柱凝集技术
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.检验医学.--------------------------中国当代医药2021年6月第28卷第17期微柱凝胶法交叉配血次侧弱凝集的原因及配血对策朱洁好叶伙梅孙沁杰广东省云浮市人民医院输血科,广东云浮527300[摘要]目的探讨微柱凝胶法(MGT)交叉配血次侧弱凝集的原因及配血对策。
方法选取2019年9月~2020年10月云浮市人民院共3606例受血者标本,对MGT交叉配血次侧弱凝集的标本进行DAT检测,并对供血者进行抗体筛查试验,分析MGT交叉配血次侧弱凝集的原因,探讨相应的配血对策。
结果3606例受血者标本中出现次侧弱凝集120例,其中直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性117例,供血者抗体筛查阳性2例,假凝集1例;对DAT阳性且黄疸明显的5例标本进一步做免疫分型及放散试验,发现5例均为IgG型,放散后抗体筛查全阴性的4例,放散后抗体筛查全阳性的1例。
结论MGT交叉配血次侧弱凝集由患者DAT阳性所致占97.50%.,交叉配血次侧凝集强度不强于患者DAT凝集强度即可;对于DAT阳性且黄疸明显的标本应查找原因,采取相应的配血方案,以提高输血的安全性及有效性。
[关键词]微柱凝胶法;交叉配血;次侧弱凝集;直接抗人球蛋白试验;输血[中图分类号]R457.11[文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2021)6(b)-0196-03Causes of weak agglutination on the secondary side of cross-matching with micro-column gel test and countermeasures of matchingZHU Jie-hao YE Huo-mei SUN Qin-jieDeparLmenL of Blood Transfusion,Yunfu People's HospiLal,Guangdong Province,Yunfu527300,China[Abstract]Objective To invesLigaLe Lhe causes of weak aggluLinaLion on Lhe secondary side of cross maLching wiLh micro-column gel LesL(MGT)and Lhe counLermeasures of maLching.Methods A LoLal of3606blood samples collecLed from SepLember2019Lo OcLober2020in Yunfu People's HospiLal were included in Lhe sLudy.The direcL anLi-human globulin LesL(DAT)was performed on Lhe samples wiLh weak aggluLinaLion on Lhe secondary side of MGT cross-maLching blood,and Lhe anLibody screening LesL was performed on donors.The causes of weak aggluLinaLion on Lhe secondary side of MGT cross-maLching blood were analyzed,and Lhe corresponding maLching counLermeasures were discussed.Results There were120cases of secondary weak aggluLinaLion in Lhe3606blood samples,including117cases of DAT posiLive,2cases of posiLive donor anLibody screening,and1case of false aggluLinaLion.FurLher immunophenoLyping and diffusion LesLs were performed on Lhe five DAT-posiLive specimens wiLh obvious jaundice.The resulLs showed LhaL all five specimens were IgG-Lype,four were all negaLive for anLibody screening afLer diffusion,and one was all posiLive for anLibody screening afLer diffusion.Conclusion97.50%of Lhe cases of weak aggluLinaLion on Lhe secondary side of MGT cross-maLching blood are caused by DAT posiLiviLy in paLienLs,and Lhe aggluLinaLion inLensiLy on Lhe secondary side of cross-maLching blood is noL sLronger Lhan LhaL of DAT in paLienLs.For Lhe specimen wiLh DAT posiLive and obvious jaundice,in order Lo improve Lhe safeLy and effecLiveness of blood Lransfusion,Lhe causes should be found and Lhe corresponding blood maLching scheme should be Laken.[Key words]Micro-column gel LesL;Cross-maLching;Weak aggluLinaLion on Lhe secondary side;DirecL anLi-human globulin LesL;Blood Lransfusion交叉配血试验是输血前必做的配合性试验,以确定受血者或供者血液中没有可测的不相配合的抗原和抗体成分,是安全输血的第一要素。
柱凝集技术Coombs试验效果评价段慧玲;滕本秀;郑月明【期刊名称】《免疫学杂志》【年(卷),期】2002(18)3【摘要】目的探讨柱凝集技术间接抗人球法在交叉配血和不规则抗体筛检试验中的可靠性。
方法应用CAT法、凝聚胺法(polybrene)和试管间接抗人球法(TCT)3种技术对20份阴性血清和30份已知阳性血清进行了间接抗人球试验,对其中5份阳性血清进行了灵敏度测试。
结果3种方法对30份阳性血清的阳性检出率分别为:CAT法100%、polybrene法93.3%、TCF法76.7%。
灵敏度测试结果为CAT法>polybrene法>TCT法。
结论CAT法在日常配血和不规则抗体筛检试验中,是一种灵敏度较高的可靠方法,提倡在输血领域推广应用。
【总页数】3页(P232-233)【关键词】柱凝聚法;凝聚胶法;Coombs试验;输血;配血【作者】段慧玲;滕本秀;郑月明【作者单位】第三军医大学新桥医院输血科【正文语种】中文【中图分类】R446.62【相关文献】1.柱凝集技术在尿毒症病人交叉配血试验中的应用 [J], 施新颜;沈强;孔惠良2.微柱凝胶卡式法Coombs试验在自身免疫性溶血性贫血诊断中的应用 [J], 周雪丽;阎石;李鹏;赵玉平3.微柱凝胶法与Coombs试验检测孕妇血清IgG抗A(B)效价的比较 [J], 张莹;王晓岚;彭群新;沈轶骊;李勇;王雪明4.微柱凝集技术检测直接抗人球蛋白试验结果分析 [J], 刘燕明;郭文敬;宫济武5.微柱凝胶Coombs试验对人RhD血型检测的实验研究 [J], 李勇;朱建春;刘莹;胡永红;张双义因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
新生儿溶血病检测操作规程一、项目名称、检验方法名称1.项目名称:新生儿溶血病检测(包括直接抗人球蛋白试验、游离试验和放散试验三项)2.检验方法名称:柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应,BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后,发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面,而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1.试剂卡品牌:美国强生奥索2.代号:BioVue-po1yCassettes3.包装规格:400卡/箱试剂卡(707300);100卡/箱试剂卡(707350)4.试剂成分:抗人球蛋白(1gG,C3b∕C3d)检测卡有6根微柱组成,每一柱中含有缓冲液,其成分为牛血清蛋白,大分子增强剂以及0.1%叠氮钠,0.0IM的EDTA.成分描述第1〜6柱:抗人球蛋白、抗抗一IgG(兔)-IgG.-C3d;多特异性抗一C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3)抗一C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7)FD&C1#蓝色染料FD&C5#黄色染料5.试剂的储存与效期:储存条件:2〜25。
C环境保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中,也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源(如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等)很近或阳光直射的地方。
效期:试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVUe专用离心机;BiOVUe专用孵育器五、样本的采集与准备:在采集标本前对病人/献血者无特殊要求。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行,应将标本置于2—8。
C保存。
六、试剂准备:抗人球蛋白(IgG,C3b∕C3d)检测卡为即用型产品。
试剂卡应在铝箔开启后一小时内使用。
试剂卡经过运输颠簸后,需倒置一下,然后重新离心以备用。
柱凝集法交叉配血试验操作规程20241.原理柱凝集法交叉配血是通过抗原-抗体在凝胶卡的反应室中反应后离心通过预先装填有抗IgG的凝胶柱。
凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或柱体中,而不凝集的红细胞则将在凝胶柱的底部。
2试剂柱凝集配血卡。
3.操作3.1取凝胶抗球蛋白微柱卡,标记1号(“主侧”),2号(“次侧”)。
3.2主侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将献血者红细胞配成1%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)50µ1轻轻滴人1号微管反应池中,再加25µ1受血者血清。
3.3次侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)50µ1轻轻滴人2号微管反应池中,再加25µ1献血者血清。
3.4阴印捆:配制细胞悬液,通常情况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1%的悬液50µ1轻轻滴入2号微管反应池中再加25µ1AB型血清。
3.5将已加好反应物的凝胶卡放入37°C孵育15分钟。
3.6取出凝胶卡,立即用专用离心机离心,通常离心的速度被设定在1000r/min (80x g~100x g离心10分钟后,观察结果。
4结果判定4.1若对照管细胞沉淀在管底,检测管凝集块在胶上或胶中判读为阳性。
结果判断参照图示(见图1-5-1).图片4.2若对照管和检测管的细胞沉淀均在管底判读为阴性。
4.3若对照管细胞在胶上或胶中说明试验失败应重新试验。
5注意事项5.1每种柱凝集卡都分为反应室和凝胶柱两部分操作时,向反应池内要先加红细胞悬液,后加血清或抗体。
5.2不同的厂商所提供的柱凝集试验要求的细胞与血清的比例不同,一般50µ11%红细胞悬浮加25µ1血清;50µ10.8%红细胞悬浮加40µ1血清。
5.3除上述两种配血方法之外,常用的还有快速的聚凝胺介质配血、LISS 介质配血以及增强反应的酶法配血等。
ABO-Rh正反定型血型定型操作规程一、项目名称、检验方法名称1.项目名称:ABO-Rh正反定型血型定型2.检验方法名称:柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应,BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后,发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面,而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1.试剂卡品牌:美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2.代号:BioVue -ABO/Rh-Reverse3.包装规格:400卡/箱试剂卡(707100);100卡/箱试剂卡(707155)4.试剂成分:BioVue ABO-Rh正反定型血型诊断试剂卡有6根微柱组成,每一柱中含有缓冲液,其成分为牛血清蛋白,大分子增强剂以及0.1%叠氮钠,0.01M的EDTA.成分描述第一柱:抗-A试剂抗-A鼠单克隆(lgM)抗体混和;蓝色染料第二柱:抗-B试剂抗-B鼠单克隆(lgM)抗体混和;黄色染料第三柱:抗-D试剂(抗RH)抗-D人单克隆(lgM)抗体第四柱:质控优化增强剂,用于血型检测的质控对照第五,第六柱:反定型稀释液优化增强剂,用于反定型血型检测5.试剂的储存与效期:储存条件: 2~25℃环境中保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中,也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源(如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等)很近或阳光直射的地方。
效期:试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机;BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备:在采集标本前对病人/献血者无特殊要求,血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行,应将标本置于2-8℃保存。
凝聚胺法与微柱凝胶法在临床输血中的应用效果分析凝聚胺法和微柱凝胶法是现代临床输血中常用的两种血型鉴定方法,对于准确判断受者和供者之间的血型差异,避免血型不符导致的输血反应具有重要意义。
本文在分析凝聚胺法和微柱凝胶法在临床输血中的应用效果时,将重点关注两者的准确性、快速性和方便性。
凝聚胺法是一种基于抗原—抗体凝集原理的血型鉴定方法。
其原理是利用酶抗体将被测血型抗原与红细胞进行凝集反应,观察是否产生凝集。
其优点是操作简单、成本低廉,可以快速判断受者和供者的血型。
凝聚胺法存在一定的局限性,容易受到红细胞浓度、温度等因素影响,准确性相对较低。
由于凝胶反应速度较慢,需要一定的反应时间,无法满足紧急输血的需求。
微柱凝胶法是一种基于凝集原理和悬浮凝胶矩阵的血型鉴定方法。
其原理是在悬浮凝胶矩阵中加入血型抗体,将红细胞与抗体进行凝集反应,并通过观察凝胶柱的高度判断血型差异。
微柱凝胶法具有准确性高、反应快速、稳定性好等优点。
它可以同时鉴定多种血型抗原和抗体,减少实验成本和操作时间。
该方法还可以检测出一些意外抗体的存在,对于判断既往妊娠输血史等具有重要意义。
微柱凝胶法的操作技术要求相对较高,需要经过专门培训才能掌握。
在临床实践中,凝聚胺法和微柱凝胶法的结合应用效果更佳。
凝聚胺法可以快速进行初步血型鉴定,确定受者和供者的ABO血型,并进行紧急输血。
而微柱凝胶法可以进一步确认血型差异,检测出意外抗体的存在,并进行更精确的血型鉴定。
两者结合可以提高血型鉴定的准确性和快速性。
微柱凝胶法还可以用于进行试验操作,筛查血型不合格的供者,确保输血的安全性。
凝聚胺法和微柱凝胶法在临床输血中具有各自的优缺点,通过结合应用可以提高血型鉴定的准确性和快速性。
在日常临床工作中,根据具体情况选择恰当的血型鉴定方法,可以有效防止血型不合适导致的输血反应,确保输血的安全性。