微生物基本试验原理及操作教学文稿
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一、实验目的1. 学习并掌握微生物的纯系分离技术。
2. 掌握微生物的接种方法和培养技术。
3. 了解微生物在不同培养基上的生长特征。
二、实验原理微生物的纯系分离是指从混杂的微生物群体中分离出单一菌种的过程。
常用的分离方法有平板划线法、稀释涂布法等。
微生物的培养是指为微生物提供适宜的生长条件,使其能够繁殖和生长的过程。
培养基是微生物生长的营养来源,包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 土壤样品- 琼脂培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)- 蒸馏水- 无菌接种环- 灭菌器- 培养皿- 显微镜- 移液器- 恒温培养箱2. 实验仪器:- 电子天平- 高压蒸汽灭菌器- 酶标仪- 离心机四、实验步骤1. 土壤样品的采集与处理- 采集土壤样品,放入无菌容器中。
- 将土壤样品与蒸馏水按1:10的比例混合,搅拌均匀。
2. 稀释涂布法分离微生物- 取适量的土壤样品稀释液,用无菌移液器吸取适量样品,均匀涂布在琼脂培养基平板上。
- 将平板倒置放入恒温培养箱中培养。
3. 平板划线法分离微生物- 取适量的土壤样品稀释液,用无菌接种环蘸取样品,在琼脂培养基平板上划线。
- 将平板倒置放入恒温培养箱中培养。
4. 观察和记录- 观察平板上生长的菌落,记录菌落特征,如大小、形状、颜色等。
- 用无菌接种环挑取单个菌落,进行纯化培养。
5. 纯化培养- 将挑取的单个菌落接种到新的琼脂培养基平板上。
- 将平板倒置放入恒温培养箱中培养。
6. 观察和记录- 观察纯化后的菌落,记录菌落特征,如大小、形状、颜色等。
- 将纯化后的菌落接种到液体培养基中,进行扩大培养。
7. 扩大培养- 将纯化后的菌液用无菌移液器移入无菌锥形瓶中。
- 加入适量的琼脂,搅拌均匀。
- 将锥形瓶放入高压蒸汽灭菌器中灭菌。
- 将灭菌后的锥形瓶冷却至室温,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀。
- 将锥形瓶放入恒温培养箱中培养。
8. 观察和记录- 观察扩大培养后的菌液,记录菌液的颜色、透明度等特征。
微生物实验教案实验一、实验目的:1.了解酵母菌的呼吸过程;2.学习使用显微镜观察微生物;3.培养学生的观察能力和实验操作能力。
二、实验材料:1.酵母菌培养液;2.盖玻片;3.种子盘;4.显微镜;5.显微镜玻璃片。
三、实验步骤:1.将适量的酵母菌培养液倒入种子盘中;2.在盖玻片上滴一滴酵母菌培养液;3.将盖玻片盖在种子盘中,使酵母菌培养液与空气充分接触;4.将培养好的酵母菌制备好的盖玻片放于显微镜上;5.用10倍的放大倍数观察盖玻片上的酵母菌。
四、实验原理:1.酵母菌是一种单细胞真菌,通过呼吸过程从有机物中释放出能量;2.酵母菌在呼吸的过程中,吸收氧气进行有机物分解,产生二氧化碳和水,释放出能量;3.在酵母菌呼吸过程中,可以观察到酵母菌的运动、分裂和部分内部细胞结构。
五、实验注意事项:1.操作时需注意实验室卫生,保持实验台面整洁;2.使用显微镜时,需小心操作,以免损坏仪器;3.为了观察更清晰的图像,可以调整显微镜的焦距和光亮度;4.实验结束后要清洗仪器,并将实验台面清理干净。
六、实验结果分析:1.通过显微镜观察可以看到酵母菌的细胞结构;2.可以观察到酵母菌的运动和分裂情况;3.在呼吸的过程中,可以观察到酵母菌释放出二氧化碳气泡。
七、实验延伸:1.可以通过样品的收集和培养,观察不同环境下酵母菌的生长情况;2.可以进行控制实验,比较不同实验条件下酵母菌的呼吸速率差异。
八、实验总结:通过本实验,我们了解了酵母菌的呼吸过程,并学习了使用显微镜观察微生物。
实验中我们观察到了酵母菌的运动、分裂和部分细胞结构。
通过这个实验,我们不仅培养了我们的观察能力和实验操作能力,同时也更加了解了微生物的基本特性。
微生物检验(完整版)微生物检验是一种用于检测和鉴定微生物的方法,它在医学、食品安全、环境保护等领域都有着重要的应用价值。
微生物检验可以帮助人们了解微生物的种类、数量、分布以及对人类和环境的影响,从而采取相应的控制和预防措施。
本文将从微生物检验的基本原理、常见方法和应用领域等方面进行介绍。
一、微生物检验的基本原理。
微生物检验的基本原理是通过对样品中的微生物进行分离、培养、鉴定和计数,从而得到微生物的种类和数量。
其主要包括以下几个步骤:1. 取样,首先需要从待检样品中取得适当的样品,如食品、水、空气、土壤等。
取样的方法和条件需根据具体的检验要求和标准来确定。
2. 分离,将样品中的微生物分离出来,通常采用的方法有稀释涂布法、滤膜法、过滤法等。
分离出的微生物可以进行后续的培养和鉴定。
3. 培养,将分离出的微生物进行培养,提供适当的营养物质和环境条件,促使微生物的生长和繁殖。
培养的时间和温度等条件需根据不同的微生物种类来确定。
4. 鉴定,对培养出的微生物进行形态学、生理学和生物化学特性等方面的鉴定,确定其种属和数量。
常用的鉴定方法有显微镜观察、生化试验、分子生物学方法等。
5. 计数,对培养出的微生物进行计数,得到微生物的数量。
常用的计数方法有平板计数法、膜过滤法、涂片计数法等。
二、微生物检验的常见方法。
微生物检验的常见方法主要包括传统方法和现代方法两大类。
1. 传统方法,传统方法主要包括涂布法、滤膜法、过滤法、薄层法等。
这些方法简单易行,成本低廉,适用于一般的微生物检验需求。
但传统方法通常需要较长的培养周期,且对微生物的种类和数量有一定的限制。
2. 现代方法,现代方法主要包括PCR法、蛋白质质谱法、流式细胞术等。
这些方法具有高灵敏度、高特异性和高通量的特点,能够快速准确地检测和鉴定微生物。
但现代方法的设备和技术要求较高,成本较高,适用于对微生物检验有较高要求的领域。
三、微生物检验的应用领域。
微生物检验在医学、食品安全、环境保护等领域都有着重要的应用价值。
微生物实验报告范文一、实验目的1.了解微生物在日常生活中的广泛应用;2.探究微生物的生长特性和繁殖能力;3.学习一种简单的微生物染色技术;4.观察并研究微生物生态系统。
二、实验原理本实验采用常见的革兰氏染色法,革兰氏染色是细菌分离鉴定的重要方法之一、此方法能将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类,从而对细菌种类和数量进行初步分析。
三、实验器材和药品器材:培养基、恒温箱、显微镜、移液器、架子、微观移液棒、塑料杯、锡纸;药品:蓝尼罗红、革兰氏染色药液(碘液、乙醇、碱性溶液、脱脂牛奶)。
四、实验步骤1.选取培养基,将固体培养基倒入塑料杯中;2.加入足够的蓝尼罗红;3.使用移液器将所需的微生物液滴于培养基上;4.用移液器挖取适量的微生物液,均匀滴到培养基上并轻轻摇晃使其均匀分布;5.将杯子放入恒温箱中,以适合微生物生长的温度进行培养;6.观察培养基上的微生物生长情况,进行观察和记录;7.观察菌落特征,进行革兰氏染色。
五、实验结果和讨论通过实验观察,我们发现微生物在培养基上生长迅速。
菌落在培养基上形成并逐渐扩大,最终形成肉眼可见的结构。
通过革兰氏染色,我们能辨别出革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏染色能够将革兰氏阳性菌染色为紫色,而革兰氏阴性菌则被染色为红色。
通过观察染色后的微生物,我们可以从中获得有关细菌种类和数量的信息。
在实验中还观察了微生物的生态系统。
我们发现不同微生物在培养基上的生长速率和菌落形状各异,这可能是由于不同的细菌种类或菌株之间的差异造成的。
六、实验结论通过本次实验,我们了解了微生物在日常生活中的广泛应用,增加了对微生物的认识。
革兰氏染色技术的运用使我们能够进一步了解细菌的种类和数量。
同时,我们还观察并研究了微生物生态系统,发现微生物的生长速率和形态特征有一定差异。
七、实验中的注意事项1.在进行微生物培养实验时,要保持操作环境的清洁,避免细菌污染;2.实验过程中需要严格控制温度;3.在染色过程中,应注意使用染色药液的顺序和浓度。
平板菌落计数法操作步骤(精)教学⽂稿平板菌落计数法操作步骤(精)平板菌落计数法⼀、⽬的要求学习平板菌落计数的基本原理和⽅法。
⼆、基本原理平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微⽣物充分分散为单个细胞,取⼀定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞⽣长繁殖⽽形成的⾁眼可见的菌落,即⼀个单菌落应代表原样品中的⼀个单细胞。
统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
但是,由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的⼀个单菌落也可能来⾃样品中的2~3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低。
现在常使⽤菌落形成单位。
该计数法的缺点是操作较繁,结果需要培养⼀段时间才能取得,⽽且测定结果易受多种因素的影响,但是这种计数⽅法最⼤的优点是可以获得活菌的信息,所以被⼴泛⽤于⽣物制品检验,以及⾷品、饮料和⽔等含菌指数或污染度的检测。
三、器材⼤肠杆菌悬液,LB琼脂培养基,1mL 5mL⽆菌吸管,⽆菌平⽫,⽆菌⽔,⽆菌试管,试管架和记号笔等。
四、操作步骤1、编号取⽆菌平⽫9套,分别标明为10-4、10-5、10-6各三套,另取6⽀⽆菌试管分别标记为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
2、稀释⽤1mL⽆菌吸管吸取1mL已充分混匀的⼤肠杆菌菌悬液,精确地放0.5mL⾄10-1的试管中,此即为10倍稀释,将多余的菌液放回原菌液中。
将10-1试管充分振荡、混匀。
另取⼀⽀1ml吸管插⼊10-1试管中来回吹吸菌液三次,进⼀步将菌体分散、混匀。
动作不要太猛太快,吸时插⼊,吹时提出,再⽤此吸管吸取10-1菌液1mL精确地放0.5mL⾄10-2试管中,此即为100倍稀释,依次类推,3、取样⽤三⽀1ml⽆菌吸定分别吸取10-4、10-5、10-6的稀释菌悬液各1mL对号放⼊编好号的⽆菌平⽫中,每个平⽫放0.2mL4、倒平板尽快向上述盛有不同稀释菌液的平⽫中倒⼊融化后冷却⾄45度的LB培养基约15-20ml,置⽔平位置迅速旋动平⽫,使培养基与菌液混合均匀。
一、实验目的1. 熟悉微生物实验室的基本操作规程和安全知识。
2. 掌握微生物分离纯化的基本方法,包括平板划线法和稀释涂布平板法。
3. 学会观察和识别不同微生物的菌落特征。
4. 了解微生物的培养方法和培养基的配制。
二、实验原理微生物分离纯化的基本原理是利用微生物在生长过程中对营养、氧气、温度等环境条件的需求差异,通过选择合适的培养基和分离方法,使混合微生物中的某一类微生物获得纯化。
平板划线法是将微生物在固体培养基表面划线,使微生物在培养基表面逐渐稀释,最终获得单菌落。
稀释涂布平板法是将微生物稀释液均匀涂布在固体培养基表面,使微生物在培养基表面形成单菌落。
三、实验材料与仪器材料:1. 菌种:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌2. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、营养琼脂培养基3. 稀释液:无菌生理盐水4. 工具:无菌镊子、无菌滴管、酒精灯、培养皿、平板划线器、显微镜等仪器:1. 培养箱2. 显微镜3. 灭菌器四、实验步骤1. 平板划线法:a. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上。
b. 用无菌镊子取一端菌液,在平板表面划线,依次划三横三纵,使菌液逐渐稀释。
c. 将平板倒置,放入培养箱中,37℃培养24小时。
d. 观察菌落特征,记录菌落形状、大小、颜色等。
2. 稀释涂布平板法:a. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别接种于无菌生理盐水中,制成10^-3、10^-5、10^-7等不同浓度的稀释液。
b. 取适量稀释液,用无菌滴管均匀涂布在营养琼脂培养基平板上。
c. 将平板倒置,放入培养箱中,37℃培养24小时。
d. 观察菌落特征,记录菌落形状、大小、颜色等。
3. 显微镜观察:a. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的菌落分别挑取少量,制成悬液。
b. 将悬液滴于载玻片上,加盖玻片。
c. 在显微镜下观察细菌的形态、大小、排列等特征。
五、实验结果与分析1. 平板划线法:a. 金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色,表面光滑,边缘整齐。
微生物的实验实验一油镜的使用方法与革兰氏染色实验目的:掌握油镜的使用方法与革兰氏染色的方法实验原理: 革兰染色法⑴革兰阳性菌细胞壁结构较致密,肽聚糖层厚,脂质含量少,乙醇不易透入;革兰阴性菌细胞壁结构疏松,肽聚糖层薄,脂质含量多,乙醇易透入。
⑵革兰阳性菌等电点(pI 2~3)比革兰阴性菌(pI 4~5)低,在相同pH条件下,革兰阳性菌所带负电荷比革兰阴性菌多,故与带正电荷的结晶紫染料结合较牢固,不易脱色。
⑶革兰阳性菌菌体含大量核糖核酸镁盐,可与碘、结晶紫牢固结合,使已着色的细菌不被乙醇脱色;革兰阴性菌含核糖核酸镁盐很少,故易被脱色。
实验步骤: 1.涂片取洁净载玻片1张,用接种环取1~2环生理盐水放于载玻片上,用灭菌的接种环在固体培养基上挑取少许细菌与盐水混合,涂布成直径1cm左右的菌膜(可视挑取菌落的多少涂片范围相应变化)。
若采用液体培养物,可直接取1~2环菌液涂布。
接种环须经火焰灭菌方可放回原处,以免造成污染。
2.干燥涂片最好在室温中自然干燥,或将标本接种面向上,置酒精灯火焰高处慢慢烘干,切勿在火焰上烤。
3.固定干燥后的标本面向上迅速通过火焰3次,这样既可杀菌,又能将细菌固定在玻片上,以免玻片上细菌在染色过程中被水冲洗掉。
2.染色(1)初染:滴加结晶紫染液2~3滴于涂布细菌处,覆盖菌膜,1min后以细水漫过轻洗,将积水甩干。
(2)媒染:滴加卢戈碘液同上,1min后水洗,并将标本片上的积水甩净。
(3)脱色:加95%乙醇数滴于标本片上,轻轻摇晃数秒,斜持玻片使乙醇流掉,再滴加乙醇直至无紫色脱下为止(约30s,灵活掌握时间),细水冲洗,甩干。
(4)复染:滴加石炭酸复红染液,30s~1min后水洗,用吸水纸吸去积水。
3. 镜检用油镜观察,并判断细菌的染色性。
记录实验结果。
4.实验后处理擦干油镜镜头,整理、清洁显微镜,把显微镜放回原处,把标本片放入消毒缸中。
注意事项: 1.标本片涂的太薄或太厚,菌体分散布不均匀,都可影响染色结果。
微生物学实验教案第一篇:微生物学实验教案实验一显微镜的构造和使用方法一、实验目的及要求1.了解显微镜的构造和性能2.掌握显微镜的正确使用和维护方法二、原理微生物最显著的特点是个体微小,必须借助显微镜才能观察它们的个体形态和细胞构造,熟悉显微镜和掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。
本实验主要介绍目前微生物学研究中最常用的普通光学显微镜的结构和使用方法,目的在于使同学们通过本实验,对光学显微镜有比较全面的了解,并重点掌握明视野普通光学显微镜中油镜的使用。
三、显微镜的构造和性能1.构造(1)机械系统:镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、推进器、调节螺旋。
(2)光学系统:目镜、物镜、聚光器、反光镜、滤光片。
2.性能(1)分辨力和数值孔径分辨力用D表示,D=0.5×(λ/N.A)N.A=n×Sin(α/2)N.A为数值孔径;λ为入射光波长;n为介质折射率。
α为镜口角。
(2)放大倍数放大倍数 = 物镜的放大倍数×目镜的放大倍数四、实验器材显微镜、标本、擦镜纸、香柏油、二甲苯五、显微镜的使用方法1、对光:光强时用平面镜,光弱时用凹面镜,视野明亮即可。
2、镜检:低倍镜——定位;高倍镜——观察;油镜——观察3、镜检完毕后的工作:擦拭镜头(标本)等,还原显微镜,登记,洗手,离开。
4、总流程:安装—调光源—调目镜—调聚光器—镜检—擦镜头——复原—登记。
六、作业(可选)1、哪些方法可以提高显微镜的分辨率?2、2、为什么有时候在低倍镜下可看到的目标,换用高倍镜则无法看到?实验二细菌、放线菌的形态观察一、实验目的及要求1.掌握细菌的制片和染色技术2.掌握放线菌形态观察方法3.熟练油镜的使用方法二、细菌染色的基本原理 1.革兰氏染色G+与G-细胞壁结构不同,当用结晶紫初染后,像简单染色法一样,所有细菌都被染成兰紫色,碘作为媒染剂,它能与结晶紫结合成结晶紫-碘的复合物,从而增强了染料与细菌的结合力。
微生物学实验教案引言:微生物学作为生物学的重要分支,研究微观领域的微生物,对于理解生命的起源、发展和进化具有重要意义。
通过实验教学的方式,可以帮助学生深入了解微生物的结构、生命周期、培养和识别方法等基本知识,培养学生的实验操作能力和科学思维能力。
本教案将介绍一节关于微生物学实验的教学内容和相关教学方法。
一、实验目的:本实验旨在让学生了解微生物的基本特征、培养和识别方法,并能熟悉常见微生物的形态特征和培养条件。
二、实验器材和试剂:1. 微生物培养皿、试管、移液器等基本实验器材;2. 细菌营养琼脂、琼脂平板等培养基;3. 青霉抑菌剂等抑菌剂。
三、实验步骤:1. 实验前准备:a. 检查实验器材是否齐全,并进行消毒处理;b. 准备好细菌营养琼脂和琼脂平板,并进行无菌处理;c. 检查抑菌剂的质量和有效期。
2. 培养常见细菌:a. 在无菌操作台上,用移液器将待培养的细菌悬浮液滴在琼脂平板上,轻轻摇动平板使细菌均匀分布;b. 将平板培养基倾斜固化,然后在恒温培养箱中培养一定时间。
3. 观察和识别微生物:a. 借助显微镜观察培养好的细菌样本,记录下其形态特征、生长方式和颜色等细节;b. 根据已有的微生物形态特征图谱对菌落进行初步鉴定,并与其他组员进行交流和讨论;c. 制作菌液鉴别板,通过不同的培养基和抑菌剂来进一步鉴定细菌的种类。
四、实验注意事项:1. 实验过程中要注意无菌操作,严格保持培养器材的无菌性;2. 实验完毕后要及时清洗和消毒相关实验器材,做到彻底无菌;3. 在观察和识别微生物过程中要细心观察,记录准确的特征和数据;4. 实验结束后将菌液鉴别板焚烧处理,防止细菌外泄。
五、实验结果和讨论:学生们完成实验后应整理实验结果和观察数据,进行实验结果的分析和讨论。
可以对不同微生物的形态特征和培养条件进行比较,总结不同细菌的培养特点和识别方法。
通过实验结果的讨论,可以培养学生的科学思维能力和实验数据分析能力。
结论:本实验通过培养和观察微生物,让学生了解了微生物的基本特征和培养方法,提高了学生的实验操作能力和科学思维能力。
微生物学实验教案一、实验目的1.了解和熟悉微生物实验操作的基本步骤和方法;2.学习观察和鉴定微生物的基本技能;3.掌握微生物在不同条件下的生长特性;4.培养学生科学实验动手能力和观察分析能力。
二、实验原理微生物学是研究微生物形态、生理特性、发育规律及其与环境的关系等的一门基础学科。
本实验主要学习微生物的培养技术和鉴定方式。
三、实验器材与试剂器材:培养锅、洗耳球、移液管、显微镜、移液枪等;试剂:琼脂、无菌培养基等。
四、实验操作步骤1.实验前准备(1)清洗培养锅、显微镜及其他实验器材;(2)准备无菌试剂,如无菌培养基、琼脂等,保持无菌状态;(3)准备待测样品,如土壤、水样或其他微生物样本。
2.杂菌分离(1)取一支无菌试管,加入10ml无菌培养基;(2)取土壤或水样品,使用洗耳球采集样品,并将样品转移到培养基中;(3)培养管轻轻摇晃,使样品均匀分布;(4)用生物安全柜将培养管拧紧,并培养在25℃恒温器中。
3.培养菌液制备(1)取一支无菌试管,并加入10ml无菌培养基;(2)用移液枪吸取微生物样品(建议使用已鉴定的纯种菌株),转移至培养基中;(3)轻轻摇动试管,使菌液均匀分散;(4)用生物安全柜将试管拧紧,并培养在适宜的温度下。
4.培养基的制备(1)取一瓶无菌培养基,按照说明书的要求精确称量;(2)将称量好的培养基加入适量的蒸馏水中溶解;(3)使用琼脂将培养基点温和保温,搅拌溶解;(4)用生物安全柜将琼脂倒入培养锅中,并冷却凝胶。
5.微生物样本的观察和鉴定(1)将培养物放在显微镜下观察;(2)观察菌落的形态、颜色和边缘等特征,并进行记录;(3)准备挂片,使用适当的染色方法,如革兰氏染色或荧光抗体染色;(4)观察染色后的细胞形态、颜色和结构等特征,并进行鉴定。
6.培养条件的影响观察(1)准备含有不同营养成分的培养基;(2)将各种培养基接种相同的菌株,并培养在不同的条件下,如温度、光照、湿度等;(3)观察和记录菌落的生长情况,并比较不同条件下的差异。