临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第十五章_弧菌科及检验

临床医学检验技术(师)：弧菌科1、单选对霍乱弧菌进行培养，选用的培养基是（）A.SS平板B.EMB平板C.中国蓝平板D.TCBSE.KVL血平板正确答案：D参考解析：霍乱弧菌营养要求不高，在普通琼脂上（江南博哥）生长良好。

初次分离常选用pH8.5的碱性胨水进行选择性增菌培养，常用TC BS、4号琼脂平板、庆大霉素琼脂平板等。

2、单选副溶血性弧菌的致病因子包括（）A.黏附因子B.胞壁C.类脂AD.脂多糖E.蛋白质正确答案：A3、单选对于可疑霍乱感染者，在粪便中霍乱弧菌含量较少时，为增加分离灵敏度，需要对标本进行增菌，取粪便进行碱胨水增菌时，在37℃培养一般至少培养（）A.2～3小时B .4～6小时C.6～8小时D.12小时E.16小时正确答案：C4、单选关于霍乱，错误的是（）A.属于烈性消化道传染病B.人类是霍乱弧菌的唯一易感者C.病愈后，少数病人可长期带菌D.病后的免疫力短暂E.接种霍乱死疫苗可增强人群的特异性免疫力正确答案：D参考解析：患过霍乱的人可获得长久的免疫力，再感染的较为少见。

5、单选关于霍乱的叙述，下列正确的是（）A.传播途径主要是通过呼吸道感染B.只需少量细菌（102~103）即可使人感染发病C.细菌侵入肠上皮细胞和肠腺而损伤肠壁D.霍乱弧菌的O1群和O139群的致病机制与过程是一样的E.致病是通过肠毒素作用于小肠上皮细胞受体引起剧烈腹泻和腹痛正确答案：D参考解析：霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的病原体，自然情况下，人类是霍乱弧菌的易感者。

正常情况下，胃液中的胃酸可消灭食物中的霍乱弧菌不至于致病，但在胃酸降低或摄入大量的霍乱弧菌，可以通过胃进入肠道。

进入肠道的霍乱弧菌通过鞭毛运动穿过肠黏膜表面的黏膜层，接近肠黏膜上皮细胞，通过菌毛定植。

霍乱弧菌的O1群和O139群的致病机制与过程是一样的。

6、单选一男性病人，43岁，剧烈腹泻水样便伴呕吐1天。

无腹痛，无里急后重。

查体，疲倦面容，皮肤、唇舌干燥，眼窝内陷。

第十五章弧菌科及检验本章内容一、弧菌属（一）霍乱弧菌（二）O139型霍乱弧菌（三）副溶血性弧菌（四）其他弧菌二、气单胞菌属与邻单胞菌属（一）气单胞菌属（二）邻单胞茵属革兰阴性直杆菌或弧菌有极端鞭毛氧化酶阳性动力阳性发酵葡萄糖弧菌属——分类根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌:能被O1群血清凝集但不产生致病毒素；③非O1群霍乱弧菌；④其他弧菌：包括副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、创伤弧菌、麦氏弧菌和拟态弧菌。

大多数为非病原菌，对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。

霍乱弧菌——生物学特性形态与结构形态：弧形或逗点状，“鱼群状”。

人工培养后呈杆状。

染色：G-。

特殊结构：有菌毛，无芽胞，部分有荚膜。

一端有一根粗而长的鞭毛，悬滴观察可见穿梭样或流星状运动。

·培养特性营养要求：不高，可无盐生长。

气体环境：兼性厌氧。

菌落特征：耐碱不耐酸。

pH8.5的碱性蛋白胨水：培养6～9h，增菌形成菌膜。

碱性琼脂平板：较大圆形扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。

硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）：较大黄色菌落。

亚碲酸钾琼脂平板：还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。

庆大霉素琼脂：形成的菌落中心呈灰褐色。

·抗原·变异性：有形态变异、菌落变异、溶血性变异和毒力变异。

·抵抗力：对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。

但耐碱力较强。

霍乱弧菌——微生物检验及鉴定·标本采集：以粪便（米泔水样便）为主，尽可能在用药之前采取。

及时接种适宜培养基。

常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文-腊二氏保存液和卡-布运送培养基等。

·形态学检查：①动力观察：米泔水样粪便悬滴观察可见流星或穿梭状运动的细菌。

②制动试验：加霍乱多价诊断血清后弧菌凝集，运动停止。

③涂片染色：革兰染色，观察革兰染色阴性呈鱼群状排列的弧菌。

研究认为穿通支原体、发酵支原体、梨支原体三种新支原体是加速AIDS进程的一个协同因子。

2000年国内学者从AIDS患者尿中分离到1株穿通支原体，从病原学上证实我国AIDS和HIV患者中存在感染。

（三）微生物学检验
标本：咽分泌物、血清、尿液等
l.分离培养
选SP-4培养基
若由红变黄透明无沉淀，视“培养可疑阳性”，再用滤膜过滤。

滤液转种传代，当培养基颜色再度由红变黄则认为“初代培养阳性”
2.鉴定
1)生化反应：葡萄糖发酵试验、水解精氨酸试验及尿素分解试验阳性。

2)代谢抑制试验。

3) P CR: 扩增特异性DNA。

4)抗体检测：HIV感染者中用ELISA法检刺出大址本菌抗体，其中无症状者的阳性率为20%,艾滋病患者为40%。

【例题】支原体进行分离培养时，应采取
A.需氧培养
B.厌氧培养
C.兼性厌氧培养
D.微衙氧培养
E.兼性厌氧或专性厌氧培养
【正确答案】E
本章小结：
一、概述
二、肺炎支原体
三、解脉脉原体。

弧菌科及检验章节习题及答案一、选择题1.霍乱弧菌生物学特性错误的是（）A.曾引起7次世界大流行B.可用活菌悬滴法直接观察其动力C.本菌初次分离通常用碱性蛋白胨水D.运动活泼，周生鞭毛E.患者粪便常呈米泔水样答案：D2.下列细菌为单鞭毛且悬滴法检查呈穿梭样运动的是（）大肠埃希菌 B.变形杆菌 C.副溶血弧菌D.霍乱弧菌E.幽门螺杆菌答案：D3.TCBS培养基中使指示剂变色的物质是（）枸橼酸盐 B.乳糖 C.蔗糖 D.半乳糖 E.硫代硫酸盐答案：C4.霍乱弧菌的主要致病物质是（）内毒素 B.外毒素 C.普通菌毛 D.荚膜 E.Vi抗原答案：B5.目前已知的最强的致泻毒素是（）Vero细胞毒素 B.霍乱肠毒素 C.耐热性肠毒素D.不耐热性肠毒素E.气单胞菌不耐热性肠毒素答案：B6.引起烈性肠道传染病的是（）大肠埃希菌 B.金黄色葡萄球菌 C.沙门菌D.霍乱弧菌E.副溶血性弧菌答案：D7.沿海地区食物中毒中最常见的病原菌是（）A.大肠埃希菌B.金黄色葡萄球菌C.沙门菌D.霍乱弧菌E.副溶血性弧菌答案：E8.运输霍乱弧菌的保存培养基为（）碱性蛋白胨水 B.PV平板 C.SS琼脂 D.EC肉汤E.GN增菌液答案：A9.副溶血弧菌引起的食物中毒，主要常见于（）我国沙漠地区 B.沿海地区食海产品 C.草原地区D.内陆平原地区 E.与地区没有关系答案：B10.关于副溶血性弧菌的致病性，错误的是（）常因食入未煮熟的海产品而感染潜伏期5-72小时主要致病物质是耐热溶血毒素主要症状为腹痛、腹泻、呕吐、发热等病后可获得牢固免疫力答案：E12.霍乱弧菌常用增菌培养基是（）血清肉汤 B.肉浸液 C.碱性蛋白胨水D.疱肉培养基E.葡萄糖蛋白胨水答案：C13.霍乱弧菌的致病因素是（）侵袭性酶 B.内毒素 C.肠毒素 D.溶血素 E.嗜神经毒素答案：C14.非O-1群霍乱弧菌常引起的疾病是（）霍乱 B.副霍乱 C.胃肠炎 D.胃及十二指肠溃疡 E.浅部创伤感染答案：C15、在碱性培养基中生长良好的细菌是()A、葡萄球菌B、大肠埃希菌C、霍乱弧菌D、结核分枝杆菌E、厌氧菌答案：C16、副溶血性弧菌在TCBS培养基上的菌落颜色是（）A、无色透明B、淡红色C、蓝绿色D、淡黄色E、紫色答案：C17、霍乱弧菌在TCBS培养基上的菌落颜色是（）A、无色透明B、淡红色C、蓝绿色D、淡黄色E、紫色答案：D二、名词解释1、霍乱红试验2、神奈川现象。

卫生专业技术资格考试内训题库（初级检验师－微生物检验）第一章绪论一、A11、条件致病菌致病的条件为A、正常菌群的耐药性改变B、正常菌群的遗传性状改变C、肠蠕动减慢使细菌增多D、长期使用广谱抗生素E、各种原因造成的免疫功能亢进2、下列微生物除哪种外均为原核细胞型微生物A、细菌B、放线菌C、螺旋体D、真菌E、立克次体3、属于真核细胞型微生物的是A、葡萄球菌B、钩端螺旋体C、白假丝酵母菌D、沙眼衣原体E、流感病毒4、下列描述的微生物特征中，哪项不是微生物的共同特征A、个体微小B、结构简单C、繁殖迅速D、分布广泛E、专性寄生5、下列哪类微生物是非细胞型微生物A、细菌B、放线菌C、真菌D、病毒E、立克次体6、下列对微生物概念表述错误的是A、存在于自然界B、体型微小、结构简单C、肉眼能直接看到D、包括真菌和原虫E、必须借助显微镜观察7、下列对微生物特点表述错误的是A、变异慢，适应能力强B、新陈代谢能力旺盛C、生长繁殖速度快D、种类多、分布广E、个体微小8、下列对细菌特点表述错误的是A、个体微小B、种类繁多C、新陈代谢能力旺盛D、适应能力差，变异快E、分布广、数量大9、对原核细胞型微生物表述错误的是A、有原始核B、无核膜C、无核仁D、单个裸露DNA分子E、进行有丝分裂10、对非细胞型微生物结构和组成表述错误的是A、结构简单B、体积微小C、能通过细菌滤器D、无细胞结构E、有产生能量的酶系统11、对微生物作用的表述错误的是A、绝大多数微生物对人类有益处B、绝大多数微生物对动物有益处C、绝大多数微生物对植物有益处D、微生物丛平衡失调可致病E、大多数微生物对人类致病二、B1、A.巴士德（Louis Pasteur）B.李斯特（Joseph Lister）C.郭霍（Robert Koch）D.佛莱明（Fleming）E.琴纳（Edward jenner）<1> 、证明微生物是传染病致病因子的是<2> 、青霉素的发现者答案部分一、A11、【正确答案】 D【答案解析】条件致病性微生物，原属正常菌群中的细菌，不会引起疾病，由于机体抵抗力下降，微生物寄居部位改变或寄居微生物丛（菌群）平衡失调，此时该菌可致病。

弧菌科及检验弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。

弧菌科包括4个菌属，即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。

前三属细菌均可引起人类感染，发光杆菌属对人无致病性。

弧菌属极端鞭毛、甘露醇、脂酶、生长需要NaCl、对O129敏感五项为＋＋＋＋＋，气单胞菌属为－＋＋－－，邻单胞菌属为－－－－＋，发光杆菌属为－－＋/－＋＋。

一、弧菌属弧菌属的细菌分布广泛，以水中最多。

世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌；③非O1群霍乱弧菌；④其他弧菌。

最后一类包括副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、创伤弧菌、麦氏弧菌和拟态弧菌。

本属菌共有100余种，大多数菌种为非病原菌，对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。

（一）霍乱弧菌霍乱弧菌是霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。

1.生物学特性（1）形态染色：本菌呈弧形或逗点状，大小为（1.4～2.6）μm×（0.5～0.8）μm。

新分离的菌株形态典型，经人工培养后易失去弧形而呈杆状。

无芽胞有菌毛，有些菌株有荚膜。

一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。

取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。

液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。

（2）培养特性：需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好，耐碱不耐酸。

常选用pH8.5的碱性蛋白胨水增菌培养，以抑制其他细菌生长，有利于本菌的繁殖，可在无盐环境生长。

在碱性蛋白胨水中，经37℃培养6～9h，在液体表面大量繁殖形成菌膜，可达快速增菌的目的。

在碱性琼脂平板上，经培养18～24h，形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。

在硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）上，形成较大黄色菌落。

第十四章肠杆菌科及检验概述和通性——分类根据细菌的形态、生化反应、抗原性质以及核酸相关性进行分类。

大多数属于正常菌群（条件致病菌）。

引起腹泻和肠道感染：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属等。

导致院内感染：枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、多源菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属和摩根菌属等。

概述和通性——生物学特性形态与结构形态：杆菌。

染色：G-。

特殊结构：多数有周鞭毛，能运动。

志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛。

均不形成芽胞，少数菌属（埃希菌属和克雷伯菌属）可形成荚膜。

培养特性营养要求：不高。

气体环境：需氧或兼性厌氧。

菌落特征：普通琼脂培养基和麦康凯培养基上均能生长，并形成中等大小的菌落，湿润光滑。

抗原变异：包括菌落S-R变异和鞭毛H-O变异。

表现为耐药性或生化反应性质的改变。

抵抗力：不强。

加热60℃，30分钟即被杀死。

不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。

对低温有耐受力，能耐胆盐。

概述和通性——微生物检验及鉴定标本采集形态学检查：革兰阴性杆菌。

分离培养：将粪便或肛拭标本立即接种在肠道菌选择培养基上或先增菌后再分离。

克氏双糖铁琼脂（KIA）培养基：葡萄糖/乳糖发酵；产气；硫化氢试验。

动力-吲哚-尿素（MIU）培养基生化反应：①用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌鉴别；②用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群；③选择生化反应进行属种鉴别；④用诊断血清做凝集反应。

埃希菌属——分类包括5个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。

临床最常见的是大肠埃希菌，俗称大肠杆菌，是人类和动物肠道正常菌群。

埃希菌属——生物学特性形态与结构形态：短杆菌。

染色：G-。

特殊结构：多数有周鞭毛，能运动，有菌毛、荚膜或微荚膜。

培养特性营养要求：不高。

气体环境：兼性厌氧。

菌落特征：营养琼脂上呈圆形，凸起，边缘整齐，灰白色的光滑型菌落，直径2～3mm，少数菌株产生β-溶血环。

弧菌科及检验● 考点弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属【内容讲解】共同特点：G-，直或微弯的杆菌氧化酶阳性具有极端鞭毛、动力阳性发酵葡萄糖弧菌科细菌及其初步鉴定弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属发光杆菌属极端鞭毛+ - - -甘露醇+ + - -脂酶+ + - +/-NaCl + - - +O129敏感+ - + +一、弧菌属WTO腹泻病控制中心将弧菌分为四类：①O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌；③非O1群霍乱弧菌；④其他弧菌（副溶血性弧菌）。

（一）霍乱弧菌霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。

1.生物学特性（1）形态染色弧形或逗点状；无芽胞、有菌毛、有些菌株有荚膜；一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。

取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。

液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。

（2）培养特性需氧或兼性厌氧菌；营养要求低；耐碱不耐酸，可在无盐环境生长。

碱性蛋白胨水：形成菌膜。

碱性琼脂平板：较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。

硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）：较大黄色菌落。

含亚碲酸钾琼脂平板：菌落中心呈灰褐色。

庆大霉素琼脂：菌落中心呈灰褐色。

（3）生化反应分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。

迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。

氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。

能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。

（4）抗原结构与分型耐热的特异性O抗原：特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。

不耐热的非特异性H抗原：H抗原为弧菌属所共有。

分类-血清学：分类-生物学：性状古典生物型El Tor生物型溶血（羊红细胞）- D血凝（鸡红细胞）- +V-P试验- +多粘菌素B敏感+ -噬菌体Ⅳ组裂解+ -噬菌体Ⅴ组裂解- +（5）变异性形态变异菌落变异溶血性变异毒力变异（6）抵抗力对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。