枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌产酶研究分析

枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌产酶分析一、概述1.枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种。

单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。

无荚膜，周生鞭毛，能运动。

革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。

菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。

需氧菌。

可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。

有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌；有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系，故常作选育核苷生产菌的亲株或制取5'-核苷酸酶的菌种。

在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。

广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。

2.地衣芽孢杆菌地衣芽孢杆菌，种属芽孢杆菌科细菌为革兰氏阳性杆菌；细胞大小：0．8μm×（1．5～3．5）μm；细胞形态及特点：细胞形态和排列呈杆状、单生。

细胞内无聚-β-羟基丁酸盐（PHB）颗粒，产生近中生的椭圆状芽孢，孢囊稍膨大。

在肉汁培养基上的菌落为扁平、边缘不整齐、白色、表面粗糙皱褶，24h后菌落直径为3mm。

本菌有动力。

可调整菌群失调达到治疗目的，可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌。

能产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖。

二、产酶的种类1.枯草芽孢杆菌代谢产酶种类枯草芽孢杆菌产生多种酶和其他代谢产物，主要由以下几个方面：●枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；●枯草芽孢杆菌能迅速消耗消化道内环境中的游离氧，形成肠道低氧环境，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌的生长；●枯草芽孢杆菌能刺激动物免疫器官的生长发育，激活淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力；●枯草芽孢杆菌菌体能自身合成消化性酶类，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等，在消化道中与内源酶共同发挥作用，提高饲料消化率；枯草芽孢杆菌能合成多种维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。

产淀粉酶芽孢杆菌的分离与初步鉴定吴月婷摘要：从土壤中分离得到一株产淀粉酶的芽孢杆菌X-1，对其进行形态学鉴定和生理生化特性分析，包括菌落形态、菌体形态、糖利用情况、生长pH范围、耐盐范围、明胶液化和酪素的水解等，初步鉴定为芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）或地衣芽孢杆菌（Bacillus lentus）。

关键词：产淀粉酶；芽孢杆菌；分离；初步鉴定淀粉酶(Amylase)是指能分解淀粉糖苷键的一类酶，主要包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、糖化酶和异淀粉酶等，在生物体的糖类代谢中起重要的作用。

其中α-淀粉酶（1,4-α-D-glucan glucanohydrolase）能水解淀粉大分子的α-1,4-糖苷键，生成糊精、麦芽寡糖、麦芽糖、葡萄糖等水解产物[1]。

α-淀粉酶在植物、动物和微生物中都广泛存在，常见的产淀粉酶微生物有芽孢杆菌、放线菌、黑曲霉、米曲霉、红曲霉和根霉等[2-7]。

芽孢杆菌属(Bacillus)是一类能产生芽孢的革兰氏阳性细菌，具有较强的抵抗不良环境的能力，如耐酸碱、耐高温的能力较强。

芽孢杆菌中较多菌种具有高淀粉酶、蛋白酶活性，近年来被广泛地用于动物饲料业，特别是作为水产饲料的添加剂。

例如在银鲫饲料中添加了0.1%的芽孢杆菌后，银鲫肠道和肝胰脏的淀粉酶活性提高了3.7%和129.5%[8]，能够有效帮助动物对饲料的消化吸收，同时作为一种良好的免疫激活剂，能增强动物的免疫力和抗病力[9]。

此外，利用芽孢杆菌产生α-淀粉酶，在食品生产中也有广泛应用。

笔者从土壤中分离得到产淀粉酶的芽孢杆菌，进行种属的初步鉴定，以期为芽孢杆菌在动物饲料业和食品生产中的发开应用提供理论依据。

1 材料与方法1.1 材料土壤材料采集于浙江师范大学取杏园食堂草坪土壤表层5~10厘米下的肥土。

1.2 培养基淀粉培养基：可溶性淀粉1%、蛋白胨l%、葡萄糖0.5%、Nacl 0.5%、牛肉膏0.5%、琼脂粉0.8%。

目前!微生态制剂及饲料添加剂中常用的芽孢杆菌有地衣芽孢杆菌"蜡样芽孢杆菌"枯草芽孢杆菌及纳豆芽孢杆菌#前三种菌都是药准字使用的菌种$为了探讨这!种菌产淀粉酶的能力!筛选和制备用于草食及杂食动物的微生态制剂及饲料添加剂使用菌种!于"##!年$月进行了!种常见芽孢杆菌产淀粉酶能力的比较试验$现将试验结果报告如下$!材料与方法!"!材料菌种%地衣芽孢杆菌&枯草芽孢杆菌&蜡样芽孢杆菌均系山东省农业科学院实验室保存菌种!纳豆芽孢杆菌是从临沂八宝豆豉中分离得到的菌种$培养基%普通营养琼脂培养基和淀粉酶试验培养基$试剂%鲁格尔氏碘溶液’革兰氏染色用碘溶液(#!"#方法%&"&%试验步骤首先做好淀粉酶试验培养基!即在普通营养基琼脂中加%’的可溶性淀粉!制成平板备用#将!种芽孢杆菌分别接种营养肉汤液体培养基的试管中!$(!培养"!)!中间摇震$*+次#将上述培养好的液体管菌种!分别划线接种于淀粉酶试验培养基中!每个菌种接两个板!争取平板上一定要出现+个以上的单个菌落!以易于观察测量和计算透明圈#将接好的上述平板置于恒温箱中$(!培养"!)#将培养好的平板取出!分别滴加现配制的鲁格尔氏碘溶液!直至全部弥漫平板#稍停片刻!观察其菌落形成的透明圈#%&"&"结果测定出现透明圈即表明该菌能产生淀粉酶#细菌产生的淀粉酶将周围的淀粉分解!因此当滴入鲁格尔氏碘溶液时!菌落周围出现透明圈!其他部分则呈现蓝色#取有透明圈的$个菌落分别测量菌落的直径和透明圈直径!取菌落和透明圈直径的平均值!然后计算出透明圈面积与菌落面积之比#比值越大!说明产淀粉酶能力越强##结果试验结果表明!常见四种芽孢杆菌都产生淀粉酶!以蜡样芽孢杆菌所产生的淀粉酶最多!纳豆芽包杆菌&枯草芽孢杆菌次之!地衣芽孢杆菌较少!详见表%#从表%可以看出!蜡样芽孢杆菌产淀粉酶的能力几乎比纳豆芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌多%倍!比地衣芽杆菌多两倍多!这为草食动物和杂食动物选择微生表!常见$种芽孢杆菌产淀粉酶的比较!!!!!菌种菌落平均直径’,,(透明圈平均直径’,,(透明圈与菌落面积比值蜡样芽孢杆菌-&#%"&$!&"#纳豆芽孢杆菌$&.-&$"&(+枯草芽孢杆菌!&$(&#"&-+地衣芽孢杆菌$&(!&.%&-.收稿日期："##!/#-0%+作者简介：王世荣’%1$(0(!男!教授!研究员!主要从事医学&微生态学和动物微生态学研究#常见几种芽孢杆菌产淀粉酶的比较王世荣１，徐龙１，张树华２，杨震国１!!!!（%&山东省农业科学院，山东济南"+#%##；"&齐鲁动物保健品厂，山东济南"+#%##）!!摘要：探索地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌产生淀粉酶的能力，以筛选和研制动物微生态制剂和饲料添加剂的使用菌种。

高产纤维素酶枯草芽孢杆菌的筛选、应用及其产酶条件研究的开题报告一、选题背景纤维素在自工业化以来的几代中一直是一种主要的工业原料，它广泛用于造纸、纤维、食品、能源和医疗等众多领域。

但是，由于极高的相对分子质量和非常结实的结构，纤维素仍然很难分解。

在自然界中，仅仅有一些微生物具有自分解纤维素的能力，其中最著名的一类就是被称为纤维素酶制造细菌。

因此，寻找纤维素酶制造菌是生产纤维素酶的关键。

二、研究目的本研究的主要目的是筛选高产纤维素酶枯草芽孢杆菌并研究其产酶条件，以期为纤维素酶的生产提供基础，同时提高纤维素的利用效率。

三、研究内容1. 枯草芽孢杆菌的分离和纤维素酶活性测定采集自然环境中的样本，使用分离纤维素酶菌的方法，鉴定分离出的枯草芽孢杆菌菌株，测定其产酶能力。

2. 枯草芽孢杆菌的识别和鉴定通过分类学的方法来对分离出的枯草芽孢杆菌的鉴定，进一步确定其物种分类、生态环境等信息。

3. 枯草芽孢杆菌在不同产酶条件下的产酶曲线绘制以实验室条件下对枯草芽孢杆菌的不同降解剂量、pH、温度、时间处理，测定产酶活性及其变化趋势，绘制生长曲线和产酶曲线图。

4. 枯草芽孢杆菌的纤维素酶酶学性质研究测定纤维素酶的酶学性质，如酶的稳定性、酶的特异性、抑制剂对酶的反应等，以推断纤维素的最佳酶解体系。

四、研究意义本研究可以筛选出高产纤维素酶枯草芽孢杆菌，并通过分析产酶条件和纤维素酶的酶学性质，为纤维素酶的生产提供理论基础和技术支持。

五、研究方法本研究主要采用以下研究方法：1. 分离纤维素酶菌并测定其产酶能力。

2. 通过分类学的方法来对分离出的枯草芽孢杆菌的鉴定。

3. 以实验室条件下对枯草芽孢杆菌的不同降解剂量、pH、温度、时间处理，测定产酶活性及其变化趋势，绘制生长曲线和产酶曲线图。

4. 测定纤维素酶的酶学性质，如酶的稳定性、酶的特异性、抑制剂对酶的反应等。

六、研究计划1. 9月-10月：采集样本并分离出纤维素酶菌。

2. 11月-12月：对枯草芽孢杆菌进行分类鉴定，测定其产酶能力。

微生物技术综合实验年级：13级生物工程（专升本）班级：2013011201学号：***********名：***指导老师：刘凤霞教授日期：二零一三十月五号目录1实验目的及原理 (1)1.1实验目的 (1)1.2实验原理 (1)2实验材料 (1)2.1实验仪器 (1)2.2实验试剂 (1)2.3培养基 (2)2.3.1 生长培养基 (2)2.3.2鉴定培养基 (2)2.3.3摇瓶培养基 (2)3试验方法 (2)3.1仪器的准备 (2)3.2培养基的配置 (2)3.3初步筛选及鉴定 (2)3.3.1采集土样 (3)3.3.2富集培养 (3)3.3.3稀释分离、纯化 (3)3.3.4初筛 (3)3.4复筛及鉴定 (4)3.4.1革兰染色 (4)3.5酶活力的测定 (4)3.5.1摇瓶培养 (4)3.5.2酶液稀释 (4)3.5.3酶液测定 (4)4结果分析 (5)4.1平板涂布分离 (5)4.2平板划线分离 (5)4.3初筛 (5)4.4复筛 (5)4.5摇瓶培养 (6)4.6酶活力测定 (6)5参考资料 (7)6附录 (8)微生物上游技术综合实验枯草芽孢杆菌的分离、纯化、筛选及鉴定1.实验目的及原理1.1实验目的（1）学习从土壤中分离、纯化枯草芽孢杆菌的原理和方法。

（2）学习掌握枯草芽孢杆菌的鉴定方法。

（3）掌握微生物的摇瓶培养方法及淀粉酶活力的测定的原理和方法。

（4）培养学生综合应用微生物实验方法的能力。

（5）培养学生自行设计实验流程、综合分析问题解决问题和判断实验结果的能力。

1.2实验原理选择合适与待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。

将土壤稀释液倒在不同类型的培养基平板上，在适宜的环境中培养几天，细菌或是其他的微生物便能在平板上生长繁殖，形成菌落。

将初次筛选得到的微生物接到淀粉培养基上培养，因为只有能够产生淀粉酶的细菌才能够利用培养基中的淀粉成分来完成自身的生命活动，才能够生存。

芽孢杆菌研究进展及其在水产养殖中的应用摘要该文主要介绍芽孢杆菌的常用种类、生物学功能及其在水产养殖中的应用，以为芽孢杆菌的利用提供参考。

关键词芽孢杆茵；生物学功能}应用；水产养殖随着社会经济的不断发展，人们对水产养殖产品的需求越来越大，水产养殖逐步向工业化、规模化养殖的方向发展。

高密度的养殖模式、抗生素的滥用、喹乙醇等禁用添加剂的非法使用也对水产养殖业健康发展造成了严重的危害。

残留毒素、污染生态环境、威胁人体健康等负面影响成为整个行业健康发展的瓶颈。

近年来，微生态制剂在畜牧兽医、人类健康等方面的推广应用，大量实验和生产实践证实微生态制剂的应用疗效，其在水产行业中的应用也越来越受人们的重视。

微生态制剂具有绿色、环保等优点，在养殖中微生态制剂可以用来解决水产养殖污染和病害的问题。

自然界广泛分布着芽孢杆菌，能产生多种酶，是动植物微生态系统优势种群之一，在水产养殖中发挥着重要的作用。

1芽孢杆菌使用种类生物制剂的研发和使用过程中最重要的问题是确保其使用的安全性。

美国食品药品管理局(FDA)在1989年发布的允许使用的菌株有43种，芽孢杆菌包括枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、短小芽孢杆菌(B.pumilus)、缓慢芽孢杆菌(B.lentus)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)和凝结芽孢杆菌(B.coagulans)。

2008年，我国农业部公布的《饲料添加剂品种目录》中，允许直接投喂动物的微生物添加剂有15种，其中芽孢杆菌有地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌2种。

随着国内外研究的深入，允许使用的芽孢杆菌种类越来越多，相继研发出了生物学特性更加优异的新菌种，如环状芽孢杆菌(B.circulans)、蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、芽孢乳杆菌(Lactobacillus sporogens)、纳豆芽孢杆菌(B.natto)、坚强芽孢杆菌(B.firmus)、巨大芽孢杆菌(B.megeterium)、丁酸梭菌(Clostridium butyricum)和东洋芽孢杆菌(B.toyoi)等，这些新菌株的发现壮大了芽孢杆菌添加剂的数量，为养殖行业的健康稳定发展提供了技术支持。

枯草芽孢杆菌的研究进展及应用前景枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种常见的细菌，广泛存在于自然环境中，包括土壤、水体和植物表面等。

近年来，枯草芽孢杆菌的研究进展引起了广泛关注，并在农业、食品工业和医药领域中展示出巨大的应用前景。

1. 枯草芽孢杆菌的研究进展1.1 特性与生物学功能枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性杆菌，具有较高的适应性和生存能力。

它具有较强的胞外酶产生能力，对多种有机废弃物具有很好的降解作用。

此外，枯草芽孢杆菌还能产生多种抗菌物质，如抗生素、抗氧化物质和抗真菌物质，对抗病原微生物有较强的威胁作用。

1.2 产生抗病性的机制研究表明，枯草芽孢杆菌可以通过竞争性排除、产生抑菌物质和激活植物免疫系统等多种途径来产生抗病性。

它可以与植物根系建立共生关系，在植物根际形成生态屏障，抵御外来病原菌的入侵。

此外，枯草芽孢杆菌还可以诱导植物自身免疫系统的活化，增强植物的防御能力。

1.3 应用于农业领域枯草芽孢杆菌在农业领域具有巨大的应用潜力。

它可以被用作生物肥料和植物生长促进剂，通过菌囊素和激素等物质的产生，促进植物的生长和发育。

与传统的化学肥料相比，枯草芽孢杆菌不仅可以提高农作物的产量和品质，还不会造成土壤环境的污染。

1.4 应用于食品工业领域枯草芽孢杆菌可以用于食品工业中的食品添加剂、酶制剂和生物防腐剂等。

它可以产生多种酶，如纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶等，用于食品的加工过程中，提高食品质量和营养价值。

此外，枯草芽孢杆菌还能产生抗菌物质，用于食品防腐剂的研发，延长食品的保质期。

1.5 应用于医药领域枯草芽孢杆菌在医药领域也有着广泛的应用前景。

菌酶是枯草芽孢杆菌的重要产物之一，通过对菌酶的研究和改造，可以用于医药领域的药物合成和废水治理等。

此外，枯草芽孢杆菌还可以产生抗生素和其他生物活性物质，对抗病原微生物有很好的杀灭作用。

2. 枯草芽孢杆菌的应用前景在农业、食品工业和医药领域中，枯草芽孢杆菌的应用前景非常广阔。

枯草芽孢杆菌的生物学特性及应用前景分析枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种常见的芽孢形成细菌，被广泛应用于农业、食品工业和生物工程领域。

在本文中，我们将对枯草芽孢杆菌的生物学特性进行综合分析，并探讨其在不同领域中的应用前景。

1. 枯草芽孢杆菌的生物学特性:枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性细菌，其细胞形态呈杆状。

它可以自由生长在土壤中，并且对营养要求较低，可以利用多种有机和无机化合物进行生长。

此外，枯草芽孢杆菌具有较高的产孢能力，其芽孢可以在恶劣的环境条件下存活，并在适宜条件下再次发芽形成活细胞。

2. 枯草芽孢杆菌在农业中的应用前景：(a) 生物农药：枯草芽孢杆菌具有抑制土壤传播病害的能力。

它分泌一种抗生素，可以抑制一些植物病原菌的生长。

此外，枯草芽孢杆菌还可以产生促进植物生长的激素，促进植物的生长和发育。

(b) 叶面肥料：枯草芽孢杆菌可以合成一些对植物有益的有机物质，如氨基酸和维生素等。

这些有机物质可以作为植物的叶面肥料，提高植物的养分吸收能力，促进植物的健康生长。

3. 枯草芽孢杆菌在食品工业中的应用前景：(a) 食品防腐剂：枯草芽孢杆菌产生一种称为亚油酸的物质，这种物质具有良好的抗菌能力。

它可以作为食品防腐剂使用，延长食品的保质期。

(b) 食品发酵：枯草芽孢杆菌可以产酶分解蛋白质和多糖，促进食品的发酵过程。

在乳制品、面包等食品加工中，可利用该菌种提高产品的质量和口感。

4. 枯草芽孢杆菌在生物工程领域中的应用前景：(a) 工业酶的生产：枯草芽孢杆菌可以产生多种酶类，如蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶等。

这些酶类在生物工程领域中有广泛的应用，可以用于提高产量、提纯产品和降解废物等。

(b) 生物表面活性剂的生产：枯草芽孢杆菌分泌的表面活性剂具有优异的乳化和清洁能力。

这些表面活性剂可用于生产洗衣粉、洗涤剂、生物柴油等产品。

综上所述，枯草芽孢杆菌具有广泛的生物学特性和应用前景。

在农业领域，它可以作为生物农药和叶面肥料，提高作物产量和质量。

枯草芽孢杆菌的生物学特征与应用领域分析枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种常见的细菌，被广泛应用于生物学研究和工业生产中。

它具有许多独特的生物学特征，并在多个应用领域发挥着重要作用。

以下是对枯草芽孢杆菌的生物学特征和应用领域的详细分析。

一、生物学特征1. 形态和结构：枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性细菌，形态为短杆状，通常呈单个或簇生长，能形成芽孢。

在芽孢形态下，枯草芽孢杆菌具有高度的抗逆性和存活能力。

2. 代谢特性：枯草芽孢杆菌是典型的好氧生物，可以利用多种碳、氮和磷源进行生长。

此外，它还具有广泛的分解能力，能降解一些有机物质，如淀粉、蛋白质和脂肪等。

3. 基因组和遗传特性：枯草芽孢杆菌的基因组相对较小，含有少量的非编码RNA。

它具有丰富的代谢和合成酶系统，同时具有多个质粒，可用于基因工程和蛋白表达。

二、应用领域1. 生物农药：枯草芽孢杆菌被广泛应用于农业生产中的生物农药制备。

它可以产生多种抗病原微生物代谢产物，如杀虫剂、杀菌剂和植物生长调节剂等。

这些产物对于农田中的害虫和病原菌具有高效的防治作用，同时对环境友好，不会污染土壤和水源。

2. 饲料添加剂：枯草芽孢杆菌可以作为一种饲料添加剂应用于畜禽养殖中。

它能够促进动物的消化吸收和免疫功能，提高动物的生长速度和养殖效益。

此外，枯草芽孢杆菌还具有一定的抗菌活性，能够预防和治疗畜禽肠道疾病。

3. 生物肥料：枯草芽孢杆菌可用于生物肥料的生产。

它具有氮固定和磷溶解能力，在农田中能够与植物共生，提供养分和增强植物的生长。

此外，枯草芽孢杆菌还能分解有机废弃物，为土壤提供有机质和养分。

4. 发酵工业：由于枯草芽孢杆菌丰富的代谢能力和产酶能力，它被广泛应用于发酵工业中。

枯草芽孢杆菌可以产生多种酶，如纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶等，用于食品、饲料、纺织和纸浆工业等领域。

此外，枯草芽孢杆菌还可以合成多种有机化合物，如氨基酸、有机酸和抗生素等。

总结起来，枯草芽孢杆菌作为一种常见的细菌，具有独特的生物学特征和广泛的应用领域。

两株高抑菌性抗生菌的抑菌性比较研究学生姓名：罗冰科指导老师：彭玲武汉生物工程学院生物技术系摘要：以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为敏感菌，以地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌为拮抗菌。

测定并比较了两株目的出发菌株的抑菌效价。

经过诱变和筛选，获得了比原出发菌株抑菌性明显增强的菌株。

关键词：拮抗菌；抑菌效价0．抗生菌抗生菌，亦称拮抗菌，指能通过产生某种或某类特殊代谢产物，具有选择性地抑制或杀死其他微生物的一些微生物。

现在也将其广义称为益生菌的一种类型。

两种微生物之间的这种关系为特异拮抗关系，前者称为拮抗菌，后者称为敏感菌，拮抗性物质称抗生素或抗菌素。

芽孢杆菌（Bacillus）是目前抗生菌中研究较多的一类，尤其是用于饲料工业和植物病虫害防治（生防菌），主要的种类有枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，同时这两种菌现在也称为益生菌[1]。

益生菌的有益功能是多方面的，大致归纳如下：屏障障功能、杀菌功能、营养功能、清理功能、免疫功能和防癌功能。

以芽孢杆菌为代表的益生菌，可促进人体对营养物质的吸收，提高免疫力，预防和治疗便秘及腹泻，降血脂，抑制肠道病源和腐败微生物的生长，分解致癌物质[2]。

因此，保持和促进芽孢杆菌优势和生长，是提高人们健康长寿的重要手段。

正是基于以上考虑，本试验就是从普通菌种中经过诱变和筛选出具有抑制性的益生菌，以便以后发展更多的应用于生产生活中。

1．材料与试剂1.1实验材料1.1.1菌种：拮抗菌，地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis)(武汉生物工程学院实验室提供)和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）(华中农业大学实验室提供)；敏感菌，金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。

1.1.2培养基：牛肉膏蛋白胨培养基2．实验方法2.1具拮抗性目的菌株的筛选（1）平板滤纸片抑菌圈法：取敏感菌菌液200uL涂布于牛肉膏蛋白胨平板表面，静置渗透片刻，将直径为6mm的无菌小滤纸片贴在培养基相应位置，用5-50uL无菌移液枪吸取10uL拮抗菌液滴加在滤纸片上，37℃恒温培养24h，测量抑菌环大小。

2021芽孢杆菌防治植物病害的机理及研发问题探究范文 长期以来，植物病害的防治主要以化学农药为主，化学农药对农业生产上防治病虫害起了十分重要的作用，但长期不合理使用化学农药产生了诸多问题。

如化学农药不仅对人、畜的健康造成危害，而且对土壤、水体、大气造成严重污染，破坏了生态平衡；病原菌和害虫抗药性的不断增强，农药的使用量和使用频度不断加大，出现了用药量与病虫害相互递增的恶性循环。

因此开发对人类和环境友好、并具良好防治效果的新植物病虫害防治策略尤为重要[1]. 随着人们对食品安全的日益重视和可持续控制病虫害发展的需要，生物防治受到各国政府和植物保护专家的重视。

生物防治是以生态学为基础来控制有害生物，是综合防治体系中一个必不可缺少的组成部分。

生物防治避免了化学农药使用带来的一系列植保、环境和能源方面的问题，促进了环境生态平衡和农业的可持续发展。

植物微生态学理论认为[2]:存在于植物体表或体内的微生物群落是一个动态平衡的生态系，一旦平衡打破，则发生植物病害；植物病害生物防治是在被病原物占据主导的生态系中引入有益的微生物，形成不利于病原物生长而利于植物生长的新的动态平衡体系，从而控制病害发生和发展。

近年来随着分子生物学技术、发酵工程和生物信息工程等新技术的飞速发展，为生物农药的研发应用奠定了坚实的理论基础和可靠的技术路线。

芽孢杆菌作为重要的生防资源，具有广阔的应用前景。

利用芽孢杆菌防治植物病害，国内外报道较多[3-7]. 芽孢杆菌在生长过程中可以在寄主植物根、叶围定殖，与病原菌竞争营养和侵染位点；分泌抗菌物质、抑制病原菌生长；诱导植物产生系统抗病性、抵御病原菌入侵，从而达到生物防治的目的。

同时，芽孢杆菌能够产生耐热、耐旱、抗紫外线和有机溶剂的芽孢，所以是理想的生防菌筛选对象。

许多性状优良的芽孢杆菌菌株已成功应用于植物病害的防治。

本文就芽孢杆菌类生物杀菌剂的研发现状、芽孢杆菌防治植物病害的机理以及在实践应用中存在的问题进行简要综述。

枯草芽孢杆菌产酶机制枯草芽孢杆菌，这名字听起来是不是有点复杂？别急，咱们慢慢聊。

这家伙其实是自然界里的一个小英雄，常常被用来帮助人类解决各种问题，尤其是在农业和环保领域。

想象一下，农田里长满了杂草，虫子们肆无忌惮地大吃特吃，真让人心烦。

可就是这个小小的枯草芽孢杆菌，能够帮助农民朋友们解决这些困扰，真是个省心省力的好帮手。

这位“菌”士的本领可不是盖的，最厉害的就是它能产出一些让人惊叹的酶。

酶是什么？通俗点说，就像是生物界里的“万能钥匙”，能帮助我们分解食物、处理废物、甚至促进植物生长。

像什么淀粉酶、纤维素酶之类的，都是它的拿手好戏。

这些酶像小小的工作者，默默地在土壤里忙碌着，把复杂的有机物变得简单易用。

比如说，枯草芽孢杆菌的纤维素酶可以把植物残体中的纤维素分解，让土壤更肥沃，真是一举两得。

说到这里，或许有人会问，枯草芽孢杆菌是怎么做到的？这就得说说它的“干活”机制。

这小家伙有个特别的技能，就是能在恶劣环境中生存。

你想啊，田里可能有化肥、农药，还有各种微生物的竞争，枯草芽孢杆菌却能在这些艰苦的条件下找到生存之道。

这真是个不怕困难的小家伙，就像我们常说的“困境中见真情”，它在恶劣的环境里依然坚持着。

然后，它的分泌系统可不简单。

枯草芽孢杆菌能分泌出一堆酶，进入周围环境，把那些大块头的有机物一口口地啃掉。

就像小孩儿吃糖一样，一点点地拆解，直到最后变得简单易吸收。

这种转化的过程简直就像是魔法，让一堆“废物”变成了“宝藏”。

一来二去，周围的土壤就变得越来越好，植物们吃得好，长得快，农民们当然笑得合不拢嘴。

再说说它的繁殖能力。

枯草芽孢杆菌的繁殖速度可是让人咋舌，短短几小时，它就能繁殖出一大堆的“兄弟姐妹”。

就像我们聚会一样，一开始只有几个人，后来转眼就变成了热闹的派对。

这么多的小伙伴一起努力，把酶分泌得飞快，整个生态环境因此受益，真是个让人开心的故事。

它的作用可不仅限于农业。

环保方面，枯草芽孢杆菌也展现了它的强大。

枯草芽孢杆菌是我国农业部允许作为饲料添加剂的两种芽孢杆菌之一，已被越来越多地研制成饲用微生态制剂。

因其制剂是无毒、无残留、无污染的“绿色”添加剂，故具有广阔的发展前景，并已在畜牧业、饲料业广泛应用，显示巨大的社会效益和生态效益。

枯草芽孢杆菌具有很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等活性，能产生抗菌素，在动物肠道内具有较强生物夺氧能力。

这些特性对促进动物营养的消化吸收、提高动物的饲料转化率、防病和促进生长起到重要作用。

鉴于此，国内外专家学者对研究开发枯草芽孢杆菌制剂用于畜禽养殖日趋关注，从而也促进了这一产业的迅猛发展，但在现阶段的工业化生产中，存在着制约枯草芽孢杆菌发酵的诸多因素。

1、枯草芽孢杆菌的生物学特点杆菌：一般（0.7～0.8）×（2.0～3.0）μm，电子显微镜测量为（0.5～0.6）×（1.1～3.5）μm，革兰氏阳性，运动，有长而又丰富的周生鞭毛。

芽孢：椭圆形，中生或偏中生，即使孢囊膨大也不显著。

生长温度：最高温度45～55℃；最低温度5～20℃。

阳性反应：接触酶；V-P反应；在7％的氯化钠中生长；pH5.7生长；分解葡萄糖、阿拉伯糖、木糖和甘露醇产酸；水解淀粉；利用柠檬酸作为碳源；还原硝酸盐为亚硝酸盐；分解酪素；石蕊牛奶产碱胨化。

阴性反应：厌氧生长；卵黄反应：在葡萄糖洋菜上或酪氨酸洋菜上形成可溶性黑色素；28℃ 4星期水解马尿酸盐；利用丙酸盐并分解酪氨酸。

在55℃生长的菌株被0.02％的叠氮化合物抑制。

变化的性质：在V-P液中产酸(pH5.0～8.0)；对溶菌酶的抗性；在10％的氯化钠中生长。

2、芽孢杆菌制剂的作用机理2.1可产生酶类和营养物质研究表明芽孢杆菌能够分泌大量的胞外酶，如蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等，有助动物对饲料的降解、消化，提高饲料利用率。

饲料中未被消化的蛋白质和一些含氮物质在肠道中被大肠杆菌和其他细菌脱梭生成具有潜在的毒性的腐胺、吲哚、酚类等物质。

一些芽孢杆菌可产生氨基氧化、SOD酶、分解硫化氢的酶以及其他抗菌物质如过氧化氢，起到杀菌作用，从而减少动物体内有害物质的产生。

产酶益生素·群康142枯草芽孢杆菌产酶性能
一、产酶益生素·群康142的成分
产酶益生素·群康142含有高酶活枯草芽孢杆菌以及其他菌群等。

活菌总数≥5.0×108cfu/g 。

二、产酶益生素·群康142的功效
产酶益生素·群康142可以改善瘤胃内环境；提升瘤胃的缓冲能力；提高饲料利用率和动物日增重，缩短育肥周期；改善生产性能；增强机体免疫力；优化养殖场的生态环境。

三、枯草芽孢杆菌N9-1-35产酶性能
1.产酶益生素·群康142中的枯草芽孢杆菌N9-1-35，与国内外同类菌株的产酶能力对比
0500
10001500
Kb Dm4238051BL-1N-1N9-1-
35产酶能力对比
产酶能力
从上图中得出结论：部分标准菌株和不同竞争性公司的菌株相比，枯草芽孢杆菌N9-1-35菌株和N-1菌株在产淀粉酶、蛋白酶、NSP 酶等方面具有巨大的优势。

2.航天搭载菌种N9-1-35随着时间变化产酶性能的研究
产酶曲线变化
50
100150200250
24681012
时间（h）酶活（u /m l ）N9-1-35N-1
从上图中得出结论：N9-1-35菌株在经过航天搭载试验后，其产酶速度得以显著提升，特别是生长前期。

而这一时期正是该菌株在胃肠道内定植产酶的关键时期。

四、效果观察。

枯草芽孢杆菌的研究进展摘要枯草芽孢杆菌是一类好氧型、内生抗逆孢子的革兰氏阳性杆状细菌，广泛存在于土壤、湖泊、海洋、动植物的体表，细胞壁不含内毒素，没有致病性，具有单层细胞外膜，能直接将许多蛋白分泌到培养基中，是一些重要工业酶制剂的生产菌[1]。

在营养缺乏的条件下，枯草芽孢杆菌停止生长，但同时加快代谢作用，产生多种大分子的水解酶和抗生素，并诱导自身的能动性和趋化性，从而恢复生长。

在极端的条件下，还可以诱导产生抗逆性很强的内源孢子，具有较强的抗逆性。

作为革兰氏阳性细菌的典型代表，对于其生理、生化、遗传及分子生物学的研究已有40多年的历史。

近年来，随着分子生物学和基因工程的发展，枯草芽孢杆菌作为基因工程表达系统发展迅速，并展现出良好的应用前景。

关键词：枯草芽孢杆菌；启动子；绿色荧光蛋白；载体；表达；异源基因1 枯草芽孢杆菌基因组研究枯草杆菌有以下一些优点: ①非致病性，不具有热源性脂多糖和细胞内毒素，具有较好的生物安全性，炭疽杆菌和蜡样芽孢杆菌除外，多数芽孢杆菌对人畜无害[2]；②遗传学特性先进，很多噬菌体和质粒适合于用作克隆载体；转化外源DNA的感受态系统也同样适用于转化重组DNA[3]。

③较强的蛋白分泌能力，当分泌蛋白跨过细胞膜后，被加工和直接释放到培养基中，使回收和纯化目的蛋白较为简单[4]。

④良好的发酵基础和生产技术。

枯草杆菌在工业上长期被用于生产蛋白酶、α-淀粉酶以及苏云金杆菌的杀虫晶体蛋白等。

枯草杆菌能在相对简单的培养基中能生长到很高的密度。

细胞的生长特性和生理学性质都被广泛、深入研究。

⑤细胞壁的组成简单，只含有肽聚糖和磷壁质，因此在分泌的蛋白质产品中不会混杂有胞被内毒素（热源性脂多糖），而这一点是大肠杆菌无法比拟的。

2 枯草芽孢杆菌基因表达特性2.1 多σ因子原核基因的转录主要由RNA聚合酶完成。

该酶由5个亚基组成，二个α亚基、一个β亚基、一个β′亚基和一个Sigma（σ）因子。

5个亚基组成全酶，除去σ因子为核心酶（E）。