克隆猪的重要事件资料

中国首例克隆小猪揭秘中国农业大学李宁教授领导的课题组经过一年多的科技攻关，终于在2006年8月5日这一天得到了回报，在河北省三河市明慧养猪公司，中国首例自主完成的体细胞克隆小猪顺利诞生了，它的诞生填补了我国在这一领域的空白。

中国是第七个获得过猪的体细胞克隆后代的国家8月5日上午10时50分，在河北省三河市明慧养猪公司，一头体重1130克，毛色油黑发亮的克隆小猪顺利诞生了。

当时在场的人无不欢欣喜悦，李宁教授领导潘登科和张运海两位博士经过一年多的辛勤耕耘，终于在这一天看到了期盼已久的硕果。

据河北省三河市明慧养猪公司的工作人员介绍，目前克隆小猪身体状况很好，该养猪公司就是它以后的家，它正和它的“代孕母亲”愉快地生活，它现在主要还是以喝“代孕母亲”的奶维生，每次喝完奶还在“代孕母亲”的身上爬来爬去的十分可爱。

克隆小猪出生时就已经会跑了，它以后将和它的异族同伴们一起生活一起玩耍，无论是生活环境、还是食物都与其他小猪一样，不会有什么区别。

克隆小猪的诞生，表明我国在此项研究上已经进入国际先进行列。

据了解，此前仅有英国、日本、美国、澳大利亚、韩国及德国获得过猪的体细胞克隆后代。

我国是第七个获得过猪的体细胞克隆后代的国家。

三批试验孕育一头克隆小猪从生物学的角度看，克隆是一种人工诱导的无性繁殖方式或者是植物的无性繁殖方式。

一个克隆就是一个多细胞生物在遗传上与另外一种生物完全一样。

体细胞克隆是指利用一定的设备和技术手段，将动物的体细胞与已经去除细胞核遗传物质的卵母细胞体外重组胚胎，然后再于特定的发育时期将重组胚植到代孕的母体的子宫内完成发育，生产与体细胞供核体遗传上同质后代的过程。

据负责该项目的主要科研攻关人员潘登科博士回忆，当时李宁教授把这个具有相当难度的课题交给他和张运海的时候，他们没有想到能有今天的结果，因为当时国内已经有几家实验室都在做克隆猪的试验，而且已经有实验室做到了移植这一步但是没有做到怀孕这一步，囊胚率达到20%这在国内已经相当不容易了。

介绍克隆技术在猪方面的研究借助体细胞移植技术，己成功地获得了克隆羊、克隆牛和克隆山羊;而在有关克隆猪的专题报告中亦采用该方法，即将未分化的早期胚胎细胞(4细胞的卵母细胞胚)作为供核细胞与去核卵母细胞融合。

经表型选择后进行的猪克隆繁殖，在内品生产中具有潜在的重要意义。

另外，基因修饰技术与克隆技术的结合能为人类创建外源性移植器官的潜在供体。

从分化细胞迈向猪克隆的第一个步骤，就是要对各种可能影响猪体外胚胎发育的因素进行调查研究。

从长白种母猪体采集的成熟卵母细胞，经2种电激活方法的任何一种刺激后，促使胚胎以单性生殖方式发育;然后将此胚胎置于微纤丝抑制剂(细胞分裂抑制素B)中，以避免因细胞的分裂而造成染色体的丢失，最后将这些胚胎放大3种不同培养基的任何一种内进行孵化(其它环境条件保持不变)(表1)。

在一定强度的电激下，经多次脉冲刺激的胚胎其发育数少于采用单次脉冲电激的胚胎;另外，培养基的种类也影响了胚胎的发育，胚胎在NCSU23培养基中发育情况最佳。

随后，用单一的1.5kv/cmlOOμs脉冲电流刺激NCSU23培养基中的胚胎，在这些条件下测定体外成熟卵母细胞的发育潜力(以体内成熟卵母细胞作对照)。

在采用这种电激方式的167个体外成熟的卵母细胞中，有116个在48h内分裂，但是仅4个发育至胚泡，该比例显著地低于相应的体内成熟卵母细胞的发育率(p=0.001，X2=检验)。

因此，在以后的试验中采用在体内发育的成熟卵母细胞。

在众多有关家畜克隆的报道中均以胎儿成纤维细胞作为供核细胞，究其原因是这些细胞能在克隆前进行基因修饰。

因此，我们对猪胎儿成纤维细胞在核移植后继续发育的能力进行了评估。

将“梅山×梅山(黑毛)”猪在妊娠24d时屠杀取其胎儿，经胰蛋白酶作用后建立原代细胞培养。

再将细胞进行高密度平板培养传代2至6次，最后进行融合；在不补充培养基的情况下连续培养l6d，产生的细胞处在G０期，最后用PCR方法鉴定每个胚胎的性别。

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克隆马普罗梅蒂亚
2003年 年

我国首例克隆民猪产崽等作者：林晓蕾等来源：《农村实用科技信息》2008年第03期本刊讯在《西游记》里，孙悟空拔下一根猴毛，并冲着猴毛轻轻一吹，就能变出成千上万只小猴子。

在人们眼中，这只是个神话，而在东北农业大学生命科学实验楼里，刘忠华博士和他的课题组成员们让神话变成了现实。

2007年岁末，一头克隆东北民猪一次产下10个“猪宝宝”。

2006年10月12日，3个体细胞克隆出的3只东北民猪顺利诞生，这是继中国农业大学2005年8月克隆出香猪后，中国研究培育出的第二例克隆猪。

时隔一年多，2007年12月27日，记者再次走进东北农业大学生命科学实验楼里。

“克隆猪成功繁殖了！”一见面，刘忠华便兴奋地告诉记者这一喜讯。

原来，目前存活的6头克隆东北民猪如今都已经达到了自然繁殖的条件，其中一头东北民猪刚刚产下10个“猪宝宝”。

体细胞核移植是实现转基因动物最重要的一步，刘忠华与其课题组成员用体细胞克隆出东北民猪的成功，在全国范围内产生重大影响。

现在市场上出现的转基因茄子、转基因黄瓜等，是通过改变植物的基因使其向更优良的性状生长。

东北民猪生长周期长，瘦小肉率低，通过克隆，去掉猪体内的不良基因，克隆出优良的品种，使其“肌肉”发达。

在研究过程中，刘忠华和学生们开玩笑，把这样的猪称之为“施瓦辛格式”民猪。

“一个胚胎只能拿出几十个同样的细胞，而体细胞则不同，想拿出多少同样的细胞就能拿出多少。

”刘忠华说，如面临濒危的动物，可以利用体细胞核移植实现“保种”，但不能无限制的“克隆”。

“一个群体要想稳定，种群内需要存在不同差异的个体”。

以东北虎为例，如东北虎大量地被“克隆”，就会导致这个群体个体相似，如遇天灾或疾病，这些克隆东北虎极易灭绝。

刘忠华希望能早日把克隆技术应用到社会实践中，为人类造福。

目前，他正带领着一个课题小组根据体细胞核移植技术研究转基因动物，相信在不久的将来，转基因动物就会问世。

萝卜赛人参98％营养在皮里萝卜在我国民间素有“小人参”之美称，也有“冬吃萝卜夏吃姜，不要医生开药方”之说。