微生物的分离和计数真题
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微生物实验试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. 下列哪种微生物属于原核生物?A. 酵母菌B. 霉菌C. 细菌D. 病毒答案:C2. 微生物培养基中通常不包含以下哪种成分?A. 碳源B. 氮源C. 无机盐D. 空气答案:D3. 微生物的代谢类型中,哪种是异养微生物的特征?A. 光能自养B. 化学自养C. 异养D. 混合营养答案:C4. 微生物学中,革兰氏染色法主要用于区分哪两类细菌?A. 好氧菌和厌氧菌B. 需氧菌和兼性厌氧菌C. 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌D. 螺旋菌和杆状菌答案:C5. 在微生物实验中,常用的灭菌方法不包括以下哪项?A. 干热灭菌B. 湿热灭菌C. 紫外线灭菌D. 酒精消毒答案:D二、填空题(每空1分,共10分)1. 微生物的分类依据主要包括形态特征、_______、生理生化特性和分子生物学特征。
答案:生态习性2. 微生物实验室常用的接种方法有划线法、_______和稀释涂布法。
答案:倾注法3. 微生物的纯种分离通常采用_______培养基。
答案:选择性4. 微生物计数的方法之一是_______计数法。
答案:稀释平板5. 微生物的保存方法包括冷冻干燥法、_______和液氮保存法。
答案:甘油管藏法三、简答题(每题10分,共20分)1. 简述微生物实验室中常用的无菌操作技术。
答案:微生物实验室中常用的无菌操作技术包括无菌操作台的使用、无菌接种环和接种针的火焰灭菌、无菌操作时的快速操作以及操作前后的酒精擦拭等。
2. 描述微生物培养过程中的污染控制措施。
答案:微生物培养过程中的污染控制措施包括使用无菌操作台、定期对实验室进行消毒、使用无菌培养基和无菌水、操作人员穿戴无菌实验服和手套、使用无菌接种工具以及定期更换无菌操作台的高效过滤器等。
四、实验设计题(每题15分,共30分)1. 设计一个实验方案,用于鉴定某未知细菌是否为大肠杆菌。
答案:实验方案可包括:(1)细菌的形态观察;(2)革兰氏染色;(3)生化试验,如糖发酵试验、靛基质试验等;(4)分子生物学鉴定,如16S rRNA基因序列分析。
2023-2024学年浙科版高中生物单元测试班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________一、选择题(本大题共计14小题每题3分共计42分)1.关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是()A. 培养基应以尿素为唯一氮源该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B. 选择菌落数在10~300间的所有平板进行计数以平均数为实验结果C. 对10mL土样稀释\ 10^6倍后取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验测得的菌落数分别为18、234、276 则该10mL土样中分解尿素的细菌数为\ 2.55times10^8个D. 应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰提高可信度【答案】D【解析】A.分离土壤中分解尿素的细菌的培养基应以尿素为唯一氮源硝化细菌是自养生物其碳源为二氧化碳故二者利用的碳源不同 A错误B.一般选择菌落数在30~300间的平板进行计数 B错误C.对10mL土样稀释 10^6倍后取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验测得的菌落数分别为18、234、276 则该10mL土样中分解尿素的细菌数为(234+276)/2\div0.1\times10\times10^6=2.55\times10^10(个) C错误D.分离微生物时需要设置不接种的培养基与实验组一起培养作空白对照设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰 D正确故选D2.某兴趣小组在校园土壤中取样进行“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验小明从稀释倍数为 10^6培养基中筛选出约120个菌落而其他同学只筛选出约40个菌落下列有关叙述错误的是()A. 小明出现这种结果的可能原因是和其他同学取样的土壤不同B. 小明出现这种结果的可能原因是培养基中混入了其他含氮物质C. 要证明培养基是否受到污染可将小明配制的培养基不加土样进行培养D. 在牛肉膏蛋白胨培养基中加入酚红指示剂可初步鉴定尿素分解菌【答案】D【解析】解 A.小明筛选出的菌落数明显比其他同学多出现这种结果的可能原因是小明和其他同学取样的土壤不同也有可能是培养基混入其他氮源或培养基被污染 A正确B.小明出现这种结果的可能原因是培养基中混入了其他含氮物质 B正确C.要证明培养基是否受到污染可将小明配制的培养基不加土样进行培养即进行空白对照 C正确D.在尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂若培养基变红色可初步鉴定尿素分解菌 D错误故选 D3.欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌下列实验操作中不正确的是()A. 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B. 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C. 可将未接种的培养基在相同条件下作为对照进行培养D. 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌【答案】D【解析】解 A、为防止土壤浸出液浓度过高不能获得单菌落要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 A正确B、同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板防止偶然因素对实验结果的影响 B正确C 、可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照以判断培养基灭菌是否彻底 C正确D、可筛选出分解尿素的细菌的培养基是以尿素为唯一氮源的选择培养基 D错误.故选 D.4.为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表).下列关于培养基甲和乙是否能用于分离和鉴别纤维素分解菌说法正确的是()注“+”表示有“-”表示无.A. 培养基甲能培养基乙不能B. 培养基甲不能培养基乙能C. 培养基甲和乙都能D. 培养基甲和乙都不能【答案】D【解析】解 A、维素分解菌分离和鉴别培养基属于固体培养基而培养基甲中没有琼脂是液体培养基 A错误B、维素分解菌分离和鉴别培养基属于固体培养基而乙的碳源为淀粉其他能够利用淀粉为体液的微生物也能在该培养基上生存没有选择作用 B错误C 、根据A、B 选项可知培养基甲和乙都不能 C错误D、根据A、B 选项可知培养基甲和乙都不能 D正确.故选 D.5.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图据图分析不正确的是()A. 3号试管的稀释倍数为\ 10^4倍B. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×\ 10^7个C. 4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号试管的10倍D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低【答案】B【解析】解 A.从土壤到3号试管中的溶液共稀释了4次因此3号试管溶液的稀释倍数为 10^4倍 A正确B.5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167)÷3× 10^5×10=1.7× 10^8个 B错误C.5号试管中稀释液进行平板培养稀释倍数比4号的低10倍如果稀释倍数适当得到的菌落平均数可能是5号的10倍 C正确D.稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低 D正确故选 B6.在“分离土壤中分解尿素的细菌”实验中为判断是否起到了分离效果提高实验结果的可信度需要精心设置对照对照组的设置方式为()A. 牛肉膏蛋白胨培养基上接种相同土壤样液B. 牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水C. 筛选分解尿素细菌的选择培养基不接种D. 筛选分解尿素细菌的选择培养基上接种无菌水【答案】A【解析】解本实验中目的是为了判断选择培养基是否起到了分离效果故应用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照接种相同土壤样液观察菌落的多少通过两种培养基上菌落的多少可判断选择培养基是否起到了分离效果故选 A7.下图表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方关于其成分的叙述错误的是()鉴别纤维素分解菌的培养基配方将上述物质溶解后用蒸馏水定容到1000mLA. 琼脂属于凝固剂该培养基为固体培养基B. CMC-Na提供氮源C. 酵母膏和土豆汁中含有生长因子D. 蒸馏水使用前无需灭菌【答案】B【解析】解 A.培养基成分中含有凝固剂(琼脂)说明该培养基是固体培养基 A正确B.CMC-Na提供碳源 B错误C.酵母膏和土豆汁中含有生长因子 C正确D.蒸馏水使用前无需灭菌 D正确故选 B8.下列关于纤维素和纤维素酶的说法正确的是()A. 纤维素中不含能量且人和其他动物无消化纤维素的酶因此无法作为能源物质B. 纤维素是一种由葡萄糖缩合而成的还原性多糖C. 纤维素酶是一种复合酶至少包括\ C_1酶、\ C_x酶和葡萄糖苷酶三种D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖【答案】C【解析】A.某些动物体内有消化纤维素的微生物因此可作为能源物质 A错误B.纤维素是一种由葡萄糖连接而成的多糖但是不具有还原性 B错误C.纤维素酶是一种复合酶至少包括 C_1酶、 C_x酶和葡萄糖苷酶三种 C正确D.葡萄糖苷酶可把纤维二糖分解成葡萄糖 D错误故选C9.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图.据图分析正确的是()A. 3号试管中的菌落稀释倍数为10^3倍B. 4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号的10倍C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7times 10^9个D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高【答案】B【解析】解 A、3号试管是稀释10^4倍 A错误B、4号中稀释液进行平板培养稀释倍数比5号的低10倍如果稀释倍数适当得到的菌落平均数可能是5号的10倍 B正确C 、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+ 175+ 167)\div 3\times 10^5\times 10= 1.7\times 10^8个 C错误D、稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低 D错误.故选 B.10.如图表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方关于其成分的叙述错误的是()A. 琼脂属于多糖但不提供碳源B. CMC-Na提供氮源C. 酵母膏和土豆汁中含有有机物D. 蒸馏水使用前无需灭菌【答案】B【解析】解 A、琼脂属于多糖但不提供碳源作为固体培养基中的凝固剂 A正确B、CMC-Na是天然纤维素经化学改性后得到的纤维素衍生物是纤维素的羧甲基醚化物不含氮元素 B错误C 、酵母膏和土豆汁中含有有机物 C正确D、蒸馏水使用前无需灭菌 D正确.故选 B.11.下列培养基成分中能用于分离分解尿素的细菌的是()A. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、牛肉膏、尿素、琼脂、水B. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、葡萄糖、琼脂、水C. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、尿素、琼脂、水D. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水【答案】C【解析】解根据题意分析可知分解尿素的细菌需要KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4\cdot 7H_2O等无机盐还要水、碳源和氮源葡萄糖可以为其提供碳源但是其氮源只能是尿素.故选 C.12.下面对“从土壤中分离分解尿素的细菌过程中灭菌”的理解不正确的是()A. 防止杂菌污染B. 消灭全部微生物C. 稀释土壤溶液的过程必须在火焰旁操作D. 灭菌必须在接种前进行【答案】B【解析】解 A、防止杂菌污染是灭菌的目的因为发酵所用的菌种大多是单一纯种整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌) A正确B、不能消灭所有的微生物因为壤中分离分解尿素的细菌也是微生物 B错误C 、为了防止杂菌污染稀释土壤溶液的过程必须在火焰旁操作 C正确D、发酵所用的微生物是在灭菌后接种的如果在接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死 D 正确.故选 B.13.下列关于分解尿素的细菌说法正确的是()A. 以尿素作为唯一碳源B. 能分解尿素的原因是能合成并分泌蛋白酶C. 环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性D. 以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红【答案】A【解析】解 A、分离分解尿素的细菌时用尿素作为唯一氮源 A正确B、能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶 B错误C 、该细菌产生脲酶是受基因控制的可以对环境中含有的大量的尿素进行分解 C错误D、分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨氨会使培养基的碱性增强.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌若指示剂变红可确定该种细菌能够分解尿素 D错误.故选 A.14.关于分离土壤尿素分解菌并计数的叙述正确的是()A. 该实验中采集的土样经高温灭菌后可以用于制取土壤稀释液B. 土壤取样、称取土壤、稀释、涂布培养都在酒精灯火焰旁进行无菌操作C. 用显微镜直接计数法计数得到的结果往往会比实际活菌数目要高D. 取\ 10^4、\ 10^5、\ 10^6倍的土壤稀释液分别涂布于各组平板上得到的所有菌落数再求平均值【答案】C【解析】解 A.在分离土壤中的尿素分解菌实验中采集的土样经高温灭菌后土样中的微生物被杀死再制取土壤稀释液接种并培养不会得到菌落 A错误B.土壤是土壤微生物的培养基土壤取样时不需要在酒精灯火焰旁操作 B错误C.用显微镜直接计数法计数得到的结果包含死的菌体和活的菌体故计数结果往往会比实际活菌数目要高 C正确D.取 10^4、 10^5、 10^6倍的土壤稀释液分别涂布于各组平板上得到的同—稀释倍数下的不同培养基上的菌落数求平均值 D错误故选 C二、解答题(本大题共计7小题每题10分共计70分)15.(1)图中选择培养基应以________为唯一氮源鉴别培养基还需添加________作指示剂分解尿素细菌在该培养基上生长一段时间后其菌落周围的指示剂将变成________色.15.(2)土壤中的细菌将尿素分解为________之后才能被植物利用土壤中的细菌之所以能将尿素分解是因为细菌能合成________.15.(3)制备实验所需的培养基时在各成分都溶化后和分装前要进行的是________和灭菌对培养基进行灭菌的常用方法是________.倒平板时要待平板冷凝后将平板倒置其主要原因是________.15.(4)在5个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为10^5的土壤样品溶液0.1 ml 培养一段时间后平板上长出的细菌菌落数分别为191、16、326、173和182.该过程采取的接种方法是________ 每克土壤样品中的细菌数量为________\times 10^8个与血细胞计数板相比此计数方法测得的细菌数目较________(填“多”或“少”).【答案】尿素, 酚红, 红【解析】能合成脲酶的细菌才能分解尿素.配制以尿素为唯一氮源的培养基能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌.分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨氨会使培养基的碱性增强.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌若指示剂变红可确定该种细菌能够分解尿素.【答案】氨, 脲酶【解析】分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨.【答案】调整pH, 高压蒸汽灭菌, 防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染【解析】制备实验所需的培养基时在各成分都溶化后和分装前要进行的是调整pH和灭菌培养基用高压蒸汽进行灭菌.倒平板时防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染因此要待平板冷凝后将平板倒置.【答案】稀释涂布平板法, 1.82, 少【解析】用于计数细菌菌落数的常用方法是稀释涂布平板法统计的菌落数应介于30\sim 300之间故选择细菌菌落数为191、173和182的平板计数.每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目所以每克该土壤样品中的菌落数为\dfrac\dfrac191 + 173 + 1823\dfrac10100\times 10^5= 1.82\times 10^8个.由于两个或多个细菌连接在一起时往往统计的是一个菌落所以用此计数方法测得的细菌数较少.故答案为(1)尿素酚红红(2)氨脲酶(3)调整pH 高压蒸汽灭菌防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染(4)稀释涂布平板法 1.82 少16.(1)在将样品稀释涂布到鉴别培养基之前可以通过________(填“固体”或“液体”)培养基进行________以增加纤维素分解菌的浓度纤维素酶是一种复合酶其中的葡萄糖苷酶可以将________分解为________16.(2)刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物但并不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应常用的刚果红染色法有两种第一种是先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应第二种是在________时就加入刚果红 ________(填“第一种”或“第二种”)方法会使菌落之间发生混杂16.(3)如果观察到产生________的菌落说明可能获得了纤维素分解菌为了确定是纤维素分解菌还需要进行________产纤维素酶的实验纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量的测定16.(4)实验结束后使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉这样做的目的是________【答案】(1)液体, 选择培养, 纤维二糖, 葡萄糖【解析】解(1)在将土壤样品涂布到鉴别培养基之前可以在以纤维素为唯一碳源的液体培养基上进行选择培养选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度纤维素酶是一种复合酶包括 C_1酶、 C_x酶和葡萄糖苷酶前两种酶使纤维素分解成纤维二糖第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖【答案】(2)倒平板, 第一种【解析】(2)刚果红不与纤维二糖和葡萄糖发生反应常用的染色法有两种第一种是先培养微生物再加入染色剂进行颜色反应第二种是在倒平板时就加入染色剂第一种方法会使菌落之间发生混杂第二种方法产生淀粉酶的微生物也产生模糊的透明圈游戏微生物能降解色素形成明显的透明圈故两种方法各有缺点【答案】(3)透明圈, 发酵, 葡萄糖【解析】(3)刚果红与纤维素反应呈红色纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色在菌落周围会出现透明圈为了确定是纤维素分解菌还需要进行发酵产纤维素酶的实验纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定【答案】(4)防止造成环境污染【解析】(4)实验结束后使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉防止造成环境污染17.(1)纤维素分解菌是一类能产生纤维素酶的微生物,纤维素酶是一种复合酶,其中包括 C_1酶、 C_x酶和葡葡糖苷酶其中能将纤维二糖分解为葡萄糖的酶是_______________ 纤维素分解菌也能以葡萄糖为碳源但是实验室中培养纤维素分解菌的培养基一般选用纤维素粉而不选用葡萄糖该培养基不选用葡萄糖作为碳源的原因是______________________________________________17.(2)自然界中许多真菌能产生胞外纤维素分解酶其分解纤维素的能力远远高于细菌从细胞结构的角度分析真菌能产生胞外纤维素分解酶的原因可能是___________________________________________________ 若要分离出耐高温的能分解纤维素的真菌为了防止其他微生物的繁殖对培养基可采取的措施是___________________________________________________________________________ ___(答出3点)17.(3)为了鉴别纤维素分解菌培养基中要加入________________以形成红色复合物为方便鉴定和筛选将菌液接种到培养基上的一般方法为_______________ 实验过程中发现许多能分解纤维素粉的菌株不一定能分解天然的烟秆粉末针对这一现象在制备纤维素分解菌制剂降解烟秆时需对培养基进行改进请写出改进方法:___________________________________________【答案】(1)葡萄糖苷酶, 葡萄糖是微生物均可利用的碳源用葡萄糖作为碳源易造成杂菌污染【解析】解(1)筛选纤维素分解菌的培养基应该以纤维素为唯一的碳源有利于纤维素分解菌生长同时抑制其他微生物生长葡萄糖是微生物均可利用的碳源用葡萄糖作为碳源易造成杂菌污染所以不能选择葡萄糖作为碳源【答案】(2)真菌是真核生物具有高尔基体和内质网能合成大量分泌蛋白, 培养基中以纤维素为唯一碳源并加入一定量的抗生素在高温环境下培养【解析】(2)纤维素分解酶为一种分泌蛋白有高尔基体和内质网的细胞都能产生分泌蛋白分离出耐高温的能分解纤维素的真菌就需要在高温下培养以纤维素作为唯一的碳源【答案】(3)刚果红, 稀释涂布平板法, 培养基中直接以烟秆粉末作为唯一碳源【解析】(3)筛选纤维素分解菌的方法是刚果红染色法该方法可以通过颜色反应直接筛选刚果红可以与纤维素形成红色复合物稀释涂布平板法是对微生物计数常用的方法18.(1)食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成________________酶的微生物能够降解纤维素该酶是一种复合酶它至少包括________________________18.(2)目前研究者多利用以________为唯一碳源的培养基从土壤中分离纤维素分解菌为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入________染料形成________色复合物若产生________ 则证明有纤维素分解菌存在18.(3)下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程上述工艺流程中环节①需要的微生物大多分布在________的环境中④过程要注意对接种器材进行________【答案】(1)纤维素 , \ C_1酶、\ C_x酶和葡萄糖苷酶【解析】解(1)纤维素酶是一种复合酶一般认为它至少包括三种组分即 C_1酶、C_x酶和葡萄糖苷酶前两种酶使纤维素分解成纤维二糖第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖正是在这三种酶的协同作用下纤维素最终被水解成葡萄糖为微生物的生长提供营养同样也可以为人类所利用【答案】(2)纤维素 , 刚果红, 红, 透明圈【解析】(2)一般利用添加了纤维素的选择培养基分离纤维素分解菌利用刚果红染色法筛选纤维素分解菌这种方法能够通过在培养基中加入刚果红看是否产生透明圈直接对微生物进行筛选【答案】(3)富含纤维素 , 灭菌【解析】(3)能产纤维零酶的微生物应多分布于富含纤维素的环境接种前要对接种器材进行灭菌处理19.(1)甲中细菌培养基和选择培养基成分上的主要区别是后者________19.(2)土壤样品需稀释后震荡摇匀用________准确吸取0.1mL土壤悬液滴加在培养基中均匀涂布将培养皿倒置后放在________中培养一段时间获得细菌菌落19.(3)5个细菌培养基平板上共接种稀释倍数为 10^5的土壤样品液0.5mL 培养一段时间后平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191 则每毫升土壤样品中的细菌数量为________个19.(4)研究人员用鉴别培养基来鉴定细菌已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应研究人员在刚果红培养基平板上得到部分有透明圈降解圈的菌落(见图丙)图中菌落________的细菌最适合作为目的菌保存不考虑基因突变上图甲中鉴别培养基中的菌落周围是否都有透明圈?________19.(5)图中菌种若要长期保存应该将其放在________条件下若在保存过程中有一菌株因基因突变导致纤维素酶失活突变后的基因转录形成的mRNA在图乙箭头处增加了70个核苷酸(无终止密码子)使该酶的结构发生变化(假设图中271位之前无终止密码子)则该酶的氨基酸数量比原来多________个假设氨基酸平均分子量为130 则突变后的蛋白质(两条肽链)分子量为________【答案】(1)以纤维素为唯一碳源【解析】解(1)图甲中细菌培养基为完全培养基选择培养基需要筛选产纤维素酶细菌因此选择培养基需要以纤维素为唯一碳源【答案】(2)移液管或移液枪, 恒温箱【解析】(2)土壤样品需稀释后震荡摇匀用移液管或移液枪准确吸取0.1mL土壤悬液滴加在培养基中均匀涂布将培养皿倒置后放在恒温箱中培养一段时间获得细菌菌落【答案】(3)\ 1.75×10^8【解析】(3)为了保证结果准确一般选择菌落数在30∼300的平板进行计数即选择156、178和191进行计算共接种稀释倍数为 10^5的土壤样品液0.5mL 培养一段时间后则每毫升土壤样品中的细菌数量=(156+178+191)÷3÷0.5× 10^5= 1.75×10^8个【答案】(4)①, 是【解析】(4)分析图解图中菌落①周围的降解圈最大说明分解纤维素的能力最强因此最适合作为目的菌保存鉴别培养基来鉴定细菌已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应因此上图甲中鉴别培养基中的菌落周围都有透明圈【答案】(5)-20℃, 21, 12916【解析】(5)图中菌种若要长期保存应该将其放在−20℃条件下若在保存过程中有一菌株因基因突变导致纤维素酶失活突变后的基因转录形成的mRNA在图乙箭头处增加了70个核苷酸(无终止密码子)使该酶的结构发生变化(假设图中271位之前无终止密码子)根据终止密码子的种类可知原来276、277、278三个碱基将构成终止密码子UGA 终止密码子之前共有273+70+2=345 一个密码子由mRNA上3个相邻的碱基构成因此该酶的氨基酸数量=345÷3=115 原来mRNA上的终止密码子为UAA 翻译出来的氨基酸数有94个即比原来多21个假设氨基酸平均分子量为130 则突变后的蛋白质(两条肽链)分子量=115×130−(115−2)×18=1291620.(1)土壤中的有些细菌能分解尿素是因为其能合成________________20.(2)分离尿素分解菌时需要配制以____________为唯一氮源的培养基20.(3)选取10g土样后进行一系列稀释分别吸取0.1mL的 10^4、 10^5、 10^6倍稀释的菌液在灭菌板上进行_______________接种采用该种接种方法的目的是_______________________________________ 该实验过程中还设置了一个空白平板空白平板可起___________作用实验结果显示 10^6倍稀释的菌液对应平板上的菌落数为。
微生物分离试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 微生物分离的目的是()。
A. 鉴定微生物种类B. 获得纯种微生物C. 观察微生物形态D. 研究微生物生理功能答案:B2. 以下哪种培养基不适合用于微生物分离()。
A. 选择性培养基B. 鉴别培养基C. 营养培养基D. 合成培养基答案:D3. 微生物分离时常用的稀释方法不包括()。
A. 梯度稀释法B. 连续稀释法C. 振荡稀释法D. 离心沉淀法答案:D4. 微生物分离时,以下哪种方法可以减少杂菌污染()。
A. 使用无菌操作技术B. 使用抗生素C. 使用紫外线照射D. 使用高温灭菌答案:A5. 微生物分离时,以下哪种培养条件不利于微生物生长()。
A. 适宜的温度B. 适宜的pH值C. 适宜的氧气供应D. 过高的盐浓度答案:D6. 微生物分离时,以下哪种方法可以提高分离效率()。
A. 增加培养基的浓度B. 增加培养时间C. 增加接种量D. 使用选择性培养基答案:D7. 微生物分离时,以下哪种方法可以用于鉴定微生物()。
A. 显微镜观察B. 生化试验C. 抗生素敏感性测试D. 所有以上方法答案:D8. 微生物分离时,以下哪种方法可以用于计数微生物()。
A. 稀释涂布法B. 比浊法C. 活细胞计数法D. 所有以上方法答案:D9. 微生物分离时,以下哪种方法可以用于分离厌氧菌()。
A. 厌氧培养箱B. 厌氧袋C. 厌氧罐D. 所有以上方法答案:D10. 微生物分离时,以下哪种方法可以用于分离真菌()。
A. 酵母提取培养基B. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基C. 玫瑰红钠培养基D. 所有以上方法答案:D二、填空题(每空1分,共20分)1. 微生物分离的目的是获得__纯种微生物__。
2. 微生物分离时常用的稀释方法包括__梯度稀释法__和__连续稀释法__。
3. 微生物分离时,使用__无菌操作技术__可以减少杂菌污染。
4. 微生物分离时,__过高的盐浓度__不利于微生物生长。
食品微生物检验技术题库及答案一、单选题(共47题,每题1分,共47分)1.在分离培养时,我们不可以采用以下哪种接种方法A、划线法B、涂布法C、穿刺法D、倾注法正确答案:C2.分离鉴别微生物时常用()进行培养A、加富培养基B、天然培养基C、鉴别培养基D、基础培养基正确答案:C3.为了得到较好的结果,在倾注平板上细菌的菌落数要在A、这些都是B、30和300之间C、500和1000之间D、200和300之间正确答案:B4.除了保证微生物基本生长需要还可显示某些形态结构或生理代谢特点的培养基为()A、合成培养基B、基础培养基C、选择培养基D、鉴别培养基正确答案:D5.下列标准不属于技术标准的是( )A、技术管理标准B、产品标准C、基础标准D、环境质量标准正确答案:A6.肉汁培养基一般用于培养A、霉菌B、放线菌C、酵母菌D、细菌正确答案:D7.革兰氏染色时最好选择处于()的微生物细胞进行染色A、稳定期B、衰亡期C、对数期D、延迟期正确答案:C8.以下是革兰氏阳性菌G+的是()A、大肠杆菌B、枯草芽胞杆菌C、金黄色葡萄球菌D、B、C都是正确答案:D9.食品菌落总数测定中,培养温度通常为A、20±1℃B、27±1℃C、46±1℃D、36±1℃正确答案:D10.最常见引起细菌性食物中毒的细菌是A、沙门氏菌B、产毒霉菌C、金黄色葡萄球菌D、致病性大肠杆菌正确答案:A11.以下哪种方法适于衰退菌种的复壮()A、采用有效的保藏方法B、纯种分离C、低温冷藏D、无菌操作正确答案:B12.细菌细胞壁主要成分是()A、纤维素B、果胶糖C、肽聚糖D、几丁质正确答案:C13.球菌在一个平面上连续分裂后,连成三个或三个以上的或长或短的链状,这种细菌称()A、葡萄球菌B、四联球菌C、链球菌D、双球菌正确答案:C14.三糖铁琼脂斜面属于()培养基A、基础B、营养C、鉴别D、选择正确答案:C15.下列哪种微生物具有典型细胞核结构()A、大肠杆菌B、沙门氏菌C、桔青霉菌D、葡萄球菌正确答案:C16.致病性乙型溶血性链球菌,能产生()A、链激酶B、蛋白酶C、尿素酶D、转氨酶正确答案:A17.MPN是指A、100g样品中大肠菌群确切数B、1g 样品中样品中大肠菌群确切数C、100g样品中大肠菌群近似数D、1g样品中大肠菌群近似数正确答案:C18.凡能满足某一菌种的野生型菌株营养要求的合成培养基简称为:()A、M.MB、C.MC、S.MD、N.M正确答案:A19.国家标准有效期一般为()年A、3年B、2年C、10年D、5 年正确答案:D20.下列不属于细菌特殊结构的是()A、鞭毛B、核质C、荚膜D、芽孢正确答案:B21.酵母菌的主要繁殖方式为()A、有性孢子繁殖B、分裂繁殖C、出芽繁殖D、无性孢子繁殖正确答案:C22.厌氧微生物的培养经常采用的方法是A、厌氧袋法B、这些都是C、厌氧罐法D、厌氧箱法正确答案:B23.靛基质试验阳性,是因为细菌含有A、色氨酸脱羧酶B、色氨酸脱氨酶C、色氨酸氧化酶D、色氨酸水解酶正确答案:D24.根据中华人民共和国标准化法规定,我国标准分为()两类A、国家标准和行业标准B、国家标准和企业标准C、国家标准和地方标准D、强制性标准和推荐性标准正确答案:D25.在三糖铁琼脂斜面上呈现:乳糖、蔗糖不发酵,葡萄糖产酸不产气,H2S阴性,该培养物可能是A、大肠杆菌B、沙门氏菌C、志贺氏菌D、柠檬酸盐杆菌正确答案:C26.发现食物中毒后,制止和防止中毒再发生的首要工作是A、立即就地封存一切可疑中毒食物并停止食用B、禁止继续销售或转移C、对可疑中毒食物立即追究其来源、扩散单位D、对已查封食品取样检验原因正确答案:A27.含血清培养基应采用下面的()法灭菌。
微生物实验室试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 微生物学中,下列哪项不是微生物的特点?A. 体积小B. 繁殖快C. 代谢类型多样D. 需要光合作用答案:D2. 细菌的基本形态包括:A. 球状B. 杆状C. 螺旋状D. 所有以上选项答案:D3. 下列哪项不是真菌的特征?A. 有细胞壁B. 有成形的细胞核C. 能进行光合作用D. 能产生孢子答案:C4. 病毒与细菌的主要区别在于:A. 病毒没有细胞结构B. 病毒比细菌小C. 病毒不能独立生存D. 所有以上选项答案:D5. 微生物实验室中常用的无菌操作技术不包括:A. 无菌接种B. 无菌过滤C. 紫外线消毒D. 高压蒸汽灭菌答案:C6. 微生物的培养基通常包含哪些成分?A. 碳源B. 氮源C. 无机盐D. 所有以上选项答案:D7. 下列哪项不是微生物实验室常用的染色方法?A. 革兰氏染色B. 酸性染色C. 碱性染色D. 荧光染色答案:C8. 微生物的纯种培养通常采用哪种培养基?A. 选择性培养基B. 鉴别培养基C. 富集培养基D. 固体培养基答案:D9. 微生物实验室中常用的微生物计数方法不包括:A. 稀释涂布法B. 比浊法C. 显微镜直接计数法D. 电子计数法答案:D10. 微生物实验室中常用的灭菌方法包括:A. 干热灭菌B. 湿热灭菌C. 化学灭菌D. 所有以上选项答案:D二、填空题(每空1分,共20分)1. 微生物的分类单位从大到小依次为:__________、__________、__________、__________、__________。
答案:界、门、纲、目、种2. 微生物实验室常用的微生物分离方法有__________和__________。
答案:稀释涂布法、平板划线法3. 微生物实验室中,常用的无菌操作技术包括__________、__________和__________。
答案:无菌接种、无菌过滤、无菌操作台4. 微生物实验室中,常用的微生物鉴定方法有__________、__________和__________。
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数基础巩固1在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()A。
鉴别培养基B.加富培养基C。
选择培养基D。
基础培养基解析:选择培养基可选择目标微生物,同时抑制或阻止其他微生物生长。
答案:C2下列关于土壤取样的叙述,错误的是()A.土壤取样,应选取肥沃、湿润的土壤B。
先铲去表层土,再取样C。
取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D。
应在火焰旁称取土壤解析:土壤取样过程中,为防止杂菌污染,取样用的小铁铲和信封在使用前都必须灭菌。
答案:C3下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B。
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C。
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D。
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析:分解尿素的细菌能利用尿素,因此选择培养基中应只有尿素这一种氮源。
此外,培养基中还应含有碳源。
答案:A4能够测定样品活菌数的方法是( )A.稀释涂布平板法B.直接计数法C。
重量法D。
比浊法解析:利用稀释涂布平板法能够在不影响生活的情况下将细菌个体从固体培养基上分离出来,并可以繁殖形成菌落,可根据菌落数测定出样品活菌数,故稀释涂布平板法可用于测定样品活菌数。
直接计数法计得的是活菌和死菌的总和。
答案:A5下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是()A。
微生物培养前,需对培养基进行消毒B。
测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析:微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法,而一般不用活菌计数法;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度以便能选择出菌落数在30~300的平板进行计数;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源.答案:A6下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是()A。
历年微生物检验试题及答案一、选择题1. 微生物检验中常用的染色方法是什么?A. 苏木精-伊红染色B. 革兰氏染色C. 巴氏染色D. 阿利新蓝染色答案:B2. 以下哪个不是微生物检验中常用的培养基?A. 营养琼脂B. 血琼脂C. 麦康凯琼脂D. 伊红美蓝琼脂答案:D3. 革兰氏染色的基本原理是什么?A. 细胞壁成分的不同B. 细胞膜的通透性C. 核酸的分布D. 蛋白质的含量答案:A4. 微生物检验中,哪种微生物是引起食物中毒的常见原因?A. 酵母菌B. 细菌C. 病毒D. 真菌答案:B5. 以下哪种微生物检验方法可以用于检测大肠杆菌?A. 直接显微镜计数法B. 稀释涂布法C. 酶联免疫吸附测定法D. 所有上述方法答案:D二、填空题6. 微生物检验中,______是用来检测微生物数量的常用方法。
答案:平板计数法7. 微生物检验中,______是检测致病菌的重要手段。
答案:生化试验8. 微生物检验中,______是判断微生物是否致病的重要指标。
答案:毒力因子9. 微生物检验中,______是用于检测微生物生长的仪器。
答案:菌落计数器10. 微生物检验中,______是用于检测微生物的遗传特性的方法。
答案:分子生物学方法三、简答题11. 简述微生物检验中常用的培养方法有哪些?答案:微生物检验中常用的培养方法包括平板培养、液体培养、微量培养等。
平板培养适用于分离和计数微生物;液体培养适用于大量培养微生物;微量培养适用于快速检测微生物的生长情况。
12. 微生物检验中,如何进行革兰氏染色?答案:革兰氏染色通常包括以下步骤:1) 涂片制备;2) 固定;3) 初染;4) 脱色;5) 复染。
通过这一过程,可以区分革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌。
四、论述题13. 论述微生物检验在食品安全领域的重要性。
答案:微生物检验在食品安全领域具有至关重要的作用。
它不仅可以检测食品中是否存在有害微生物,还可以评估食品的卫生状况和安全性。
2.2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数习题1.在培养基中加入尿素(惟一氮源),以分离出能分解尿素的细菌,这种加入尿素的培养基在功能上属于()A.选择培养基B.固体培养基C.液体培养基 D.半固体培养基2.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天,结果如图所示。
从实验结果分析,以下叙述不.正确的是()A.链霉素能阻止结核菌的生长B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D.链霉素可以用于治疗伤寒病人3.测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释,其原因是()A.细菌个体小,真菌个体大B.细菌易稀释,真菌不易稀释C.细菌在土壤中数量比真菌多D.随机的,没有原因4.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()A.未接种的选择培养基新课标B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D.接种了的选择培养基5.在涂布平板操作时错误的是()A.将涂布器在酒精灯火焰上灼烧,直到烧红B.取少量菌液滴加在培养基表面C.将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后,冷却8 s~10 s再用D.涂布时可转动培养皿,使涂布均匀6.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养能分解尿素的细菌后,指示剂的颜色是() A.蓝色 B.红色C.黑色D.棕色7.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()A.鉴别培养基B.加富培养基C.选择培养基D.基础培养基8.分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧C.①③⑤⑧D.①④⑥⑦9.在寻找目的菌株时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找,下列不.属于厌氧细菌生存环境的是()A.土壤深层B.人或动物体内寄生C.真空 D.池塘淤泥10.下列是关于检测土壤中细菌总数实验操作的叙述,其中错误的是()A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数11.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A.以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂B.以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基,其他成分都相同,在相同条件下操作,培养与观察,则乙组实验属于()A.空白对照B.标准对照C.相互对照D.条件对照13.某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难以降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)。
2024年微生物检验技术中级考试真题一、单项选择题(每题2分,共40分)下列哪项不属于微生物学实验室生物安全的基本原则?A. 实验室分区管理B. 个人防护装备的正确使用C. 废弃物的随意丢弃D. 微生物的妥善保存与运输细菌菌落形态的观察主要通过哪种方法进行?A. 显微镜观察B. 肉眼直接观察C. 革兰染色后观察D. 荧光显微镜观察下列哪种培养基常用于检测粪便中的大肠杆菌?A. 伊红美蓝培养基B. 血琼脂培养基C. 麦康凯培养基D. 巧克力培养基微生物分离纯化技术中,最常用的方法是?A. 划线分离法B. 倾注平板法C. 稀释涂布平板法D. 液体培养法革兰染色法主要用于区分细菌的哪种特性?A. 形状B. 大小C. 革兰氏阳性与阴性D. 是否有鞭毛下列哪种微生物是专性厌氧菌?A. 大肠杆菌B. 链球菌D. 破伤风梭菌微生物计数方法中,最常用且准确的方法是?A. 显微镜直接计数法B. 平板菌落计数法C. 比浊法D. 稀释涂布平板法(与第3题不同角度考察)鉴别细菌种类时,常采用哪种实验进行生化特性分析?A. 发酵试验B. 革兰染色C. 凝集试验D. 血清学试验下列哪种方法是鉴定细菌耐药性的常用手段?A. 纸片扩散法B. 显微镜观察C. 分子生物学技术D. 药敏试验微生物检验中,用于评估环境清洁度的指示菌是?A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 酵母菌D. 霉菌二、多项选择题(每题3分,共15分,多选或少选均不得分)微生物实验室常用的消毒灭菌方法包括:A. 紫外线照射B. 煮沸C. 75%乙醇擦拭D. 巴氏消毒E. 高压蒸汽灭菌下列哪些微生物属于条件致病菌?A. 大肠杆菌B. 葡萄球菌D. 铜绿假单胞菌E. 肺炎链球菌微生物培养过程中,影响菌落生长的因素有:A. 温度B. pH值C. 营养物质D. 氧气浓度E. 光照强度下列哪些实验可用于鉴别细菌的种属?A. 生化试验B. 血清学试验C. 分子生物学鉴定D. 革兰染色E. 药敏试验微生物实验室常用的生物安全柜类型包括:A. I级B. II级C. III级D. 超净工作台E. 通风橱三、简答题(每题10分,共30分)简述革兰染色法的步骤及原理。
专题二第二节土壤中分解尿素的细菌的分离与计数测试题知识点:土壤中尿素分解菌的课题背景1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是()A.在液体培养基上进行B.至少接种一种细菌C.接种一个细菌D.及时补充消耗的营养物质2.在一个“淀粉-琼脂”培养基的5个圆点位置,分别用不同方法处理,将此实验装置放在37℃恒温箱中,保温处理24h后,将碘液滴在培养基的5个圆点上,其实验结果记录于下表:()请指出④和⑤所发生的颜色反应,以及③接种的面包霉的分泌物分别是A.棕黄色、棕黄色、淀粉酶B.蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶C.棕黄色、蓝黑色、淀粉酶D.棕黄色、蓝黑色、麦芽糖酶3.利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是()A.酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌B.酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌C.酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌D.黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌知识点:土壤中尿素分解菌的分离与计数研究思路4.PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶,这种酶要能忍受93℃左右的高温.如果请你来寻找这种耐高温的酶,你会去哪里寻找()A.土壤中B.海水中C.热泉中D.冷库中5.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()A.KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水D.KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水6.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0。
1mL) ()A.2。
34×108B.2.34×109 C.234 D.23。
47.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线(3条线均与下图中的链霉素带接触),将平板置于37℃条件下恒温培养3天,结果如图所示.从实验结果分析以下叙述,不正确的是()A.链霉素能阻止结核菌的生长B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D.链霉素可以用于治疗伤寒病人知识点:土壤中尿素分解菌的实验的具体操作8.下列操作不属于微生物的分离步骤的是( )A.稀释B.划线或涂布C.接斜面D.培养9.影响微生物生长的主要环境因素是()A.阳光、温度、水分B.温度、水分、PHC.水分、PH、氧D.温度、PH、氧10.下列微生物的产物中没有菌种特异性的一组是()A.氨基酸、核苷酸、多糖、色素B。
2022年高考生物总复习:微生物的分离和计数
1.(2013·新课标全国Ⅱ,39)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。
实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题:
(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用____________法或____________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。
(2)取该单菌落适当稀释,用__________法接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A________________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B____________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明____________________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________________________________。
(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好选用抗生素__________。
解析(1)在微生物的培养过程中,常用来分离微生物的方法是稀释涂布平板法和平板划线法。
(2)为了使微生物在培养基上能够均匀分布,一般用稀释涂布平板法将微生物接种在培养基上。
(3)在抗药性检验过程中,如果在菌落周围出现透明圈,说明此种抗生素可抑制该细菌;透明圈的大小表示此种抗生素抗菌效果的强弱。
据此可判断抗菌效果强弱依次是A、C、B;D的透明圈中出现了一个菌落,说明该菌落对此种抗生素具有耐药性。
答案(1)平板划线稀释涂布(或涂布)平板
(2)稀释涂布平板(涂布)
(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌
(4)A
2.(2014·四川理综,10)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。
研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。
分离降解苯磺隆的菌株和探索其降
解机制的实验过程如图甲、乙所示。
(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_____________。
(2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________,这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。
(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。
划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。
造成划线无菌落可能的操作失误有__________________ _________________________________________________________________。
(4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。
该实验的假设是________________________,该实验设计是否合理?为什么?__________________________________。
答案(1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖(2)细胞分裂素母液(3)接种环①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理,缺少空白对照。