(3)图中步骤1代表____________,步骤2代表退火,步骤 3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。 (4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温 度过高会破坏______________的碱基配对。退火温度 的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但__ ____________的引物需要设定更高的退火温度。
(3)常见的DNA连接酶有T4 DNA连接酶和E·coli DNA连接酶,T4 DNA连接酶既能连接黏性末端,又能连 接平末端。
答案:(1)Sau3AⅠ 两种酶切割后产生的片段具有相 同的黏性末端 (2)甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目 的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被 转录(其他合理答案亦可) (3)E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 T4 DNA 连接酶
3.(2017·江苏高考)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在 的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应 (PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金 属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答 下列问题:
(1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过 ____________ 获得____________用于PCR扩增。 (2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1 和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适 当的____________________位点。设计引物时需要避 免引物之间形成__________________ ,而造成引物自 连。
专题14 现代生物科技专题
答案速填: ①DNA连接酶 ②目的基因的获取 ③检测与鉴定 ④基因 ⑤作物脱毒 ⑥细胞增殖 ⑦动物细胞融合 和动物细胞培养 ⑧骨髓瘤细胞 ⑨囊胚 ⑩获能 ⑪动物血清 ⑫桑椹胚 ⑬早期胚胎 ⑭全能性 ⑮物质循环再 生原理