:随着分子生物学的飞速发展,许多实验对水纯度的要求越来越高,用自来水、蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水,磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。
用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。
7. 蒸汽消毒锅:分子生物学所用大部分试剂,而且实验用具都应严格消毒灭菌。
用于小批量物品的随时消毒。
大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒。
8. 滤器滤膜:不耐高温、高压的试剂用其处菌。
9.各种天平:台秤、精密电子分析天平,用于精确称量各类试剂。
10.液体体积的度量:量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等。
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介.第一篇:实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介.实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介一、实验目的熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用二、实验原理1、恒温气浴摇床:用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养,发酵,杂交,生化反应及酶和组织研究等。
2、超净工作台:用于分子生物学无菌操作。
3、低温台式高速离心机:用于分离纯化DNA和蛋白质等,如基因片段的分离,蛋白酶的沉淀和回收等。
4、微量移液管:是连续可调的,计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。
有多种规格:①0.5-10μL②10-100μL③20-200μL④100-1000μL。
5、电泳仪:用于确定大分子物质的分子量以及鉴定物种亲缘关系的仪器。
6、PCR仪:用于目的基因的扩增,是一对寡糖核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧,从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段。
主要用于基础研究和应用研究等领域。
7、灭菌锅:用于细菌和细胞培养及核酸等有关实验使用的试剂,器皿及实验用具的严格灭菌。
三、实验仪器恒温气浴摇床、超净工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、灭菌锅、PCR仪、电泳仪。
四、实验步骤(一)、恒温气浴要穿的使用:1、样品瓶牢固放入弹簧夹中2、接通电源开关,仪器进入准备状态3、参数设定,(设定温度、时间、转速等参数)4、按启动键仪器开始工作,按暂停键可暂停托盘的旋转;5、按电源键,显示屏显示消失,关闭电源总开关(二)、超净工作台的使用1、使用工作台时,先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面,然后用消毒剂擦拭消毒。
2、接通电源,提前30分钟打开紫外灯照射消毒,处理净化工作区内工作台表面积累的微生物,15分钟后,关闭紫外灯,开启送风机。
3、工作台面上,不要存放不必要的物品,以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4、操作结束后,清理工作台面,收集各废弃物,关闭风机及照明开关,用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
分子生物学实验室仪器使用方法说明书一、实验室仪器的介绍1.1 仪器名称:分子生物学实验室仪器1.2 仪器型号:XXX1.3 仪器功能和用途:该仪器主要用于分子生物学实验室中的基因分析、DNA测序、蛋白质分析等实验。
二、仪器安装与准备2.1 确保电源连接:将仪器的电源线插入电源插座,并确保稳定的电源供应。
2.2 连接通信接口:根据仪器所要求的通信接口,将该仪器与电脑或其他设备进行连接。
2.3 检查仪器附件:检查仪器包装盒内的各个附件是否齐全,并确保它们的完好无损。
三、仪器基本操作步骤3.1 仪器的启动与关机3.1.1 启动仪器:按下仪器的电源开关,等待仪器正常启动。
3.1.2 关闭仪器:按下仪器的电源开关,等待仪器正常关闭,并断开电源连接。
3.2 仪器系统设置3.2.1 打开仪器软件:在电脑上打开仪器所需的软件,并等待软件正常加载。
3.2.2 系统配置:根据实验需求,对仪器系统进行必要的配置,例如调整仪器的温度、位置等参数。
3.3 样品准备与加载3.3.1 样品制备:按照实验要求,制备所需的样品,并确保样品的纯度和浓度符合要求。
3.3.2 样品加载:将制备好的样品按照仪器的要求进行加载,确保样品的正确放置和固定。
四、仪器操作注意事项4.1 安全操作:在操作仪器时,应穿戴实验室所要求的防护设备,并遵守实验室的安全规范。
4.2 仪器维护与清洁:定期对仪器进行清洁和维护,保持仪器的良好状态和运行效果。
4.3 实验记录与数据保存:及时记录实验过程和结果,并进行数据的保存和备份,以便后续分析和研究。
五、故障排除5.1 常见故障:列举常见的仪器故障和可能的原因,例如电源故障、通信故障、样品加载故障等。
5.2 故障排查方法:针对每种故障,提供相应的排查方法和解决方案。
5.3 遇到无法解决的故障时,应及时联系仪器维修人员或生产厂家进行维修。
六、仪器的维护与保养6.1 清洁与消毒:定期对仪器进行清洁和消毒,确保仪器的卫生和操作的安全。
实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。
配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
(2)设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。
(3)将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。
(4)按控制面板的运转键,离心机开始运转。
在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。
(5)在预先设定的运转时间内(不包括减速时间),离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。
生化工程实验室分子生物学操作规范大全第一篇:生化工程实验室分子生物学操作规范大全生化工程实验室分子生物学操作规范1.手套使用原则上不论什么实验都应带手套操作,特别是: 1)无菌操作;2)与RNA有关的所有操作;3)重要克隆菌的挑单克隆、扩增、保存等;4)与有毒试剂有关的所有操作,比如用EB染胶,用有机溶剂提取(在通风橱内操作)。
2.移液枪及枪头使用 1)在合适量程范围内使用; 2)移液枪定期校对;3)枪头必须插紧,防止脱落以及吸样体积不够;4)不要水平放置带有枪头的枪; 5)使用后挂在枪架上,不可以乱放;6)装枪头时必须戴手套,灭菌后50-70℃烘干后使用;7)加样体积应为枪头最大体积的20-100%,低于该范围的用小一号的枪头。
3.加样1)加用任何试剂前要将试剂混合(除饱和酚或一些特别的有机试剂);2)加样的枪头应在试剂的中间表层吸收,防止枪头外壁带用过多试剂,改变加样试剂体积(除饱和酚外,一定要伸到饱和酚液的下部吸取);3)加酶时酶要放置在冰上,应注意体积准确,外壁不带,内壁吹打干净。
注意用枪头从反应体系的管底吸上,反复吹打。
4.混匀1)除上述特殊试剂外,所有试剂在使用前后都要充分混匀;多数分子操作在加样后、反应前都要充分混匀;2)0.2ml和0.5ml管30%体积以下可进行枪混匀和擦边混匀;3)0.5-1.5ml管15-40%体积时,试管30%体积以下时可使用漩涡混匀器混匀;4)0.5-1.5ml管30-70%体积,试管30-70%时可进行颠倒混匀。
5.水浴锅1)需提前10-30分钟调好温度,稳定后才能使用; 2)水位不可以低于水浴锅高度的50%,及时添水或换水;3)使用合适的浮子;4)使用完毕及时关闭电源。
6.离心1)离心如果需要预冷,应至少预冷15min; 2)要质量对称放置;3)不合适的离心管应外套其他型号的离心管;4)离心后如果要移动,应放在离心管架上移动,防止破坏液面;5)短暂离心要在3000-8000rpm范围内,时间应短于30秒; 6)离心完毕应及时清理离心机。
初中生物年度工作报告分子生物学实验室常用仪器及使用方法分子生物学实验室(p2设计)1.功能:进行分组织培养前实验室设计组织培养前实验室设计在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。
实验室的大小取决于工作的目的和规模。
以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。
在设计组织培养实验室时,应按组织培养程序来没计,避免一些环节倒排,引起日后工作混乱。
植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。
要做到无菌的条件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
实验室设计原则:保证无菌操作,达到工作方便,防止污染。
实验室组成:化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室(接种室)、培养室、细胞学实验室、其他小型仪器设备。
1)化学实验室(准备室):完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。
主要设备:药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器.2)洗涤、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。
主要设备:水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器(如烘箱)等。
3)无菌操作室(接种室):主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。
主要设备:紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针)等。
接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。
配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。
接种室要求干爽安静,清洁明亮。
在适当位置吊装1~2盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
最好安装一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。
接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。
进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。
1)台式高速离心机2)恒温水浴箱3)枪式移液器4)灭菌的EP管和Tip头1)溶液1: 25% 蔗糖50mmol/L 50mmol/L 500ug/ml 100ug/ml Tris-Hcl,pH8.0 EDTA,pH8.0溶菌酶(现用现配) RNase2)溶液Ⅱ:100mmol/L Tris-Hcl,pH8.01% SDS400ug/ml 蛋白酶K3)酚:氯仿:异戊醇(25:24 :1)4)氯仿:异戊醇(24:1)5) 3mol/L NaAc(pH5.2)6)异丙醇或者无水乙醇7) 70%乙醇8) TE缓冲液:10mmol/L Tris-Hcl,pH8.01mmol/L EDTA ,pH8.01) 5mL细菌过夜培养, 5000rpm离心10分钟,去上清液。
2)将菌体细胞悬于250uL溶液1中, 37°C水浴保温过夜。
3)加250uL溶液Ⅱ,55°C水浴保温4小时。
4)加0.9倍体积的酚/氯仿/异戊醇(25:24 :1),轻轻混匀,于14000rpm离心10分钟,转移水相至新的Ep管,重复步骤4一次。
5)向转移的水相中加入0,9倍体积的氯仿/异戊醇(24:1),轻轻混匀,于14000rpm离心10分钟,转移水相至新的Ep管,重复步骤5一次。
6)向转移的水相中加入0.1倍体积的3mol/L NaAc和0.7倍体积的异丙醇(或者2.5倍体积的无水乙醇),冰上放置30分钟。
7) 14000rpm离心20分钟,弃上清,用0.5mL70%乙醇洗涤沉淀一次,弃上清,沉淀于室温干燥。
8)将DNA沉淀溶解于15ul TE缓冲液中,-20°C保存。
9)进行DNA含量和纯度检测,琼脂糖凝胶电泳鉴定。
1)研磨缓冲液:称取59.63gNaCl,13.25g柠檬酸三钠, 37.2gEDTA-Na分别溶解后合并为一,用0.2mol/L的NaOH 调至pH7.0,并定容至1000ml。
2) 10 SSC溶液:称取87.66gNaCl 和44.12g柠檬酸三钠,分别溶解,一起定容至1000ml。
1培养箱在分子生物学试验中,有很多反应都是在特定温度下进行的,这时就需要一个控温的装置.例如:用于细菌的平板培养,我们通常设定为37℃于培养箱倒置培养;其他分子生物学实验如酶切等需要25℃,30℃,37℃等条件.2冰箱冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器.分子生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存.具体来说,不同温度下保存的物品如下:a.4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等.b.-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等.c.-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液,感受态等的保存.d.0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验.3摇床摇床是实验室常用仪器,一般有常温型和低温型两种.对于分子生物学实验室,如果能配置低温型摇床,就可以适应不同的实验需求.例如:用于大肠杆菌,酵母菌等生物工程菌种的振荡培养及蛋白的诱导表达,培养通常为28度和37度,诱导表达需要20-37度;在感受态的制备过程中,需要有18度的温度控制;用于蛋白凝胶的染色脱色时振荡,常温使用;用于大肠杆菌常规转化时振荡复苏,常为37度.对于控制温度低于室温时,我们需要低温型摇床来控温.4水浴锅水浴锅也是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分.例如,用于42度的大肠杆菌转化时的热激反应;用于DNA杂交过程中水浴控温.5烘箱烘箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干.烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择.例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干;用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干.6纯水装置纯水装置包括蒸馏水器和纯水机.蒸馏水器的价格便宜,但在造水过程中需要有人值守;纯水机价格高些,但是使用方便,可以储存一定量的纯水.纯水使用也有不同的级别,一般实验用水需要纯水,用于PCR、DNA测序、酶反应均需要超纯水.7灭菌锅分子生物学所用到的大部分实验用具都应严格消毒灭菌.包括实验物品、试剂、培养基等.灭菌锅也有不同大小型号,有些是手动的,有些是全自动的.用户需要根据自己的需要选购.8天平天平用于精确称量各类试剂.实验室常用的是电子天平,电子天平按照精度不同有不同的级别.9液体量器液体量器用于精密量取各类液体.常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯.10pH计用于配置试剂时精确测量PH值,从而保证配置的溶液的精确性.有时也需要利用pH 计测定样品溶液的酸碱度.11分光光度计分光光度计通过测定吸光值,从而用于分析样品核酸和蛋白的含量及纯度;同时也可以测定培养菌液的浓度.12离心机离心机有冷冻和常温之分.主要用于收集微生物菌体、细胞碎片以及其他沉淀物.有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境.例如在感受态制备过程中必须保证低温环境,所以需要冷冻离心机.13超净工作台分子生物学中凡是涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成,还有感受态制备,转化反应等,都需要无菌的环境.14电泳系统实验室常用的电泳主要是三种:水平电泳用于核酸DNA/RNA的琼脂糖电泳检测;垂直电泳用于蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测;转印电泳用于将蛋白转印到膜上做western 检测.15PCR仪PCR仪有不同的类型,分别用于不同的实验.普通和梯度PCR仪用于基因克隆和基因检测过程中DNA/RNA的扩增.荧光定量PCR仪用于核酸定量分析、基因表达差异分析、单核苷酸多态性检测、甲基化检测.原位PCR仪用于鉴定和定位带有靶序列的细胞在组织中的位置.16凝胶成像分析系统/紫外检测仪凝胶成像系统用于对染色后的核酸琼脂糖电泳胶和蛋白聚丙烯酰胺凝胶的观察和拍照,有些可以进行切胶操作.紫外检测仪可以用于对染色后的核酸琼脂糖电泳胶的观察,胶回收时切胶操作,但是不能连接电脑拍照.17制冰机实验室常用的是雪花制冰机,制冰机一般是按每日制冰量分成不同型号.分子实验室中制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境,以减少核酸酶或蛋白质酶的水解.感受态制备也需要长时间冰浴.18磁力搅拌器在配置试剂过程中,有些试剂较难溶解,这时需要借助磁力搅拌器.磁力搅拌器可以加速溶解固体内容物.磁力搅拌器一般带加热功能.19生物安全柜分子实验中涉及的试剂和样品很多是有毒的,对于操作人员来说伤害较大.为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散,可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护.20微波炉和电炉用于溶液的快速加热,电泳琼脂糖凝胶的加热溶化配制,固体培养基的加热溶化.21液氮罐分子生物学实验中感受态细胞的制备需要液氮处理.感受态的保存也可以存于液氮中.22微管移液器微管移液器也有不同型号,是用于准确量取特定体积的溶液.。
《分子生物学》实验讲义实验一分子生物学实验基础知识及常用仪器介绍实验二质粒DNA分离纯化实验三琼脂糖凝胶电泳实验四聚合酶链反应(PCR)检测质粒DNA实验五限制酶切鉴定质粒DNA实验一分子生物学实验基础知识及常用仪器介绍一、实验目的了解分子生物学实验特点,了解分子生物学实验室常用设备及基本实验操作。
二、实验内容1.分子生物学实验知识⑴严格操作规程分子生物学实验一般比较复杂,如所用试剂多、操作步骤多、实验时间长等,因此为保证实验效果,在实验室中一定要有整体观念,严格按照操作规程进行。
⑵耐心细致操作实验中不能急于求成,特别是对于初入门者,应反复操作,积累经验。
⑶习惯微量操作在分子生物学实验中,试剂的用量往往很少,常常细到1ul液体、ug或ng固体,这是平常肉眼很难看到的,所以刚刚接触实验的人往往感到不习惯,总是担心要取的东西能否看到、准不准确,操作的样品会不会丢失,总是想加大反应体积,以为越多越好。
这些观念都是错误的。
只有定时定量加入液体,才能保证实验成功,所以平时应加以练习,逐渐建立微量操作的观念才能解决好问题。
⑷防止实验污染分子生物学实验的对象主要是核酸,不同生物材料的DNA和DNA之间,不同的样品之间,核酸酶等蛋白酶与核酸之间,产物与反应物之间都有可能造成污染,最终导致实验的失败。
故要从所用试剂、仪器设备、耗材及操作人员等方面进行防止污染的操作。
⑸正确处理试剂分子生物学实验中对试剂的要求十分严格,包括试剂的等级、配制、除菌储备等各方面均有严格要求。
⑹注意实验安全分子生物学实验中,操作者常会接触一些对人体有害的试剂,必须实验安全要求进行实验操作,否则会给实验室甚至整个人类带来巨大的危害。
2.分子生物学实验常用仪器介绍⑴微量取液器⑵水纯化装置(离子交换器、超纯水装置)⑶离心机(低速、高速、超速)⑷电泳装置(电泳仪、电泳槽)⑸灭菌设备(高压蒸汽灭菌锅、过滤除菌器)⑹超净工作台⑺PCR仪⑻凝胶成像系统(紫外分析仪、核酸凝胶电泳图谱的记录)⑼温度控制设备(冷冻设备、培养箱、水浴箱、烤箱)⑽其它设备(紫外可见分光光度计、微波炉、凝胶干燥器、真空干燥仪)3.分子生物学基本实验操作⑴基因组DNA的分离与纯化(核酸浓度和纯度测定)⑵真核细胞mRNA的分离与纯化⑶质粒DNA的提取⑷PCR基因扩增实验⑸限制性内切酶酶切实验⑹DNA重组技术⑺DNA转移技术⑻DNA测序:化学法、双脱氧链终止法⑼核酸探针的制备技术:末端标记、PCR法制探针、非放射性探针⑽分子杂交技术:Southern印迹、Northern印迹和Western印迹4.微量移液器的使用可调节微量移液器标准操作程序(适用的液体:水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液):⑴调节数字至所需体积;⑵装上吸嘴(不同规格的移液器用不同的吸头),注意气密性);⑶按到第一档,垂直进入液面几毫米;⑷缓慢松开控制按钮(否则液体进入吸头过速会导致液体倒吸入移液器内部吸入体积减少);⑸停顿1s后将吸嘴提离开液面;⑹平稳按压打出液体。
分子生物学领域常用的实验室仪器介绍分子生物学领域是现代生命科学的重要分支之一,它研究的是生物分子层面的生命过程,旨在深入揭示生命的本质和机制。
而在分子生物学研究中,实验室仪器则是不可或缺的工具,它们不仅可以帮助研究者进行实验操作,还能够提高实验结果的可靠性和精度。
本文将为大家介绍分子生物学领域常用的实验室仪器。
一、PCR扩增仪PCR(聚合酶链式反应)扩增技术是分子生物学领域中最常用的实验技术之一,是通过对核酸单链进行不断反复的扩增,从而获得足够多的样品用于后续的实验研究。
PCR扩增仪是一种能够精确控制温度并产生稳定温度的设备,它可以通过快速升温和降温的方式对PCR反应的反应体系进行加热和冷却,以满足PCR反应各个步骤所需的不同温度条件。
根据不同的实验需求,PCR扩增仪通常有单块、双块和四块等不同规格型号。
二、电泳仪电泳是一个常见的探测和分离生物分子的方法,尤其在DNA和RNA分子的研究中应用广泛。
电泳仪则是进行电泳实验的设备。
电泳仪根据不同的实验需求、对样品大小和数量的要求,可以选择垂直电泳仪、平板电泳仪、毛细管电泳仪、聚丙烯酰胺凝胶等不同类型的电泳仪。
其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是目前应用最广泛的电泳仪之一,它可以以高效、稳定和可重复的方式对生物分子进行分离、检测和纯化。
三、荧光定量PCR仪荧光定量PCR(实时PCR)技术是PCR技术的一种延伸,它通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化动态监测扩增产物的累积情况,从而实时定量测定PCR反应产物的含量。
荧光定量PCR仪是荧光定量PCR技术实验的核心设备,它通过荧光信号的强度或增长速率来定量PCR反应物质的含量。
荧光定量PCR仪可根据实验数量和复杂程度的不同分为单通道和多通道两种类型。
四、显微镜生物显微镜是分子生物学领域中经常使用的设备,它主要用于观察、研究和记录细胞和组织样品的结构和形态特征,以及细胞间和分子间的相互作用和动态过程。
在生物领域中广泛应用多种类型的显微镜如荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜等。