分子生物学技术讲座基因表达调控的研究方法的分子生物学技术讲座——基因表达调控的研究方法基因表达调控的研究已成为当代分子生物学的一个研究热点。
所谓的基因表达就是指生物体内基因组中特定的结构基因在特定的条件下通过转录、翻译等一系列的复杂过程，合成具有特定氨基酸序列并具有特定生物学功能的蛋白质分子。
但是基因组上的所有结构基因并非在所有的细胞中同时都表达，每一个特定的结构基因的表达都是在生物体发育的特定阶段，在特定的组织中或细胞中才得以进行，即生物体内基因的表达具有选择性和程序性，而且表达的数量也是特定的，这就是基因表达的调控。
由于基因表达的调控是一个多水平(即基因组、转录、转录后、翻译和翻译后)的复杂过程，所以研究基因表达调控的方法种类繁多，新方法、新技术层出不穷。
目前常用的方法有：DNase Ⅰ超敏感分析法、DNA甲基化分析、蛋白-核酸紫外交联法、体外转录分析法、氯霉素乙酰转移酶分析、足纹法、凝胶滞留法、Northern印迹法、转录起始点分析法、二相杂交法、三相杂交法和Western印迹法等。
在此仅择其最常用的或最新的方法加以详细介绍。
1 Northern印迹法Northern印迹法又称RNA印迹法，它的工作原理和操作过程与Southern印迹法基本相同。
所不同之处是Northern印迹法是将电泳分离的RNA从凝胶中转移至固相的支持物上。
其基本操作过程是从细胞或组织中提取的总体RNA，经变性琼脂糖凝胶电泳分离后，转移至硝酸纤维素膜上或尼龙膜上，然后用特异性放射性探针去检测目的基因的表达状况，见图(1)。
如果对Northern印迹法的放射自显影结果进行密度扫描或计算机技术分析，就可定量分析被检测的目的基因在不同的组织中或细胞中的表达状况。
目前此方法广泛地应用于基因表达水平的研究。
2 足纹法足纹法是测定DNA结合蛋白在DNA上的精确结合位点的实验方法。
它可以分成二大类，即保护法和干扰法。
保护法的原理是DNA结合蛋白与其特异的DNA序列结合，可保护其结合序列免受某些DNA断裂试剂(DNase Ⅰ、核酸外切酶Ⅱ、羟自由基等)的作用。
