临床免疫学与检验重要知识点汇总
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免疫学检验1、免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
2、免疫应答分为识别阶段、活化阶段和效应阶段。
3、识别阶段,是巨噬细胞等抗原递呈细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T辅助细胞及相关淋巴细胞的阶段。
4、活化阶段,是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增殖,分化的阶段。
5、效应阶段,是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
7、免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
8、中枢免疫器官是免疫细胞发育为成熟免疫细胞的场所,它包括骨髓和胸腺。
9、成年人和动物所有血细胞及淋巴细胞的发源地是骨髓。
10、T细胞发育的重要中枢器官是胸腺。
11、外周免疫器官及组织包括淋巴结、脾、黏膜伴随的淋巴组织。
富含血管的最大外周淋巴器官是脾。
12、自然杀伤细胞来源于骨髓造血干细胞,其发育成熟依赖于骨髓及胸腺微环境。
13、免疫球蛋白是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞后产生的、执行体液免疫功能的一组球蛋白。
14、抗体是机体在抗原刺激下,由浆细胞合成分泌产生的具有免疫功能的球蛋白。
15、所有抗体是球蛋白,但不是所有的球蛋白都是抗体。
16、Igg是血清中含量最高的免疫球蛋白,是再次免疫应答的主要抗体,也是唯一能通过胎盘的抗体。
17、补体的激活途径有经典途径、替代途径、MBL途径。
18、正常血清中,含量最高的补体成分是C3、C419、细胞因子:由免疫细胞分泌具有生物活性的多肽或小分子蛋白质的总称,生物活性常表现为多效性、重叠性、拮抗效应和协同效应。
20、抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定族(表位)和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。
21、抗原抗体结合力:1. 静电引力;2. 范德华力(最小);3. 氢键结合力;4. 疏水作用力(最强)22、抗原与抗体结合的特异性,是两者在化学结构和空间构型上呈互补关系所决定的。
23、抗原抗体比例合适时,沉淀物形成快而多,称为等价带。
临床免疫学检验知识点1.免疫系统的基本知识:了解免疫系统的组成、功能和调节机制是理解临床免疫学检验的基础。
免疫系统由免疫器官(如脾脏、淋巴结、骨髓等)和免疫细胞(如淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞等)组成,其功能包括抵御病原体的入侵、清除异常细胞和产生抗体等。
2.免疫细胞的检测方法:常用的免疫细胞检测方法包括流式细胞术、免疫组化和染色技术等。
流式细胞术可用于检测和计数不同类型的免疫细胞,免疫组化和染色技术可用于检测细胞表面标记物和细胞内分子的表达水平。
3.免疫球蛋白的检测方法:免疫球蛋白是免疫系统中的重要成分,其浓度和种类的改变可以指示一些疾病的存在和进展。
测定免疫球蛋白的方法包括免疫电泳、免疫扩散和化学发光等技术。
4.免疫反应的检测方法:免疫反应的检测方法可以用于评估机体对病原体的免疫应答以及检测自身免疫疾病的存在。
常用的免疫反应检测方法包括抗体检测、细胞毒性测定和溶菌试验等。
5.自身抗体的检测方法:自身抗体是机体免疫系统对自身组织产生的免疫反应产物,其异常产生与自身免疫疾病的发生和进展密切相关。
常用的自身抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光和免疫印迹等。
6.免疫功能的评估方法:免疫功能的评估可以指导临床医生判断机体的免疫状况和预测疾病的发展趋势。
常用的免疫功能评估方法包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子水平检测和细胞增殖测定等。
7.临床应用:临床免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要意义。
例如,检测艾滋病病毒抗体可用于艾滋病的早期诊断和监测;自身抗体的检测可用于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎的诊断;细胞因子水平的检测可以评估炎症反应和肿瘤的进展等。
综上所述,临床免疫学检验涵盖了多个方面的知识点,包括免疫系统的基本知识、免疫细胞和免疫球蛋白的检测方法、免疫反应和自身抗体的检测方法、免疫功能的评估方法以及临床应用等。
这些知识点对于临床医生正确使用和解读免疫学检验结果具有重要的指导意义。
免疫学考试重点归纳(全面)1抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力,其中疏水作用力最强,它是在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
2亲和性(affinity):是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位(AD)之间的结合强度,取决于两者空间结构的互补程度。
3亲合力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
4抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性。
5带现象(zone phenomenon):一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带,抗原过量称为后带。
6免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7免疫佐剂(immuno adjustvant):简称佐剂,是指某些预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
8半抗原(hapten):又称不完全抗原,是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性),而单独不能诱导抗体产生(无免疫原性)的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
9载体(carrier):结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
10载体效应:初次免疫与再次免疫时,只有使半抗原结合在同一载体上,才能使机体产生对半抗原的免疫应答,该现象称为~。
11单克隆抗体(McAB):将单个B细胞分离出来,加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,即~。
12多克隆抗体(PcAb):天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被激活,产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白,即~13基因工程抗体(GEAb):是利用DNA重组及蛋白工程技术,从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配,经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
免疫学简介一、免疫学概念与免疫应答免疫应答过程:抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以与产生一系列的免疫效应分子免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段1、识别阶段:是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报与相关淋巴细胞的阶段2、活化阶段:是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增值、分化的阶段。
B细胞接受抗原信息分化为浆细胞,T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞3、效应阶段:是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子,T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。
另外有少量T、B细胞在增值分化后,不直接执行效应功能,而成为记忆细胞免疫应答效应多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应二、免疫组织与器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成免疫器官按功能不同,分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所,由骨髓和胸腺组成;外周免疫器官是免疫应答的场所,有淋巴结、脾与扁桃体等组成。
单核细胞核淋巴细胞经血液循环与淋巴循环进出于外周淋巴组织与淋巴器官,形成机体免疫系统的免疫网络。
(一)中枢免疫器官1、骨髓2、胸腺:是一级淋巴上皮组织,是T细胞发育的重要中枢器官,胸腺由胸腺基质细胞(TSC)和胸腺细胞组成。
(二)外周免疫器官与组织1、淋巴结:分为皮质区与髓质区。
皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。
淋巴结的中心是髓质区,由淋巴索和淋巴窦组成,淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞,包括B 细胞、浆细胞、T细胞与巨噬细胞淋巴结主要功能:是共淋巴细胞栖息和增值的场所;是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地;是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站2、脾:是富含血管的最大外周淋巴器官。
3、黏膜伴随的淋巴组织:有B细胞、T细胞、浆细胞与巨噬细胞,受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答,使B淋巴细胞活化分化为浆细胞,产多种Ig类别的看那个题,其中最主要的是IgA与分泌型IgA,执行体液免疫与局部特异免疫作用(三)淋巴细胞再循环与归巢三、免疫细胞(一)淋巴细胞:是免疫系统的主要细胞,包括T细胞、B细胞核NK细胞1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。
临床免疫的知识点总结1. 免疫系统的组成免疫系统是由多种细胞和分子组成的,主要包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突细胞等,以及各种免疫球蛋白和细胞因子。
这些细胞和分子协同作用,共同保护机体免受外来病原体的侵害。
2. 免疫系统的功能免疫系统的主要功能包括免疫应答、免疫记忆和自身免疫调节。
免疫应答是指在感染病原体时,免疫系统能够迅速识别并清除病原体,从而维护机体的免疫稳态。
免疫记忆则是指免疫系统能够记住曾经遇到的病原体,从而使得再次遇到相同病原体时能够迅速做出反应。
自身免疫调节是指免疫系统能够识别并清除机体内部的异常细胞,从而防止自身免疫疾病的发生。
3. 免疫系统的异常免疫系统的异常包括免疫缺陷和免疫过敏两种情况。
免疫缺陷是指免疫系统的功能受到损害,导致机体容易受到感染。
免疫过敏是指免疫系统对于外界非致病性抗原产生过度的反应,导致炎症和组织损伤。
4. 临床免疫学的应用临床免疫学在临床实践中有着广泛的应用,包括免疫诊断、免疫治疗和免疫预防等多个方面。
免疫诊断是指通过检测机体免疫系统的功能状态来评估患者的免疫状况,从而帮助诊断疾病。
免疫治疗是指利用免疫系统的功能来治疗疾病,包括细胞免疫治疗、抗体治疗和免疫调节剂等多种手段。
免疫预防则是通过免疫接种来预防传染病的发生。
5. 免疫系统与疾病免疫系统与疾病之间有着密切的关系。
免疫系统的异常会导致多种疾病的发生,包括感染病、自身免疫病、肿瘤等。
因此,了解免疫系统的基本知识对于预防和治疗这些疾病具有重要意义。
6. 免疫系统的疫苗疫苗是利用免疫系统的记忆功能来预防疾病的一种有效手段。
疫苗能够激活免疫系统对于特定病原体的抗体产生,从而在患者再次遇到相同病原体时能够迅速清除。
因此,疫苗接种是预防传染病的重要手段。
7. 免疫系统的调节免疫系统的功能受到多种因素的调节,包括遗传因素、环境因素和年龄因素等。
了解这些调节因素对于维护免疫系统的稳态具有重要意义,可以帮助预防疾病的发生。
临床免疫学与检验重要知识点汇总免疫应答主要分为哪几个阶段?1)识别阶段 2)活化与增值阶段 3)免疫效应中枢免疫器官与外周免疫器官有哪些器官组成?各有什么功能?1)中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟得场所,如骨髓,胸腺2)外周免疫器官:免疫细胞产生应答得场所。
如脾脏,淋巴结,黏膜,扁桃体等。
T细胞、B细胞与NK细胞得主要功能分别就是什么?1)T细胞: 介导细胞免疫,辅助体液免疫。
2)B细胞: 产生体液免疫3)NK细胞:介导天然免疫,发挥细胞毒作用。
根据作用方式及其特点得不同,机体存在两类免疫简述各自得概念与特征?1)先天性免疫或固有性免疫,就是个体出生就是就具有得天然免疫,可通过遗传获得,就是机体在长期进化过程中逐渐建立起来得主要针对入侵病原体得天然防御功能。
其主要特征就是反应迅速,针对外来异物得范围较广,不针对某个特定异物抗原,也称非特异性免疫。
2)适应性免疫,就是个体出生后,接触到生活环境中得多种异物抗原,并在不断刺激中逐渐建立起来得后天免疫,也称获得性免疫。
其主要特征就是针对某个特定得异物抗原而产生免疫应答,开始得应答过程比较缓慢,一旦建立清除该抗原得效率很高,特异性很强,也称特异性免疫。
简述抗原抗体反应得原理。
答:抗原与抗体能够特异性结合就是基于抗原表位与抗体超变区分子间得结构互补性与亲与性,这种特性就是由抗原、抗体分子空间构型所决定得,它们之间得结合就是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面得结合简述抗原抗体反应得类型。
答:抗原抗体反应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生得凝集反应;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生得沉淀反应;③抗原抗体结合后激活补体所致得细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致得中与反应;⑤免疫标记得抗原抗体反应等。
什么就是带现象?答:在抗原抗体反应等价带前后,由于抗体或抗原过量(形成前带或后带),上清液中可测出游离得抗体或抗原,形成得沉淀物少,不出现可见反应,这种现象在做血清学试验时称为带现象。
临床免疫知识点总结一、免疫系统的基本概念1. 免疫系统的组成免疫系统是由多种细胞和分子组成的复杂系统,包括淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞、血清免疫球蛋白等。
淋巴细胞包括T细胞、B细胞和NK细胞,它们在免疫应答中起着不同的作用。
巨噬细胞和树突状细胞则是通过吞噬和呈递抗原来激活淋巴细胞。
血清免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和IgD,它们可以与抗原结合,并触发免疫反应。
2. 免疫系统的功能免疫系统的主要功能是保护机体免受外界病原微生物的侵害。
它通过识别和清除病原微生物,维持机体内部的稳态。
免疫系统还能够识别和清除异常细胞,包括肿瘤细胞。
此外,免疫系统还参与到体内异物和抗原的清除,保持机体内部的稳态。
3. 免疫系统的免疫应答当机体受到感染或其他外界侵害时,免疫系统会启动免疫应答,包括先天免疫应答和获得性免疫应答。
先天免疫应答通过巨噬细胞和自然杀伤细胞来清除病原微生物,而获得性免疫应答则是通过B细胞和T细胞来识别和清除特定抗原。
免疫应答的过程包括抗原识别、T细胞和B细胞的激活、抗原清除和记忆应答。
二、免疫系统的疾病1. 免疫系统的过敏性疾病过敏性疾病是由于机体异常的免疫应答导致的疾病,包括变态反应、过敏性鼻炎、哮喘、食物过敏等。
这些疾病通常由特定抗原引起,机体对抗原产生异常的免疫应答,导致炎症和组织损伤。
2. 免疫系统的自身免疫性疾病自身免疫性疾病是由于机体免疫系统对自身组织产生异常的免疫应答,导致组织损伤和功能障碍,包括类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性甲状腺疾病等。
这些疾病通常由遗传和环境因素共同导致,临床表现各异。
3. 免疫系统的恶性肿瘤免疫系统的恶性肿瘤包括淋巴瘤和骨髓瘤等,这些肿瘤通常由淋巴细胞或浆细胞恶性增生导致。
临床表现包括淋巴结肿大、骨髓增生异常、免疫功能低下等。
三、临床免疫学的诊断和治疗1. 免疫系统疾病的诊断免疫系统疾病的诊断主要依靠病史、临床表现、实验室检查和免疫学检查。
临床免疫学检验1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织4、B细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD)同时检测CD5分子,可分为B1细胞和B2细胞。
B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。
5、T细胞:介导细胞免疫。
共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞的标志是CD4;杀伤T细胞的标志是CD8;T细胞受体=TCR。
T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);CD3+CD4+CD8- = 辅助性T细胞(Th)CD3+CD4-CD8+ = 细胞毒性T细胞(Tc或CTL)(T细胞介导的细胞毒试验)CD4+CD25+ = 调节性T细胞(Tr或Treg)T细胞功能检测:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。
增殖试验有:形态法、核素法。
T细胞亚群的分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验;6、NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。
直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞)表面标志:CD16(ADCC)、CD56。
测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。
7、吞噬细胞包括:单核-吞噬细胞系统(MPS,表面标志CD14,包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。
(表达MHCⅡ类分子)8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a、CD11c和CD83。
《临床免疫学检验技术》复习笔记一、绪论临床免疫学检验技术作为医学检验技术专业的核心课程,在医学领域中占据着至关重要的地位。
它主要阐述了基础免疫学和临床免疫学的基本理论、技术,以及常见免疫相关性疾病的免疫学特征和诊断方法。
二、抗原与抗体1. 抗原(Ag)是指能启动、激发和诱导免疫应答的物质,可被T、B 细胞表面特异性抗原受体识别及结合,激活细胞产生应答产物。
抗原是所有能启动、激发和诱导免疫应答的物质,其可被T、B 细胞表面特异性抗原受体(TCR 或BCR)识别并结合,激活T/B 细胞产生免疫应答,并与之发生特异性反应。
抗原可来自外界或自身,机体免疫细胞通常识别的抗原多数是蛋白质,少数是多糖、脂类和核酸等。
例如,2018 年长春长生疫苗事件中提到的疫苗就属于免疫学上所说的抗原范畴。
抗原的特性包括免疫原性、免疫反应性和特异性。
免疫原性是指抗原被T、B 细胞表面特异性抗原受体(TCR 或BCR)识别及结合,诱导机体产生适应性免疫应答的能力;免疫反应性,又称抗原性,是指抗原与其所诱导产生的免疫应答效应物质特异性结合的能力。
所有的抗原都有免疫反应性,但不一定有免疫原性。
同时具有免疫原性和免疫反应性的物质称为完全抗原;只有免疫反应性而无免疫原性的物质称为半抗原。
抗原的免疫原性主要取决于抗原的异物性和理化特性,也与机体的遗传、性别、生理状态以及抗原进入机体的途径和方式有关。
抗原通常为非己物质,抗原与抗体之间的亲缘关系越远,免疫原性越强。
天然抗原多为大分子有机物,蛋白质免疫原性较强;抗原分子量越大,则免疫原性越强;多支链或含环状结构基团的抗原较直链抗原免疫原性强;聚合状态蛋白较单体的免疫原性强;颗粒性抗原较可溶性抗原的免疫原性强。
此外,机体对抗原的免疫应答受多种遗传基因特别是主要组织相容性复合体基因的控制,还受年龄、性别与健康状态的影响。
在应用抗原免疫动物制备抗体时,选择合适的动物种类非常重要,应该选用发育成熟且健康的动物。
免疫学检验知识点总结免疫学检验是临床检验中非常重要的一个领域,通过检查人体的免疫系统功能,可以帮助医生诊断疾病、监测疾病进展以及评估治疗效果。
免疫学检验涉及到许多知识点,包括免疫学基础知识、免疫学检验方法、常见的免疫学检验指标等。
本文将对免疫学检验的相关知识点进行总结。
一、免疫学基础知识1. 免疫系统的组成免疫系统由两大部分组成:体液免疫和细胞免疫。
体液免疫主要通过抗体来进行免疫应答,而细胞免疫则通过吞噬细胞和T细胞来进行免疫应答。
2. 免疫系统的功能免疫系统的主要功能包括防御感染、清除异常细胞、调节炎症反应等。
免疫系统通过对抗原的识别和消除来维护机体内稳态,保护机体免受外界病原体的侵害。
3. 免疫系统的异常免疫系统的异常会引发一系列疾病,包括自身免疫病、免疫缺陷病、过敏性疾病等。
免疫系统的异常分析对于疾病的诊断和治疗至关重要。
二、免疫学检验方法1. 免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的免疫学检验方法,包括直接免疫荧光法和间接免疫荧光法。
直接免疫荧光法可以用于检测抗原,间接免疫荧光法可以用于检测抗体。
该方法操作简便、灵敏度高,被广泛应用于临床诊断。
2. 酶联免疫吸附测定法(ELISA)ELISA是一种敏感度高、特异性强的免疫学检验方法,可以用于检测抗体或抗原。
它的操作简便,可以同时进行多个样本的检测,被广泛应用于病毒感染、免疫性疾病等的诊断。
3. 免疫印迹法(Western Blot)西方印迹法是一种用于检测蛋白质的技术,可以用于分析抗原或抗体的特异性。
该方法适用于检测免疫印迹图谱,可用于疾病的诊断和治疗。
4. 流式细胞术流式细胞术是一种用于分析或分选细胞的技术,可以用于检测免疫细胞的表面标记物、分析细胞免疫学特性等。
该方法操作简便、高通量化,被广泛应用于免疫学研究和临床诊断。
5. 免疫电泳法免疫电泳法是一种用于分离和检测蛋白质的技术,可以用于检测血清中的免疫球蛋白和其他蛋白质。
该方法适用于检测免疫球蛋白谱图、诊断多发性骨髓瘤等。
临床免疫学检验重点整理(下)混合,在补体参与下,使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空斑,每一个空斑中央含一个抗体形成细胞,空斑数目即为抗体形成细胞数目。
细胞因子(CK):是由机体活化的免疫细胞及某些基质细胞分泌的小分子蛋白质,通过结合细胞表面的相应受体发挥生物学效应(有旁分泌、自分泌、内分泌)。
细胞粘附分子(CAM):是由细胞产生、介导细胞与细胞间或细胞与基质间相互接触和结合的分子。
酶联免疫斑点实验(ELISPOT):在包被有待测CK抗体的微孔板上,加入可分泌相应细胞因子的待测细胞,在有或无刺激物存在的条件下培养后,待测细胞向其周围分泌细胞因子,并被板上的特异性抗体捕获。
洗去细胞后用酶标抗体为一抗或二抗,分别做直接法和间接法。
所选底物应在酶促反应后形成不溶性产物。
一个斑点代表一个细胞因子分泌细胞,斑点的颜色深浅程度与细胞因子量相关。
目前在细胞因子检测方面应用较多的是IFN-γ的测定。
免疫球蛋白(Ig):是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。
可分为分泌型和膜型两类。
(现在认为,Ig与Ab没有什么区别)临床上常用速率散射免疫比浊法检测Ig。
免疫球蛋白测定的临床意义(一)年龄,年龄不同其血液中的Ig含量有一定变化,新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG,故血液中含量较高,接近成人水平。
婴幼儿体液免疫功能尚不成熟,Ig含量低于成人,各年龄段的正常参考区间见教材。
需要注意的是,血液Ig随年龄、性别、血型、种族及测定方法不同而有差别,各实验室需要建立自己的参考值范围。
(二)多克隆高Ig血症肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化等患者的血清中,三种免疫球蛋白均可升高。
慢性细菌性感染如结核、麻风、慢性支气管炎等血中IgG可升高。
宫内感染时脐带血或出生后的新生儿血清中IgM含量可增高。
自身免疫性疾病时三种Ig均可升高,如SLE患者以IgG/A升高较为多见,类风湿性性关节炎患者以IgM升高为主。
临床免疫学检查考点总结一、病毒性肝炎标志物检查HAV HBV HCV HDV HEV基因组线状单链RNA小RNA病毒科DNA病毒单股正链RNA(黄病毒属)单股环状RNA单股正链RNA(杯状病毒属)抗体系统IgM,表近期感染1周达高峰,持续2月逐渐下降,IgG可保持多年HBV颗粒又叫Dane颗粒,详见后不是保护性抗体是HCV感染的标志抗-HDV不是保护性抗体抗HEVIgM在发病初期产生是近期感染的标志备注100℃5min可完全灭活,紫外线、过氧乙酸等敏感HBV抵抗力强,100℃10min可灭活,对酒精敏感100℃5min可灭活一种缺陷病毒需HBV辅助才能复制消毒剂敏感免疫学标志临床意义HBsAg+ 最早出现血清学标志抗-HBs抗体:曾感染乙肝;接种了疫苗一种保护性抗体HBeAg(e抗原)HBV活动性复制和传染性标志抗-HBe 传染性减弱的标志HBcAg(核心抗原)存在于受染肝细胞核中,血液中检测不到,+表有传染性抗-HBcIgM 早期感染IgG 过去感染HBV DNA 最敏感最直接的HBV感染指标二、常用抗原抗体凝集反应项目缩写临床意义抗核抗体谱ANA包括dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗可提取核抗原(ENA)抗体谱。
ANA——最常见于SLE、混合性结缔组织病抗Sm - SLE特异性指标抗双链DNA 抗体抗dsDNA SLE活动性指标类风湿因子RF类风湿性疾病时,RF的阳性率70%~90%,故本试验的特异性不高抗环瓜氨酸肽抗体CCP 是类风湿性关节炎特异而敏感的早期诊断指标抗链球菌溶血素“O”抗“O”升高常见于感染性心内膜炎、扁桃体炎、风湿热以及链球菌感染后肾小球肾炎,1周后开始升高,4~三、肿瘤标志物检查(一)甲胎蛋白(AFP)测定:升高见于肝癌(>300μg/L)、生殖腺胚胎性肿瘤(如睾丸癌、畸胎瘤),病毒性肝炎、肝硬化(但<300μg/L)(二)癌胚抗原(CEA)测定结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、胰腺癌等(三)前列腺特异抗原测定在前列腺癌时可见PSA水平明显升高四、免疫球蛋白1.IgG、IgA、IgM均增高常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等)2.单一免疫球蛋白增高主要见于免疫增殖性疾病(如多发性骨髓瘤、原发性球蛋白血症等)。
一:名词解释1免疫学(immunology):是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病,治病为目的的一门现代医学科学。
2免疫球蛋白(immunoglobulin):是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质,主要存在于血清等液体中,约占血浆蛋白总量的20%,IgG能与相应抗原特异性结合,执行体液免疫功能。
3补体(complement):是存在于人和脊椎动物血清与组织液中一组经活代后有酶活性的蛋白质,包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白,故称为补体系统。
4细胞因子(cytokine):是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的总称。
大多数细胞因子是低分子量的蛋白或糖蛋白。
5临床免疫学(clinical immunology):是将免疫学基础理论,临床疾病与免疫学技术相结合,用于研究疾病的免疫病理机制,诊断与鉴别诊断,评价治疗效果和判断预后的多个分支学科的总称。
6亲和性(affinity):是指抗体分子上的一个抗原结合点与一个相应抗原表位之间的结合强度,抗原抗体的亲和性取决于两者空间构型的互补的程度。
7亲和力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,亲和力与亲和性,抗体的结合价,抗原的有效抗原表位数目有关。
8免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
9半抗原(hapten):是指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
10免疫佐剂(immunoadjuvant):预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型,简称佐剂。
11凝集反应(agglutination reaction):是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原的颗粒性载机与相应抗体特异性结合后,在适当电解质存在下,出现肉眼可见的凝集现象。
免疫应答主要分为哪几个阶段?1)识别阶段 2)活化和增值阶段 3)免疫效应中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成?各有什么功能?1)中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟的场所,如骨髓,胸腺2)外周免疫器官:免疫细胞产生应答的场所。
如脾脏,淋巴结,黏膜,扁桃体等。
T细胞、B细胞和NK细胞的主要功能分别是什么?1)T细胞:介导细胞免疫,辅助体液免疫。
2)B细胞:产生体液免疫3)NK细胞:介导天然免疫,发挥细胞毒作用。
根据作用方式及其特点的不同,机体存在两类免疫简述各自的概念和特征?1)先天性免疫或固有性免疫,是个体出生是就具有的天然免疫,可通过遗传获得,是机体在长期进化过程中逐渐建立起来的主要针对入侵病原体的天然防御功能。
其主要特征是反应迅速,针对外来异物的范围较广,不针对某个特定异物抗原,也称非特异性免疫。
2)适应性免疫,是个体出生后,接触到生活环境中的多种异物抗原,并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫,也称获得性免疫。
其主要特征是针对某个特定的异物抗原而产生免疫应答,开始的应答过程比较缓慢,一旦建立清除该抗原的效率很高,特异性很强,也称特异性免疫。
简述抗原抗体反应的原理。
答:抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的,它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合简述抗原抗体反应的类型。
答:抗原抗体反应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应;③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应;⑤免疫标记的抗原抗体反应等。
什么是带现象?答:在抗原抗体反应等价带前后,由于抗体或抗原过量(形成前带或后带),上清液中可测出游离的抗体或抗原,形成的沉淀物少,不出现可见反应,这种现象在做血清学试验时称为带现象。
影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素?答:环境条件包括:电解质,酸碱度和温度。
稳定条件:①电解质:常用O.85%氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液;②酸碱度:pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质,抗原抗体反应一般在pH为6~8时进行;③温度:一般以15,40℃为宜,最佳反应温度为37℃。
简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。
单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的,其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。
试述免疫血清应如何进行纯化。
免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。
提纯IgG类抗体的方法有:硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法,采用亲和层析法提取IgG时,可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。
另外,还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。
方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂,以吸附免疫血清中的杂抗体,或将杂抗原交联于sephamse 4B上,通过亲和层析去除杂抗体。
叙述杂交瘤技术的基本原理。
杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性,即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖,经过克隆化后成为单个细胞克隆,分泌的抗体即为单克隆抗体。
简述间接血凝试验的基本原理。
间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞,与相应抗体(或抗原)作用,在有电解质存在的条件下,经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象,又称被动血凝试验简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。
Coombs试验又称抗人球蛋白试验,其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体,能与相应的抗原牢固结合,但在一般条件下不出现可见反应,利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体,可使红细胞凝集。
Coombs试验有二种类型:(1)直接Coombs试验:用于检测红细胞结合的不完全抗体。
(2)间接Coombs试验:用于检测血清中游离的不完全抗体。
抗球蛋白试验主要应用于那些方面?①输血:对于“危险”受体(指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人)的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查,以抗球蛋白法最为可靠。
②血型抗原抗体的检查:主要检查Rh—者,其体内是否有抗-D抗体,应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性的供体血液作常规检查。
最可靠和灵敏的方法是将待检D 阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D 血清混合,然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。
③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断:母体产生的最常见的免疫性抗体为Rh 抗体和ABO 抗体,一般为7S 的IgG,可通过胎盘屏障,作用于胎儿红细胞,引起新生儿溶血性疾病,可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。
④对溶血性贫血的研究:获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。
⑤对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。
Coombs 试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清,如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等,分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。
什么是协同凝集试验?主要用于何种检测?协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似,但所用的载体为金黄色葡萄球菌。
这种细菌的细胞壁中含有A蛋白(SPA),SPA 能与特异性抗体IgG 的Fc段结合(IgG3除外)。
抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面,仍保持与相应抗原特异性结合的特性。
当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时,就成为抗体致敏的载体颗粒,若与相应抗原接触,即出现反向间接凝集反应。
可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶性抗原的检测。
何谓间接凝集反应?将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒表面,使之成为致敏载体颗粒,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适宜电解质存在条件下,出现特异性的凝集现象,称为间接凝集反应间接凝集反应如何进行分类?各试验的原理是什么根据致敏载体用的是抗原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验;根据载体种类,分为间接血凝试验和胶乳间接凝集试验;根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验和协同凝集试验。
间接凝集试验是用抗原致敏载体检测标本中的相应抗体。
将可溶性抗原与载体颗粒结合,再与标本中的抗体反应,通过抗体桥联,形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块,为阳性反应。
反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。
用特异性抗体致敏颗粒,与样品中的待检抗原反应,通过抗原桥联,形成肉眼可见的凝集为阳性。
临床上用于检测HbsAg、AFP 等。
间接凝集抑制试验诊断试剂为已知抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体,用于检测标本中与致敏抗原相同的抗原。
将标本与抗体试剂相反应,然后加入致敏抗原,若出现凝集现象,说明标本中不存在相应抗原;如未出现凝集现象,则说明待检标本中含有相应抗原,凝集反应被抑制。
同理,用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作为诊断试剂,检测标本中的抗体,称为反向间接凝集试验。
协同凝集试验与间接凝集反应的原理相似,但所用载体为金黄色葡萄球菌,该菌细胞壁上的SPA 能与特异性抗体的IgG 的Fc 段结合(IgG3除外),抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面,仍能与相应抗原特异性结合。
当这种葡萄球菌与IgG 抗体连接时,就成为抗体致敏的载体颗粒,若与相应抗原接触,即出现反向间接凝集反应。
间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验,用已知的抗原或抗体致敏红细胞,然后与样品中的抗体或抗原在适宜条件下反应,出现红细胞凝集者为阳性。
根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱。
胶乳凝集试验是以聚苯乙烯胶乳微粒作为载体的间接凝集试验。
HAT培养基筛选杂交瘤细胞的机制是什么?答:1.淋巴细胞:不能生长,5到7天死亡;DNA的主要合成途径被A阻断2.骨髓瘤细胞:不能生长,5到7天死亡;HGPRT缺乏,DNA合成的旁路途经受阻3.骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成杂交瘤细胞,可长期生长繁殖。
利用淋巴细胞的HGRT将H合成为嘌呤碱并最终与T一起合成DNA从淋巴细胞获得产生某种抗体的遗传信息,从骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能力简述免疫系统的三个生理功能。
答:免疫系统的三个生理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御:是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。
该功能正常时,机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害,即抗感染免疫;异常情况下,反应过高会引起超敏反应,反应过低或缺失可发生免疫缺陷。
免疫自稳:是机体免疫系统维持内环境稳定的一种生理功能。
该功能正常时,机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的细胞和免疫复合物等异物,而对自身成分保持免疫耐受;该功能失调时,可发生生理功能紊乱或自身免疫性疾病。
免疫监视:是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的一种生理功能。
该功能失调时,有可能导致肿瘤发生,或因病毒不能清除而出现持续感染。
决定抗原抗体最佳配比的方法有几种?(1)抗原稀释法:将可溶性抗原作一系列倍比稀释,然后向各管中加入一定浓度的适量抗血清,37℃反应后,产生的沉淀量随抗原量变化而不同,以沉淀物最多的管为最适比例管。
(2)抗体稀释法:是将恒定量抗原与不同倍比稀释的抗体反应,出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。
(3)棋盘格法:亦称方阵法。
抗原抗体同时稀释,可一次完成抗原和抗体的滴定,并找出抗原、抗体的最适比。
是前二法的结合简述单向免疫扩散试验的基本原理和技术要点。
(1)原理:待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成白色沉淀环,沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。
(2)技术要点:将抗体和热融化琼脂(约50%)混合,倾注成平板。
待凝固后在琼脂板上打孔,孔中加入已稀释的抗原液,和不同浓度的抗原标准品,置37~12温箱,24~48h后观察孔周围沉淀环。
量取沉淀环直径,通过抗原标准品,计算待测抗原的浓度。
在双向免疫扩散试验中,如何判定结果?双向免疫扩散中,出现沉淀线,表明存在相应的抗原、抗体,不出现沉淀线则表明缺乏抗原或抗体。
沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致,沉淀线靠近抗原孔,提示抗体含量高;靠近抗体孔,提示抗原含量较多免疫电泳技术的优点是什么?免疫电泳有哪些用途?1)优点:免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术,既有抗原抗体反应的高度特异性,又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力,广泛应用于牛物医学领域。