酸水解法测定脂肪含量实验报告

酸水解法测定脂肪脂肪是人体内一种重要的营养物质，也是能量的主要来源之一。

为了准确测定食物中的脂肪含量，科学家们提出了多种方法，其中酸水解法是一种常用的测定方法。

酸水解法是通过将食物样品与酸反应，将脂肪分解成脂肪酸和甘油，然后通过一系列化学反应将脂肪酸转化为易于测定的产物，从而得到脂肪含量的结果。

将待测样品加入酸溶液中进行水解。

常用的酸溶液有硫酸、盐酸等，选择合适的酸溶液可以提高水解效率。

在加入酸溶液的过程中要注意控制温度，避免溶液过热或起泡。

水解反应进行一段时间后，将样品溶液进行中和处理。

这一步是为了使反应停止，同时还可以去除酸性物质的影响。

中和常用的方法是加入碱溶液，如氢氧化钠溶液。

接下来，需要将产生的脂肪酸从溶液中提取出来。

这一步可以通过萃取的方法实现。

常用的溶剂有醚类、醇类等。

将溶液与溶剂充分摇匀，待两者分层后，将有机相（含有脂肪酸）分离出来。

分离出的有机相中含有脂肪酸，但还有其他杂质。

为了准确测定脂肪含量，需要进一步纯化。

可以通过洗涤、结晶等方法将脂肪酸纯化。

纯化后的脂肪酸可以通过酸值滴定或色谱等方法进行测定。

酸值滴定是一种常用的测定方法，通过滴加酸碱指示剂，将溶液的酸碱滴定至中性，从而得到脂肪酸的酸值。

而色谱法则是通过将样品分离成不同的组分，然后利用色谱柱将脂肪酸分离出来，再通过检测器检测脂肪酸的含量。

总结一下，酸水解法是一种常用的测定脂肪含量的方法。

通过将样品与酸反应，将脂肪分解成脂肪酸和甘油，然后通过一系列化学反应将脂肪酸转化为易于测定的产物，从而得到脂肪含量的结果。

这一方法的优点是操作简便、结果准确，但也有一些注意事项，比如要控制好水解的时间和温度，选择合适的酸溶液等。

通过酸水解法测定脂肪含量，有助于我们更好地了解食物的营养成分，为合理膳食提供科学依据。

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例3-6 为比较两种方法对乳酸饮料中脂肪含量测定结果是否不同，随机抽取了10份乳酸饮料制品，分别用脂肪酸水解法和哥特里－罗紫法测定其结果如表3-5第(1)~(3)栏。

问两法测定结果是否不同？
表3-5 两种方法对乳酸饮料中脂肪含量的测定结果(%)
编号 (1) 哥特里－罗紫法
(2) 脂肪酸水解法
(3) 差值d (4)=(2)-(3) 1 0.840 0.580 0.260 2 0.591 0.509 0.082 3 0.674 0.500 0.174 4 0.632 0.316 0.316 5 0.687 0.337 0.350 6 0.978 0.517 0.461 7 0.750 0.454 0.296 8 0.730 0.512 0.218 9 1.200 0.997 0.203 10 0.870 0.506 0.364
2.724
(1)建立检验假设，确定检验水准
H 0：μd =0，即两种方法的测定结果相同 H 1：μd ≠0，即两种方法的测定结果不同
α=0.05
(2)计算检验统计量
本例n =10，∑d =2.724，∑d 2=0.8483，/ 2.724/100.2724d
d n =∑==。

0.1087d S =
=
=
按公式(3-16)
0.27247.925, 1019t ν==-=
(3)确定P 值，做出推断结论
查附表2的t 界值表得P <0.001。

按α=0.05水准，拒绝H 0，接受H 1，有统计学意义。

可认为两种方法对脂肪含量的测定结果不同，哥特里－罗紫法测定结果较高。

一、实验目的1. 掌握酸水解法测定脂肪含量的原理和操作步骤。

2. 了解脂肪在食品和生物样品中的重要性。

3. 通过实验验证酸水解法测定脂肪含量的准确性。

二、实验原理酸水解法是一种常用的测定脂肪含量的方法，其原理是将样品与强酸（如盐酸）一同加热进行水解，使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来。

随后，使用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶剂，干燥后称量，提取物的重量即为脂肪含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 食品或生物样品- 无水乙醚- 石油醚- 盐酸- 乙醇- 烧杯- 试管- 水浴锅- 分析天平- 恒温水浴- 烘箱- 干燥器2. 实验步骤：1. 样品处理：- 准确称取约2克样品，置于50毫升烧杯中。

- 加入8毫升水和10毫升浓盐酸，搅拌均匀。

2. 水解：- 将烧杯放入70-80℃的水浴中，每隔5-10分钟用玻璃棒搅拌一次，至样品脂肪游离消化完全为止，约需40-50分钟。

- 水解过程中，如水分蒸发，应适当补加水，保持溶液总体积不变。

3. 提取：- 取出烧杯，加入10毫升乙醇，混合均匀。

- 冷却后将混合物移入100毫升具塞量筒中。

- 用25毫升乙醚分次洗涤烧杯，并将洗液一并倒入量筒中。

- 加塞振摇1分钟，小心开塞放出气体，再塞好。

- 静置12分钟，小心开塞，用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。

- 静置10-20分钟，待上部液体澄清，吸出上清液于已恒重的锥形瓶内。

- 再加5毫升乙醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。

4. 回收溶剂、烘干、称重：- 回收锥形瓶内乙醚后，将锥形瓶置水浴上蒸干。

- 置100-105℃烘箱中干燥2小时。

- 取出锥形瓶放入干燥器内冷却30分钟。

- 称量锥形瓶及脂肪的质量。

四、实验结果与分析1. 计算脂肪含量：- 脂肪含量（%）= (样品中脂肪的质量 / 样品质量) × 100%- 例如，若样品中脂肪的质量为0.2克，样品质量为2克，则脂肪含量为10%。

最新资料推荐酸水解法测定食品中脂肪含量与索氏抽提法的比较山西医科大学学报（J Shanxi Med Univ） 1999, 30 （ 4） 383 酸水解法测定食品中脂肪含量与索氏抽提法的比较李秀花（山酋医科大学营养与食品卫生学教研室太原030001）摘要木文采用酸水解法和索氏抽提法同时测定了豆乳粉，乳粉等样品中脂肪含量，对两法测定结果进行比较发现：酸水解法具有提出脂肪率高，快速，不受特殊器材限制等优点，可适用于各类食品的脂肪测定，而且是豆乳粉，乳粉等喷雾加工制品脂肪测定的首选方法。

关键词中图号食品分析T S201. 2 2+酸水解法R151. 3索氏抽提法膳食脂肪类食物中脂肪含量的测定方法很多，一般多采用经典的索氏抽提法[1, 2],其优点是准确率较高，方法稳定性好。

但在多年的工作实践中发现有些经加工的食品应用索氏法测脂含量远远低于实际值，易造成测定结果的误差。

因而针对不同食物选择适当的分析测定方法成为科研和食物成分分析的首要问题。

本文旨在比较两种测脂方法对不同样品测定结果的差别，并试图找寻影响索氏法对某些样品测定值偏低的原因所在，为今后的科研工作提供准确可靠的测定方法。

1材料与方法1. 1仪器与试剂（略）1. 2样品（研制产品）；豆乳粉（研制产品）；管饲营养液市售奶粉（含糖）山西省山阴奶粉厂1. 4操作步骤：1. 4. 1索氏抽提法[1] 1. 4. 2酸水解法消化：称取样品约2克（含脂肪0. 3~ 0. 6克）置于150 ml锥形瓶中，加入95%乙醇4 ml,使样品全部浸于乙醇中，加浓HC1 10 ml,充分混匀，置锥形瓶于80水浴中50 min,每隔10 min摆动锥形瓶一次，待全部样品消化后，取出锥形瓶，流水冷却，用95%乙醇10 ml分次将混合物全部洗入100 ml具塞置筒中。

提取用移液管准确加入乙瞇20 m 1,加塞振摇1 m in,（注意放气）,静置5 m in,再准确加入石油瞇20 ml,加塞振摇1 min, 静置30 min,待分层后，用移液管准确吸取上层瞇液20 ml于己称重的提脂瓶中（可用锥形瓶代替），水浴中回收讎液，等瞇液蒸干，置提脂瓶于105恒温干燥箱中烘至恒重。