生化总结1
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生物化学重点总结
记不清的,难点&重点
蛋白质化学重点
特征元素(N)和含量及蛋白质含量的计算:N平均为16%
每克样品含N克数*6.25*100=100g样品中蛋白质含量g%
组成蛋白质的氨基酸结构、数量和分类
组成人体蛋白质的氨基酸有20种
均属L-α-氨基酸(除甘氨酸)
分类:非极性疏水氨基酸,极性中性氨基酸、酸性氨基酸、碱性氨基酸
酸性氨基酸:Asn、Glu
碱性氨基酸:Lys、Arg、His
带羟基:Ser、Tyr、Thr
带巯基:Cys
蛋白质一级结构概念、化学键
在蛋白质分子中,从N端至C端的氨基酸排列顺序称为蛋白质的一级结构。
化学键:肽键、二硫键
二级结构概念、化学键、种类
指蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,即该段肽链主链骨架原子的相对结构,不涉及氨基酸残基侧链的构象。
化学键:氢键
种类:α-螺旋,β-折叠,β-转角和无规卷曲、模体
三级结构概念、主要维系键
整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置,即整条肽链所有原子的三维空间排布位置。维系键:次级键——疏水作用、离子键、氢键、范德华力
分类:结构域、分子伴侣
四级结构概念
蛋白质分子中,各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用。
蛋白质的两性游离和等电点
两性电解质,解离程度取决于溶液pH值
等电点:在某一pH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势和程度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时的溶液pH值称为该氨基酸的等电点pI。
pH>pI,蛋白质带负电; pH 蛋白质的变性:概念、特征、影响因素 在某些理化因素作用下,蛋白质特定的空间构象被破坏,即有序的空间构象变成无序的空间结构,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,称为蛋白质变性。 特征:发生于二硫键和非共价键,不涉及一级结构。 影响因素:加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子、生物碱试剂等 蛋白质的沉淀:维持稳定性的因素、沉淀概念、方法 维持稳定因素:颗粒表面电荷、水化膜 沉淀:在一定条件下,蛋白疏水侧链暴露在外,肽链融会相互缠绕继而聚集,因而从溶液析出。 方法:丙酮沉淀、盐析法(硫酸铵、硫酸钠、氯化钠)、免疫沉淀法 核酸化学重点 核酸的分子组成(碱基、戊糖、核苷酸) 碱基+ 戊糖糖苷键核苷+ 磷酸酯键核苷酸 DNA的功能及碱基组成 功能:以基因的形式载荷遗传信息,并作为基因复制和转录的模板。是生命遗传的物质基础,是个体生命活动的信息基础。 碱基组成:A、T、C、G DNA一级结构概念及连接键 核苷酸的排列顺序 键:磷酸二酯键 二级结构双螺旋结构特点 1、DNA分子是由两条相互平行,方向相反的脱氧核苷酸链组成的右手螺旋结构。 2、R - P骨架位于分子外侧,碱基在双螺旋内侧,碱基互补,以氢键相连。 3、每个碱基对的两个碱基处于同一平面,并垂直于双螺旋的中心轴。 4、一周包含10个碱基对,相邻碱基对间旋转36°。螺距3.4nm,直径2nm。 RNA的种类 rRNA, mRNA, tRNA, hnRNA, snRNA, snoRNA, scRNA/7SL-RNA RNA的碱基组成、一级结构及连接键 碱基组成:A、U、C、G、稀有碱基 一级结构:核苷酸的排列顺序 连接键:磷酸二酯键 mRNA结构特点:5’末端m7GpppN,3’末端多聚A尾 tRNA二级结构:三叶草型,3‘端均为CCA-OH氨基酸接纳茎 DHU环、反密码子环、TΨC环、额外环、 RNA与DNA区别: 碱基组成、核糖、功能等等 核酸的一般理化性质:具有较强酸性,线形高分子,紫外吸收 核酸的紫外吸收、变性、复性和杂交的概念 紫外吸收:260nm处最大吸收峰 变性:在某些理化因素作用下,DNA双链的互补碱基对之间的氢键断裂,使DNA双螺旋结构松散,成为单链的现象。(增色效应,紫外吸收增加) Tm:溶解温度,指DNA加热变形过程中,使DNA分子内50%的双链结构打开时的温度。 Tm=69.3+0.41(%G+C)=4(G+C)+2(A+T) 复性:变性DNA在适当条件下,两条互补链可以重新配对,恢复天然的双螺旋结构,这一现象,称为复性。 杂交:两条来源不同具有互补碱基顺序的单链多核苷酸片段形成双螺旋结构的现象称为核酸分子杂交。 酶重点 酶的概念、特点 是由活细胞合成的、对其特异底物起高效催化作用的蛋白质。 单纯与结合酶的概念、常见的含维生素的辅酶及功能 单纯酶:仅由肽链构成的酶 结合酶:由蛋白质部分和非蛋白质部分组成。 酶蛋白与辅助因子的关系 二者结合形成全酶才具有催化作用,辅助因子分为辅酶(结合疏松)和辅基(结合紧密)。活性中心和必需基团的概念 活性中心:酶分子中某一特定空间结构的区域,能与底物特异的结合并将底物转化为产物。必须基团:与酶活性密切相关的化学基团,包括结合基团和催化基团。 酶原和酶原激活的概念、机理和意义 酶原:有些酶在细胞内合成或初分泌,或在发挥催化功能前只是酶的无活性的前体 酶原激活:酶原向酶转化的过程,实质是酶的活性中心形成或暴露。 机理:酶原特定条件一个或几个肽链断裂,水解下一个或几个肽链分子构象改变形成或暴露酶的活性中心 意义:避免自身消化,保证酶在特定的部位与环境发挥其催化作用,可以作为酶的贮存形式。同工酶:指催化的化学反应相同,酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。 变构酶:某些小分子物质能与酶分子活性中心以外的某一特殊部位结合,引起酶构象的改变,从而改变酶活性,受此种变构调节的酶即变构酶。 底物浓度的影响(曲线特征、米氏方程及Km) Km值等于酶促反应速度为最大速度一半时的 底物浓度,单位mol/L