氨氮测定方法——纳氏试剂光度法(纳氏试剂比色法)

水质氨氮的测定方法纳氏试剂分光光度法1. 含义本测定方法适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。

当水样体积为50 ml ，使用20 mm 比色皿时，本方法的检出限为0.025 mg/L，测定下限为0.10 mg/L ，测定上限为 2.0 mg/L （均以N 计）。

2. 方法原理以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长420 nm 处测量吸光度。

3. 检测依据水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法HJ 535-20094. 检测程序4.1 试剂和材料除非另有说明，分析时所用试剂均使用符合国家标准的分析纯化学试剂，实验用水为按4： 1 制备的水。

4.1.1 无氨水，在无氨环境中用下述方法之一制备。

（1 ）离子交换法蒸馏水通过强酸性阳离子交换树脂（氢型）柱，将流出液收集在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶内。

每升流出液加10 g 同样的树脂，以利于保存。

（2）蒸馏法在 1 000 ml 的蒸馏水中，加0.1 ml 硫酸（ρ=1.84 g/ml ），在全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去前50 ml 馏出液，然后将约800 ml 馏出液收集在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶内。

每升馏出液加10 g 强酸性阳离子交换树脂（氢型）。

（3）纯水器法用市售纯水器临用前制备。

4.1.2 轻质氧化镁（MgO）不含碳酸盐，在500 ℃下加热氧化镁，以除去碳酸盐。

4.1.3 盐酸，ρ （HCl）=1.18 g/ml 。

4.1.4 纳氏试剂，可选择下列方法的一种配制。

（1）二氯化汞- 碘化钾- 氢氧化钾（HgCl 2-KI-KOH ）溶液称取15.0 g 氢氧化钾（KOH），溶于50 ml 水中，冷却至室温。

称取 5.0 g 碘化钾（KI ），溶于10 ml 水中，在搅拌下，将 2.50 g 二氯化汞（HgCl2）粉末分多次加入碘化钾溶液中，直到溶液呈深黄色或出现淡红色沉淀溶解缓慢时，充分搅拌混合，并改为滴加二氯化汞饱和溶液，当出现少量朱红色沉淀不再溶解时，停止滴加。

纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮标准
试剂和仪器：
纳氏试剂、蒸馏水、比色皿、分光光度计
操作流程：
1.取样：取一定量的待测水样，先进行前处理。

即用蒸馏水洗净比色皿后，加入待测水样，至刻度线。

2.添加试剂：用分度玻璃管向比色皿中加入纳氏试剂7.5ml，搅拌，室温放置10分钟。

3.进行分光测定：用分光光度计在680nm波长进行吸光度的测定，将比色皿放置在光路中，操作时注意比色皿中是否有气泡。

4.做样：将待测水样中的氨氮含量与纳氏试剂反应生成的产物的吸收光强度之间建立标准曲线，计算样品中的氨氮含量。

标准曲线与结果分析：
1.建立标准曲线：取一定量活水，分别加入0、0.7、1.4、
2.1、
3.5、7.0ml氨
标准溶液，并用蒸馏水配成100ml,加入纳氏试剂，操作3中所述的分光测定方法，得到吸光度值。

以吸光度为纵坐标，氨标准溶液中氨氮的质量浓度为横坐标，做出标准曲线。

2.计算结果：通过标准曲线找出待测水样的吸光度值，即可计算出含量。

样品中的氨氮含量，用公式计算：C=(S-A)/k，其中S为待测水样的吸光度，A为纯水的吸光度，k为标准曲线斜率，C为样品中氨氮的含量。

3.结果分析：根据计算出的样品中氨氮含量，判定水质是否合格。

若氨氮含量超标，则需在水处理工艺中加入相应的氨氮去除方法。

氨氮的测定纳氏试剂法氨氮是指水中存在的氨和氨化合物所含有的氨的总量。

氨氮的测定是环境监测和水质分析中的重要项目之一。

纳氏试剂法是一种常用的氨氮测定方法，其基本原理是利用氨与酚类化合物在碱性条件下发生缩合反应，生成带有紫色的络合物，并通过比色法测定络合物的吸光度来确定氨氮的含量。

进行样品的处理。

将待测样品收集并进行必要的预处理，如过滤、稀释等。

确保样品的代表性和稳定性，同时避免干扰物质对测定结果的影响。

然后，进行纳氏试剂的制备。

将纳氏试剂溶解于适量的蒸馏水中，制备成一定浓度的试剂液。

纳氏试剂通常由亚硝酸钠、苯酚、氢氧化钠和蒸馏水组成。

接下来，进行反应过程。

将一定量的样品与纳氏试剂在碱性条件下进行反应，通常在加热的条件下进行。

反应时间的长短可根据样品的特性和预期的氨氮浓度来确定。

反应完成后，待溶液冷却至室温。

冷却后的溶液中会生成一种带有紫色的络合物，其吸收峰位于500-530nm的紫外可见光区域。

这种络合物的浓度与样品中氨氮的含量成正比。

测定络合物的吸光度。

将反应后的溶液转移到光度计的比色皿中，设置好波长并调零。

然后，测定溶液的吸光度值，并记录下来。

通过测定溶液的吸光度值，可以使用标准曲线法来计算样品中氨氮的浓度。

标准曲线的制备是指使用一系列已知浓度的标准溶液，测定其吸光度值并绘制出标准曲线。

然后，使用样品的吸光度值在标准曲线上找到对应的氨氮浓度。

进行结果的计算和分析。

根据测定所得的氨氮浓度，结合样品的体积和稀释倍数等信息，可以计算出样品中氨氮的总量。

同时，还可以根据国家标准或相关行业标准，将测定结果进行评价和判定。

纳氏试剂法作为一种常用的氨氮测定方法，具有操作简便、灵敏度高、结果准确等优点。

在实际应用中，需要注意样品的处理、试剂的配制、反应条件的控制等，以保证测定结果的准确性和可靠性。

此外，还可以根据实际需要进行方法的改进和优化，以适应不同样品类型和测定要求。

水质氨氮检测标准操作规程纳氏试剂分光光度法一、目的规范测定水中氨氮的纳氏试剂分光光度法标准操作规程。

二、适用范围1、适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。

2、当水样体积为50 ml时，本方法的检出限为0.025 mg/L，测定下限为0.10 mg/L，测定上限为2.0mg/L（均以N计）。

三、责任者实验室检验人员及负责人。

四、正文1、方法原理以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长420nm处测量吸光度。

2、仪器2.1、分析天平、紫外可见分光光度计、30mm比色皿、50ml具塞玻璃比色管、实验室常用玻璃仪器等。

2.2、氨氮蒸馏装置：由500ml凯式烧瓶、氮球、直形冷凝管和导管组成，冷凝管末端可连接一段适当长度的滴管，使出口尖端浸入吸收液液面下。

亦可使用500 ml 蒸馏烧瓶。

3、试剂分析时所用试剂均使用符合国家标准的分析纯化学试剂，实验用水为制备的无氨水。

3.1、无氨水：用市售纯水器临用前制备。

3.2、轻质氧化镁（MgO）：将氧化镁在500℃下加热，以除去碳酸盐。

3.3、纳氏试剂：碘化汞-碘化钾-氢氧化钠（HgI2 -KI-NaOH）溶液称取16.0g氢氧化钠（NaOH），溶于50ml水中，冷却至室温。

称取7.0g碘化钾（KI）和10.0g碘化汞（HgI2），溶于水中，然后将此溶液在搅拌下，缓慢加入到上述50ml氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml。

贮于聚乙烯瓶内，用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧，于暗处存放，有效期1年。

3.4、ρ =500g/L酒石酸钾钠溶液称取50.0g酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O）溶于100mL水中，加热煮沸以除去氨，充分冷却后，定容至100mL。

3.5、ρ=3.5g/L硫代硫酸钠溶液称取3.5g硫代硫酸钠（Na2S2O3）溶于水中，稀释至1000ml。

3.6、ρ=100g/L硫酸锌溶液称取10.0 g硫酸锌（ZnSO4·7H2O）溶于水中，稀释至100ml。

水样中氨氮的分析纳氏试剂比色法GB7479—871、原理：以游离态的氨或铵离子等形式存在的铵氮与纳氏试剂反应生成黄棕色络合物，该络合物的色度与铵氮的含量成正比，可用目视比色或者用分光光度计法测定。

2、采样及保存：实验室样品采集在聚乙烯或玻璃瓶内，应尽快分析，不然要在2—5℃下存放，用硫酸将此样品酸化至PH小于2，但酸化的样品会吸收空气中的氨而被污染，应注意。

3、样品处理：1）清洁的样品可直接量取。

2）含有悬浮物或色度深的样品在预处理后，在从中量取。

预处理的方法有：除余氯、凝聚沉淀、络合掩蔽、蒸馏法、低PH下煮沸。

4、操作步骤：1）目前只用于分析外排、BAF、电渗析、循环水中氨氮，其它水样还用蒸馏滴定法；但对于用。

2）直接量取合适体积的水样放入50ml比色管中，加水至刻度后，一定要将水样充分混匀，再加入1ml酒石酸钾钠溶液，摇匀；加入纳氏试剂1ml，摇匀。

放置10min后进行比色。

波长420nm，比色皿20mm，以水做参比进行测定。

根据目前水质情况：外排取样50ml，BAF取样1ml，根据水质变化情况调整取样量。

3）分析结果计算：仪器读数ug/取样体积ml，即为水样中氨氮的浓度mg/L。

4）从分光光度计中读取的含量应在15—100ug之间，如果大于100ug属超量程了，此时应减少取样量。

如果低于15ug，应增加取样量后比色计算。

如果取样量已经是50ml，仪器读数低于15ug，直接进行计算。

5、所用试剂：1）纳氏比色试剂：碘化汞—碘化钾—氢氧化钠（HgI2—KI—NaOH）A、称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，冷却至室温。

B、称取7g碘化钾和10g碘化汞，溶于水中，然后将此溶液在搅拌下，缓缓地加入到氢氧化钠溶液中，并稀释至100ml，贮于棕色瓶内，用橡皮塞塞紧。

于暗处存放，有效期可达一年。

2）酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠，溶于100ml水中，加热煮沸，以驱除氨，充分冷却后稀释至100ml。

纳氏试剂分光光度法测氨氮纳氏试剂分光光度法测氨氮的原理是利用纳氏试剂与氨氮作用，生成黄色络合物。

该络合物在一定波长下具有最大吸光度，通过测量吸光度即可定量测定氨氮含量。

试剂组成及反应机理纳氏试剂由水杨酸、过二硫酸钾和EDTA等组成。

氨氮与水杨酸在碱性条件下反应，生成黄色的络合物。

过二硫酸钾主要起氧化剂的作用，EDTA主要起络合剂的作用，可以防止金属离子干扰反应。

操作步骤1. 取样和稀释：根据样品浓度，取适量样品于比色管中，并稀释至一定体积。

2. 加入纳氏试剂：向样品中加入一定量的纳氏试剂，充分混匀。

3. 反应显色：将比色管置于37℃水浴中反应显色一定时间（通常为30分钟）。

4. 分光光度测定：将显色后的样品转移至比色皿中，在570nm波长处测定吸光度。

5. 绘制标准曲线：利用已知浓度的氨氮标准溶液绘制标准曲线，以吸光度为纵轴，氨氮浓度为横轴。

6. 计算氨氮含量：根据样品的吸光度和标准曲线，计算出样品中的氨氮含量。

注意事项1. 样品应新鲜，若放置时间过长，氨氮可能挥发或被吸收。

2. 纳氏试剂应现配现用，放置时间过长会影响显色效果。

3. 反应显色温度和时间应严格控制，否则会影响反应速率和显色效果。

4. 样品中若含有较多有机物，可能会影响显色效果，需要预先进行有机物去除处理。

5. 样品中若含有较多金属离子，可能会干扰反应，需要采取适当的络合措施。

优点和局限性优点：灵敏度高，检测限低。

操作简单，易于掌握。

适用于各种水样和废水样品的测定。

局限性：受样品中其他物质的干扰较大，需要采取适当的预处理措施。

反应显色需要一定的时间，测定速率相对较慢。

络合物在酸性条件下不稳定，可能会影响测定的准确性。

水质氨氮的测定方法纳氏试剂分光光度法1.含义本测定方法适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。

当水样体积为 50 ml，使用 20 mm 比色皿时，本方法的检出限为 0.025 mg/L，测定下限为 0.10 mg/L，测定上限为 2.0 mg/L（均以 N 计）。

2.方法原理以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长 420 nm 处测量吸光度。

3.检测依据水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法HJ 535-20094.检测程序4.1 试剂和材料除非另有说明，分析时所用试剂均使用符合国家标准的分析纯化学试剂，实验用水为按4：1 制备的水。

4.1.1无氨水，在无氨环境中用下述方法之一制备。

(1）离子交换法蒸馏水通过强酸性阳离子交换树脂（氢型）柱，将流出液收集在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶内。

每升流出液加 10 g 同样的树脂，以利于保存。

（2）蒸馏法在1 000 ml 的蒸馏水中，加 0.1 ml 硫酸（ρ=1.84 g/ml），在全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去前 50 ml 馏出液，然后将约 800 ml 馏出液收集在带有磨口玻璃塞的玻璃瓶内。

每升馏出液加 10 g 强酸性阳离子交换树脂（氢型）。

（3）纯水器法用市售纯水器临用前制备。

4.1.2轻质氧化镁（MgO）不含碳酸盐，在 500℃下加热氧化镁，以除去碳酸盐。

4.1.3盐酸，ρ(HCl)=1.18 g/ml。

4.1.4纳氏试剂，可选择下列方法的一种配制。

（1）二氯化汞-碘化钾-氢氧化钾（HgCl2-KI-KOH）溶液称取 15.0 g 氢氧化钾（KOH），溶于 50 ml 水中，冷却至室温。

称取 5.0 g 碘化钾（KI），溶于 10 ml 水中，在搅拌下，将 2.50 g 二氯化汞（HgCl2）粉末分多次加入碘化钾溶液中，直到溶液呈深黄色或出现淡红色沉淀溶解缓慢时，充分搅拌混合，并改为滴加二氯化汞饱和溶液，当出现少量朱红色沉淀不再溶解时，停止滴加。

氨氮的测定（纳氏试剂光度法）原理：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长范围内具有强烈吸收。

通常测量用波长在410-425nm范围。

本法最低检出浓度为0.025mg/L。

仪器：紫外分光光度计、PH计、100ml具塞量筒。

试剂（配制试剂及水样稀释均用无氨水）10%（m/v）硫酸锌溶液：称取10g硫酸锌溶于水稀释至100ml。

25%氢氧化钠溶液：称取25g氢氧化钠溶于水，稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中。

硫酸：ρ=1.84纳氏试剂：称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，充分冷却至室温。

另取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。

酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml。

铵标准溶液：称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵溶于水中，移入1000mI容量瓶中，稀释至标线，此溶液浓度为1000mg/L。

无氨水制备：每升蒸馏水中加0.1ml硫酸，在全玻璃馏器中重蒸馏，弃去50ml初馏液，接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。

步骤：预处理：取100ml水样于具塞量筒中，加入1ml10%硫酸锌溶液和0.1—0.2ml25%氢氧化钠溶液，调节PH至10.5左右，混匀。

放置使沉淀，用经无氨水充分洗涤过的中速滤纸过滤，并去初滤液20ml。

校准曲线的绘制：移取1ml铵标准液于100ml容量瓶中,用水稀释至标线,此溶液为10mg/L分别吸取1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml铵标准液于100ml容量瓶中加水稀释至标线，其含量分别为0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L、1.0mg/L，然后分别取以上铵标准液50ml水样于比色管中，加1.0ml酒石酸钾钠溶液，混匀，加1.5ml纳氏试剂，混匀，放置10分钟在波长420nm处，用光程10mm比色皿，经水为参比，测量出吸光度，测完试样后，紫外分光光度计会自动根据吸光度与氨氮的含量关系绘制曲线图，并保存在紫外分光光度计内（分光光度计的使用见6.15）。

水质氨氮的测定纳氏试剂法
纳氏试剂法是一种常用的水质氨氮测定方法，也被称为硫熏法。

该方法的原理是通过将水样中的氨氮与纳氏试剂（含有磷钼酸铵、硼酸和硫酸）反应生成明黄色的醇酸盐沉淀，然后通过比色法测定沉淀的光吸收浓度来确定水样中的氨氮浓度。

测定步骤如下：
1. 取一定体积的水样放入反应瓶中。

2. 加入适量的纳氏试剂，并迅速摇匀。

3. 放置一段时间，使沉淀充分析出。

4. 将沉淀离心沉淀下，倒掉上清液。

5. 加入硫酸溶解沉淀，使其完全溶解。

6. 使用分光光度计测定溶液的吸光度。

7. 通过氨氮标准曲线或计算公式，根据吸光度值得出水样中的氨氮浓度。

需要注意的是，纳氏试剂法是一种相对精确的测定方法，但在一些特殊情况下可能会受到干扰。

如过量溶液中的硫酸可能会对测定结果产生影响，而硫酸中的铁和铝离子也有可能干扰测定。

因此，在进行测定时需要注意样品的处理方法和设备的选择。

另外，由于该方法涉及到有毒试剂的使用，操作时需要注意安全。