植物源性重组人血清转铁蛋白的多功能性介绍
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转铁蛋白
正常值
04
化验取材
06
化验类别
03
化验结果意 义
05
化验方法
血清运铁蛋白,TF
ELISA法、RIA法： 成人：2.20～4.0g/L (220～400mg/dl) >60岁： 1.80～3.8g/L (180～380mg/dl)
(1)升高：缺铁时增高(缺铁性贫血)、铁蛋白释放增加(急性病毒性肝炎、肝细胞坏死)。
转铁蛋白
运铁蛋白
01 简介
03 相关疾病
目录
02 参考资料
转铁蛋白又名运铁蛋白 transferrin，TRF，siderophilin）是血浆中主要的含铁蛋白质，负责运载由消化 管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中，供成熟红细胞的生成。
简介
01
别名
02
(2)降低：感染性疾病、风湿性关节炎、原发性肝癌、肾病、尿毒症、遗传性运铁蛋白缺乏症、流行性出血 热、血色病、再生障碍性贫血、慢性溶血性贫血、系统性红斑狼疮等。
血液
蛋白质测定
血液生化检查、蛋白质测定
参考资料
《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》
相关疾病Βιβλιοθήκη 发性肝癌感谢观看
04
化验取材
06
化验类别
03
化验结果意 义
05
化验方法
血清运铁蛋白,TF
ELISA法、RIA法： 成人：2.20～4.0g/L (220～400mg/dl) >60岁： 1.80～3.8g/L (180～380mg/dl)
(1)升高：缺铁时增高(缺铁性贫血)、铁蛋白释放增加(急性病毒性肝炎、肝细胞坏死)。
转铁蛋白
运铁蛋白
01 简介
03 相关疾病
目录
02 参考资料
转铁蛋白又名运铁蛋白 transferrin，TRF，siderophilin）是血浆中主要的含铁蛋白质，负责运载由消化 管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中，供成熟红细胞的生成。
简介
01
别名
02
(2)降低：感染性疾病、风湿性关节炎、原发性肝癌、肾病、尿毒症、遗传性运铁蛋白缺乏症、流行性出血 热、血色病、再生障碍性贫血、慢性溶血性贫血、系统性红斑狼疮等。
血液
蛋白质测定
血液生化检查、蛋白质测定
参考资料
《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》
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转铁蛋白说明书
牛转铁蛋白（饱和铁形态，冻干粉末，细胞培养级别）Transferrin, Bovine Holo Form, PowderIron Rich, Cell Culture Grade产品介绍：转铁蛋白是血浆中主要的铁传递蛋白，为细胞内化和细胞代谢提供所需的铁。
研究发现所有的细胞生长都离不开转铁蛋白。
不但维持正常的细胞代谢依赖于以生物活性形态存在的铁，铁还是一些酶的辅助因子，比如RNA聚合酶，DNA合成酶。
同时也是血红蛋白的重要组成部分。
转铁蛋白是血浆糖蛋白，从血浆中分离而来，牛转铁蛋白以两种分子形态存在，分子量分别为74KD和78KD。
每个转铁蛋白分子通过C端和N端结构位点可以结合两分子铁离子，所以转铁蛋白以三种形态存在：脱铁（不结合铁离子），饱和铁（结合两分子铁离子）和部分饱和，在生理情况下，转铁蛋白分子仅有1/3 被铁饱和。
使用说明：转铁蛋白对于绝大部分细胞系在无血清培养基中生长是必需的，研究表明饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是最有效的形态。
对于杂交瘤，黏连细胞和悬浮细胞系，在细胞培养过程中，应保持培养基中转铁蛋白浓度在0.5-100μg/ml。
针对不同的细胞系，需要选择最合适的浓度。
J.H.Brock在小鼠淋巴细胞的无血清培养试验中【1】，以碳14标记的胸苷利用度为指标，比较了鼠源、人源和牛源Tf的效果。
结果显示，无论在刀豆蛋白A或者脂多糖的刺激条件下，三种来源的Tf均能显著增加小鼠淋巴细胞对胸苷的利用度，三种Tf之间的差异不显著。
Larisa Tsavaler等在人红白血病体外细胞系K562的无血清培养试验中【2】，比较了人源转铁蛋白和牛源转铁蛋白的效果，结果显示两者在300ug/ml的浓度条件下，均能良好支持细胞生长，无显著差异。
Robert C Penhallow等研究了Hela细胞无血清培养基中Tf的效果【3】，结果显示牛源Tf 与人类细胞表面的Tf受体亲和力较弱，在无血清Hela细胞培养生长试验中，牛源Tf与人源Tf一样能够支持细胞生长，但需要的浓度要较高。
转铁蛋白结构
转铁蛋白结构
转铁蛋白（Transferrin）是一种由铁原红蛋白N端脱肽的血浆糖蛋白，其主要功能是运输铁离子到身体各个部位并维持机体内的铁平衡。
转铁蛋白分子具有两个铁结合位点（Fe^3+），在pH值略低于生理pH（7.4）的情况下会发生互动，并促使铁离子与氧化还原形式下的转铁蛋白形成复合物。
转铁蛋白分子属于β-globulin家族，由679个氨基酸组成，分子量约约76.5 kDa。
转铁蛋白的二级结构包括40%的α-螺旋和24%的β-折叠，蛋白质外侧有许多含有羧基（-COOH）和氨基（-NH_3^+）的氨基酸，可以与水分子形成氢键和离子键互相作用，稳定蛋白质的结构。
此外，转铁蛋白的结构还包括两个铁结合位点，位于蛋白质的N端和C端。
转铁蛋白的三级结构可以分为两个叶片，每个叶片包括两个亚域。
铁结合位点位于叶片之间，形成了一个大的凹槽，可以容纳铁离子与转铁蛋白形成的复合物。
此外，转铁蛋白还包括许多分子间相互作用的残基，例如二硫键和离子键等，这些相互作用稳定了蛋白质的三维结构，维持其功能活性。
总之，转铁蛋白是一种具有两个铁结合位点的β-globulin糖蛋白，其分子结构包括两个叶片和许多分子间相互作用的残基，并具有稳定的α-螺旋和β-折叠的二级结构。
其功能主要是运输铁离子到身体各个部位并维持机体内的铁平衡。
转铁蛋白0.52
转铁蛋白0.521.引言1.1 概述转铁蛋白是一种重要的蛋白质分子，它在维持机体正常功能中发挥着重要的作用。
转铁蛋白0.52是一种新型的转铁蛋白亚型，具有独特的结构和功能特点。
本文旨在介绍转铁蛋白0.52的定义、功能以及其在科学研究和临床应用中的潜力。
转铁蛋白是一类主要存在于人和动物体内的铁载体蛋白质，可以与铁离子结合并运输到机体各个部位。
它在调控铁代谢、维持铁平衡以及防止铁过载方面发挥着重要的作用。
转铁蛋白0.52是近年来新发现的一种转铁蛋白亚型，它与传统的转铁蛋白相比，在结构上有所不同，并且具有更强的铁载体能力和更高的稳定性。
转铁蛋白0.52的特点主要表现在以下几个方面。
首先，它具有较高的铁结合能力，能够更有效地与铁离子结合形成稳定的铁载体复合物。
其次，转铁蛋白0.52的分子结构相对稳定，能够抵抗外界环境因素的影响，保持其功能的完整性和活性。
此外，转铁蛋白0.52还具有良好的生物相容性和生物可降解性，对机体无毒副作用。
转铁蛋白0.52在科学研究和临床应用中具有广阔的前景。
在科研领域，通过研究转铁蛋白0.52的结构与功能，可以深入了解其在铁代谢调控、疾病诊断和治疗等方面的作用机制，为相关领域的研究提供新的思路和方法。
在临床应用方面，转铁蛋白0.52可以作为一种新型的药物载体，在药物输送和细胞靶向治疗等方面具有巨大的潜力。
综上所述，转铁蛋白0.52作为一种新型的铁载体蛋白质，在铁代谢调控和临床应用方面有着广泛的应用前景。
本文将通过介绍其定义和功能特点，进一步阐述转铁蛋白0.52在科学研究和药物开发领域的重要价值，并对其未来的发展进行展望。
在1.2文章结构部分，我们将对本文的组织结构进行介绍，以便读者能够更清晰地了解文章的内容和脉络。
本文主要分为三个部分：引言、正文和结论。
在引言部分，我们将对文章的背景和目的进行介绍。
首先，我们将概述转铁蛋白及其在生物体中的重要性。
其次，我们将介绍文章的整体结构，包括各章节的内容和安排。
转铁蛋白受体与肿瘤疾病的关系
转铁蛋白受体与肿瘤疾病的关系
邓太海
【期刊名称】《海南医学》
【年(卷),期】2011(22)5
【摘要】转铁蛋白受体(Transferrin receptor,TfR)是机体介导铁代谢的重要蛋白质分子,在铁的运输、转化和利用中起着关键作用.近年来随着对转铁蛋白受体进一步的研究后发现,转铁蛋白及其受体除运输铁的功能外,还与细胞生长和增殖及其肿瘤细胞的代谢有关.本文将对转铁蛋白受体的结构、功能及与肿瘤疾病的关系作一综述.
【总页数】4页(P137-140)
【作者】邓太海
【作者单位】广东医学院,广东湛江,524023
【正文语种】中文
【中图分类】R730.231
【相关文献】
1.重组人促红细胞生成素治疗肿瘤相关性贫血及其与血清促红细胞生成素、转铁蛋白受体关系的临床研究 [J], 傅爱林;沈文香;汪小葛
2.基于转铁蛋白受体（TfR1）的肿瘤与脑部疾病靶向治疗研究进展 [J], 邵明;刘煜
3.AP-1与肿瘤、自身免疫性疾病、哮喘、肾脏疾病关系的研究进展 [J], 史珑; 王向华; 杨达胜
4.间质性肺疾病与血清肿瘤标记物的关系 [J], 段兴秋;田琨;张云辉
5.长链非编码RNA SNHG7与胃肠肿瘤临床病理特征及疾病进展关系的Meta分析 [J], 胡明超;袁雄;王强;俞文渊;张振杰
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
铁传输蛋白在植物生长发育过程中的功能与表达调控
铁传输蛋白在植物生长发育过程中的功能与表达调控植物在生长发育过程中对铁元素的需求非常重要，因为铁作为许多重要酶的辅酶，参与了许多生命活动的调节，包括光合作用、呼吸作用、DNA 合成等。
然而，由于土壤中铁元素的相对缺乏，植物必须发展出一套复杂的系统来吸收和转运铁元素。
铁传输蛋白在这个过程中起着至关重要的作用，它们负责将土壤中的铁元素吸收并运输到植物的各个组织细胞中。
铁传输蛋白主要分为两类：铁载体和铁调控蛋白。
铁载体包括铁螯合物和铁载体蛋白，它们与土壤中的游离铁结合形成稳定的螯合配合物，并将其转运到植物根系表皮细胞表面。
铁调控蛋白则负责调控铁的吸收和分配。
其中质膜相关蛋白（MAs）是一类调控铁吸收的关键蛋白，它们通过调节铁载体蛋白的表达和活性来调节根系对铁元素的吸收。
在植物吸收铁元素的过程中，铁传输蛋白的表达受到许多内外因素的调控。
首先，土壤中铁元素的含量和形态对铁传输蛋白的表达起着至关重要的作用。
在土壤中，铁通常以两种形态存在：游离态和络合态。
土壤中铁的有效性主要取决于其存在方式，游离态铁较容易被植物吸收和利用。
植物感应到土壤中的游离态铁浓度低时，会通过启动铁缺乏响应（Iron Deficiency Response，IDR）途径来提高铁传输蛋白的表达，以增强对土壤中铁元素的吸收。
其次，许多植物激素也参与了调控铁传输蛋白的表达。
例如，茉莉酸（Jasmonic Acid，JA）是一种重要的植物激素，在铁元素的吸收和运输过程中起着重要的作用。
研究发现，JA可以通过调节MA的表达来调控铁传输蛋白的活性，从而增强对铁元素的吸收和利用。
此外，植物生长素（Auxin）和乙烯（Ethylene）等植物激素也参与了铁传输蛋白的调控，对植物生长发育过程中的铁元素代谢起到重要的作用。
此外，一些转录因子和信号转导通路也参与了铁传输蛋白的表达调控。
例如，铁调控因子家族（Iron Regulatory Factor Family，IRF）是一类调控植物对铁元素响应的重要转录因子，它们可以识别并结合到铁调控蛋白的启动子区域，从而调控其转录水平。
铁蛋白转铁蛋白是什么
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢
铁蛋白转铁蛋白是什么
导语：铁蛋白是一种机体内的可溶组织蛋白，那么铁蛋白转铁蛋白是什么？铁蛋白转铁蛋白是什么在人体内的含量是不同的，如果患者出现贫血等症状的
铁蛋白是一种机体内的可溶组织蛋白，那么铁蛋白转铁蛋白是什么？铁蛋白转铁蛋白是什么
在人体内的含量是不同的，如果患者出现贫血等症状的时候，一定要引起重视，积极的治疗疾病，避免诱发急慢性肝炎等疾病，我们来详细的了解一下相关的分析与介绍吧。
铁蛋白为机体内一种贮存铁的可溶组织蛋白，正常人血清中含有少量铁蛋白，但不同的检测法有不同的正常值，一般正常均值男性约80－130ug/L(80-130ng/ml)女性约35－55ug/L(35-55ng/ml)，血清铁水平在妊娠期及急性贫血时降低，急慢性肝脏损害和肝癌时升高，国内报道肝癌患者阳性率高达90%。
动植物体内广泛存在的一类贮存铁的蛋白。
在哺乳类动物的肝和脾中含量最多。
其外径约12～14nm，空囊腔径长约6nm，外壳(即脱铁铁蛋白)由24个亚基组成，每个亚基约含163个氨基酸残基，每个分子最多可结合4500个铁原子。
分子量约为450kd。
结合铁的铁蛋白是“溶”于水的，血浆铁蛋白的浓度与体内储存的铁成正比。
近几年来发现肝癌还含有一种酸性的异铁蛋白，称为癌胚异铁蛋白，可能有助于早期诊断。
肝癌患者治疗有效者血清铁蛋白下降，而恶化和再发者升高，持续增高则予后不良，故血清铁蛋白测定可作为疗效监测手段之一，特别是对AFP阴性的患者尤有意义。
关于铁蛋白转铁蛋白的介绍，希望对于大家有一定的帮助，也希望大家在日常的生活中一定要注意饮食调理，多吃富含铁质的食物，避
预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏。
植物铁蛋白的研究进展
植物铁蛋白的研究进展
陈丽萍;张丽静;傅华
【期刊名称】《草业学报》
【年(卷),期】2010(019)006
【摘要】铁蛋白(ferritin)是一种铁结合和存储蛋白,广泛存在于动物、植物和微生物体内,是生物体内的一种保守性较高的多功能多亚基蛋白.植物铁蛋白作为专门的贮铁蛋白,是植物光合作用和固氮等生化反应的铁源,不仅调节体内铁的含量,而且是一种重要的胁迫反应蛋白,调控铁生物功能,在植物的发育、抵抗氧化损害等方面发挥重要的作用.本研究从铁蛋白的结构、功能及基因克隆、表达和遗传转化等方面,概述了其在植物分子生物学中的研究进展及其应用情况.
【总页数】9页(P263-271)
【作者】陈丽萍;张丽静;傅华
【作者单位】农业部草地农业生态系统学重点开放实验室兰州大学草地农业科技学院,甘肃兰州730020;农业部草地农业生态系统学重点开放实验室兰州大学草地农业科技学院,甘肃兰州730020;农业部草地农业生态系统学重点开放实验室兰州大学草地农业科技学院,甘肃兰州730020
【正文语种】中文
【中图分类】Q946
【相关文献】
1.乳铁蛋白及乳铁蛋白肽的基因工程研究进展 [J], 史芳芳;王亮
2.铁蛋白与转铁蛋白受体表达调控的分子机制研究进展 [J], 周密;廖清奎
3.转铁蛋白-转铁蛋白受体抗肿瘤作用研究进展 [J], 张定林;陈玥琦;刘毅敏
4.乳铁蛋白及乳铁蛋白肽的基因工程研究进展 [J], 史芳芳;王亮;吕自力;王安江
5.转铁蛋白和转铁蛋白受体的研究进展 [J], 张宏伟;刘俊涛
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医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术
医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术随着科学技术的不断进步，医药工业也日新月异，植物源重组人血清白蛋白制备技术便是其中的一大突破。
本文将从不同角度深入探讨这一技术的原理、应用和未来发展方向，希望能给读者带来新的启发和思考。
1. 技术原理医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术是指利用植物细胞或植物组织作为宿主，通过基因工程技术将人类血清白蛋白基因导入植物细胞，并使其表达和分泌人类血清白蛋白。
这一技术的原理是通过转基因手段，使植物细胞拥有制备人类蛋白的能力，进而实现大规模的可控制备。
相比于传统的动物细胞培养技术，植物源重组技术具有成本低、易于扩大规模和生物安全性好等优势，因此备受关注。
2. 技术应用植物源重组人血清白蛋白制备技术在药物生产、临床治疗和疾病研究等领域具有广泛的应用前景。
在药物生产方面，医药级植物源重组人血清白蛋白可以用于制备各类治疗性蛋白药物，如免疫球蛋白、细胞因子等，满足临床治疗需求。
在临床治疗方面，植物源重组蛋白可以作为血液净化和替代性治疗的重要药物，并广泛应用于多种疾病的治疗中。
在疾病研究方面，该技术也为科学家提供了重要工具，帮助他们更好地理解疾病的发病机制和寻找治疗方法。
3. 技术未来发展方向随着生物技术的快速发展，医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术也面临着新的发展机遇和挑战。
未来，技术发展的方向主要包括提高制备效率、改善蛋白质表达质量和扩大适用范围等方面。
在提高制备效率方面，科学家将继续优化基因表达系统和生产工艺，以提高植物细胞的蛋白表达水平和产量。
在改善蛋白质表达质量方面，科学家将努力解决蛋白后翻译修饰、折叠和组装等关键环节的技术难题，以获得高质量的医药级蛋白制品。
扩大适用范围也是未来发展的重要方向，科学家将进一步探索新的植物宿主和蛋白制备技术，以满足不同医药需求。
个人观点医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术的发展为医药行业带来了前所未有的机遇和挑战。
作为一名生物技术工作者，我认为我们应该充分发挥技术优势，加强国际合作，不断完善技术体系，推动技术向更深层次发展，为人类健康事业作出更大的贡献。
转铁蛋白说明书
牛转铁蛋白（饱和铁形态，冻干粉末，细胞培养级别）Transferrin, Bovine Holo Form, PowderIron Rich, Cell Culture Grade产品介绍：转铁蛋白是血浆中主要的铁传递蛋白，为细胞内化和细胞代谢提供所需的铁。
研究发现所有的细胞生长都离不开转铁蛋白。
不但维持正常的细胞代谢依赖于以生物活性形态存在的铁，铁还是一些酶的辅助因子，比如RNA聚合酶，DNA合成酶。
同时也是血红蛋白的重要组成部分。
转铁蛋白是血浆糖蛋白，从血浆中分离而来，牛转铁蛋白以两种分子形态存在，分子量分别为74KD和78KD。
每个转铁蛋白分子通过C端和N端结构位点可以结合两分子铁离子，所以转铁蛋白以三种形态存在：脱铁（不结合铁离子），饱和铁（结合两分子铁离子）和部分饱和，在生理情况下，转铁蛋白分子仅有1/3 被铁饱和。
使用说明：转铁蛋白对于绝大部分细胞系在无血清培养基中生长是必需的，研究表明饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是最有效的形态。
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针对不同的细胞系，需要选择最合适的浓度。
J.H.Brock在小鼠淋巴细胞的无血清培养试验中【1】，以碳14标记的胸苷利用度为指标，比较了鼠源、人源和牛源Tf的效果。
结果显示，无论在刀豆蛋白A或者脂多糖的刺激条件下，三种来源的Tf均能显著增加小鼠淋巴细胞对胸苷的利用度，三种Tf之间的差异不显著。
Larisa Tsavaler等在人红白血病体外细胞系K562的无血清培养试验中【2】，比较了人源转铁蛋白和牛源转铁蛋白的效果，结果显示两者在300ug/ml的浓度条件下，均能良好支持细胞生长，无显著差异。
Robert C Penhallow等研究了Hela细胞无血清培养基中Tf的效果【3】，结果显示牛源Tf 与人类细胞表面的Tf受体亲和力较弱，在无血清Hela细胞培养生长试验中，牛源Tf与人源Tf一样能够支持细胞生长，但需要的浓度要较高。
人重组铁蛋白纳米
人重组铁蛋白纳米人重组铁蛋白纳米是一种生物相容性强、生物降解性好的纳米材料，它是通过基因工程技术在宿主细胞中表达并纯化得到的重组人类铁蛋白。
铁蛋白是一种铁储存蛋白，存在于人体的肝脏、脾脏等多种组织中，具有高效结合和储存铁离子的能力。
重组铁蛋白纳米利用这一特性，可用于药物输送、磁性共振成像（MRI）对比剂、癌症治疗、生物传感器等领域。
在制备过程中，首先需要根据铁蛋白的氨基酸序列设计并合成相应的重组基因，然后将该基因插入到合适的表达载体中。
这个载体随后被转入大肠杆菌或其他适合的表达系统中进行表达。
通过诱导表达，细菌细胞会大量生产重组铁蛋白，之后通过一系列的纯化步骤如亲和层析等方法来提纯蛋白质，最后通过特定的方法将其组装成纳米颗粒。
铁蛋白纳米颗粒的尺寸通常在纳米级别（10-100纳米），这种尺寸的纳米颗粒具有许多独特的物理化学性质，如量子尺寸效应、表面效应等，这些性质使得铁蛋白纳米在生物医学领域有着广泛的应用前景。
在药物输送方面，铁蛋白纳米可以被用来封装药物分子，通过靶向特定的细胞或组织来提高药物的疗效并减少副作用。
由于铁蛋白本身具有对铁离子的高亲和力，它还可以被用来作为MRI的对比剂，通过改变局部磁场的弛豫时间来增强图像的对比度。
在癌症治疗中，铁蛋白纳米可以被设计成能够识别并结合癌细胞表面的特定分子，然后通过释放药物或引发细胞死亡来抑制肿瘤生长。
此外，由于铁蛋白纳米可以被磁性材料修饰，它们还可以被用来引导药物直接到达肿瘤部位，实现精准治疗。
在生物传感器领域，铁蛋白纳米的高铁结合能力可以用来检测和定量血液中的铁水平，对于诊断铁缺乏性贫血等疾病具有重要意义。
总之，人重组铁蛋白纳米作为一种多功能的纳米材料，在生物医学研究和临床应用中展现出巨大的潜力。
随着纳米技术和生物工程的不断进步，铁蛋白纳米有望在未来为疾病的诊断和治疗提供更多创新的解决方案。
30 基于种子生产植物源重组药物蛋白研究进展_蒋滢
核 农 学 报 2014，28（ 9） ： 1597 ～ 1605 Journal of Nuclear Agricultural Sciences
1597
文章编号： 1000-8551（ 2014） 09-1597-09
基于种子生产植物源重组药物蛋白研究进展
蒋 滢1 杨 静2 齐广勋2 邢国杰2 马莲菊1 杨向东2
收稿日期： 2013-12-23 接受日期： 2014-05-13 基金项目： 国家自然科学基金（ 31000743） ，吉林省农业科学院创新工程项目（ C42070507） 作者简介： 蒋滢，女，主要从事植物生物反应器方向研究。E-mail： tianshixiaolian@ 163． com 通讯作者： 杨向东，男，副研究员，主要从事植物生物反应器及叶绿体转基因方面研究。E-mail： xdyang020918@ 126． com
利用种子生产重组医用蛋白或多肽是植物生物反 应器研究的一个重要领域。ProdiGene 公司首次利用 玉米种子表达了重组亲和素 （ avidin） ，其生产成本较 微生物生产系统降低 10 倍以上［12］。随后该公司利用 玉米种子生产的重组胰蛋白酶（ bovine trypsin） 进入商 业化 生 产，其 市 场 规 模 预 计 达 1. 2 亿 美 元［7］。 He 等［13］利用 水 稻 种 子 表 达 的 重 组 人 血 清 蛋 白 （ human serum albumin，OsrHSA） 表达水平为 10. 58% TSP。进 一步研究表明，重组 OsrHSA 具有与人 HSA 相同的生 物学功能，具 有 促 进 细 胞 生 长 和 治 疗 肝 硬 化 的 作 用。 目前重组 OsrHSA 已进入大规模商业化生产阶段。美 国 Ventria Bioscience 公司利用水稻种子生产的重组人 乳铁蛋白（ lactoferrin） 及重组溶菌酶（ lysozyme） 表达量 分别为 25% TSP 和 13% ～ 14% TSP［14］，目前这两种重 组蛋 白 已 完 成 临 床 试 验 阶 段。 此 外，重 组 胃 脂 酶 （ gastric lipase） 和人胰岛素（ insulin） 分别在玉米种子 和红花种子中已完成临床 II 期试验［15］。除上述已进 入临床试验或商业化生产阶段的植物源重组医用蛋白
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文章编号： 1000-8551（ 2014） 09-1597-09
基于种子生产植物源重组药物蛋白研究进展
蒋 滢1 杨 静2 齐广勋2 邢国杰2 马莲菊1 杨向东2
收稿日期： 2013-12-23 接受日期： 2014-05-13 基金项目： 国家自然科学基金（ 31000743） ，吉林省农业科学院创新工程项目（ C42070507） 作者简介： 蒋滢，女，主要从事植物生物反应器方向研究。E-mail： tianshixiaolian@ 163． com 通讯作者： 杨向东，男，副研究员，主要从事植物生物反应器及叶绿体转基因方面研究。E-mail： xdyang020918@ 126． com
利用种子生产重组医用蛋白或多肽是植物生物反 应器研究的一个重要领域。ProdiGene 公司首次利用 玉米种子表达了重组亲和素 （ avidin） ，其生产成本较 微生物生产系统降低 10 倍以上［12］。随后该公司利用 玉米种子生产的重组胰蛋白酶（ bovine trypsin） 进入商 业化 生 产，其 市 场 规 模 预 计 达 1. 2 亿 美 元［7］。 He 等［13］利用 水 稻 种 子 表 达 的 重 组 人 血 清 蛋 白 （ human serum albumin，OsrHSA） 表达水平为 10. 58% TSP。进 一步研究表明，重组 OsrHSA 具有与人 HSA 相同的生 物学功能，具 有 促 进 细 胞 生 长 和 治 疗 肝 硬 化 的 作 用。 目前重组 OsrHSA 已进入大规模商业化生产阶段。美 国 Ventria Bioscience 公司利用水稻种子生产的重组人 乳铁蛋白（ lactoferrin） 及重组溶菌酶（ lysozyme） 表达量 分别为 25% TSP 和 13% ～ 14% TSP［14］，目前这两种重 组蛋 白 已 完 成 临 床 试 验 阶 段。 此 外，重 组 胃 脂 酶 （ gastric lipase） 和人胰岛素（ insulin） 分别在玉米种子 和红花种子中已完成临床 II 期试验［15］。除上述已进 入临床试验或商业化生产阶段的植物源重组医用蛋白
高纯度植物源重组人血清白蛋白的制备方法及其应用
高纯度植物源重组人血清白蛋白的制备方法及其应用高纯度植物源重组人血清白蛋白（HSA）的制备方法及其应用植物源重组人血清白蛋白（HSA）是一种重要的生物医药制剂，在临床和科研中有着广泛的应用。
传统上，HSA通常是通过提取人类血液中的白蛋白获得，但这种方法存在血液供应紧张和传染病传播的风险。
近年来，利用转基因植物制备高纯度植物源重组HSA的方法得到了广泛关注。
高纯度植物源重组HSA的制备方法主要包括基因克隆、转基因植物的构建与转化、植物体内表达和HSA的提取纯化等步骤。
首先，对人类血浆中的HSA基因进行克隆，获取HSA基因的DNA序列。
然后，将HSA基因与适当的启动子、终止子和调控元件进行连接构建成适用于植物表达的表达载体。
接下来，将表达载体通过农杆菌介导的方法导入到目标植物中，使目标植物细胞中含有HSA基因。
在经过一系列的培养和筛选后，选出转基因植物株系并进行扩繁。
在大规模的转基因植物培养过程中，需要对植株进行适当的生长条件控制，以提高HSA的表达水平。
常见的培养方法如液体培养和固体培养等，可以根据需求选择合适的培养方式。
当目标植物达到一定生长期时，可以进行HSA的提取和纯化。
常用的提取方法包括机械破碎和细胞溶解等，用以破坏植物细胞结构，释放HSA。
然后，可通过凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析和透析等技术手段对提取液进行纯化，以去除杂质，并得到高纯度的植物源重组HSA。
高纯度植物源重组HSA在医药领域具有广泛的应用价值。
首先，HSA可以作为生物医药制剂的原料药使用，如制备血浆代用品，用于治疗休克、肝功能不全等疾病。
其次，HSA可以用于制备口服给药的载体，如微球、纳米颗粒等，用于提高药物的生物利用度和稳定性。
此外，HSA还可以作为药物传递系统的载体，如携带药物靶向癌细胞。
与传统的人血浆源HSA相比，高纯度植物源重组HSA具有以下优势：一是植物不具备传染病的风险，可以避免传染病的传播；二是植物源HSA可以实现大规模生产，提高制备效率和降低制备成本；三是植物源HSA可以通过基因工程技术进行定制化的改良，以满足特定的临床和科研需求。
植物铁素转运蛋白家族的结构生物学及其功能分析
植物铁素转运蛋白家族的结构生物学及其功能分析植物是全球最主要的食物来源之一，然而，缺铁是影响植物生长和发育的最重要因素之一。
为了解决这个问题，植物进化出了一种可以转运铁素的蛋白质——铁素转运蛋白。
铁素转运蛋白家族是一个广泛存在于真核生物中的基因家族，包括铁素转运蛋白（IRT）和铁素调节蛋白（FER）等多个成员。
植物铁素转运蛋白家族的分子结构和功能铁素转运蛋白家族的成员在结构上具有高度的相似性，通常包括12个跨膜区域，其中第三和第四个跨膜区域形成了一个水合孔道，用于转运铁素。
这两个跨膜区域之间还存在着两个环形结构，用以稳定整个蛋白质的结构。
此外，铁素转运蛋白家族的成员还包括N-端和C-端两个侧臂，分别对蛋白质运输和调控起到重要作用。
植物铁素转运蛋白家族中的不同成员对铁素的结合亲和力和选择性不同，在植物内部，它们分别起到将铁素从根部吸收到整个植物体、存储和调节铁素的作用。
生物、生化和遗传的互动铁素转运蛋白家族的结构和功能不仅受到生化、物理等基础学科的影响，也受到生物学和遗传学等综合学科的相互作用。
研究表明，铁素转运蛋白受到外界环境、植物生长期以及生长条件的影响，从而调整其转运铁素的能力，结构和功能的变化。
例如，在土壤缺铁的环境下，铁素转运蛋白有一些优化形态，用于更好地吸收来源于土壤中的铁离子，通过这种学习和优化，铁素转运蛋白的选择性更好，有效减少了浪费和损失。
铁素转运蛋白家族的功能分析随着科学技术的发展，研究人员可以利用基因工程等技术研究铁素转运蛋白家族的功能。
例如，在处理铁素缺乏的植物时，研究人员可以通过表达某种铁素转运蛋白进行改善。
另外，还可以利用不同基因型的植物进行遗传和生理分析，以确定各个成员对植物生长发育的影响。
除了研究铁素转运蛋白家族的功能外，还可以研究它们与其他生物分子的相互作用，比如透过生物的介导作用控制铁素的吸收。
更深入的研究将有助于我们更好地了解铁素在植物中的转运和利用过程，为发展改进新植物品种，提高植物产量和质量提供理论基础。
重组人乳铁蛋白(rhLF)的致敏性评价
述功 能 使 ｈ Ｌ Ｆ 具 有 了广泛 的应 用 空 间， ｈ Ｌ Ｆ己被推 荐 作为 食 品添加 剂 。随着 其应 用 的 日益 广泛 ， ｈ Ｌ Ｆ的 需
求量 也 在逐 年上 升 。 虽然 目前 已经 有 不少方 法 可 以从 母 乳 中分 离纯 化 出ｈ Ｌ Ｆ ， 但 费用较 高 ， 产量 低 ， 这 已 成 为 限制 其充 分利 用 的重 要 因素 。研 究显 示 ， 通过 转基 因技术 使 ｒ ｈ Ｌ Ｆ 基 因在 牛乳 腺 中表 达 ， 会给 大 规模 工 业化 生 产 ｈ Ｌ Ｆ提 供 了有 效 ｈ Ｌ Ｆ如 ｈ Ｌ Ｆ一 样 安全 的 条件 下才 能广 泛使 用 。最 近研 究表 明 ， ｒ ｈ Ｌ Ｆ 转 基 因奶 牛 的牛 乳成 分 与 非转 基 因奶 牛产 生 的牛 乳 并没 有 显著 差 异 。转 基 因奶 牛 乳汁 中含 有 的 ｒ ｈ Ｌ Ｆ与 ｈ Ｌ Ｆ在 生物 学 特性 上 也相 似 ， 如 分子 量 较接 近 ， Ｃ端糖 基化 位 点也 基本 相 同， 而这 两 种 蛋 白Ｎ端 糖 基 化 的 区别 在 于物 种 和 组 织／ 细 胞特 异 性 。ｒ ｈ Ｌ Ｆ对 蛋 白水解 的敏 感 性 与 天 然 ｈ Ｌ Ｆ相 比， 并无 明显区别 ， 在体 外消 化 实验 中， 都 能够 在 ６ ０ ｍｉ ｎ内被 完 全消 化 。此 外 ， 研 究 发现 ｒ ｈ Ｌ Ｆ 在 体
人 乳铁 蛋 白（ ｈ Ｌ Ｆ ） 是 一 种 多功 能 蛋 白 ， 属 于 转铁 蛋 白家 族 ， 具 有抗 菌 、 抗 病 毒和 抗 氧化 等特 性 。饮 食
中的 ｈ Ｌ Ｆ能 改善 机体 ， 特 别 是 婴幼 儿对 铁 元素 的吸 收率 ， 同时还 能够 促 进 肠道 上 皮细 胞 的生 长发 育 。上
植物源性重组人血清转铁蛋白的多功能性介绍
植物源性重组人血清转铁蛋白的多功能性概述人血清转铁蛋白（htf）是人血清中主要的结合铁蛋白质，在铁转运中有重要作用。
另外，htf还有许多其他的作用，包括抗菌功能和对哺乳动物细胞增殖、分化中的生长因子效用。
其多功能性使其在不同疗法和商业应用中有巨大价值。
然而，htf的这些成功应用很大程度上取决于大量的高质量的htf的应用。
本研究中，我们将植物作为获得重组htf的一种新平台。
我们的研究表明转基因植物是一种获得rhtf的有效系统，最大积累量达到了全部可溶蛋白的0.25%（或高达33.5ug/g的叶子鲜重）。
此外，植物源性rhtf保持了许多与天然htf相同的生物活性。
尤其是rhtf 在体外可逆性的结合铁作用，表明了其抑菌活性、在无血清培养基中的支持细胞增值的作用，和在体外内化进入哺乳动物细胞的性质。
本研究的成功使得未来多领域应用植物源性rhtf成为可能。
植物源性rhtf突出的应用就是作为特定细胞的一种新的载体或者作为蛋白质/肽段药物的口服递送以治疗人类疾病例如糖尿病。
为证明此假说，我们在植物中又额外地表达了一种包含胰高血糖素样肽段-1（GLP-1）或其衍生物的htf融合蛋白。
在此，我们展示植物源性htf-GLP-1融合蛋白保持了体外培养基中内化进入哺乳动物细胞的能力。
简介转铁蛋白Tf包含了所有脊椎动物体内发现的一系列同源性的铁结合蛋白糖蛋白（Aisen and Harris, 1989），主要功能是铁的螯合和转运。
Tf是一种单分子蛋白，分子量范围为76-81 kDa，取决于糖基化程度。
每种TF蛋白包含两种相似的裂片，分别叫做N-末端和C-末端，每一裂片包含单一的铁结合位点（Aisen and Harris, 1989; Baker et al., 2002）。
hTf是转铁蛋白Tf家族的主要成员。
hTf蛋白由679个氨基酸组成，主要在肝脏合成并分泌入血（MacGillivray et al., 1983）。
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植物源性重组人血清转铁蛋白的多功能性概述人血清转铁蛋白（htf）是人血清中主要的结合铁蛋白质，在铁转运中有重要作用。
另外，htf还有许多其他的作用，包括抗菌功能和对哺乳动物细胞增殖、分化中的生长因子效用。
其多功能性使其在不同疗法和商业应用中有巨大价值。
然而，htf的这些成功应用很大程度上取决于大量的高质量的htf的应用。
本研究中，我们将植物作为获得重组htf的一种新平台。
我们的研究表明转基因植物是一种获得rhtf的有效系统，最大积累量达到了全部可溶蛋白的0.25%（或高达33.5ug/g的叶子鲜重）。
此外，植物源性rhtf保持了许多与天然htf相同的生物活性。
尤其是rhtf在体外可逆性的结合铁作用，表明了其抑菌活性、在无血清培养基中的支持细胞增值的作用，和在体外内化进入哺乳动物细胞的性质。
本研究的成功使得未来多领域应用植物源性rhtf成为可能。
植物源性rhtf突出的应用就是作为特定细胞的一种新的载体或者作为蛋白质/肽段药物的口服递送以治疗人类疾病例如糖尿病。
为证明此假说，我们在植物中又额外地表达了一种包含胰高血糖素样肽段-1（GLP-1）或其衍生物的htf融合蛋白。
在此，我们展示植物源性htf-GLP-1融合蛋白保持了体外培养基中内化进入哺乳动物细胞的能力。
简介转铁蛋白Tf包含了所有脊椎动物体内发现的一系列同源性的铁结合蛋白糖蛋白（Aisen and Harris, 1989），主要功能是铁的螯合和转运。
Tf是一种单分子蛋白，分子量范围为76-81 kDa，取决于糖基化程度。
每种TF蛋白包含两种相似的裂片，分别叫做N-末端和C-末端，每一裂片包含单一的铁结合位点（Aisen and Harris, 1989; Baker et al., 2002）。
hTf是转铁蛋白Tf家族的主要成员。
hTf蛋白由679个氨基酸组成，主要在肝脏合成并分泌入血（MacGillivray et al., 1983）。
hTf的主要功能是络合血中的游离铁并将之转运到全身各处（MacGillivray et al., 1983）。
放射示踪研究显示至少80%的络合至tHf的铁转运至骨髓并组成新生的红细胞（Finch and Huebers, 1982）。
除其众所周知的铁转运功能外，hTf还有许多额外的功能，许多与其携铁能力无关。
例如，研究显示HTF可促进体外无血清培养基条件下鼠粒性白细胞和巨噬细胞前体细胞的克隆生长（Iizuka and Murphy, 1986）。
另外，HTF的存在对于大多数哺乳动物细胞的培养有重要作用，例如体外受精培养（Holst et al., 1990）和肝细胞群体的维护和扩展（Suzuki et al., 2006）。
当增殖细胞高表达HTF受体以允许HTF包裹并可能引发和维持细胞DNA合成时，HTF常常作为一种生长因子（Gomme et al., 2005）。
HTF的其他作用包括抵抗细菌、酵母菌、病毒和真菌的抗菌活性（(Artis et al., 1983; Salamah and al-Obaidi, 1995），降低细胞粘附的能力（Ardehali et al.,2002）。
HTF的多功能性可以作为潜在的治疗和非治疗应用。
例如，HTf已被用来治疗人类转铁蛋白缺乏症（一种以贫血、铁超载、生长迟缓和感染发生率增加为特点的状况）（Hayashi et al., 1993），局部贫血-再灌注损伤（促进氧化应激导致炎症、最终因凋亡和坏死而导致细胞死亡的一种情况）（Hayashi et al., 1993）和心血管疾病（Hayashi et al., 1993）。
HTF的治疗送递也降低了放射疗法的副作用（Koterov et al., 2003），有助于为骨髓移植患者提供抗微生物活性的作用（von Bonsdorff et al., 2003）。
此外，HTF已用来作为一种新的载体系统，在体内运载药物入癌细胞（Laske et al., 1997）。
近来，HTF被证实作为一种高效的载体，以送服口服蛋白质和氨基酸药物入内脏以实现全身治疗效果（Widera et al.,2004; Bai et al., 2005）。
HTF蛋白也有许多巨大的潜在非治疗应用。
例如，许多无血清培养基以HTF作为血清代用品，支持哺乳动物细胞生长（Barnes and Sato, 1980a,b）。
为了使HTF的这些商业和治疗应用具备可行性和得到实现，大量HTF的可靠、廉价的供应是很重要的，取决于一种高效、性价比合算的重组生产系统。
迄今为止，已有数种表达系统报道获得重组HTF。
描述的RHTF的细菌表达，仅允许生产蛋白质的氨基末端和羧基末端领域（半分子）（Ikeda et al., 1992; Steinlein and Ikeda, 1993;de Smit et al., 1995），随着19HTF分子内二硫键的出现，使得利用微生物主机获得这种蛋白成为了一项挑战。
使用细菌获得重组ＨＴＦ的进一步限制，是其从重组蛋白到获得功能性产品过程中无法去除信号肽（MacGillivray et al., 1998）。
作为一个可选择的细菌生产系统，已证实rhTf在幼仓鼠肾（ＢＨＫ）细胞的表达（Funk et al., 1990; Mason et al., 1991, 1993, 2001）。
虽然成功了，但幼仓鼠肾细胞系统受限于低产量的rhTf （no more than 40 mg⁄L of cell culture）。
为了降低生产难度，已研究了数个表达系统，包括酵母菌（仅在ＨＴＦ的Ｎ－末端领域和两个ＨＴｆ突变类型表达）（Steinlein et al., 1995;Sargent et al., 2006）、使用杆状病毒表达系统的昆虫细胞（> 20毫克⁄L的细胞培养）（Ali et al.,1996）和果蝇Ｓ２细胞（不超过0.35毫克⁄L的细胞培养）（Lim et al., 2004）。
因为这些系统都是依靠昂贵的细胞培养和发酵方法，他们不适合低成本的规模化生产。
此外，哺乳动物的细胞培养很容易受到细菌和病毒病原的污染，导致产品安全的担忧。
植物生物反应器已被证实作为一种有效的、有吸引力的重组哺乳动物蛋白的生产平台（Schillberg et al., 2005;Daniell, 2006;Boehm, 2007）。
作为生物反应器，植物允许无限的可扩展性，通过哺乳动物病原体消除产品污染，以及与微生物或动物相比，使用细胞培养系统降低了生产成本（Daniell,2006; Boehm, 2007; Ma et al.,2008）。
因为他们的真核特性，植物可以进行复杂的转译后修改和加工，这是许多转基因哺乳动物具有治疗作用的蛋白质的生物学和⁄或免疫学功能所要求的。
此外，可食用的转基因植物组织提供了允许植物源性治疗蛋白质和多肽直接口服递送的可能性，消除了昂贵的下游蛋白纯化和加工。
在本研究中,我们已经证实了利用转基因植物作为生产rhTf新体系的可行性。
因为天然hTf是一种分泌分子，rhTf是针对转基因植物内膜系统以提高积累的。
在此，我们证明了转基因烟草植物是一个有效的生产rhTf表达系统，最大限度积累可达0.25%的全部可溶性蛋白质（ＴＳＰ）（或者高达33.5ｕｇ／ｇ鲜叶组织）。
转基因蛋白质的生化和功能特性表明了植物源性ＲＨＴＦ是非糖基化的，正如酶和化学去糖基化分析证实的，保留的多项与天然hTf性能相同的性能。
尤其是，植物源性rhTf在体外可逆性地络合铁，证实了抑菌活性，在无血清培养中支持细胞生长和增殖，并保留了在体外内化进入哺乳动物细胞的能力。
这些结果表明，植物源性rhTf可能存在许多潜在应用价值。
最重要的功能是，使用rhTf作为特定细胞或口服递送的蛋白质和多肽药物的新载体分子。
为了验证这个假说，我们在转基因植物中额外引入了一个rhTf融合蛋白，包含抗胰高血糖素样肽1 (GLP-1)或其衍生物。
已证明，当加入到体外细胞培养基，植物源性rhTf-GLP-1融合蛋白有内化进入哺乳动物细胞的能力。
该研究结果具有重要的影响，其中包括开发植物源性rhTf作为一种新的靶向给药系统的可能性，以及未来开发出基于新的植物源性rhTf治疗广谱疾病方法的可能性。
结果转基因植物的植物表达载体的构建和产生二进制植物表达载体ｐＲＪＣ－ｈＴｆ的产生，强本构CaMV 35S促进剂促进了hTf的表达天然信号肽如图1表明。
来源于烟草蚀刻病毒（ＴＥＡ）ＲＮＡ的５＇端输出序列和３＇内质网（ＥＲ）保留信号主题ＫＤＥＬ整合入ｐＲＪＣ－ｈＴｆ以最大限度ｒｈＴｆ积累（(Ma et al., 2005; Wang et al., 2008）。
即时插入上游信号KDEL的6xHis标签整合到ｐＲＪＣ－ｈＴｆ上，以通过固定化金属亲和层析促进下游ｒｈＴｆ的纯化（ＩＭＡＣ）。
低生物碱烟草变种８１Ｖ９（Menassa et al., 2001）是利用含有pRJC-hTF的根癌农杆菌转变的。
所产生的20多个独立的转基因烟草株，与所有转基因植物，表现出了正常的生长和发育，与非转变烟草cv. 81V9相比没有表型方差。
hTf整合入核基因组，且其在转录水平的表达，分别经聚合酶链反应（ＰＣＲ）和逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）而得到证实（数据未显示）。
转基因植物的rhTf蛋白质积累rhTf在转基因植物的积累，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及其后的使用市面可得的抗hTf抗体的免疫蛋白印迹得到印证。
总蛋白萃取物时从植物获得的，通过ＲＴ－ＰＣＲ获得rhTf阳性表达。
如图２ａ，抗ｈＴｆ抗体检测到一个明显的分子质量76ｋＤａ的单一蛋白，与ｈＴｆ标准等同尺寸（Sigma-Aldrich）。
不出所料，在相同的条件下的野生植物叶子提取物中没有检测到蛋白质带。
烟叶提取物中rhTf的相对积累量的测定，采用间接的抗hTf 抗体ELISA法与一个hTf标准比较。
rhTf的积累水平，发现在独立主要转基因植物(T0plants)，范围从0.07%到0.25%ＴＳＰ（或6至33.5ｇ／ｇ鲜叶重）。
此外，转基因烟草植物的rhTf有明显的空间分布的差异，最上面的叶子表现出最高水平转基因蛋白质积累（数据未显示）。
植物源性ｒｈＴｆ是非糖基化的为了研究植物源性rhTf的醣化作用，重组蛋白进行了酶、化学去糖基化。
对酶的去糖基化，总蛋白提取物以及通过His-purification得到的植物源性rhTf的部分纯化样品，用PNGase F处理并通过使用抗hTf抗体的免疫印迹法分析。
在PNGase F处理之前，纯化rhTf的完整性，通过Coomassie bule stainong考马斯亮蓝染色在SDS - PAGE 上确认。